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Tanon凝胶成像系统操作规程
设备操作流程：
1、开启总电源。
2、开启电脑至Windows处于正常工作状态。
3、打开主机上层箱内电源开关。
4、双击桌面上的“GIS”图标，进入软件。
5、拍摄：1）打开拍摄界面。
2）把凝胶置于投射上。
3）打开相应灯源的电源开关（如用紫外灯源，请勿肉眼无防护直接观测）。
4）经电脑控制进行拍摄、保存图像。
5）拍摄完毕请立即关闭灯源电源。
6、工作完毕，关闭软件窗口。
7、当天工作完毕后，关闭主机上层箱内电源开关。
8、关闭电脑。
注意事项：
1、凝胶成像系统为EB污染区，电脑为非EB污染区，注意严格区
分EB污染区和非污染区，防止污染区向非污染区扩散。
2、仪器配置的电脑专机专用，不得上网。
3、电脑开启时请勿突然断电，以防硬盘损坏导致实验资料丢失。
4、如用紫外灯源，拍摄完毕请立即关闭灯源电源！
5、拍摄时，请注意不要将过量的缓冲液倾倒在投射底座上。
6、请注意保管好软件加密狗和软件光盘，以免遗失。
中药参芪益肺糖浆对体外肺癌细胞抑制作用研究杨春云;黄宏云;唐万贵;张思波【摘要】目的研究中药制剂\"参芪益肺糖浆\"体外抗肺癌作用.方法采用MTT法检测参芪益肺糖浆对人肺腺癌细胞A549的体外抑制作用,计算细胞增殖抑制率,并绘制剂量反应曲线计算半数抑制浓度值;采用流式细胞术检测A549细胞凋亡、细胞周期及A549凋亡相关蛋白的相对表达量.结果浓度一致的参芪益肺糖浆作用于A549细胞,其细胞增殖可随时间延长而下降(P<0.05),A549细胞增殖则随药物浓度增加而下降,经剂量反应曲线绘制,参芪益肺糖浆对A549细胞的半数抑制浓度为24.87 mg/ml.中、高浓度参芪益肺糖浆组的A549细胞株早期和晚期凋亡率均显著高于空白组(P<0.05),空白组与参芪益肺糖浆组不同剂量条件下早期、晚期细胞株凋亡均有统计学意义(P<0.05).参芪益肺糖浆作用于A549细胞株24 h后,在低、中、高剂量条件下,G0/G1期的细胞百分率随剂量增加而逐渐升高(P<0.05),S期细胞百分比随剂量增加而下降(P<0.05),G2/M期的细胞百分率仅在高浓度条件下显著高于空白组(P<0.05).参芪益肺糖浆作用24 h后呈浓度依赖性上调cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9、p-jnk、p-p38、p-erk,且高浓度组上调幅度显著优于空白组(P<0.05).结论参芪益肺糖浆或可作为扶正培本的增效药物用于肺癌的临床治疗,具一定临床应用价值.【期刊名称】《解放军医药杂志》【年(卷),期】2019(031)008【总页数】5页(P34-38)【关键词】肺肿瘤;参芪益肺糖浆;体外抗肺癌【作者】杨春云;黄宏云;唐万贵;张思波【作者单位】445000 湖北恩施,恩施土家族苗族自治州中心医院药剂科;445000湖北恩施,恩施土家族苗族自治州中心医院药剂科;445000 湖北恩施,恩施土家族苗族自治州中心医院药剂科;445000 湖北恩施,恩施土家族苗族自治州中心医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌是当今严重危害人类生命和健康的疾病之一, 发病率已居各类恶性肿瘤之首；目前，常采用手术、化疗、放疗等多种治疗方法治疗肺癌，但5年生存率仍低于14%，且对身体的伤害较大[1]。
Journal of China Pharmaceutical University2022，53（1）：93-98学报金刚纂中木脂素对食管鳞癌细胞的抑制作用戚微岩1，夏春磊1，安柔锦1，高新梅1，李东平1，徐寒梅1，2*（1中国药科大学江苏省合成多肽药物发现与评价中心，南京211198；2中国药科大学天然药物活性组分与药效国家重点实验室，南京211198）摘要金刚纂（Euphorbia neriifolia L.）是大戟科植物，采用硅胶柱色谱以及制备HPLC等多种色谱技术，从金刚纂地上部分中分离出5个已知的木脂素成分，并对这5种木脂素的潜在抗肿瘤活性进行体外研究，其中化合物2对食管鳞癌细胞，特别是KYSE-410和KYSE-450细胞，表现出增殖抑制和细胞毒性。
机制研究进一步证明化合物2可通过激活caspase-3/9及下调Bcl-2/Bax蛋白表达比例，诱导癌细胞发生显著凋亡。
实验结果显示，化合物2在体外对食管鳞癌细胞，尤其是KYSE-410细胞具有显著抑制作用，表明化合物2具有良好的抗肿瘤活性，应对其进行深入研究。
关键词金刚纂；木脂素；抗肿瘤活性；细胞凋亡中图分类号R931.6；R965文献标志码A文章编号1000-5048（2022）01-0093-06doi：10.11665/j.issn.1000-5048.20220114引用本文戚微岩，夏春磊，安柔锦，等.金刚纂中木脂素对食管鳞癌细胞的抑制作用［J］.中国药科大学学报，2022，53（1）：93–98.Cite this article as：QI Weiyan，XIA Chunlei，AN Roujin，et al.Suppressive effect of lignans from Euphorbia neriifolia L.on esophageal squa⁃mous cancer cell［J］.J China Pharm Univ，2022，53（1）：93–98.Suppressive effect of lignans from Euphorbia neriifolia L.on esophageal squamous cancer cellQI Weiyan1,XIA Chunlei1,AN Roujin1,Gao Xinmei1,LI Dongping1,XU Hanmei1,2*1The Engineering Research Center of Synthetic Polypeptide Drug Discovery and Evaluation of Jiangsu Province,China Pharmaceutical University,Nanjing211198;2State Key Laboratory of Natural Medicines,China Pharmaceutical University,Nanjing 211198,ChinaAbstract Eubhorbia neriifolia L.is a plant of Euphorbia family.Five known lignans were isolated from the aerial parts of E.neriifolia L.by silica gel for column chromatography and preparative high-performance liquid chromatography(HPLC).Their potential antitumor activities were evaluated in pound2exhibited proliferation inhibition and cytotoxicity against esophageal squamous cancer cells,especially KYSE-410and KYSE-450cells.Further analyses showed that compound2could significantly induce apoptosis through the activation of caspase3/9and down-regulation of the Bcl-2/Bax protein ratio.These results suggested that compound2had a significant inhibitory effect on the esophageal squamous cancer cells,especially KYSE-410, which deserves further research as a potential antitumor agent.Key words Euphorbia neriifolia L.;lignans;antitumor activity;cell apoptosisThis study was supported by the Natural Science Foundation of Jiangsu Province(No.BK20180569)大戟科植物包含约2000个种属，广泛分布在热带和温带地区［1］。
QuickChemi 5200化学发光成像系统使用说明书1Simply Discover More02莫纳生物莫纳苏州4000平米 ISO9001、13485 标准工厂莫纳武汉6000平米 GMP 标准洁净工厂上海运营中心公司营销总部莫纳生物简介莫纳生物科技有限公司由珠海南山投资有限公司等机构发起，联合国内外多家知名生命科学企业携手打造。
公司集研发、生产、销售、服务于一体，致力于成为生命科学基础科研产品、生物技术企业研发工具及高标准生产原料的全产业链提供者，塑造生命科学行业的著名品牌。
研发生产基地莫纳生物现拥有莫纳苏州研发、生产基地、莫纳武汉生产基地，建成莫纳生物技术研发院。
构建了完整的研发，生产，质控，市场，销售管理，客户服务体系，旨在促进产学研合作、研发成果转化和企企合作。
依据QbD （质量源于设计）原则建立系统质量控制体系，做高标准、稳定、可靠的生命科研工具。
莫纳生物技术研发院由12名知名科学家担任顾问，10多位博士领衔近百名研究人员，以生物学应用为导向，研发更智能、高标准的生命科研工具。
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学 报Journal of China Pharmaceutical University 2023，54（2）：226 - 237226脆弱拟杆菌ATCC25285通过TGF-β/Smad3通路诱导Treg细胞分化缓解结肠炎魏芳，范梦慧，刘光臣，顾馨月，邢莹莹*（中国药科大学生命科学与技术学院，南京 211198）摘 要 肠道菌群的变化通常与不同的胃肠道疾病有关，维持肠道菌群稳态可以增强免疫耐受性，调节肠道免疫平衡。
已有研究发现，增加肠道菌群拟杆菌门中脆弱拟杆菌（B.fragilis）的相对丰度，可以显著增强肠道调节性T细胞（Treg）和抗炎细胞因子的表达，缓解肠道炎症。
然而，B.fragilis调节肠道免疫的具体机制尚不清楚。
本研究通过给SPF级C57BL/6小鼠饮用3% DSS溶液构建急性结肠炎模型，自由饮用7 d后，通过灌胃对已患结肠炎小鼠外源性补充B.fragilis，研究B.fragilis对肠道免疫的调控作用及其作用机制。
实验结果表明，B.fragilis可以改善结肠炎小鼠的肠道菌群紊乱，增加肠道菌群主要代谢产物短链脂肪酸（SCFAs）的含量。
通过提取小鼠组织淋巴细胞、初始CD4+ T细胞、使用脂质体修饰的siRNA敲低小鼠Smad3，采用流式细胞术进一步研究发现B.fragilis能够通过TGF-β/Smad3信号通路诱导肠道Treg细胞及相关细胞因子的表达，增强肠道调节免疫，进而缓解结肠炎。
此外，本研究还发现B.fragilis通过增加肠道中活性氧（ROS）的表达来激活TGF-β，从而诱导Treg细胞分化并发挥免疫调节作用。
关键词脆弱拟杆菌；胃肠道微生物；调节性T细胞；TGF-β/Smad3；结肠炎中图分类号Q939.91 文献标志码 A 文章编号1000 -5048（2023）02 -0226 -12doi：10.11665/j.issn.1000 -5048.2023011202引用本文魏芳，范梦慧，刘光臣，等.脆弱拟杆菌ATCC25285通过TGF-β/Smad3通路诱导Treg细胞分化缓解结肠炎［J］.中国药科大学学报，2023，54（2）：226–237.Cite this article as：WEI Fang，FAN Menghui，LIU Guangchen，et al. Bacteroides fragilis ATCC25285 relieves colitis by inducing Treg cells differentiation via the TGF-β/Smad3 signaling pathway［J］.J China Pharm Univ，2023，54（2）：226–237.Bacteroides fragilis ATCC25285 relieves colitis by inducing Treg cells differ⁃entiation via the TGF-β/Smad3 signaling pathwayWEI Fang, FAN Menghui, LIU Guangchen, GU Xinyue, XING Yingying*School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing 211198, ChinaAbstract The changes in intestinal flora are usually associated with different gastrointestinal diseases, and intestinal flora homeostasis can enhance immune tolerance and regulate intestinal immune balance.Previous studies have found that the increase of the relative abundance of Bacteroides fragilis (B.fragilis) in Bacteroides intestinalis can significantly enhance the expression of intestinal regulatory T cells (Treg) and anti-inflammatory cytokines, thus alleviating intestinal inflammation.However, the mechanism of B.fragilis regulating intestinal immunity is still unclear.In this study, an acute colitis model was constructed by giving 3% DSS in drinking water solution to SPF-grade C57BL/6 mice for 7 days, and exogenous supplementation B.fragilis was given to mice by gastric gavage to study its regulatory effect on intestinal immunity and its mechanism of action.The results showed that B.fragilis could improve the intestinal flora disorder in mice with colitis and increase the content of short-chain fatty acids (SCFAs), the main metabolite of the intestinal flora.By extracting mouse tis‑sue lymphocytes, naive CD4+T cells, and liposome-modified siRNA knockdown mouse Smad3, it was further收稿日期2023-01-12 *通信作者Tel：************E-mail cpuskyxyy@基金项目国家重点研发项目（No.2017YFD0400303）；国家自然科学基金资助项目（No.81971562）；宁夏省重点研发计划项目（No.2020BFG02012）；江苏省高校优先学术项目开发（PAPD）第 54 卷第 2 期魏芳，等：脆弱拟杆菌ATCC25285通过TGF-β/Smad3通路诱导Treg细胞分化缓解结肠炎discovered by flow cytometry that B.fragilis induced the expression of intestinal Treg cells and related cyto‑kines through the TGF-β/Smad3 signaling pathway, which enhanced intestinal regulatory immunity and allevi‑ated colitis.It was also found that B.fragilis activated TGF-β by increasing the expression of reactive oxygen species (ROS), thus inducing Treg cell differentiation and playing an immunomodulatory role.Key words Bacteroides fragilis; gut microbiota; regulatory T cells; TGF-β/Smad3; intestinal inflammation肠道菌群与肠黏膜免疫密切相关，肠道菌群失调常导致炎症性疾病，如溃疡性结肠炎、克罗恩病等炎症性肠病［1-2］。
·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要：实验室前期shot-gun 质谱结果表明PCSK9在PAM 空细胞和PRRSV 感染组PAM 细胞间存在差异表达。
为了深入研究PCSK9与PRRSV 间的相互作用机制，本实验在体外合成猪PCSK9基因并克隆至原核表达载体pET-28a 中，构建重组表达质粒pET-28a-PCSK9。
利用该原核表达系统获得了高效表达的重组蛋白PCSK9（约75 kDa ），进一步通过镍柱亲和层析技术纯化重组蛋白PCSK9作为免疫原，皮下免疫5-6周龄的BALB/c 小鼠（100 ng/只），获得了1株产生PCSK9特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株（2A2B12）。
应用此单克隆抗体对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV ）感染PAM 细胞后的内源性PCSK9变化情况进行了检测。
Western blot 和IFA 结果表明本实验制备的PCSK9单克隆抗体具有良好的特异性，抗体针对的表位位于PCSK9的C 端结构域（463-705 aa ）；此外，Western blot 结果表明PRRSV 感染可抑制PCSK9蛋白的表达，过表达PCSK9对PRRSV 的复制有明显的抑制作用。
本研究中研制的抗体可为今后猪源PCSK9与PRRSV 的相互作用研究提供工具支持。
关键词：PCSK9；单克隆抗体；PRRSV 中图分类号： S858.28文献标志码： A文章编号：1674-6422（2023）01-0106-07Preparation of a Monoclonal Antibody to Porcine PCSK9 and its Applicationduring PRRSV InfectionZHANG Yujiao 1, LIU Changlong 1,2, JIANG Yifeng 1,2, YU Lingxue 1,2, ZHOU Yanjun 1,2, ZHAO Kuan 1,LI Liwei 1,2, CAO Yunlei 1, TONG Guangzhi 1,2, GAO Fei 1,2(1. Shanghai Veterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China; 2. Jiangsu Co-Innovation Center for the Prevention andControl of Important Animal Infectious Disease and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)收稿日期：2020-09-23基金项目：国家自然科学基金（31670158）；国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项（2016YFE0112500）作者简介：张玉娇，女，博士研究生，预防兽医学专业通信作者：高飞，E-mail：***************.cn猪PCSK9单克隆抗体的制备及其在PRRSV 感染过程中的应用张玉娇1，刘长龙1,2，姜一峰1,2，虞凌雪1,2，周艳君1,2，赵 款1，李丽薇1,2，曹云雷1，童光志1,2，高 飞1,2（1.中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241，2.扬州大学 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009）2023,31(1):106-112Abstract: Previous studies of shot-gun mass spectrometry have demonstrated that proprotein convertase subtilisin/kexin type 9（PCSK9）is differently expressed in PAM cells with or without Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infection. In order to further explore the interaction mechanism between PCSK9 and PRRSV , pig-originated PCSK9 gene was synthesizedin vitro and cloned into prokaryotic expression vector pET-28A followed by generating recombinant expression plasmid PET-28a-PCSK9. PCSK9 protein of about 75 kDa was expressed as inclusion body at a high level in the prokaryotic expression system and purifi ed by nickel column affinity chromatography. The purified PCSK9 protein was used to subcutaneously immunize BALB/C mice at 5-6 week-age (100 ng/mouse) and then a hybridoma cell line secreting monoclonal antibody (MAb) 2A2B12 against PCSK9 was obtained· 107 ·张玉娇等：猪PCSK9单克隆抗体的制备及其在PRRSV 感染过程中的应用第31卷第1期前蛋白转化酶枯草溶菌素9（p r o p r o t e i n convertase subtilisin kexin 9, PCSK9）又称为神经凋亡调节转化酶（neural apoptosis-regulated convertase 1, NARC-1），属于前蛋白转化酶（Proprotein Convertases, PC）家族[1]，这些蛋白酶参与酶原、激素、生长因子、细胞因子、粘附分子以及受体等分泌蛋白的激活、灭活、细胞定位过程[2-3]。
全自动化学发光分析仪技术参数
一．设备名称：全自动化学发光分析仪（国产品牌）
二．数量：一台
三．设备用途：主要适用检验科传染四项标本的检测与分析。
四．主要功能和技术指标：
1. 处理速度：≥150测试/小时；
2. 仪器配置有条码识别系统，并支持LIS双工模式；
3. 须提供相关原厂试剂、校准品、质控品；
. 5. 加样系统具备液面感应、凝块监测功能，具备自动稀释功能；
6. 具备人性化操作软件，免费提供连接检验科LIS软件服务。
五. 售后服务及技术培训：
1. 设备免费保修三年，终身维护，保修期过后设备维修只收取
备件成本费。
2. 省城有售后服务部和维修工程师，出现问题4小时作出响应。
24小时到达现场维修设备。
3. 免费提供检验科2名人员到使用该设备的三级以上医院进行
为期1-2周的临床使用技术培训。
1。
第42卷第2期2021年3月Vol.42No.2March2021中山大学学报（医学科学版）JOURNAL OF SUN YAT⁃SEN UNIVERSITY（MEDICAL SCIENCES）L-茶氨酸局部给药抑制皮肤神经末梢的异常生长缓解小鼠银屑病瘙痒揭英桃，林震嘉，张珺，谈智，许雅南，熊媖，唐源，周利君（中山大学中山医学院生理教研室//中山大学疼痛研究中心，广东广州510080）摘要：【目的】观察L-茶氨酸是否在咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病小鼠中具有止痒作用并初步探讨机制。
【方法】将IMQ软膏局部应用于小鼠背部皮肤建立银屑病模型；L-茶氨酸经口服（10mg/kg∙d）或病损皮肤局部涂抹（50、125、250mmol/L，2次/d）进行防治处理。
采用抓挠等自发性行为学测试检测治疗效果；并运用免疫荧光染色（IF）、Western Blot（WB）及原代背根神经节（DRG）神经元培养技术探讨相关机制。
【结果】口服L-茶氨酸对IMQ诱导的瘙痒无明显作用，但病损皮肤局部应用明显改善银屑病模型小鼠皮肤不舒适感诱发的舔或咬及畏缩等自发性行为，并呈浓度依赖性。
IF和WB结果显示，L-茶氨酸不仅能抑制模型小鼠皮肤TNF-α过表达，还能阻止β3-tubu⁃lin神经纤维的异常生长和瘙痒相关分子瞬态受体电位香草酸1（TRPV1）的上调。
体外实验进一步证实L-茶氨酸能浓度依赖性地直接抑制IMQ引起的CGRP+、β3-tubulin+神经突起异常生长。
【结论】局部应用L-茶氨酸通过抑制皮肤神经纤维的异常生长缓解小鼠银屑病模型的皮肤瘙痒不适感。
因此，L-茶氨酸局部给药可成为治疗银屑病慢性瘙痒的一种潜在方法。
关键词：银屑病；瘙痒；L-茶氨酸；肿瘤坏死因子-α；神经末梢异常生长中图分类号：R758.31文献标志码：A文章编号：1672-3554（2021）02-0161-10Topical Application of L-theanine Relieves Mouse Psoriasis Pruritus byInhibiting Abnormal Growth of Skin Nerve EndingsJIE Ying-tao，LIN Zhen-jia，ZHANG Jun，TAN Zhi，XU Ya-nan，XIONG Ying，TANG Yuan，ZHOU Li-jun（Department of Physiology，Zhongshan School of Medical，Sun Yat-sen University//Center for Pain Research，Sun Yat-sen University，Guangzhou510080，China）Correspondence to：ZHOU Li-jun；E-mail：zhoulij3@Abstract：【Objective】To investigate whether L-theanine exerts anti-pruritic effect on mice with imiquimod（IMQ）-induced psoriasis and its related mechanisms.【Methods】We established the psoriasis model by applying the IMQ ointment topically on mice back skin and oral（10mg/kg∙d）or topical pretreatment（50，125，250mmol/L，twice one day）of L-theanine was used as the treatment.Spontaneous behavior，such as scratching，was used to detect the therapeutic effect.Immunofluorescence（IF），Western Blot（WB）and primary dorsal root ganglion（DRG）neuronal culture were used to in⁃vestigate the mechanisms.【Results】Oral administration of L-theanine had no apparent effect on IMQ-induced pruritus，but topical delivery in the lesional skin significantly improved the spontaneous behavior such as licking or biting and flinch⁃ing in a dose-dependent manner.IF and WB results showed that L-theanine not only inhibited the overexpression of TNF-αin model mouse skin，but also prevented the abnormal growth ofβ3-tubulin+nerve fibers and the upregulation of tran⁃·基础研究·收稿日期：2020-12-14基金项目：国家自然科学基金（81771204）；广东省自然科学基金（2019A1515011838，2020A1515010204）作者简介：揭英桃，硕士研究生，研究方向：瘙痒与疼痛，E-mail：jieyt@；周利君，通信作者，教授，博士生导师，E-mail：zhoulij3@第42卷中山大学学报（医学科学版）sient receptor potential vanilloid1（TRPV1），an itch-related molecule.Moreover，the results from the experiments with primary cultured DRG neurons further confirmed that L-theanine directly reduced IMQ-induced abnormal outgrowth of CGRP+，β3-tubulin+neurites in a concentration dependent manner.【Conclusions】Topical application of L-theanine can relieve pruritus or discomfort in IMQ-induced psoriasis mouse model by inhibiting abnormal growth of skin nerve fiber end⁃ings.Therefore，L-theanine could be a potential treatment for chronic itch in psoriasis.Key words：psoriasis；pruritus；L-theanine；TNF-α；abnormal growth of nerve endings［J SUN Yat⁃sen Univ（Med Sci），2021，42（2）：161-170］银屑病（俗称牛皮癣），是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤病，影响全球约1%~3%的人口［1］。
基金项目：江苏农牧科技职业学院项目（ＮＳＦ２０２１ＺＲ１５）；江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目（２０２１１２８０６０５６Ｈ）１例蛋鸡混合感染的病原检测与分析苏晓健，赵永旺，吴 双，车业贵江苏农牧科技职业学院，江苏泰州２２５３００摘 要 为明确盐城某规模化养殖场蛋鸡死亡原因，针对２０２２年冬季送检的１７只患病蛋鸡进行了病理剖检、细菌分离鉴定和常规ＰＣＲ检测。
细菌分离鉴定结果表明分离到１株致病性大肠杆菌；ＰＣＲ检测结果包括Ｈ９亚型ＡＩＶ１份、ＣＡＶ４份、ＭＤＶ和ＣＡＶ混感１份、ＦＡｄＶ和ＣＡＶ混感１份、Ｈ９和ＣＡＶ混感６份。
结合临床症状、病理变化和实验室检测结果，该次疫情诊断为ＣＡＶ、Ｈ９亚型ＡＩＶ、ＦＡｄＶ、ＭＤＶ和ＥＣ混合感染。
关键词 ＣＡＶ；Ｈ９亚型ＡＩＶ；病原检测ＰａｔｈｏｇｅｎｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｏｎｅｃａｓｅｏｆｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｌａｙｉｎｇｈｅｎｓＳＵＸｉａｏｊｉａｎ，ＺＨＡＯＹｏｎｇｗａｎｇ，ＷＵＳｈｕａｎｇ，ＣＨＥＹｅｇｕｉＪｉａｎｇｓｕＡｇｒｉ ａｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙＶｏｃａｔｉｏｎａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｔａｉｚｈｏｕ２２５３００，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ，ｂａｃｔｅｒｉａｌｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄｒｏｕｔｉｎｅＰＣＲｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｏｎ１７ｓｉｃｋｌａｙｉｎｇｈｅｎｓｓｅｎｔｆｏｒｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｗｉｎｔｅｒｏｆ２０２２ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｆｉｎｄｏｕｔｔｈｅｃａｕｓｅｏｆｄｅａｔｈｏｆｌａｙｉｎｇｈｅｎｓｉｎａｌａｒｇｅ ｓｃａｌｅｆａｒｍｉｎＹａｎｃｈｅｎｇ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｐａｔｈｏｇｅｎｉｃＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄ；ＰＣＲｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｉｎｃｌｕｄｅｄｏｎｅＨ９ｓｕｂｔｙｐｅＡＩＶａｎｄｆｏｕｒＣＡＶ；ｏｎｅＭＤＶａｎｄＣＡＶｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｏｎｅＦＡｄＶａｎｄＣＡＶｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｓｉｘＨ９ａｎｄＣＡＶｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｌｉｎｉｃａｌｓｙｍｐｔｏｍｓ，ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓａｎｄｌａｂｏｒａｔｏｒｙｔｅｓｔｒｅｓｕｌｔｓ，ｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｃｗａｓｄｉａｇｎｏｓｅｄａｓｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆＣＡＶ，Ｈ９ｓｕｂｔｙｐｅＡＩＶ，ＦＡｄＶ，ＭＤＶａｎｄＥＣ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ＣＡＶ；Ｈ９ｓｕｂｔｙｐｅＡＩＶ；ｐａｔｈｏｇｅｎｄｅｔｅｃｔｉｏｎｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８ ０４１４．２０２３．０８．００１ 引言冬春季节由于气候多变、昼夜温差大，成为鸡呼吸道疾病的高发时期。
