高级生物化学(摘要)
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高级生物化学知识点讲解高级生物化学知识点讲解高级生物化学篇一:高级生物化学1、Meselson半保留复制的证明思想1958年Meselson和Stahl利用氮标记技术在大肠杆菌中首次证实了DNA的半保留复制。
他们将大肠杆菌放在含有15N标记的NH4Cl培养基中繁殖,使所有的大肠杆菌DNA被15N所标记,可以得到15N-DNA。
由于15N-DNA的密度比普通DNA(14N-DNA)的密度大,在氯化铯密度梯度离心时,两种密度不同的DNA分布在不同的区带。
然后将细菌转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养,在培养不同代数时,收集细菌,裂介细胞,用氯化铯(CsCl)密度梯度离心法观察DNA所处的位置。
在重培养基中培养出的(15N)DNA显示为一条重密度带。
转入轻培养基中繁殖两代。
第一代所有DNA的密度介于15N-DNA和14N-DNA之间,即形成了DNA分子的一半含有15N,另一半含有14N的杂合分子。
第二代后,14N分子和14N-15N杂合分子等量出现。
若在继续培养,可以看到14N-DNA分子增多。
当把14N-15N杂合分子加热时,它们分开成14N链和15N链。
这就充分证明了。
在DNA复制时原来的DNA分子可被分成两个亚单位,分别构成子代分子的一半,这些亚单位经过许多代复制仍然保持着完整性。
由此可以证明大肠杆菌的复制遵循预想中的半保留复制方式。
2、尼伦伯格对于遗传密码的破译思想1961-1962年,尼伦伯格和马太采用了蛋白质的体外合成技术,破译了第一个遗传密码:(1)实验思路:利用蛋白质的体外合成技术,以人工合成的RNA作模板合成多肽,确定氨基酸与密码子的对应关系。
(2)实验步骤:1)提出大肠杆菌的破碎细胞液加入试管(除去原DNA和mRNA)2)添加20种氨基酸(分五组,每个试管各加四种氨基酸)3)加入人工合成的RNA(多聚尿嘧啶核苷酸)4)合成多肽(只在加入酪氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、丝氨酸的试管中出现多肽链)5)运用同样方法将上述四种氨基酸分别加入装有多聚U的四个试管(加入苯丙氨酸的试管中出现多肽链)(3)实验结论:尿嘧啶的碱基序列可编码由苯丙氨酸组成的多肽链,结合克里克提出的三个碱基编码一个氨基酸的实验结论,可以得出苯丙氨酸的密码子是UUU。
华东理工大学2014-2015学年第一学期《高级生物化学》课程论文班级:生物化学与分子生物学学生姓名:孙婉菊学号:010140133 开课学院:生物工程学院任课教师:魏东芝成绩:合成生物技术在甾体药物生产中的应用摘要:甾体类药物是销售额仅次于抗生素的世界第二大类药物,多种甾体药物均由甾体激素中间体衍生而来。
甾体激素中间体的传统生产方法有植物提取皂素法和化学全合成法,后者由于其对环境有害,反应产物结构不单一且成本较高,不利于工业化生产。
目前主要采用微生物对特殊原料进行转化的半合成法,但存在微生物转化率低、发酵周期长等问题。
合成生物学的出现为构建利用糖为唯一碳源生产甾体激素药物的人工细胞提供了理论上的可行性和可靠的技术支持。
文章重点综述了甾体转化菌株的选育改良、分子改造及合成生物技术在甾体中间药物生产中的应用,以有利于工业发酵的酿酒酵母、分枝杆菌等为底盘细胞,通过引入外源合成功能模块,实现胆甾醇、雄烯二酮等甾体激素中间体的生物合成,以期推动甾体类药物生物制造技术的进步。
关键词:甾体药物;化学全合成法;半合成法;合成生物技术甾体类药物是指分子结构中含有环戊烷多氢菲母核结构的激素类药物,如泼尼松、倍他米松、氢化可的松等,具有很强的抗过敏、抗感染、抗病毒等药理活性,已被广泛应用于治疗内分泌失调、心血管、胶原性病症、淋巴白血病、皮肤病、风湿病、老年性疾病等[1-2]。
目前,已知的甾体药物有300多种,其数量还在持续增长,被列为最具有市场价值的药物,同时也是世界上仅次于抗生素的第二大类药物[3]。
随着各国经济发展和居民生活水平提高,人们对甾体类药物的需求将不断增加,甾体激素中间体的市场空间广阔。
甾体生物转化为新型甾体类药物、有效的甾体药物原材料及关键中间体的合成提供了一条新途径。
目前,甾体药物的合成主要集中在以甾体母核结构的天然产物为原料、采用化学合成法和微生物催化半合成法相结合的方式来合成甾体药物。
甾体生物转化即利用微生物酶对甾体底物的某一部位进行特定的化学反应来获得一定的产物。
高级生物化学复习资料生物化学作为生命科学领域的重要基础学科,对于深入理解生命现象和生物过程具有至关重要的作用。
高级生物化学则在基础生物化学的基础上,进一步拓展和深化了相关知识,涵盖了更多复杂和前沿的内容。
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一、蛋白质结构与功能蛋白质是生命活动的主要承担者,其结构与功能的关系是高级生物化学中的重点内容。
蛋白质的一级结构是指氨基酸的线性排列顺序。
通过肽键连接的氨基酸序列决定了蛋白质的基本性质和潜在功能。
二级结构包括α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲等。
α螺旋是常见的结构,每个氨基酸残基沿中心轴旋转 100°,上升 015nm,每圈螺旋包含 36 个氨基酸残基。
β折叠则是通过链间的氢键形成片层结构。
三级结构是指整条多肽链的三维构象,主要由疏水相互作用、氢键、离子键和范德华力等维持其稳定。
例如,肌红蛋白就是具有典型三级结构的蛋白质。
四级结构是指多个亚基聚合形成的蛋白质复合物。
血红蛋白就是由四个亚基组成的具有四级结构的蛋白质。
蛋白质的功能与其结构密切相关。
例如,酶的催化活性依赖于其活性中心的特定结构;抗体通过其可变区的结构与抗原特异性结合。
二、核酸的结构与功能核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。
DNA 是双螺旋结构,两条链反向平行,碱基之间通过氢键互补配对。
A 与 T 配对,G 与 C 配对。
这种碱基互补配对原则是 DNA 复制和遗传信息传递的基础。
RNA 有多种类型,如信使 RNA(mRNA)、转运 RNA(tRNA)和核糖体 RNA(rRNA)等。
mRNA 携带遗传信息,指导蛋白质的合成;tRNA 则在蛋白质合成过程中转运氨基酸;rRNA 是核糖体的组成成分。
核酸在生命活动中具有重要的功能,如遗传信息的储存、传递和表达。
三、酶学酶是生物体内具有催化作用的蛋白质或 RNA。
酶的催化特点包括高效性、专一性、可调节性和不稳定性。
1凝胶电泳电泳:带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。
蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动,从而通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术凝胶的特点:1、凝胶可以一直由小的温度梯度产生的对流。
2、凝胶可以作为增强分离效果的分子筛,比凝胶孔径小的分子容易移动,比孔径大的多的分子几乎是固定的。
1、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶是精选的电泳支持介质,因为它在化学上式惰性的。
十二烷基磺酸钠(SDS)是一种可以打破蛋白质中非共价键的阴离子去污剂,SOD的阴离子与蛋白质主链以大约一个阴离子对两个氨基酸残基的比例合成,形成一种带有大量与蛋白质分子量成正比例负电荷的SDS和蛋白质的复合物,蛋白质在电场中的泳动速率仅与蛋白质颗粒大小有关。
然后就可以把这种SDS与蛋白质的复合物用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中,蛋白质复合物可以用银染或考马斯蓝等燃料染色,显示出一系列色带。
2、等电聚焦电泳在聚丙烯酰胺凝胶中加入系列两性电解质载体,在电场中形成一个连续而稳定的线性pH梯度,也即pH从凝胶的正极向负极依次递增,电泳时被分离蛋白质处在偏离其等电点的pH位置时带有电荷而移动,至该蛋白质PI值相等的pH区域时,其静电荷为零而不再移动,这种通过蛋白质的等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法称为等电聚焦电泳。
等电聚焦电泳的过程:电泳时可将样品置于凝胶的任何位置;初始位置在负极时,因pH>pI,蛋白质分子带负电,电泳时向正极移动;移动过程中,pH逐渐下降,所带负电荷量逐渐减少,蛋白质移动速度减慢;当移动到pH=pI时,蛋白质所带净电荷为零,蛋白质即停止移动;各种不同蛋白质在电泳结束后,会分别聚集于相应的等电点位置,形成一个很窄的区带;区带的位置是由pH梯度的分布和蛋白质的pI所决定,而与蛋白质分子的大小和形状无关。
3、双向电泳第一向:等电聚焦电泳;第二向:SDS-PAGE双向电泳后的凝胶经染色后蛋白呈现二维分布图,水平方向反映出蛋白在pI上的差异,垂直方向反映出它们在分子量上的差别。
⾼级⽣物化学⾼级⽣物化学第⼀章绪论⼀、发展中的⽣物化学⽣物化学是在⽣物学发展的基础上融合了化学、物理学、⽣理学等学科的理论和⽅法形成的科学,是研究动物、植物、⼈体、微⽣物等⽣命物体的化学组成和⽣命过程中的化学变化的⼀门学科,所以⼈们认为⽣物化学是⽣命的化学。
⽣命是发展的。
⽣命起源、⽣物进化、⼈类起源等等均已说明⽣命是发展的,因此⼈们对⽣命化学的认识也是在发展之中的,⽣物化学的发展可以追寻到18世纪下半叶(在约是乾隆年间),要从拉⽡锡研究燃烧和呼吸说起。
法国著名的化学家拉⽡锡(Attoine—Laureut Lavoisier,1743----1794),他曾经钻研燃烧现象。
并进⽽研究了呼吸作⽤。
在他29岁时开始燃烧的科学试验,发现磷燃烧后成为磷酸,硫燃烧后成为硫酸;磷酸和硫酸分别⽐磷和硫重,这表明燃烧并不是失去了“燃素”,⽽是跟氧结合的过程。
他⼜利⽤天平和量热器,测量了豚⿏等动物在⼀定时间内的呼吸,定量测定了CO2和释放的热量,从⽽证实动物的呼吸作⽤就好象物体的燃烧⼀样,只不过动物体的燃烧是缓慢和不发光的燃烧。
他的研究成果彻底地推翻了“燃素说”,为⽣命过程中的氧化奠定了基础。
瑞典化学家舍勒(Carl Wilhelm Scheele,1742----1786)从14岁开始就随⼀位药剂师作了8年学徒,在此期间,他废这寝忘⾷的学习化学,并利⽤业余时间进⾏化学实验。
在1770年他28岁时从酒⽯⾥分离出酒⽯酸,以后他⼜分析了膀胱结⽯获得了尿酸,分析研究了柠檬酸、苹果酸、没⾷⼦酸或称为五倍⼦酸,分析研究了⽢油。
舍勒在⽆机化学⽅⾯也有很多贡献,曾经拒绝了柏林⼤学和英国要他担任化学教授职务的邀请,⼀⽣乐于他的化学实验。
这是18世纪的成果,是由化学家通过科学实验,发现了⽣物体的呼吸作⽤,发现了⽣物体的中间代谢产物。
所以拉⽡锡和舍勒是两位⽣物化学的先驱,是⽣物化学的奠基⼈。
进⼊19世纪后,在物理学、化学、⽣物学⽅⾯有了极⼤的进展,如1804年道尔顿的原⼦论,1869年门捷列夫的元素周期律,1895年伦琴发现了X—射线,1835年贝采利乌斯说明了催化作⽤,1859年达尔⽂发表了《物种起源》,1865年孟德尔的碗⾖杂交试验和遗传定律,1848年亥姆霍兹(Helmholtz)找到了肌⾁中热能来源,贝尔纳(Bernard)发现了肝脏⽣糖功能等等。
高级生物化学课件总结核酸部分第一章绪论第二章核酸的化学组分1.糖环的折叠:核酸中的五原糖病不在一个平面上,通常以几种构像的形式存在。
这种构想称为糖环的折叠。
2.核酸组分的分离方法:纸电泳、胶电泳、离子交换层析、薄层层析,反相层析等3.核酸组分的鉴定方法:紫外吸收法、紫外光谱法、第三章核酸的化学结构与性质1.卫星DNA:主要分布在染色体着丝粒部位,由非常短的串联多次重复DNA序列组成。
因为它的低复杂性,又称为简单序列DNA,又因为其不同寻常的核苷酸组成,经常在浮力密度梯度离心中从整个基因组DNA中分离成一个或多个“卫星条带”,故称为卫星DNA。
2.多态性:脱氧核糖和磷酸组成的骨架上的许多键都可以全动,随着热力学的变化,可以使链弯曲、伸展或碱基分开。
这就使具有同样碱基配对的DNA双螺旋可以采取另一些构想,DNA构象上这种差异称为多态性。
3.DNA结构变异的三个方面:a.脱氧核糖的五元环能折叠成多种构象;b.组成磷酸脱氧核糖骨架的连续的键可以转动;c.C1’-N糖苷键可以自由转动。
4.发夹结构,茎环结构:具有不完善的两侧对称结构的区域形成的二级结构。
两端互补的序列可配对形成茎杆,它可能完全互补形成发夹,也可能末端有未配对的碱基形成茎环结构,发夹-环结构。
由于环内特殊的减价配对及碱基堆积力,三到四个碱基形成的环特别稳定。
在许多生物系统中,发家结构及茎环结构都是有重要生物功能的元件,包括tRNA和rRNA的结构,转录终止,调控翻译及病毒基因组的包装,说明这一结构是RNA-蛋白的相互作用位点。
5.DNA构型的生物学意义:a.沟(特别是大沟)的特征在遗传信息表达过程中其关键作用;b.沟的宽窄及深浅影响调控蛋白对DNA信息的识别,三种构型的DNA处于动态转变之中;cDNA二级结构的变化与高级结构的变化是星湖关联的,这种变化在DNA复制与转录中具有重要的生物学意义。
6.回文结构:又称反向重复序列,是一段能自我互补的序列,即同其互补链一样的序列(两者的阅读方向都是5’-3’).能形成发夹结构或十字形结构。
生化技术在动物营养中的应用概况【摘要】:随着科技的发展,生物化学技术作为一种工具在动物营养与饲料的研究中发挥着越来越重要的作用,笔者对转基因技术与饲料品质、酶制剂的应用、微生物饲料开发、营养调控技术等方面做了简要的概括与论述。
转基因技术可以改善饲料的品质;酶制剂可有效提高那些不易消化饲料的可利用性和营养价值,帮助幼龄动物消化酶系早日建立,加快生长速度;利用微生物能够利用廉价的碳源、氮源生产微生物蛋白,具有较高的营养价值,同时含有较多的可溶性碳水化合物、以及维生素和酶类;维生素以及二价金属等可以通过影响基因转录、mRNA的稳定性和翻译,影响基因的表达。
【关键词】:生化技术;转基因技术;酶制剂;微生物;维生素;二价金属生化技术是应用自然科学及工程学的原理,依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品来为社会服务的技术。
它包括DNA重组技术、蛋白质工程、酶工程、细胞工程、微生物发酵工程、生化工程等。
这些新技术对畜牧业生产具有重要的意义。
1. 利用转基因技术改善饲料的品质家畜的饲料原料主要由禾谷类作物、植物油副产品和牧草组成。
利用生物技术改善饲料的营养价值的方法主要有利用生物工程技术培育高营养价值的饲料作物。
转基因植物在家畜营养方面的应用研究发展很快。
例如,采用诱发肿瘤质体基因方法成功地将大豆蛋白基因转移给向日葵[1],使基因在不同物种之间的转移已成为现实。
在许多国家,大麦是粮食中主要组成,但蛋白质含量偏低。
现在英国等科学家正试图对大麦蛋白质合成基因进行重组,以获得高品质的大麦品种。
许多植物含有抗营养因子或含有影响该植物品质的物质,大多数这些因子或物质对植物本身蛋白质的合成以及家畜对饲料物质的吸收有不利影响。
通过采用生物技术选育出不含或少含抗营养因子的植物。
2. 酶制剂在动物动物营养中的应用酶制剂作为家畜饲料添加剂在国内外越来越来受重视,它可有效提高那些不易消化饲料的可利用性和营养价值,帮助幼龄动物消化酶系早日建立,加快生长速度[2]。
高级生物化学有效成分:指欲纯化的某种单一的生命大分子物质。
有效成分具有含量少和稳定性差的特性。
固定相:固定相是由层析基质组成的。
其基质包括固体物质(如吸附剂、离子交换剂)和液体物质(如固定在纤维素或硅胶上的溶液),这些物质能与相关的化合物进行可逆性的吸附、溶解和交换作用。
流动相:在层析过程中推动固定相上的物质向一定方向移动的液体或气体称为流动相。
在柱层析时,流动相又称洗脱剂或洗涤剂(即推动有效成分或杂质向一定方向移动的溶液)。
在薄层层析时流动相又称展层剂。
层析:以基质为固定相(柱状或薄层状),以液体或气体为流动相,有效成分和杂质在这两个相中连续多次地进行分配、吸附或交换作用,最终结果是使混合物得到分离。
操作容量:即在特定条件下,某种成分与基质反应达到平衡时,存在于基质上的饱和容量。
一般以每克(或每毫升)基质结合某种成分的毫摩尔数(或毫克数)来表示。
其数值越大,表明基质对某种成分的结合力越强;否则反之。
床体积(V t):通常床体积是指膨胀后的基质在层析柱中所占有的体积(V t)V t是基质的外水体积(V0)和内水体积(V i)以及自身体积(V g)的总和,即V t = V0 + V i + V g。
洗脱体积(V e):洗脱体积是指某一成分从柱顶部到底部的洗脱液中出现浓度达到最大值时的流动相体积。
外水体积(V0):外水体积是指基质颗粒之间体积的总和。
内水体积(V i):内水体积是指基质颗粒内部体积的总和。
基质体积(V g):基质体积是指基质自身所具有的体积。
V0、V i和V g 都是随着床体积和基质性质的变化而变化的。
膨胀度:在一定溶液中,单位重量的基质充分溶胀后所占有的体积用Vβ表示,即每克溶胀基质所具有的床体积。
一般亲水性基质的膨胀度比疏水性的大。
分配系数是指一组分在固定相与流动相中含量的比值,常用K表示。
而迁移率是指一组分在相同时间内,在固定相移动的距离与流动相移动距离之比值,常用R f 表示。
高级生物化学备考资料绪论部分生命诞生之谜-物质孕育生命的一瞬间什么是生命?⏹生命能够按照自己的样子制造出子子孙孙-自我复制⏹非生命和生命的区别:⏹非生命会随着实践流逝而毁灭;⏹生命也会随着实践流逝而毁灭,但它能够在毁灭之前增殖,因而从外部看没有毁灭。
⏹不仅如此,生命还具有维持“个体”的能力-新陈代谢⏹同化作用:生命能够利用所得到的能量,将简单的化合物合成自身成分的过程;⏹异化作用:生命将复杂的有机物分解为比较简单的化合物而获得能量的过程。
⏹探索生命的起源,其实质就是探索生命的两大功能-自我复制以及新陈代谢是如何出现的。
构成生命的复杂分子⏹复杂而巧妙的细胞真的是自然产生出来的吗?⏹生原说(宇宙胚种论):瑞典化学家斯文特.阿伦尼亚斯(1859-1927)正式提出;⏹Crick(1916-2004)也认为:“自然界合成DNA和蛋白质的概率太低,生命很有可能是在地球之外宇宙的其他地方产生出来,后来才来到地球上”。
大多数科学家都不同意生源说,而认为“生命是在地球的某个地方通过一系列化学反应的积累产生出来的”。
化学进化说⏹1924年,俄国生物化学家奥巴林(1894-1980)认为,生命的诞生经历了三个阶段:⏹第一阶段,大气中的甲烷和氨发生反应,生成氨基酸和碱基等分子;⏹第二阶段,生成蛋白质和核酸,这些物质溶解在海水中,形成“原始汤”;⏹第三阶段,生成包裹着蛋白质和核酸的原始细胞-最初的生命。
那以后才开始有了复杂的代谢反应。
⏹然而,奥巴林得假说并没有立即为人们所接受。
米勒实验⏹1953年,美国加利福尼亚大学的米勒将甲烷、氨气和水蒸气充满烧瓶,并将水蒸气循环通过其中,然后在其中反复放电,在烧瓶中再现原始地球的大气,用放电来模拟原始大气中的雷电。
导致生命诞生的能量来自宇宙射线?⏹现在认为原始大气的主要成分是N2和CO等不容易发生反应的分子。
⏹日本横滨国立大学小林宪正教授等用质子束模拟宇宙射线照射N2和CO混合气体,得到若干种氨基酸等有机分子。
高级生物化学第一章绪论一、发展中的生物化学生物化学是在生物学发展的基础上融合了化学、物理学、生理学等学科的理论和方法形成的科学,是研究动物、植物、人体、微生物等生命物体的化学组成和生命过程中的化学变化的一门学科,所以人们认为生物化学是生命的化学。
生命是发展的。
生命起源、生物进化、人类起源等等均已说明生命是发展的,因此人们对生命化学的认识也是在发展之中的,生物化学的发展可以追寻到18世纪下半叶(在约是乾隆年间),要从拉瓦锡研究燃烧和呼吸说起。
法国著名的化学家拉瓦锡(Attoine—Laureut Lavoisier,1743----1794),他曾经钻研燃烧现象。
并进而研究了呼吸作用。
在他29岁时开始燃烧的科学试验,发现磷燃烧后成为磷酸,硫燃烧后成为硫酸;磷酸和硫酸分别比磷和硫重,这表明燃烧并不是失去了“燃素”,而是跟氧结合的过程。
他又利用天平和量热器,测量了豚鼠等动物在一定时间内的呼吸,定量测定了CO2和释放的热量,从而证实动物的呼吸作用就好象物体的燃烧一样,只不过动物体的燃烧是缓慢和不发光的燃烧。
他的研究成果彻底地推翻了“燃素说”,为生命过程中的氧化奠定了基础。
瑞典化学家舍勒(Carl Wilhelm Scheele,1742----1786)从14岁开始就随一位药剂师作了8年学徒,在此期间,他废这寝忘食的学习化学,并利用业余时间进行化学实验。
在1770年他28岁时从酒石里分离出酒石酸,以后他又分析了膀胱结石获得了尿酸,分析研究了柠檬酸、苹果酸、没食子酸或称为五倍子酸,分析研究了甘油。
舍勒在无机化学方面也有很多贡献,曾经拒绝了柏林大学和英国要他担任化学教授职务的邀请,一生乐于他的化学实验。
这是18世纪的成果,是由化学家通过科学实验,发现了生物体的呼吸作用,发现了生物体的中间代谢产物。
所以拉瓦锡和舍勒是两位生物化学的先驱,是生物化学的奠基人。
进入19世纪后,在物理学、化学、生物学方面有了极大的进展,如1804年道尔顿的原子论,1869年门捷列夫的元素周期律,1895年伦琴发现了X—射线,1835年贝采利乌斯说明了催化作用,1859年达尔文发表了《物种起源》,1865年孟德尔的碗豆杂交试验和遗传定律,1848年亥姆霍兹(Helmholtz)找到了肌肉中热能来源,贝尔纳(Bernard)发现了肝脏生糖功能等等。
如此多的发现和进展极大的促进了生物化学的发展,而且也是现代生物化学发展的前提。
此外,生产的发展,工业的发达和社会的进步也极大地推动了生物化学的发展。
德国化学家李比希(Liebig)是农业化学的奠基人,也是生理化学和碳水化合物化学的创始人之一,他于1826年在德国吉森(Giessen)大学建立了李比希实验室,并首创了在大学进行化学实验的教学。
1842年撰写的《有机化学在生理学和病理学上的应用》专著,首次提出了“新陈代谢”这个学术名词。
他研究了许多有机化合物,并对脂肪、血液、胆汁和肌肉提取物进行了研究。
他有很多杰出的学生,有位叫施洛斯比尔格尔(Julins Schlossberger),是第一位担任生理化学教授职务的人,他于1840—1859年间在德国蒂宾根(Tübingen)大学教授有机化学和生理化学。
施洛斯比尔格尔逝世后,蒂宾根大学生理化学的盛名延续了一个世纪。
历任的生理化学教授都是当时第一流的生理化学专家,具有医学和有机化学的基础,如霍佩—赛勒(Hoppè—Seyler)、Gustav、Han Thierfelder(研究脂肪氧化)和Franz—Knoop(研究脂肪氧化,尿中排出马尿酸)等。
霍佩—赛勒(1825—1859)是德国医生,因将生理化学(即生物化学)建立成一门独立的科学而著名。
1877年他首次提出了“生物化学”这个名词,创办和编辑了第一种《生理化学杂志》,出版了《生理化学及病理化学分析手册》,首次获得了纯的卵磷脂,并曾获得晶体状的血红素。
首创“蛋白质”一词,又研究过代谢、叶绿素及血液。
他研究病理液体和脓细胞,从而导致他的一位学生Friedrich Miescher (1844—1895)从脓细胞核中分离出了脱氧核糖核蛋白,另一位学生Albrecht Kossel(1853—1927)因对蛋白质、细胞及细胞核化学的研究而获得1910年诺贝尔生理学或医学奖。
霍佩—赛勒建立了著名的斯特拉斯堡研究所,并在此担任过生理化学教授,在科学研究和培养学生方面都做出了巨大的贡献。
总之,自1840—1900年间,德国的生理化学跟其他领域的科学一样,处于开拓和领先地位。
并对美国的生理化学的发展起了非常重要的推动作用。
例如,池廷登(Russel Henry Chittendlen)是美国留德学生,回到美国纽黑文的耶鲁大学教授生理化学,是全美第一位任生理化学教授职务的留德归美学生。
他在生理化学方面任教达30年,居美国生理化学的领导地位。
他与他的德国老师寇南(Willy Kühne)合作对胃液和肠液消化过程的产物进行了化学研究,发现了不少新东西。
也进行了蛋白质的分解试验。
再如,艾贝尔(John Jacob Abel,1857—1938)曾在德国留学7年,获斯特拉斯堡大学医学博士,返美后在密西根大学和约翰斯·霍普金斯大学任教,他分离了肾上腺素。
1962年制成了胰岛素晶体。
1932年领导内分泌研究室。
总的说来,美国生理化学初始阶段受德国的影响较深。
20世纪后,生物化学有了很大的发展。
德国、美国、英国、法国都有了生物化学的学术中心。
就生物化学来说,20世纪前半叶,在蛋白质、酶、维生素和物质代谢及生物氧化方面都有了很大的发展。
霍普金斯(Sir Frederick Gowland Hopkins,1861—1947)是英国剑桥大学生物化学教授,因发现维生素而与荷兰的艾克曼(C.Eijkman,1858—1930)共获1929年的诺贝尔生理学或医学奖。
霍普金斯创建了剑桥大学普通生物化学学派和中心,从事教学和研究的人员都是生物化学方面的精英,为生物化学的发展做出了较大的贡献。
20世纪初直至二战前夕,德国在生物化学方面仍占领先地位,如埃米尔·费歇尔(Emil Fischer,1852—1919),普鲁士化学家,研究糖和嘌吟类物质,获1902年诺贝尔化学奖。
汉斯·费歇尔(Hans Fischer,1881—1945),德国生物化学家,因对血红素和叶绿素的研究而获诺言贝尔化学奖。
迈尔霍夫(Otto Meyerhof,1884—1951),德国生物化学家,因研究肌肉代谢的糖原—乳酸循环与英国的A.V.Hill共获1922年的诺贝尔生理学或医学奖。
威尔施泰特(RichardWillstatter,1872—1942),德国化学家,研究叶绿素及其植物色素结构而获得1915年诺贝尔化学奖。
温道斯(Adolf Windaus,1876—1959),德国有机化学家,因研究维生素等有重要生物学作用的物质而获得1928年的诺贝尔化学奖。
瓦尔堡(Otto Warburg,1883—1970),德国生物化学家,因对细胞呼吸的研究而获1931年诺贝尔生理学或医学奖。
在留德学生的推动下,20世纪前半叶,美国的生物化学方面也的很大发展。
如耶鲁大学池廷登的后继者门德尔(Lafayette Benedict Mendel,1872—1935),美国生物化学家,发现了维生素和蛋白质的营养价值,建立了现代营养学概念。
20—30年代营养和维生素的研究在美国比较突出。
再如哈佛医学院的福林(Otto Folin),于1909年任生物化学教授,1915时福林教授将哈佛大学生物化学系办成了有影响的学术中心,重点放在分析方法和临床应用研究上。
福林建立了尿中肌酸和肌酸酐的测定方法,氨基酸测定方法,尿氮测定方法。
福林和吴宪(我国生物化学家)于1919—1922年设计了血液分析的颜色测定方法。
大约从20世纪中叶起,生物化学得到了突飞猛进地发展,并且生物化学的领域也向深度和广度发展,其原因是:①物理学家、化学家以及遗传学家等参加到生命化学的领域中来了。
②研究人员迁居和交往频繁。
③研究方法有了突破和改进。
④信息交流量增大。
从研究方法的改进上来说,相继出现了色谱技术、电泳技术、超速离心技术、荧光分析技术、同位素示踪技术以及电子显微镜的应用等。
可以说生物化学的分离、纯化和鉴定的方法向微量、快速、精确、简便和自动化的方向发展。
从不同学科专家的参与上来看,英国物理学家肯德鲁(John Cowdery Kendrew)测定了肌红蛋白的结构。
英国物理学家佩鲁茨(Max Ferdinand Perutz)用X—射线衍射技术分析了血红蛋白的结构,二人共获1962年的诺贝尔化学家。
美国化学家鲍林(Linus Pauling)因确定了氢键在蛋白质结构中及大分子间相互作用的重要性,并认为某些蛋白质具有类似螺旋的结构,研究了镰刀型贫血病,提出了“分子病”的名称,获得了诺贝尔化学奖和和平奖。
桑格(Frederick Sanger)英国生物化学家,经过10年的研究,于1955年确定了牛胰岛素的结构,获得了1958年的诺贝尔化学奖。
1980年他又设计出了一种测定DNA核苷酸排列顺序的方法,而与吉尔伯特(Walter Gilbert)、伯格(Pall Berg)共获1980诺贝尔化学奖。
麦克林托克(Barbara Mc Clintock)美国遗传学家,从事玉蜀黍遗传研究40年,发现了可移动的遗传成分,因而获得了1983年的诺贝尔生理学或医学奖。
生物化学领域中,在20世纪获得诺贝尔奖的成果还有:克雷布斯(Sir Hans Adolf Krebs,英籍德裔生物化学家,犹太人,1933年被迫迁居英国)1937年发现三羧酸循环。
李普曼(Fritz Albert Lipmann,美籍德裔生物化学家)1947年成功的分离出了CoA,1953年确定了其分子结构。
克雷布斯和李普曼二人共获1958年诺贝尔生理学或医学奖。
奥乔亚(Severo Ochoa,美籍西班牙生物化学家)发现细菌内的多核苷酸磷酸化酶,并合成了核糖核酸。
科恩伯格(Arthur Korberg,美国医师、生物化学家)发现DNA在细胞内及试管内的复制方式。
奥乔亚和科恩伯格二人共获1959年诺贝尔生理学或医学奖。
威尔金斯(Maurice Wilkins,新西兰出生的英国物理学家)完成了对DNA的X—射线衍射分析,沃森(James Dewey Watson)和克里克(Francis Harry Compton Crick)提出了DNA的双螺旋结构,三人共获1962年的诺贝尔生理学或医学奖。
尼伦伯格(Marshall Warren Nirenberg,美国生物化学家)破译遗传密码,霍利(Robert William Holly)阐明酵母丙氨酸tRNA 的核苷酸的排列顺序,并证明所有tRNA的结构类似,科拉纳(Har Gobind Khorana,美籍印度裔生物化学家)首次人工复制出酵母基因,三人共获1969年诺贝尔生理学或医学奖。