粪便隐血试验的临床价值讲课
- 格式:doc
- 大小:128.00 KB
- 文档页数:7
粪便隐血试验(OBT)及临床意义一、概述粪(大)便隐血是指上消化道出血小于5 ml,粪便中无可见的血液,且红细胞被消化破坏,显微镜检查不能发现红细胞的微量出血。
检查粪便隐血采用粪便隐血试验(occult blood test,OBT)。
二、检测方法目前,粪便隐血试验常用化学法或免疫法测定类中血红蛋白,也可联合测定类中转铁蛋白。
其中,免疫法粪便隐血试验是一种高灵敏度的测定方法,有胶乳凝集法、EIA 法、胶体金法和免疫层析法等。
此外,还有半自动、全自动的粪便隐血试验仪器。
化学法一、原理血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化H202作为电子受体使色原(如邻联甲苯胺)氧化而显色(如邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氨苯显蓝色)。
二、试剂1、10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液2、3%过氧化氢液。
三、操作1、用小木棍挑取少量粪便,涂在消毒棉签或白瓷板上。
2、滴加10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液2~3滴于粪便上。
3、滴加3%过氧化氢液2~3滴。
4、立即观察结果,在2分钟内显蓝色为阳性。
四、结果判定1、阴性:加人试剂2分钟后仍不显色。
2、阳性+:加人试剂10秒后,由浅蓝色渐变蓝色。
3、阳性2+:加人试剂后初显浅蓝褐色,逐渐呈明显蓝褐色。
4、阳性3+:加人试剂后立即呈现蓝褐色。
5、阳性4+:加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。
五、注意事项1、3%过氧化氢液易变质失效,须进行阳性对照试验,将过氧化氢滴在血片上,应产生大量泡沫。
2、齿龈出血、鼻出血、月经血等可导致阳性反应。
3、用具应加热处理(如试管、玻片、滴管等)以破坏污染的过氧化物酶。
4、也可选用中等敏感(0.3~1mg Hb/g粪便)的愈创木酯法,但必须选购质量优良的愈创木酯,配制成20g/L愈创木酯乙醇溶液,代替10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液,操作同上。
免疫法一、原理采用抗人血红蛋白的单克隆抗体或多克隆抗体,与粪便样品中的人血红蛋白特异性结合以检测类便中有无血液。
本试验不受动物血红蛋白的干扰,试验前不须禁食肉类。
粪便隐血试验的临床价值医科大学附属第一医院消化科军自1864年Vandeen发明GUALAC法检测大便隐血后,为临床消化道出血及消化道肿瘤的诊断提供了一种无创伤、简便、快速的检测方法。
100多年以来,此法有了长足的进步。
目前隐血检查方法可分为五类LL2]:放射分析法、物理法、化学法、免疫法和血红素-吓嘛试验。
放射分析法是静脉注射弋r标记的红细胞后检测粪便放射活性.专门用于定量分析.但日常使用太复杂。
物理法是通过显微镜检测粪便红细胞和血色素晶体或分光仪鉴定血红蛋白及其衍生物.目前主要用于学术研究:血红素-吓啾试验可检出任何形式的血红素,如游离的血红素或与珠蛋白结合的血红素及其多种衍生物.可用于定量分析大肠癌的隐性岀血■ 但由于对上消化道岀血的髙灵敏性,降低了其筛检大肠癌的特异性化学法和免疫法是目前比较常用的粪隐血检测试验•被美国胃肠病学会推荐用于普通人群大肠癌的筛检化学法以愈创木脂试验为代表,原理是基于血红蛋白分子的高铁血红素部分具有假性过氧化物酶(pseudoper-oxidase)活性.可催化裂解过氧化氢.其衍生物与指示剂偶联.氧化显色剂而形成有色产物.从而判断粪便中是否含有血红蛋白或血红素。
显色剂常用联苯胺(benzidine),但由于其致突变性,最近有应用三环类抗抑郁药盐酸丙咪嗪(imipramine hydrochloride, I PH)和去甲丙咪嗪盐酸盐(desipramine hydrochloride,DPH)等代替联苯胺,作为新的粪隐血检测显色剂的报道I:。
再水化愈创木脂试验可以增加反应的灵敏度,但再水化也可激活各种干扰因素的过氧化物酶活性而增加假阳性率[L5\研究发现无再水化假阳性结果为2%〜4%,而再水化则达8%〜16%t6\亦有报道,使用再水化愈创木脂试验可使肿瘤的预测值从44%下降到19% 1],因此美国胃肠病学会推荐使用无再水化愈创木脂试验筛检大肠癌⑶。
愈创木脂试验检测粪隐血前常需进行膳食限制,这是因为来自于肉类的非人类血红蛋白及其他具有过氧化物酶活性的膳食成分(如菠菜等)可引起假阳性,而过多的维生素C则可引起假阴性结果。