家兔离体小肠平滑肌生理特性
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离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的:①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对彖:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境卞,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠室溫下小肠平渭肌收缩曲线图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温卞其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范閑内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的卩肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率卞降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣第度台氏波小肠平滑肌收缩曲线图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,实验药品:台式液、%去甲肾上腺素溶液、%乙酰胆碱溶液、%阿托品溶液、%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420 生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1•恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入%勺阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入%勺乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入%勺去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%勺氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
家兔离体小肠平滑肌生理特性,实验目的,1(通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。
2(学习动物离体组织器官灌流的实验方法。
,实验原理,消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。
平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。
在一定时间内,离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。
本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中,观察当模拟内环境因素发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。
该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性,被称为生物学检定法。
,器械与材料,兔(大白鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。
缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1?10000)、乙酰胆碱(1?100000)、0.5mg/ml 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。
1,CaCl2、心得安、阿托品、自己准备可影响消化的药物。
,方法与步骤,1(恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽,浸漫度务必超过2支加热管。
然后在药液管及预液管加适量台氏液,二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台氏液,使预液管预温的台氏液通向药液管。
恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约40?(此温度是水浴槽中加热管旁的水温,与药液管内的温度相差2,3?),为了药液管内的温度得到准确控制,须采用外加温度计调整。
最后打开供氧开关,即可产生空气气泡供氧,微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出,不能过快以免液面振动而影响记录。
肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管,用弹簧夹控制出液量。
2(水浴里的水恒温38?,营养管内充满台氏液。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察实验目的:1. 了解兔小肠平滑肌的收缩特性;2. 观察不同剂量乙酰胆碱和异丙肾上腺素对小肠平滑肌的作用;3. 观察肉桂胺和地奥心明对小肠平滑肌的作用。
实验原理:1. 平滑肌收缩原理:平滑肌细胞中的钙离子可以进入肌浆高敏感度钙离子离子通道,钙离子进入细胞内后可激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),MLCK会通过磷酸化肌球蛋白轻链,使其与肌球蛋白重链结合,进而激活肌原纤维的收缩。
平滑肌的松弛则是通过激活肌球蛋白酶磷酸化酶(MLCP),使已经磷酸化的肌球蛋白轻链脱磷酸而实现的。
2. 乙酰胆碱和异丙肾上腺素作用机制:乙酰胆碱是一种促进胆碱能神经传递的神经递质,通过激活M3胆碱能受体激活平滑肌细胞内的MLCK,激活肌原纤维收缩而引起平滑肌收缩。
而异丙肾上腺素则是一种肾上腺素类神经递质,在平滑肌细胞内通过激活β2-肾上腺素能受体作用于肌浆高敏感度钙离子离子通道(L型钙通道),引起离子通道开放,钙离子进入细胞内,激活MLCK,MLCK活化肌原纤维,导致平滑肌收缩。
3. 肉桂胺和地奥心明作用机制:肉桂胺是一种抑制钙离子离子通道开放的钙离子通道阻滞剂,通过抑制平滑肌细胞内的钙离子进入细胞内而阻止平滑肌收缩。
而地奥心明则是一种肾上腺素能受体激动剂,与β2-肾上腺素能受体结合,促进L型钙通道开放,增加平滑肌细胞内的钙离子进入,从而导致平滑肌收缩。
实验步骤:1. 实验前准备:将兔子解剖,取出小肠,并将其中的粘膜和黏膜去除,切成宽约0.5cm,长约 3-4cm 的小块,用泡沫贴片固定于组织浴盆内。
组织浴盆中加入平衡液,使小块与平衡液分离,并置于37℃水浴2至3小时。
2. 实验操作:将小肠平滑肌组织块连接至力记录器,穿孔测压管插入,测压管注射平衡液,保持压力稳定后进行实验记录。
a. 观察小肠平滑肌的基础收缩情况,记录其基础张力;b. 每隔2分钟注射一次乙酰胆碱,初步测定其作用剂量,以其作用达到峰值的最小剂量为标准剂量,记录其作用前和作用峰值的收缩程度,记录对应的张力值;c. 注射不同剂量异丙肾上腺素,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;d. 注射肉桂胺,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;e. 注射地奥心明,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用不雅察之羊若含玉创作一、实验目标: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记载剖析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用办法;③不雅察并记载传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管.三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞自己的自发迟缓放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理情况下,应用BL-410/420多媒体生物信号记载剖析系统和换能器系统分离研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响.四、实验记载与剖析㈠图(一)图(一)暗示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变更情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时显著削弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定规模内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会下降,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会削弱.㈡图(二)图(二)暗示在38度台氏液参加肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变更情况由图(二)可知参加肾上腺素后小肠平滑肌收缩显著削弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体联合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度削弱.㈢图(三)图(三)暗示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变更情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩显著增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体联合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强.㈣图(四)图(四)暗示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变更情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无显著的变更,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体联合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不克不及与小肠平滑肌肌膜上的M受体联合,就不克不及引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么显著转变.㈤图(五)图(五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变更情况由图(五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩显著削弱,这是因为参加盐酸后,小肠所处情况的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子内流削减,进而影响动作电位产生的频率;别的氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白联合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性下降、肌纤蛋白对钙离子的敏感性下降,肌质网释放钙离子的量削减,能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化进程,所以小肠的平滑肌收缩显著削弱.当过几秒后参加氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的情况恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常.。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的:①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管.三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱.㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
家兔离体小肠平滑肌生理特性
,实验目的,
1(通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。
2(学习动物离体组织器官灌流的实验方法。
,实验原理,
消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。
平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。
在一定时间内,离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。
本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中,观察当模拟内环境因素发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。
该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性,被称为生物学检定法。
,器械与材料,
兔(大白鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。
缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1?10000)、乙酰胆碱(1?100000)、0.5mg/ml 阿托品、
0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。
1,CaCl2、心得安、阿托品、自己准备可影响消化的药物。
,方法与步骤,
1(恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽,浸漫度务必超过2支加热管。
然后在药液管及预液管加适量台氏液,二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台氏液,使预液管预温的台氏液通向药液管。
恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约40?(此温度是水浴槽中加热管旁的水温,与药液管内的温度相差2,3?),为了药液管内的温度得到准确控制,须采用外加温度计调整。
最后打开供氧开关,即可产生空气气泡供氧,微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出,不能过快以免液面振动而影响记录。
肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管,用弹簧夹控制出液量。
2(水浴里的水恒温38?,营养管内充满台氏液。
要不断供应空气或O2,通过可调节供气旋钮控制气流速度,使气泡一个一个地进入台氏液中。
3(用铁锤击兔或大白鼠的头部,昏迷后,立即剖开腹腔,取出十二指肠至结肠间的肠段,剪成约3,4cm 小段,放入室温台氏液内轻轻冲洗,以除去肠的内容物。
边洗边通入空气或O2,把肠段夹入另一盛有新鲜台氏液的培养皿内,继续通气备用。
4(将肌肉张力换能器(10g)固定于铁架台上,张力换能器输入端与系统的第1
通道中相连,进入计算机生物信号采集处理系统,选择“新建实验”中“张力”模块的生理特性实验项目并对控制面板参数进行设置。
5(营养管内的溶液保持37?,然后取出一小段肠,用缝针将肠的一端穿线结扎(只结扎半边肠腔)。
肠的一端结扎线系于带夹的固定支架底端S 形小钩上,将支架放入营养管内并固定于管边缘。
肠的另一端则连于张力换能器的应力臂上。
使肠段完全浸浴在台氏液中,并立即通气。
让肠段稳定20min,便可以描记其活动曲线。
6(实验项目
(1)观察、记录38?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。
(2)观察、记录25?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。
(3)待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38?后,加1:10000肾上腺素1,2滴于中央
标本槽中,观察肠段收缩曲线的改变。
在观察到明显的作用后,用预先准备好的新鲜38?台氏液冲洗三次。
(4)待肠段活动恢复正常后,再加1:10000乙酰胆碱1,2滴于中央标本槽中,观察肠段收缩曲线的改变。
作用出现后同上法冲洗肠段。
(5)向中央标本槽内加入1 mol?L-1NaOH溶液1,2滴,观察肠段收缩曲线的改变。
作用出现后同上法冲洗肠段。
(6)向中央标本槽内加入1 mol?L-1HCl溶液1,2滴,观察肠段收缩曲线的改变。
待作用出现后同上法冲洗肠段。
(7)向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液2,3滴或1%BaCl2 2—3 滴,观察肠段收缩曲线的改变。
(8)0.01%磷酸组织胺1—2 滴, 观察肠段收缩曲线的改变。
待作用出现后同上法冲洗肠段。
(9)参照以上方法,这里可以加入自己设计提出的药物,观察肠段收缩曲线的改变。
(10)在换上新鲜台氏液,肠段恢复节律收缩的基础上,加入乙酰胆碱3滴,使引起明显效应,再加入0.5mg/ml 阿托品3—4 滴,观察加入阿托品后肠段运动的变化。
进行这项试验后,需要多次冲洗,肠段才慢慢恢复活动。
,实验结果,
剪贴实验记录曲线,并做好标记、注释。
分析各种因素对小肠运动的影响,并简要说明其机制。
,注意事项,
1(每次加药前,必须在预液管内准备好更换用的38?台氏液。
2(药液管内台氏液的量必需没过肠段,并保持药液管恒温为38?,以免影响肠平滑肌的收缩功能以及对药物的反应不稳定。
3(各药液加入的量为参考数据,效果不明显可补加,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。
4(通气管的气泡逸出速度不可太快,以单个气泡陆续出现为宜。
否则会影响肠段运动的曲线记录。
5(每项实验效果明显后,立即更换新鲜台氏液,一般应冲洗2,3次,待肠段恢复正常活动后再进行下一项目。
实验结果图:。