粪便隐血试验的临床价值-讲课
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粪便隐血试验参考值临床意义粪便隐血试验(FOBT)是一种常规的实验室检查方法,用于检测人体肠道内是否存在潜在的出血。
这种试验的参考值对于判断结果是否正常具有重要意义,同时也反映了临床上的许多潜在问题。
下面将详细介绍粪便隐血试验的参考值及其临床意义。
粪便隐血试验的参考值通常为阴性,即不存在红细胞或血红蛋白。
在某些情况下,特别是进行高灵敏度的粪便隐血试验时,可能会检测到极少量的红细胞或血红蛋白,但这并不一定意味着存在疾病。
一般来说,粪便隐血试验阳性,即检测到红细胞或血红蛋白,可能提示以下几种情况:消化道出血:特别是下消化道出血,如痔疮、肛裂、肠息肉等。
其他疾病:如口腔溃疡、牙周炎等口腔出血,或鼻腔出血等。
粪便隐血试验的临床意义主要体现在以下几个方面:辅助诊断消化道疾病:对于消化道出血、消化道炎症和消化道肿瘤等疾病,粪便隐血试验可以提供重要的诊断线索。
特别是在肠道肿瘤的早期,可能会出现粪便隐血试验阳性的情况,有助于早期发现肠道肿瘤。
评估疾病的严重程度:如果粪便隐血试验持续阳性,可能提示消化道出血较严重,或者存在多处出血。
同时,如果粪便中红细胞或血红蛋白的含量越高,也说明出血量越大,病情可能更为严重。
指导治疗:如果粪便隐血试验阳性,医生可以根据具体情况制定相应的治疗方案,如使用止血药物、调整饮食等。
同时,对于一些需要手术的疾病,如肠癌、胃癌等,粪便隐血试验的结果也可以作为评估手术效果和预后的参考。
监测复发和转移:对于已经接受治疗的消化道疾病患者,定期进行粪便隐血试验可以监测疾病的复发和转移情况。
如果试验结果持续阳性,可能提示疾病复发或转移。
鉴别诊断:与其他实验室检查方法相结合,如大便常规、血常规等,可以帮助医生鉴别诊断一些难以确定的疾病。
例如,如果粪便隐血试验阳性,但大便常规和血常规检查正常,可能提示患者存在痔疮等良性疾病引起的出血。
粪便隐血试验是一种重要的实验室检查方法,其参考值和临床意义对于诊断和治疗消化道疾病具有重要意义。
粪便隐血试验(OBT)及临床意义一、概述粪(大)便隐血是指上消化道出血小于5 ml,粪便中无可见的血液,且红细胞被消化破坏,显微镜检查不能发现红细胞的微量出血。
检查粪便隐血采用粪便隐血试验(occult blood test,OBT)。
二、检测方法目前,粪便隐血试验常用化学法或免疫法测定类中血红蛋白,也可联合测定类中转铁蛋白。
其中,免疫法粪便隐血试验是一种高灵敏度的测定方法,有胶乳凝集法、EIA 法、胶体金法和免疫层析法等。
此外,还有半自动、全自动的粪便隐血试验仪器。
化学法一、原理血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化H202作为电子受体使色原(如邻联甲苯胺)氧化而显色(如邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氨苯显蓝色)。
二、试剂1、10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液2、3%过氧化氢液。
三、操作1、用小木棍挑取少量粪便,涂在消毒棉签或白瓷板上。
2、滴加10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液2~3滴于粪便上。
3、滴加3%过氧化氢液2~3滴。
4、立即观察结果,在2分钟内显蓝色为阳性。
四、结果判定1、阴性:加人试剂2分钟后仍不显色。
2、阳性+:加人试剂10秒后,由浅蓝色渐变蓝色。
3、阳性2+:加人试剂后初显浅蓝褐色,逐渐呈明显蓝褐色。
4、阳性3+:加人试剂后立即呈现蓝褐色。
5、阳性4+:加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。
五、注意事项1、3%过氧化氢液易变质失效,须进行阳性对照试验,将过氧化氢滴在血片上,应产生大量泡沫。
2、齿龈出血、鼻出血、月经血等可导致阳性反应。
3、用具应加热处理(如试管、玻片、滴管等)以破坏污染的过氧化物酶。
4、也可选用中等敏感(0.3~1mg Hb/g粪便)的愈创木酯法,但必须选购质量优良的愈创木酯,配制成20g/L愈创木酯乙醇溶液,代替10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液,操作同上。
免疫法一、原理采用抗人血红蛋白的单克隆抗体或多克隆抗体,与粪便样品中的人血红蛋白特异性结合以检测类便中有无血液。
本试验不受动物血红蛋白的干扰,试验前不须禁食肉类。
你了解大便隐血试验检查的临床意义吗?(四川省射洪市金华中心卫生院629213)大便隐血试验检查常可为临床上一些病变的发现提供重要诊断依据。
但现实生活中有很多人都不了解此项检查,也就不重视此项检查,从而延误了对某些与该项检查相关联疾病的及时诊断时机。
一个人的健康,是可通过大便状况反映出来,正常情况下,一个人身体健康不会出现大便黑色情况,一旦出现黑色大便那就要引起重视,应尽早去医院做相应的检查。
一、隐血试验是怎么回事?大便隐血试验是指在消化道有少量出血时,肉眼不能见到大便中带血,但大便中已有被破坏红细胞,只是量少而已。
大便隐血试验常作为筛选消化道恶性肿瘤早期诊断的一个指标,对消化道出血的诊断有着很重要价值。
临床上有许多消化系统疾病,当其出血量很少时,用肉眼和显微镜都很难发现有出血的情况,通过做大便隐血试验(又称粪潜血试验)就可以确定有无消化道出血。
大便隐血试验检查其方法简便易行,只需患者采集少量大便送到去化验即可。
二、大便隐血试验检查的重要性大便隐血试验常为一些病变的早期发现提供重要的线索,特别是上了一定岁数的人应重视此项检查。
有许多专家建议超过50岁以上的人群每年都应该做一次大便隐血试验,特别是家族中有结肠癌病史或是曾经得过结肠息肉的人,因这类属于患结肠癌几率高的人群,更应该从40岁起每年都做一次大便隐血试验是非常必要的。
通过大便隐血试验检查,证实有消化道出血后,还需要结合患者的临床症状、体征和其他化验检查进一步查明引起出血的原因。
临床常见的原因有胃和十二指肠溃疡的活动期、胃癌、结肠癌、肠结核、钩虫病、慢性结肠炎、结直肠溃疡、直肠癌等。
大便隐血试验持续阳性时应想到有恶性病变的可能性。
大便隐血试验除了可以监测具有明显胃肠道出血病史的患者外,还在胃肠道肿瘤筛查预警、监测抗凝剂使用过程中的出血等方面都有着非常重要的意义。
三、大便隐血试验检查的临床意义有哪些?①大便隐血试验呈阳性,表示病人有上消化道出血情况;②有消化性溃疡疾病的人,大便隐血试验阳性率大概为45%-70%,而且阳性是间断性显现的,经过治疗大便外观看着好转后,大便隐血现象还会持续一周左右,待出血停止后大便隐血可转阴性;③有近20%的消化道癌症早期患者,大便隐血试验结果显示呈阳性,而到了癌症晚期大便隐血试验就能达到90%以上,而且是持续性阳性,所以大便隐血试验的检查在消化道肿瘤的筛查中有着重要意义;④其他一些疾病,如流行性出血热,其大便隐血试验结果的阳性率能达到近85%,这可以作为疾病诊断的重要佐证。
粪便隐血试验的临床价值医科大学附属第一医院消化科军自1864年Vandeen发明GUALAC法检测大便隐血后,为临床消化道出血及消化道肿瘤的诊断提供了一种无创伤、简便、快速的检测方法。
100多年以来,此法有了长足的进步。
目前隐血检查方法可分为五类LL2]:放射分析法、物理法、化学法、免疫法和血红素-吓嘛试验。
放射分析法是静脉注射弋r标记的红细胞后检测粪便放射活性.专门用于定量分析.但日常使用太复杂。
物理法是通过显微镜检测粪便红细胞和血色素晶体或分光仪鉴定血红蛋白及其衍生物.目前主要用于学术研究:血红素-吓啾试验可检出任何形式的血红素,如游离的血红素或与珠蛋白结合的血红素及其多种衍生物.可用于定量分析大肠癌的隐性岀血■ 但由于对上消化道岀血的髙灵敏性,降低了其筛检大肠癌的特异性化学法和免疫法是目前比较常用的粪隐血检测试验•被美国胃肠病学会推荐用于普通人群大肠癌的筛检化学法以愈创木脂试验为代表,原理是基于血红蛋白分子的高铁血红素部分具有假性过氧化物酶(pseudoper-oxidase)活性.可催化裂解过氧化氢.其衍生物与指示剂偶联.氧化显色剂而形成有色产物.从而判断粪便中是否含有血红蛋白或血红素。
显色剂常用联苯胺(benzidine),但由于其致突变性,最近有应用三环类抗抑郁药盐酸丙咪嗪(imipramine hydrochloride, I PH)和去甲丙咪嗪盐酸盐(desipramine hydrochloride,DPH)等代替联苯胺,作为新的粪隐血检测显色剂的报道I:。
再水化愈创木脂试验可以增加反应的灵敏度,但再水化也可激活各种干扰因素的过氧化物酶活性而增加假阳性率[L5\研究发现无再水化假阳性结果为2%〜4%,而再水化则达8%〜16%t6\亦有报道,使用再水化愈创木脂试验可使肿瘤的预测值从44%下降到19% 1],因此美国胃肠病学会推荐使用无再水化愈创木脂试验筛检大肠癌⑶。
愈创木脂试验检测粪隐血前常需进行膳食限制,这是因为来自于肉类的非人类血红蛋白及其他具有过氧化物酶活性的膳食成分(如菠菜等)可引起假阳性,而过多的维生素C则可引起假阴性结果。
粪便隐血试验的临床价值南京医科大学附属南京第一医院消化科张军自l864年Vandeen发明GUALAC法检测大便隐血后,为临床消化道出血及消化道肿瘤的诊断提供了一种无创伤、简便、快速的检测方法。
100多年以来,此法有了长足的进步。
目前隐血检查方法可分为五类[ 1, 2 ] : 放射分析法、物理法、化学法、免疫法和血红素-卟啉试验。
放射分析法是静脉注射51Cr标记的红细胞后检测粪便放射活性, 专门用于定量分析, 但日常使用太复杂。
物理法是通过显微镜检测粪便红细胞和血色素晶体或分光仪鉴定血红蛋白及其衍生物, 目前主要用于学术研究:血红素-卟啉试验可检出任何形式的血红素,如游离的血红素或与珠蛋白结合的血红素及其多种衍生物, 可用于定量分析大肠癌的隐性出血, 但由于对上消化道出血的高灵敏性,降低了其筛检大肠癌的特异性[ 2 ]。
化学法和免疫法是目前比较常用的粪隐血检测试验, 被美国胃肠病学会推荐用于普通人群大肠癌的筛检[ 3 ]。
化学法以愈创木脂试验为代表, 原理是基于血红蛋白分子的高铁血红素部分具有假性过氧化物酶(pseudoper-oxidase)活性, 可催化裂解过氧化氢, 其衍生物与指示剂偶联, 氧化显色剂而形成有色产物, 从而判断粪便中是否含有血红蛋白或血红素。
显色剂常用联苯胺(benzidine),但由于其致突变性, 最近有应用三环类抗抑郁药盐酸丙咪嗪(imipramine hydrochloride,IPH)和去甲丙咪嗪盐酸盐(desipramine hydrochloride,DPH)等代替联苯胺,作为新的粪隐血检测显色剂的报道[ 4 ]。
再水化愈创木脂试验可以增加反应的灵敏度,但再水化也可激活各种干扰因素的过氧化物酶活性而增加假阳性率[ 1, 5 ],研究发现无再水化假阳性结果为2%~4%,而再水化则达8%~16%[ 6 ]。
亦有报道,使用再水化愈创木脂试验可使肿瘤的预测值从44%下降到19%[1],因此美国胃肠病学会推荐使用无再水化愈创木脂试验筛检大肠癌[3]。
愈创木脂试验检测粪隐血前常需进行膳食限制,这是因为来自于肉类的非人类血红蛋白及其他具有过氧化物酶活性的膳食成分(如菠菜等)可引起假阳性,而过多的维生素C则可引起假阴性结果。
有研究表明, 使用常规(无再水化)愈创木脂试验, 食用红肉时的假阳性率只有0.7%[ 7 ],因此检查前无须限制膳食[ 3 ]。
愈创木脂试验一般检测3次连续的大便, 每次取2个样本。
尽管单次试验的灵敏度很低(30%~50%), 但每年1次的检测方案能够检出大约92%的大肠癌患者。
化学法FOBT病人取第一次粪便标本前的4d内及整个检测期间应注意的问题:(1)避免进食红色的肉和血制品(如黑色布丁、肝、肾)及黑色的鱼肉(如鲨鱼、金枪鱼、沙丁鱼等);(2)避免进食西红柿、花菜、甜瓜、香蕉,黄豆等;(3)避免饮酒和药物服用,如阿司匹林或其它非激素类抗炎药物、维生素C、含铁剂等;(4)避免过于粗糙的食物刺激溃疡部出血; (5)如果病人在腹泻期和月经期,或最近有鼻、咽喉出血者应暂停试验;(6)FOB试验准确与否与过氧化酶有很大的关系,由于食物中的过氧化酶可致FOB假阳性,因此应指导患者在检查前4d及检查中要吃低过氧化酶的食物,还应避免吃刺激消化道出血的药物;(7)正确留取粪便的方法包括:①在黏液脓血等肉眼观察不正常的部位取材; ②肉眼观察无异常,则需在3个以上不同部位取材; ③如是鲜血便或柏油样便,要在取便器上注明; ④取便量不能少于黄豆大小。
免疫法FOBT的原理是利用抗原、抗体的特异性结合, 使用单克隆或多克隆抗体检测粪便内未受破坏的人血红蛋白的珠蛋白部分。
由于珠蛋白通过上消化道时已被降解、代谢而失去免疫原性, 因而免疫化学法检测粪便隐血对于结肠和直肠出血更具特异性[ 8 ]。
免疫法FOBT不与非人类血红蛋白反应, 不需进行膳食限制, 受上消化道出血的影响也最小, 但使用非甾体抗炎药或患有其他常见的大肠非肿瘤性出血仍可引起假阳性结果[ 2 ]。
各种免疫法FOBT如反向被动血凝法、荧光酶免疫法、酶联免疫吸附法、血凝法、乳胶凝集法等多种方法均已用于临床。
免疫法FOBT筛检大肠癌较愈创木脂试验更精确, 目前在日本已经广泛用于粪便筛检早期大肠癌[ 9 ]。
Nakama[ 10 ]等应用3d粪便收集法, 使用5种不同的免疫法FOBT,检测大于1cm的腺瘤。
结果显示,灵敏度和特异性分别为48%和97%。
与愈创木脂试验相比, 免疫法提高了检测的特异性和病人的依从性, 不足之处是灵敏度仍不够理想。
目前临床上常用的免疫法是单克隆血红蛋白抗体金标试纸法。
金标法不会出现假阳性,但可能出现假阴性。
出现假阴性主要有以下几方面原因。
(1)粪便中血红蛋白含量太高,超过了金标法的检测范围。
因隐血试纸中抗血红蛋白抗体的量是一定的,所以具有一定的检测范围。
当血红蛋白抗原物质浓度远远大于检测板中抗血红蛋白抗体的浓度时,形成的免疫复合物反而减少,即出现后带现象。
所谓后带现象是指由于抗原过剩而产生的弱阳性乃至假阴性结果,又称为钩状效应。
临床实验中柏油样、咖啡样便等出现的假阴性就是由于血红蛋白含量过高所致[ 11 ]。
(2)轻微出血,如果采样不足(抗原过少)和稀释液用最控制不严格也可造成假阴性。
(3)由于血红蛋白结构的破坏造成。
有的上消化道出血患者的血红蛋白在胃部,珠蛋白链被胃酸迅速的水解,在小肠被蛋白酶分解,血红蛋白可能被充分分解或消化殆尽而失去单克隆抗体所特异结合的抗原决定镞,同时体外或胃肠道内细菌的作用也可使粪便中血红蛋白免疫活性丧失,已没有抗原特性,导致假阴性结果。
提示血红蛋白可能被充分降解而失去单克隆抗体所特异结合的抗原决定簇。
(4)由于抗原抗体反应受温度影响较大,当冬天气温较低时,应适当延长观察时间或做保温处理,以免人为出现假阴性结果。
(5)用弱碱性PBS缓冲液代替蒸馏水稀释标本进行检测,可提高消化道出血的检出率。
这是由于抗原与抗体具有胶体性质,在弱碱性条件下有较高的亲水性,抗原与抗体特异性结合后,其亲水性减弱,易受某些电解质影响而失去部分负电荷,从而使在第一阶段已形成的抗原抗体复合物彼此进一步连接,出现明显的凝集或沉淀现象。
(6)单克隆抗体金标检测法假阴性结果的出现提示我们,尽管单克隆抗体检测法具有高灵敏度,高特异性的优点。
但也有一定局限性。
此检验只能作为筛选或辅助诊断用,不能对消化道出血病变做结论性诊断。
有时对外观为柏油样便而免疫法检查却呈阴性或弱阳性时,不要轻易排除患者无消化道出血的结论。
很多文献对采用化学法和免疫法进行FOBT开展了比较研究。
肖向东等[12]利用不同浓度的人和动物的血红蛋白液,病人标本分别采用化学法(邻甲苯胺法)和免疫法(金标法)测定大便隐血。
结果发现,金标法测隐血的检测下限为0.1mg/L,邻甲苯胺法为1.0mg/L,金标法灵敏度高。
食用肉类对邻甲苯胺法影响很大,可使结果出现假阳性,而金标法不受影响。
卢春利等[13]收集120例住院患者随机粪便并收集鸡、兔、羊、牛、猪、蛇、鱼、鸭、鹅等动物血和肌肉,比较化学法(联苯胺隐血试验)和免疫法(单克隆抗体胶体金隐血试验)测定粪隐血试验。
结果提示,胶体金试纸条最低Hb检测出浓度为0.2 ug/ml,联苯法最低检测出浓度为0.8ug/ml。
说明免疫法比化学法灵敏度高,对人体早期的消化道微量出血更为敏感。
在单克隆抗体法阴性标本中,分别加各种动物血红蛋白和肌红蛋白时,单克隆抗体法始终还是阴性,而在联苯胺法阴性标本中,加各种动物血红蛋白和肌红蛋白,联苯胺法则均为阳性。
用含维生素C浓度分别为5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml、80mg/ml加人约含Hb3.5ug/ml的粪便中,结果单抗法仍为阳性,而联苯胺法测得结果为阴性,再用铁剂及含过氧化物酶的蔬菜汁加人含Hb3.5ug/ml粪便中做同样的隐血试验,结果是单克隆抗体法所做的结果始终不变,而联苯胺法测得的结果为阴性。
说明单克隆抗体法不受其他化学药品、铁剂、过氧化物酶等的干扰,而联苯胺则受之影响较大,易形成假阴性结果。
王希平等[14]利用不同浓度血红蛋白液和572份大便标本,分别采用化学法(匹拉米洞法)和免疫法(胶体金法)测定隐血试验。
结果发现,胶体金法灵敏度高(O.2ug/m1);在250ug/ml~ 1ug/ml内反应较强;而浓度太高(>1000ug /m1),反应为阴性。
匹拉米洞法灵敏度为2ug/ml,不受高浓度的影响。
由此可见胶体金法只能判定阴阳性,不能像化学法那样给临床医生提供一定的参考含量。
在无胃肠道病组中金标法阳性为2.1%,主要是金标法高灵敏度,有时有微量出血都导致阳性。
贝索试纸(匹拉米洞法)阳性为5.0%,这主要是饮食、药物等影响引起的假阳性较高。
而在上消化道出血组中,金标法阳性(92.3%)低于贝索试纸法(100.O%),其中有二份标本经胃镜确诊为上消化道出血且为黑便,金标法无论做何稀释测定,结果都为阴性,这可能是HB经胃、胰、肠等不同pH消化液和肠道细菌蛋白酶等的作用,使抗原变性或消失而导致假阴性,贝索试纸则不受影响。
在结、直肠癌组中两者结果相符。
李世荣等[15]对323例患者连续进行3次化学法粪隐血试验(CFOBT)、免疫法粪隐血试验(IFOBT)和结肠镜检查。
计算CFOBT、IFOBT和序贯粪隐血试验[CFOBT阳性者进行IFOBT,再阳性者,行结肠镜检查,称序贯粪隐血试验(SFOBT) ]筛检结直肠癌的效率与费用。
结果说明:(1)连续3次粪隐血检查: CFOBT、IFOBT和SFOBT 的敏感性分别为95.9%、95.9%和93.9%,三种隐血试验间差异无统计学意义。
IFOBT 和SFOBT的特异性分别为89.2%和94.2%,均显著高于CFOBT(75.5%), SFOBT又显著高于IFOBT。
调整癌检出例数到同一水平后,在3个粪隐血方案中,每检出1例癌的花费SFOBT最低。
(2)连续2次粪隐血检查: CFOBT、IFOBT和SFOBT的敏感性分别为77.8%、87.8%和75.5%, IFOBT的敏感性明显高于CFOBT和SFOBT。
特异性分别为88.5%、96.4%和98.6%, SFOBT与IFOBT的特异性显著高于CFOBT, 但SFOBT与IFOBT 间差异无统计学意义。
调整癌检出例数后, 每检出1例癌的费用IFOBT最低。
(3) 3种粪隐血试验筛检方案的早期癌检出率均为60%。
(4) 结直肠腺瘤的检出率为41.6%~48.3%; 随腺瘤直径的增大检出率亦有所增加, >2cm的腺瘤检出率可达到87.5%。
结论:依从性较好的普查人群, 推荐连续3次SFOBT方案;依从性较差人群,推荐采用2次IFOBT方案;FOBT可检出大部分晚期腺瘤。