嗜冷菌

食品中嗜冷菌的检测实验报告
实验目的：检测食品中是否存在嗜冷菌，初步了解食品卫生质量。

实验材料：
1. 细菌培养基
2. 无菌培养皿
3. 恒温箱
4. 食品样品
实验步骤：
1. 提取食品样品5克，加入15毫升无菌生理盐水中，摇匀。

2. 取1毫升加入含有10毫升细菌培养基的无菌试管中。

3. 对于每个样品，设置一个无菌培养皿，将1毫升的培养基稀释10倍加入培养皿中。

4. 将试管和培养皿放入恒温箱中，分别在15℃和25℃两个温度下培养。

5. 培养24小时后，观察每个培养皿内是否有菌落生长。

实验结果：
在15℃的条件下，每个培养皿中都有菌落生长，且形态相似，颜色为灰白色，形状为圆形或椭圆形，直径约为1-2毫米；在25℃的条件下，也都有菌落生长，但数量较少，形态和颜色与15℃下相似。

结论：
通过实验，证实了食品样品中存在嗜冷菌。

嗜冷菌是一种能在低温环境下生长的细菌，容易引起食品污染，影响食品的卫生质量，应加强卫生监管。

牛乳中嗜冷菌的危害牛乳中嗜冷菌的检测方法-养牛技术嗜冷菌在-15—20℃之间最宜生长，其在保存过程中产生的大量胞外耐高温的脂肪酶和蛋白酶会分解脂肪和蛋白质，所以在高温杀菌后仍有残留，从而造成牛奶腐败变质。

为避免鲜牛乳发生变质,一般从收集到加工过程中都采取冷藏,但此时往往会导致乳中嗜冷菌占具主导地位,而其产生的耐热性酶类是主要造成鲜牛乳以及乳制品质量变差的一个主要原因.检测牛乳中细菌总数一般在37℃温度下进行48h培养,但该条件下嗜冷菌不会生长,从而往往被忽视,应加强检测。

下面就具体来了解一下：牛乳中嗜冷菌的危害牛乳中嗜冷菌的检测方法。

1、来源鲜牛乳中的嗜冷菌具有比较广泛的来源，且可分成较多类型的菌株，其中数量较多的是微球菌、假单胞菌以及产碱杆菌。

微球菌分布比较广泛，主要存在于动物体表、空气、水源以及、设备上；假单胞菌属主要在海水、淡水、土壤以及多种植物体内存在；产碱杆菌主要在饲料、水源以及粪便中存在。

在污染嗜冷菌的途径中，主要是通过接触个人，如药浴杯污染、挤奶工双手不卫生、水清洗乳头污染、贮存及运输设备不干净或没有严格消毒等，都容易导致嗜冷菌含量过高。

2、危害鲜牛乳中主要为兼性嗜冷菌，产碱杆菌属、假单胞菌属、克雷伯氏杆菌属、黄杆菌属以及无色杆属等，是目前经常能够分离到的嗜冷菌。

通过对以上菌株进行特性分析，发现其都会影响鲜牛乳的保存。

例如，假单胞菌具有很强分解蛋白质和脂肪的能力，能够导致脂肪发生分解，从而容易形成脂肪哈败味，还能够使其中的蛋白质发生分解产生蛋白胨；产碱杆菌，自身无法使牛乳中的糖类发生分解而产酸，但能够生成棕黄色、灰黄色的色素，还能够导致牛乳中含有的有机盐发生分解而生成碳酸盐，从而导致牛乳呈碱性，能够造成乳制品发生黏性变质。

也就是说，嗜冷菌能够使牛乳中的成分被破坏，这主要是由于嗜冷菌能够分泌耐热蛋白酶、脂肪酶而导致蛋白质、脂肪发生分解。

另外，在有氧低温条件下，嗜冷菌能够引起生色反应，如黄色、奶油色、绿色、红色、金色、黑色或者棕褐色等。

铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌是一种革兰阴性的细菌，属于嗜冷菌。

它得
名于其在培养基上形成铜绿色的菌落。

铜绿假单胞菌广泛
存在于自然环境中，如水体、土壤、植物和动物体内等。

铜绿假单胞菌具有较强的耐受力和适应性，能够在多种环
境条件下生存和繁殖。

它可以生长在室温下，但最适宜的
温度是30-35摄氏度。

它对氧气的需要较低，可在低氧甚
至无氧条件下生长。

铜绿假单胞菌可以产生多种酶和毒素，其中一些具有致病性。

它是医院感染的常见细菌之一，可引起各种感染，包
括呼吸道感染、尿道感染和创伤感染等。

由于其对多种抗
生素显示出耐药性，治疗铜绿假单胞菌感染的方法较为有限，且会增加治疗的难度。

预防铜绿假单胞菌感染的措施包括保持良好的卫生习惯、
正确使用抗生素、避免过度使用抗菌剂等。

对于高危人群，
如免疫系统受损的患者和长期住院的患者，需要采取额外的预防措施，如定期消毒、单独隔离等。

总的来说，铜绿假单胞菌是一种常见的致病细菌，对抗生素显示出耐药性，需要注意预防和控制其感染的传播。

最常见的“嗜冷菌”，有耶氏菌和李斯特菌。

肉类、奶及奶制品、豆制品、沙拉和水产品等，都是较易受其污染的食物。

先说耶氏菌，它可引起多种疾病，最常见的是小肠结肠炎，主要表现为腹痛、腹泻、发热等症状，或出现类似阑尾炎的症状，偶尔也能引起肠道溃疡和穿孔。

耶氏菌还可以引起皮肤多形红斑、结节红斑和关节炎。

严重的话可致人发生败血症、脑膜炎、肺脓肿、肝脓肿、骨髓炎。

李斯特菌可引起新生儿、孕妇、老年人以及免疫功能下降或缺陷的人发病，它可引起新生儿败血症、脑膜炎，导致呼吸或循环衰竭，病死率高达100%。

孕妇感染后会出现畏寒、发热、头痛、肌痛、关节痛、背痛等类似上呼吸道感染的症状，还可引起早产、死产或新生儿脑膜炎而致其死亡。

成年人感染后，则可引起败血症，表现为发热、肌痛、腹泻和恶心。

感染李斯特菌后，还可导致中枢神经系统受损，出现脑膜炎、脑炎、脑脓肿，出现发热、头痛、恶心、呕吐和偏瘫等，约40%的病人还会发生呼吸衰竭，病死率较高。

此外，李斯特菌感染还会引起心内膜炎、化脓性结膜炎、发热性肠炎、肝炎、肝脓肿、胆囊炎、脾脓肿、关节炎、骨髓炎等。

被耶氏菌和李斯特菌污染的食物，经正常的煮烧可将细菌杀灭。

多数嗜冷菌在贮存期间，能产生热稳定性胞外降解性酶类（主要是蛋白酶、脂肪酶和碱性磷酸脂酶），在巴氏消毒过程中基本不受影响，这类热稳定性胞外蛋白酶和脂肪酶甚至经过UHT处理后仍能保持部分活性，造成乳及乳制品风味及质地上的变异，主要表现为：1.蛋白酶分解乳蛋白后，导致产品发苦，，水解过程中释放的氨基酸会使褐变反应加剧，分解k-酪蛋白，引起蛋白胶凝化。

2.分解脂肪后，导致游离脂肪酸增加，口感风味变差。

嗜冷菌的检验和控制目前用于检测生奶中嗜冷菌数量的方法有多种，最常见的方法是在5℃—7℃培养10天后计数，或将样品21℃增菌培养后，采用选择性培养基在21℃培养25小时后，将样品中G-杆菌作为嗜冷菌污染的指标，这些方法在时间及针对性上都存在严重的缺陷。

注意冰箱中的嗜冷菌
在很多人眼中，冰箱就是一个与外界绝缘的'无菌保鲜室。

专家提醒，冰箱内虽温度较外界低，却是嗜冷菌的“温床”。

市民应经常清理冰箱，保持冰箱内环境的干净整洁，抑制细菌生长繁殖。

通常情况下，嗜冷菌在0℃～20℃的环境中最适宜生长。

在冰箱内，当其他细菌无法生存或生长繁殖速度减慢时，嗜冷菌却能够快速生长、大量繁殖。

一般来说，食用了被嗜冷菌污染的食物，会导致恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状。

嗜冷菌家族成员——李斯特菌，可引起新生儿、婴儿化脓性脑膜炎、成人败血症、孕妇流产等。

那么，该如何预防嗜冷菌污染食物呢？首先，要经常清理冰箱，保持冰箱内环境整洁，抑制细菌生长、繁殖；其次，要把握好冰箱的使用温度，冷藏室通常应保持在4℃～10℃；另外，食用从冰箱中取出的食物，应将之彻底加热，尤其是剩饭剩菜，需要再回锅煮一下。

一般加热15分钟以上，可以保证去除嗜冷菌，减少腹泻的发生；最后，生、熟食物要注意分开存放，避免交叉污染。

细菌的生长条件细菌是一类微小的单细胞生物，其生长条件直接影响其繁殖和生存能力。

下面将介绍细菌的生长条件，包括温度、湿度、pH值、营养物质和氧气。

一、温度温度是细菌生长的重要因素之一。

根据适宜生长的温度范围，细菌可以分为三类：嗜热菌、嗜冷菌和中温菌。

1. 嗜热菌：适宜生长温度为50℃-80℃。

嗜热菌可以在温泉、海底热泉等高温环境下生存，其酶活性能够在高温下保持稳定。

2. 嗜冷菌：适宜生长温度为0℃-20℃。

嗜冷菌可以在极寒的环境中生存，如南极洲的冰川和北极海洋中。

3. 中温菌：适宜生长温度为20℃-45℃。

中温菌是最常见的细菌类型，可以在人类体温范围内生存繁殖。

二、湿度湿度对细菌的生长也有重要影响。

细菌对湿度的要求可以分为两类：耐干菌和耐湿菌。

1. 耐干菌：适应低湿环境的细菌。

它们可以在干燥的环境中存活，并且能够形成耐干的孢子来保护自身。

2. 耐湿菌：适应高湿环境的细菌。

这类细菌通常生活在水域、土壤或植物表面等湿润环境中。

三、pH值pH值是衡量溶液酸碱性的指标，对细菌的生长也有重要影响。

细菌可以分为酸性菌、碱性菌和中性菌。

1. 酸性菌：适宜生长在pH值低于7的酸性环境中。

这类细菌可以在酸性食品和发酵过程中生长繁殖。

2. 碱性菌：适宜生长在pH值高于7的碱性环境中。

这类细菌可以在碱性土壤和碱性水体中生存。

3. 中性菌：适宜生长在pH值接近中性的环境中。

这类细菌对酸碱度要求不高，可以在人体内生存繁殖。

四、营养物质细菌的生长需要各种营养物质，包括碳源、氮源、矿物质和微量元素等。

1. 碳源：细菌利用碳源进行能量代谢和有机物合成。

常见的碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。

2. 氮源：细菌需要氮源合成蛋白质和核酸。

常见的氮源包括氨基酸、尿素、硝酸盐等。

3. 矿物质：细菌需要矿物质提供微量元素，如钙、镁、铁等。

4. 微量元素：细菌还需要微量元素作为酶的辅助因子，如锌、铜、锰等。

五、氧气氧气是细菌生长的重要因素之一，对细菌生长的影响可分为以下几类：1. 厌氧菌：不需要氧气进行生长，可以在无氧或微氧条件下生存。

嗜冷菌数检测培训内容一、引言嗜冷菌是一类适应低温环境生长的微生物，它们在低温下能够正常繁殖和代谢。

嗜冷菌的检测对于食品、水质、环境等领域具有重要意义。

本文将介绍嗜冷菌数检测的培训内容，包括检测方法、样品处理、培养条件等方面的知识。

二、嗜冷菌数检测方法1. 嗜冷菌数量的测定方法主要有平板计数法和膜过滤法。

平板计数法适用于嗜冷菌数量较多的样品，膜过滤法适用于嗜冷菌数量较少的样品。

2. 平板计数法的步骤：（1）将样品取适量加入培养基中，均匀涂布在富含营养物的琼脂平板上；（2）将琼脂平板放入低温环境，使嗜冷菌生长；（3）经过适当时间后，通过计数器对琼脂平板上的菌落进行计数，得到嗜冷菌的数量。

3. 膜过滤法的步骤：（1）将样品通过膜过滤装置过滤，将过滤膜放置在富含营养物的琼脂平板上；（2）将琼脂平板放入低温环境，使嗜冷菌生长；（3）经过适当时间后，通过计数器对琼脂平板上的菌落进行计数，得到嗜冷菌的数量。

三、样品处理1. 样品的收集和保存（1）对于食品样品，应在低温条件下采集，并尽快送至实验室进行处理；（2）对于水质样品，应使用无菌容器采集，并尽快送至实验室进行处理；（3）对于环境样品，应选择合适的采样点和采样工具，并尽快送至实验室进行处理。

2. 样品的预处理（1）对于食品样品，应先进行均质处理，以确保样品的均匀性；（2）对于水质样品，应先进行过滤处理，以去除杂质；（3）对于环境样品，应先进行稀释处理，以适应检测方法的要求。

四、培养条件1. 嗜冷菌的适宜生长温度一般在0℃-15℃之间，不同的嗜冷菌对温度的要求有所不同，因此在培养过程中应根据具体的嗜冷菌种类来调整温度。

2. 嗜冷菌的培养基应选择适合其生长的培养基，一般含有蛋白胨、酵母粉、葡萄糖等成分，以提供必要的营养物质。

3. 嗜冷菌的培养时间一般较长，需要在适宜温度下培养数天甚至数周，以获得足够的菌落数量。

五、结果分析与报告1. 根据实验结果，可以计算出嗜冷菌的数量，并进行统计分析。

原料奶嗜冷菌的危害及其控制方法杨亚军概要质量数据对比分析显示，原料乳中微生物数量和嗜冷菌数量不存在有效的正反关联，即微生物合格率高的原料奶，其嗜冷菌数量未必低，反之，微生物合格率低的原料奶，其嗜冷菌数量未必就高（详见附件1），因此本文简述了低温菌的概念、来源及其危害，着重介绍嗜冷菌控制措施。

一、嗜冷菌概念牛乳挤出来要经过冷却处理，降低乳温从而抑制细菌的生长繁殖，但在低温条件下有些细菌也能生长，而这类细菌即为低温菌。

低温菌又包括嗜冷菌和耐冷菌。

嗜冷菌主要存在于低温环境中，包括两类微生物，一类是专性嗜冷菌（Psychrophiles）最高生长温度不高于20℃，最适生长温度为15℃，在0℃仍然可以生长繁殖的微生物；另一类为兼性嗜冷菌（Psychrotrophics），又名耐冷菌，最高生长温度高于20℃，最适生长温度高于15℃，在0～5℃仍然可以生长繁殖的微生物。

专性嗜冷菌主要分布在常冷低温区，对温度的变化比较敏感，20℃以上即很快引起死亡；而兼性嗜冷菌分布范围较宽，从常冷到不稳定的低温环境中都能分离到。

乳的低温菌污染被认为是影响乳制品保质期的最为重要因素之一。

二、嗜冷菌的危害嗜冷菌广泛存在牛乳的外部环境中，如：土壤、灰尘、空气、水、草料、粪便等中，而牛体乳房部位、挤奶设备管道容器内以及挤奶现场环境中的嗜冷菌最有可能进入牛奶当中，对原料乳造成污染。

这种细菌可以在冷藏温度下的牛乳中大量繁殖，并产生可以侵害乳中营养成分的热稳定酶类，如耐热性蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶等，不但引起产品酸包、苦味包、乳清分离、变色发粘，脂肪分离等变质现象发生，而且还会影响乳制品的加工。

乳中所含嗜冷菌极其胞外酶浓度的大小直接影响着牛乳的货架期，加工过程中一般采用的热杀菌只能杀灭乳中细菌包括嗜冷菌，但其所产生的耐热性胞外酶却仍然能够保持活性，最终会导致超高温灭菌奶的苦味、凝结等不良腐败现象的发生。

降低嗜冷菌在生长繁殖过程中产生的耐热性胞外酶的浓度，以确保奶制品的质量及其货架期。

嗜冷菌和耐冷菌,蔼哆佝做#999年26(2】微牛物学强报-155微生物勘探方法,微生物提高石油采收率工艺从贫矿石中浸出各种金属(铀,金和铜等)的工艺和微生物再生能源(卜L,石油等)l_艺等等,甫已在生产中应用,有正处十研究开发阶段程中.不仅要啬明微生物的存在,还要查明它们赖以生存的营养物的存在及其对所在环境条仲的适应性,和它们产生的代酣产物的实际规模等,才能作出比较可靠的结它决不能将微生物的存在与其积极的生命活应该特别指出是,在研究微生物地质作用的过动的存在混为一谈1_r,f,?..……"...-;极端微生物专栏;嗜冷菌和耐冷菌辛明秀马延和c中国科学院馓l牛物研究所】00080在地球这个大的生态系统中存在着广'泛的低温环境如占地球表面l4%的两极地区,岛山,冰川厦件库等地海洋深处等(90%的海水其平均温度为5℃或更低).在这些特殊的环境中生活着一类微生物即玲适应微生物根据萁生长温度特性可缅分为两类.一类是必额生活在低温条件且其最高生长温度不超过20℃,最适生长温度在15"C,在OC可生K繁殖的微生物称嗜冷菌(psychrophiles)另一类其最高生长温度高于20C最适温度高于l5℃,在O～5℃可生长繁殖的微生物称为耐玲苗(psychrolrophs)这两类微生物的生态分布和适应低温的分机制存在一定差异在丰富底物存在条件下,嗜件菌在O'C的生长要超过耐冷菌.嗜冷菌只能在较窄的温度范围内生长,而耐冷菌则能在较宽的温度范围内生k嗜冷菌主要分布于常玲的环境中如南北两极地区,冰窟高山.探海和土壤等低温环境中.嗜冷菌的分布很受环境温度限制且数量少即使南北两极常挣的环境中,分离到的微生物中嗜冷菌只占很少部分嗜拎菌对温度的变化根敏感,20C以上很快即目l起死1L=.耐冷菌则分布范围较宽.从常冷到不稳定的低温环境中均可分离到,嗜冷微生物具有f泛的微生物区系,已发现的嗜抟微生物既有真细菌,蓝细菌又有酵母菌,真菌和藻类最近叉发现嗜冷古细菌玲适应微生物在长期的生物进化过程中形成了一系列的适应低温的机制.这些机制包括营养物质的吸收和转运,DNA的复制台战,蛋白质的台成,台成代谢和分解代谢的正常进行,能量代谢的正常进行.细胞的分裂等膜中脂的组成提供了膜流动和柏结构的前提条件从而保证膜中镶嵌的蛋白质发挥正确的功能如离子和营养的吸收,电子转移等膜中脂类的改变会引起膜流动性的改变因此微生物必须调节脂类的组成,从而调节膜的流动性和相的结构此适应环境温度的变化当微生物处于低温时最经常看到的变化是增加不饱和脂肪酸的比例.比较中温酵母利嗜冷酵母同时处于低温时清楚地发现嗜砖酵母合成的不饱和脂肪酸含量增加细菌处于低温时除了不饱和脂肪酸的改变外尚有其他变化如缩短酰基链的长度,增加脂肪酸支链的比例和减少环状脂肪酸的比例等.所有这些变化对于低温时维持膜的流动性具有重要意义而膜的流动性为营养物质的转运和吸收提供了基础.中温菌在接近OC时溶质吸收不活跃,其细胞膜中的运载蛋白对冷敏感,涪质分子不能与相应的运载蛋白结合,且在低温条fq-下由于能量缺乏不能支持营养物资的跨膜运输而嗜冷菌细胞膜中的运载蛋白对冷不敏感比较研究嗜冷的,中温的和嗜热的Torulopsis酵母菌株,发现只有嗜冷菌能在2"C运转葡萄糖嗜玲菌中的蛋白质在低温下能保持结构上的完整I生,这可能是由于其蛋白分子含有更多的氢键和盐键(转第l09页))1999年2623.3肠道益生菌的菌群变化微牛物学通报?l09?本研究中,双歧杆菌和乳酸杆菌的菌群数量呈现出一定的动态变化对非球虫感染雏鸡,上述菌群变化可能与肠道有益微生物菌群的逐步建立过程有关.而对球虫感染鸡,则同时与球虫的感染过程有关,因为柔嫩艾美耳球虫的致病性主要表现在球虫感染岳的3～7d时球虫在肠道上皮细胞中的裂殖生殖阶段,感染后第7d,机体开始逐步恢复.但前期的一些病理变化则将保持一段较长的时间奉研究中,球虫感染鸡的双歧杆菌和乳酸杆菌的菌群数量变化基本上与球虫病的致病过程相符合.3.4肠道益生菌的应用双歧杆菌和乳酸杆菌是健康鸡肠道内的正常微生物菌群的重要组成部分,起作排出和控制潜在的病原微生物,增强动物抵抗力,缓解和排除应激因素的影响,促进动物生长,提高饲料转化率等作用'.如一些含有乳酸杆菌生菌剂已在北欧面市,用于鸡沙门氏病的防治J既然秉嫩艾美耳球虫感染町以引起盲肠中上述两种有益微生物的下降,使盲肠的正常苗群失调,那么对于感染球虫的病鸡,通过添加双歧杆菌和乳酸f上接第155页)从而能形成相对松动剌具有弹性的结构嗜冷菌中的某酶称嗜冷酶,在低温卜具有很岛的催化活性,其酶的最适反应温度与中温菌相比一般要低2O～30"C这就保证了嗜玲菌在低温下生命活动的正常进行.嗜冷菌具有在0℃合成蛋白质的能力这是由于其棱糖体酶类以及细胞中的可溶性日于等对低温的适应性.体外实转表明,在同样低温条件F嗜冷菌体外蛋61质翻译的错误率最低许多中温菌不能在0C合成蛋白质一方面是由于其棱糖体对低温的不适应,翻译过程中不能形成有效的起始复合物,另一方面是由于低温细胞膜的破坏导致氨基酸等内容物的泄精由此可见嗜冷菌适应低温的能力表现在蛋白质合成过程中翻浑机制的适应陛厦在低温F能保持完整的膜结构,从而保证低温蛋白质合成的J下常进行冷休克蛋白(coldshockprotein)首先在』=肠杆菌中篮现,将大腑杆菌从37~C突然转移到iO~C时,细胞中杆菌则有可能缓解球虫病所造成的影啊笔者曾将嗜酸性乳酸杆菌和乳糖用于柔嫩曼美耳球虫感染的雏鸡,发现它能够着地降低球虫感染对鸡盲肠中肠炎沙门氏菌数的增加作用,为上述推测提供了一个实际例证.参考文献郁明发卜海畜牧兽医通讯,】989I36-37 McIXmgaldLRCocci出anandre]medinfectionsIn Chemotherap~ofPal-asidcDiseasesNewY ork: PlenumPubishJngCorporation,】986?【57～】70 nZRFukalaT,BabaEⅡPouhr3.Sci.】995.74I～7QinzRFukataT,BabaErAv】ans.】995,39548～553QinZR.BabaE,FukataT口PotdtyrSci【995—74】786～1792nZRBabitE,FukamT,AⅥans】996.40:36J～367陈德威家禽微生志学见:何明清丰编动物微生志学北京:中国表业版社【99413【～】3"/ BucitananRE—GibbonsNEBe~gey'5Manualof deternfinativeBactenotogy8ed_,Baldmor~:Williams&Wild[IS【974WierupM,Wah[stromH,EngstromBInternJFood.Micmo1.】992,5:287～29】会诱导台成一组冷休克蛋白它们在对低温的生理适应过程中发挥着重要作用检测嗜冷酵母Trichosporon puSulans的冷休克反应,发现冷刺傲后冷休克蛋白在银短时倒内大量产生.有些分离自南极的耐冷细菌在22C 和4"C时冷休克基日能经常表达,当温度从22℃突然降到4C后lhcsDAmRNA表达量最大.耐冷菌由于生活在温度波动的环境中,它们必颓忍受温度的快速降低,这与它们产生的冷休克蛋白是密切相关的地球上冷适应微生物的资源非常丰富它们在低温条件r即可对污染物质进行降解和转化低温笈酵口J生产许多风味食品且可节约能源及减少中温苗的污染分离自嗜冷菌的脂酶,蛋白酶及D一半乳糖苷酶在食品工业和洗涤剂中具有很大潜力从海洋冷适应微生物中分离的生物活性物质可用于医药食品等生命起源于温度}硅低海洋,因此有学者提出玲适应微生物与生命起源相联系.玲适应微生物存生物技术及生命科学研究中的地位将会越来越重要234i789。