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1.中药药理与临床2007标题：大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立（本实验选用高脂饲料诱导大鼠高血脂、脂肪肝，为预防脂肪肝药物的筛选提供实验模型。
）目的：建立大鼠高血脂及脂肪肝模型。
方法：SD大鼠随机分为2组，分别接受正常饲料、高脂饲料，连续3周，测定大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)、极低密度脂蛋白(VLDL—C)。
1．1动物：SD大鼠，SPF级，20只，雌雄各半，体重180—220g, 实验动物质量合格证明号：2006A1．2高脂饲料：高脂饲料由猪油(12％自制)、胆固醇(2％)、丙硫氧嘧啶(0.2％)、3号胆盐(0.5％)、普通混合饲料粉(85.3％)组成，将以上各物先人工充分混匀，再经搅拌，压成圆条状颗粒，真空包装后，经”co辐照消毒备用，由南方医科大学实验动物中心制作。
1．3方法：将大鼠随机分为正常对照组(10只)、高脂模型组(10只)，雌雄各半。
正常对照组投喂普通颗粒饲料，高脂模型组以高脂饲料替代普通饲料投喂，平均每天每只约20克左右。
动物造模3周，实验结束前1天晚上禁食，不禁水，次日上午麻醉后，腹主动脉采血，分离血清，送南方医科大学附属南方医院医学检验中心检测血脂五项。
取肝脏，称肝湿重，计算肝指数，并在肝右叶离边缘1cm处，横切一块肝组织用10％中性福尔马林固定，常规脱水，HE染色。
讨论：本文用高脂饲料成功地复制了大鼠高脂血症及脂肪肝模型，严重的肝细胞的变性可导致部分动物出现不同程度的肝细胞坏死。
高脂模型组大鼠肝脏体积增大，重量增加，质软切面油腻为奶黄色。
高脂模型组大鼠血清TG、TC、LDL—c、VLD含量都非常显著升高。
对于HDL—c所占Tc的百分率，正常对照组非常显著高于高脂模型组，虽然高脂模型组HDL —C含量明显高于正常对照组，但由于正常对照组TC含量远远低于模型对照组，故HDL —C含量必然低于模型对照组。
复方中药防治大鼠脂肪肝的实验研究
苗宇船;李瑞华
【期刊名称】《山西中医学院学报》
【年(卷),期】2003(4)2
【摘要】目的:观察复方中药对复合因素诱发的脂肪肝动物模型的影响.方法:24只Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(n=8)基础饲料喂养;模型组(n=8)高脂饲料喂养;复方中药组(n=8)在高脂饲料喂养的基础上予复方中药煎剂灌胃.观察一般情况及血清肝功能、血脂,并行病理学检查.结果:与模型组相比,复方中药组的肝指数,血清甘油三酯、高密度脂蛋白及谷丙转氨酶均有明显改善,差异有统计学意义;血胆固醇、低密度脂蛋白均呈下降趋势.病理学检查表明肝脏脂肪变性有改善.结论:复方中药可以通过改善实验大鼠体内脂质代谢达到防治脂肪肝的目的.
【总页数】3页(P15-17)
【作者】苗宇船;李瑞华
【作者单位】山西中医学院,山西,太原,030024;太原市卫生学校,山西,太原,030012【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.单味中药防治非酒精性脂肪肝的实验研究进展与展望 [J], 何道同;王兵;陈珺明
2.复方首乌降脂通脉颗粒防治大鼠高脂血症和脂肪肝的实验研究 [J], 陈家英;陈姝;梅胜尧;段晓波;滕德义
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5.中药防治脂肪肝实验研究进展 [J], 苏菁;徐宗佩
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大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立杨威;徐闯;陈媛媛;郑家三;张洪友;夏成【摘要】利用不同高脂饲料配方建立大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,为非酒精性脂肪肝的研究提供参考依据.大鼠饲喂单纯高脂饲料以及分别含有去氧胆酸、丙基硫氧嘧啶的高脂高胆固醇饲料,经6周的实验周期.结果显示,单纯饲喂高脂饲料大鼠(H6)呈现出显著的体重增加以及肝脏脂肪浸润.饲喂添加去氧胆酸盐的高脂饲料后大鼠肝脏胆固醇水平显著降低,但血液丙氨酸转氨酶(ALT)和丙氨酸转氨酶(AST)水平显著高于H6大鼠.丙基硫氧嘧啶介导甲状腺机能减退脂肪肝模型(HP6)组大鼠呈现前期体重生长缓慢后期的体重减轻且高的血清甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、ALT.四环素刺激下的甲状腺机能减退大鼠(HPT6)呈现严重肝脏病变以及低下肝脏脂肪蓄积和高水平的血清ALT.表明HP6大鼠存在进行性非酒精性脂肪肝的发生.而在四环素刺激下,甲状腺机能减退大鼠存在进行性肝纤维化以及肝脏疾病晚期的可能.为非酒精性脂肪肝研究提供了有力的基础数据.【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》【年(卷),期】2017(029)003【总页数】5页(P15-19)【关键词】高脂饮食;非酒精性脂肪肝;丙硫氧嘧啶;去氧胆酸盐;盐酸四环素【作者】杨威;徐闯;陈媛媛;郑家三;张洪友;夏成【作者单位】黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319【正文语种】中文【中图分类】S856.4近年来，人类脂肪肝的发病呈不断上升趋势，对人类的健康和生活质量造成严重威胁。
非酒精性脂肪肝病作为最常见的肝脏疾病之一，根据其严重程度不同可从简单的肝脏脂肪沉积到非酒精性脂肪肝炎，最后可发展为肝脏纤维以及肝硬化和肝细胞癌[1-2]。
大鼠非酒精性脂肪肝中UCP2动态表达研究目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝中UCP2的动态表达，进一步明确其在非酒精性脂肪肝中的发病机制。
方法选取大鼠60只进行实验，按照随机分组原则划分为观察组和对照组，观察组采用高脂饮食进行脂肪肝诱导，采用免疫组织学技术和Western blot技术对大鼠肝组织中的UCP2进行检测，对大鼠的血清甘油三脂（TG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和游离脂肪酸（FFA）含量进行检测。
结果大鼠在形成非酒精性脂肪肝过程中，体内UCP2阳性细胞的含量以及TG、ALT、FAA的表达和含量都会显著增加，在高脂饮食诱导8～12周期间最为明显。
结论大鼠非酒精性脂肪肝的形成与发展程度与体内UCP2表达强度呈正比例关系，UCP2的酶活性增高会导致促进脂质过氧化反应，促进脂肪肝的形成。
标签：非酒精性脂肪肝；UCP2；动态表达非酒精性脂肪肝，是一种无过度饮酒史，由于肝细胞内脂肪存积或变性所导致的临床病理综合征。
近年来，随着人们生活水平的不断提高，对高脂肪类食物的摄入增多，非酒精性脂肪肝的发病几率也呈现出逐年上升的趋势，并最终发展成为终末期肝病或肝硬化，对患者健康和生活造成严重影响，且当前仍没有有效的治疗药物[1]。
解耦联蛋白2（UCP2）是一种位于线粒体内膜上的载体蛋白，具有解偶联的作用，可以发挥脂质调节的作用，但当UCP2的表达增加时，却同时对机体产生不良的作用，在非酒精性脂肪肝的形成发展过程中具有重要的调节作用[2]。
为了探讨两者之间的关系，本研究选取大鼠建立非酒精性脂肪肝模型实验，对UCP2的动态表达变化进行研究，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取本医院动物中心的成年、雄性大鼠60只进行研究（合格证号：1003046），体重150～200g，首先全部采用普通饲料喂养1周。
按照随机分组原则将60只大鼠划分为观察组和对照组各30只。
观察组大鼠采用88%基础饲料加10%猪油加2%胆固醇，自由进食和饮水；对照组采用普通饲料进行饲养，两组患者均以12周为1个周期进行饲养[3]。
清脂益肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠治疗
的实验研究
1．2．1 动物分组与模型建立：43只大鼠在动物房内适应性喂养1周后，随机分为4组：正常对照组(I组)10只，模型组(1I 组)l1只，清脂益肝汤组(Ⅲ组)11只、二甲双胍组(Ⅳ组)11只。
Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲以高脂饲料，配方为：普通饲料+1％胆固醇+ 14％猪油，由天津市华容实验动物中心饲料厂配制；正常对照组饲以普通饲料，实验动物自由饮水和进食。
4周后随机抽取Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ三组中各一只大鼠脱颈处死，病理证实脂肪肝已形成。
清脂益肝汤组给生药16 g·ks ·d～，灌胃治疗；二甲双胍组给170 mg·ks～·d (按成人剂量1．5 g／d折算)溶于5 rnl蒸馏水中
灌胃。
正常对照组、模型组给予同量蒸馏水灌胃，各组按原饲料进行饲养。
8周后，全部脱颈处死，取血及肝组织待测。
1．2．2 观察指标及检测方法：(1)观察大鼠食欲、体重、毛发及死亡情况。
(2)血清指标测定：测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、
空腹血糖(FBS)、游离脂肪酸(FFA)；放免法测定空腹胰岛素(FINS)。
胰岛素抵抗指数计算：胰岛素抵抗指数(HOME-IR)：
(~33s×F~NS)／22．50。
(3)取肝组织一块马上置于液氮中用RTPCR 法检测肝组织中瘦素mRNA(1eptin mRNA)的表达。
1．3 组织病理学标本的制备取肝左叶用10％甲醛溶液固
定，石蜡包埋，HE染色，光镜下观察组织学改变。
2、化痰泄浊方对脂肪肝模型大鼠胰岛素抵抗及瘦素
的影响
1．2．1 分组与模型制作 SD大鼠48只，常规饲养1周后随机分为5组：正常对照组、模型组、DBGTT组、HTXZR高剂量和低剂量组，其中正常对照组8只，其余4组各1O只。
正常对照组予以基础饲料喂养，其余4组均以高脂饲料(84 9／6基础饲料+1o猪油+5 蛋黄粉+1 胆固醇)喂养，并于造模第1天予以腹腔注射四环素150 mg／kg，后每隔6 d腹腔注射四环素110 mg／kg 1次，共6次。
1．2．2 给药方法自造模第1天起，除正常对照组外，其余各组均按5 ml〃kg 〃d一，1次／d，分别灌服生理盐水或相应的药物溶液。
HTXZR高剂量和低剂量组的给药浓度分别为HTXZR 2 g／ml和1 g／ml(相当于成人用药剂量的2O倍和1O倍)；DBGTT溶于蒸馏水中，制成浓度为0．06 g／ml的溶液，给药浓度为0．225 g〃kg。
〃d (相当于成人用药剂量的1O倍)。
连续7周。
4种中药复方对大鼠脂肪肝模型胰岛素抵抗及瘦素的影响
1．2．1 分组与模型制备：SD雄性大鼠，1 10只，随机分为空白组、模型组、东宝肝泰组(东宝组)、
化痰祛浊高剂量组(化痰高组)、化痰祛浊低剂量组(化痰低组)、疏肝健脾高剂量组(疏肝高组)、疏肝
健脾低剂量组(疏肝低组)、凉血活血高剂量组(凉血高组)、凉血活血低剂量组(凉血低组)、滋阴补肾
高剂量组(补肾高组)、滋阴补肾低剂量组(补肾低组)等
1 1组各10只；常规饲养1周后，除空白组给予基础饲料外，其余10组均饲以高脂饲料(质量分数84％
基础饲料+质量分数10％猪油+质量分数5％蛋黄粉+质量分数1％胆固醇)，并于造模第1 d腹腔注射
四环素150 mg／kg，其后每6 d 1次腹腔注射四环素1O0 mg／kg，计6次。
1．2．2 给药方法：自造模第1 d起，除空白组外，各组分别灌服生理盐水及相应药物，东宝肝泰溶
于蒸馏水中，制成0．06 g／ml的混悬液，灌服剂量为0．225 g／(kg·d)，相当于成人用药量的10倍。
高剂量组按10 ml／(kg·d)灌胃，相当于成人用药量的20倍，低剂量组按5 ml／(kg·d)灌胃，相当于成人用药量的10倍。
1．2．3 标本采取：于造模第7周结束时采集标本。
方法：隔夜禁食，次日以20 g／L戊巴妥钠溶液1 ml ／kg腹腔内注射麻醉后，从腔静脉采血，然后迅速取出肝脏称肝湿重，计算肝湿重／体重比值，即为肝指数。
所采血在30 min内离心取血清待检。
1．2．4 指标测定：瘦素及空腹胰岛素定量采用放1．6 标本采取于实验造模第7周结束时处死各组动物，方法：隔夜禁食，次日以2％戊巴妥钠溶液1ml／kg体重腹腔内注射麻醉后，迅速取出肝脏称肝湿重，并取肝左叶0．1cm x 0．1cm x 0．6cm 标本2～4块经戊二醛锇酸固定、然后取同部位肝左叶1块0．5cmX 1cm X 0．3cm 组织置于l0％磷酸缓冲甲醛液
固定。
1．7 指标涸定
1．7．1 瘦素及空腹胰岛素定量采用放射免疫方法，
单位以 g／ml表示。
根据_5】推荐公式计算胰岛素抵抗
指数(胰岛素抵抗指数=空腹血糖含量X空腹胰岛
素含量／22．5)。
1．7．2 肝脏病理光镜：取肝左叶，中性甲醛固定肝标本，肝组织石蜡切片HE染色观察肝脏病理学改变。
电镜：标本经戊二醛锇酸固定，环氧树脂包埋，超薄切片透射电镜观察肝组织超微结构变化。
光镜下评估肝脂肪变性程度，判断标准按照脂变细胞占肝细胞的百分比进行脂变程度分级_5】。
三七总皂苷对大鼠非酒精性脂肪肝模型
胰岛素抵抗及瘦素受体表达的影响
1．1 实验动物及饲料选取Wi~ar雄性大鼠40只(由山西医
科大学实验动物中心提供)，体重(180±20)g，实验室温度
(18-22)℃，湿度45％～65％，各组动物单笼喂养，自由饮水。
基础饲料(山西医科大学实验动物中心提供)；高脂饲料：基础饲
料84．5％、蛋黄粉10％、猪油5％，猪胆盐0．5％。
1．2 试验用药品及试剂三七总皂苷粉剂(云南玉溪市维和制1．4 动物模型分组及标本制备适应性饲养7 d后，按体重编
号，完全随机分组，正常组10只、造模组30只，均自由进食、进水。
正常组喂养基础饲料，造模组喂养高脂饲料。
3个月后随
机解剖正常组大鼠2只和造模组大鼠6只，取肝组织，HE染色。
造模成功后，造模组停喂高脂饲料，改为普通饲料喂养，剩余32 只大鼠再随机分为4组，每组8只。
正常组：纯净水4 mL／d灌
胃30 d；模型组：纯净水4 mL／d灌胃30 d；三七总皂苷低剂量组：三七总皂苷100 mg／(kg·d)灌胃30 d；三七总皂苷高剂量组：三七总皂苷200 mg／(kg·d)灌胃30 d。
各组大鼠药物干预
30 d后，禁食、禁水12 h，次日称体重，注射25％乌拉坦0，4 mL／kg，
麻醉后腹主动脉取血每只4 mL，室温下2 000 r／min离心15
mln，分离血清，一40℃冰箱保存。
迅速取出肝脏，称湿重，并取肝右叶2块用10％甲醛固定，分别用于HE 染色和瘦素受体免
疫组化染色。
1．5 指标测定
1．5．1 血清瘦素及空腹胰岛素采用放射免疫法，计算胰岛素抵抗指数(胰岛素抵抗指数=空腹血糖含量×空腹胰岛素含量／22．5)。
1．5．2 普通病理学检测10％甲醛固定，石蜡包埋，组织切片，HE 染色，光镜下观察普通病理学变化。
光镜下评估肝脂肪变
性程度，判断标准按照脂变细胞占肝细胞的百分比进行脂变程度分级 J。
1．5．3 免疫组化染色采用SABC法。
方法为切片脱蜡；3％
H202溶液处理；热修复抗原；5％BSA封闭；滴加大鼠瘦素受体单克隆抗体一抗(浓度1：100)，4℃冰箱过夜；隔夜滴加生物素化养抗兔Iga二抗，37℃孵育20 min，再滴加试剂SABC；DAB
显色；苏木精复染。
细胞呈棕黄色为阳性，蓝色为阴性。
1．5．4 病理指标分析对各组免疫组化染色最显著区域的表
达进行图像分析，在400倍光镜下测量每个显示屏的染色强度(平均光密度)。
每张切片选取染色最显著的6个视野，分别测
量光密度，然后计算其平均值，来说明各组瘦素受体的表达情况。
1．6 统计学处理使用SPSS 13．0统计软件进行统计学处理。
计量资料以均数±标准差(i±S)表示。
多组间比较采用方差
分析和两两比较的SNK—q检验、Pearson相。
