兔葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

4522023肉兔金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验牛群孟庆福黄敏董旭陈小密王华*周孝琼*（龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000）摘要为了诊断福建省龙岩市某兔场乳房炎的具体病原，试验对兔脓肿液进行细菌分离纯化培养、革兰氏染色、显微镜观察、自动微生物鉴定系统鉴定、16S rDNA序列测定以及对所分离菌株进行药敏试验和耐药性分析。

结果表明，所分离菌株为金黄色葡萄球菌。

药敏试验结果显示，分离的金黄色葡萄球菌对青霉素G、青霉素钾、氨苄西林、红霉素、庆大霉素和磺胺甲氧嘧啶高度敏感；对磺胺异亚唑中度敏感；对环丙沙星、卡那霉素、克林霉素等6种药物不敏感。

关键词肉兔金黄色葡萄球菌16S rDNA药敏试验文献标识码：A文章编号：1003-4331（2023）02-0017-04Isolation,identification and drug sensitivity test of Staphylococcus aureus from meat rabbitsNiu Qun Meng Qingfu Huang Min Dong Xu Chen Xiaomi Wang Hua*Zhou Xiaoqiong*(School of Life Sciences,Longyan University,Fujian Longyan364000)Abstract In order to diagnose the specific pathogen of mastitis in a rabbit farm in Longyan city,Fujian province,the experiment was conducted to isolate and purify the bacteria from rabbit abscess fluid,observe it with a Gram staining microscope,identify it with an automatic microbial identification system,determine the16S rDNA sequence,and analyze the drug sensitivity and drug resistance of the isolated strains.The results showed that the isolated strains were Staphylococcus aureus.The drug sensitivity test showed that the isolated strains were highly sensitive to penicillin G,penicillin potassium,ampicillin,erythromycin,gentamycin and sulfamethoxazole; moderately sensitive to sulfamethoxazole;It is insensitive to6drugs such as ciprofloxacin,kanamycin and clindamycin.Key words Meat rabbit Staphylococcus aureus16S rDNA Drug susceptibility test葡萄球菌病是由葡萄球菌属致病性葡萄球菌感染引起人和动物多种疾病的总称。

长毛兔金黄色葡萄球菌的分离鉴定赵蕾;李坤林;李书光;孙翠平;宋峰;沈志强【摘要】从内蒙古包头市某养殖场患有肺炎的病兔分离到一株革兰氏阳性球菌,通过形态学观察和生化试验进行了初步鉴定,并通过16S rRNA序列扩增和测序进行分析,BLAST分析结果显示,该菌与金黄色葡萄球菌的核酸序列同源性达99.6％,确定该分离菌株为兔金黄色葡萄球菌,并将其命名为BTSH1.%A gram-positive cocci was collected from pneumonia illness rabbit in a farm of Baotou. Morphological observation and biochemical tests methods were taken for identification. Furthermore, 16S rRNA PCR amplification and sequence a-nalysis were processed, and BLAST analysis showed the nucleic acids allogenic to Staphylococcus aureus sequences reach 99, 6%. The results displayed this separation strain was a Staphylococcus aureus, and it was named BTSH1.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2011(038)009【总页数】3页(P184-186)【关键词】兔金黄色葡萄球菌;分离;鉴定【作者】赵蕾;李坤林;李书光;孙翠平;宋峰;沈志强【作者单位】山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600【正文语种】中文【中图分类】S852.61+1兔葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌引起的家兔的一种常见病，以败血症或各种器官的化脓性炎症为特征（王云峰等，1997；黄晓红，2005）。

兔金黄色葡萄球菌的分离鉴定和耐药性分析
谢辉;刘玉梅;张昕;孙莹莹;常赵阳;张自强
【期刊名称】《中国兽医杂志》
【年(卷),期】2022(58)4
【摘要】为了明确洛阳某地区兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的致病菌及其药物敏感性,本试验无菌采取病兔的病灶进行细菌分离纯化、革兰染色镜检、16S rDNA序列鉴定,并采用药物纸片琼脂扩散法进行分离菌的药敏试验。

分离鉴定结果显示,从病兔肺脏、肝脏和脾脏中分离的致病菌为金黄色葡萄球菌。

药敏试验结果显示,分离的金黄色葡萄球菌对红霉素、麦迪霉素、卡那霉素、复方新诺明、氨苄西林、丁胺卡那、头孢氨苄、头孢呋辛、呋喃唑酮具有耐药性;对羧苄西林、哌拉西林、诺氟沙星、多黏菌素B、多西环素、庆大霉素、新霉素敏感。

结果表明该兔场家兔发病原因为金黄色葡萄球菌感染,且分离菌对多种药物耐药,通过药敏试验结果合理用药可减少细菌耐药性的发生。

【总页数】5页(P81-85)
【作者】谢辉;刘玉梅;张昕;孙莹莹;常赵阳;张自强
【作者单位】河南科技大学动物科技学院
【正文语种】中文
【中图分类】R378.1
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兔葡萄球菌病的诊断和中西医疗法作者：邵立岩来源：《现代畜牧科技》 2015年第10期邵立岩（辽宁省丹东市宽甸县八河川动物卫生监督管理所118225）兔葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌引起的，以皮肤和器官化脓性炎症或菌血症、败血症为特征的一种流行性传染病。

1 病原本病病原是金黄色葡萄球菌，为革兰氏阳性球菌，无鞭毛，不形成芽孢和荚膜，常呈葡萄串状排列。

该菌为需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。

本菌致病力取决于其产生毒素和酶的能力。

对外界抵抗力很强，加热80℃经30分钟才能被杀死。

3%～5%石炭酸液消毒力较强。

对青霉素、红霉素、庆大霉素敏感，但易产生耐药性和耐药菌株。

本病广泛分布于自然界，也是人和动物体表、上呼吸道的常在菌。

可通过各种途径发生感染，但以伤口感染为主要方式。

也可经汗腺、毛囊进入机体而发生坏死性皮炎和脓肿。

还可经消化道和呼吸道途径引起感染。

本病的发生和流行还与各种诱因密切相关，如饲养管理、环境、卫生、应激等因素。

2 主症脓毒血症：仔兔出生后2～3天，胸、腹、颈、颌下和腿内侧皮肤先出现炎症，后见有粟粒大小的白色脓肿，多数病兔2～5天内出现败血症而死亡。

治疗后，有的脓肿可吸收，脓疱逐渐变干结痂自行脱落。

转移性脓毒血症：在病兔头、颈、背皮下或肌肉以及内脏器官形成一个或几个脓肿，其大小不一，小如豌豆、大如鸡蛋，柔软且有弹性。

经1～2个月，皮下脓肿可自行破溃，流出白色干酪样脓汁，创口经久不愈，脓汁流到别处皮肤上，引起病兔搔抓，造成损伤后又可形成新的脓肿。

脓肿向体内破溃时，即可发生全身感染，呈现败血症状，迅速死亡。

剖检见皮下、心、肺、肝、脾及子宫等内脏有脓肿，外有结缔组织包膜。

有的可见心包炎和胸、腹膜炎及骨膜炎。

脚皮炎：发病初期患部出现红斑，稍微肿胀和脱毛，随后形成经久不愈且易出血的溃疡。

病变常见于后腿跖趾区跖侧面皮肤，前肢少见。

此时，病兔不愿移动脚，换脚休息时小心翼翼，食欲不佳，消瘦。

如发生全身性感染，会迅速出现败血症而死亡。

葡萄球菌药敏实验流程英文回答：Staphylococcus aureus is a common bacterium that can cause various infections in humans. To determine the susceptibility of Staphylococcus aureus to different antibiotics, a drug sensitivity test, also known as an antibiotic susceptibility test, is performed. This test helps in selecting the appropriate antibiotic for the treatment of infections caused by Staphylococcus aureus.The following is a general outline of the procedure for conducting a Staphylococcus aureus drug sensitivity test:1. Isolation and identification of Staphylococcus aureus: The first step is to isolate and identify the Staphylococcus aureus strain from the clinical sample, such as blood, wound swab, or urine.2. Preparation of the bacterial suspension: A pureculture of Staphylococcus aureus is prepared by streaking the isolated colonies on a nutrient agar plate. A few colonies are then transferred to a tube containing asterile saline solution, and the suspension is adjusted to match the turbidity of a 0.5 McFarland standard.3. Inoculation of the Mueller-Hinton agar plate: Usinga sterile cotton swab, the bacterial suspension is evenly spread on the surface of a Mueller-Hinton agar plate. This agar medium is commonly used for antibiotic susceptibility testing.4. Placement of antibiotic discs: Sterile antibiotic discs impregnated with different antibiotics are placed on the surface of the agar plate. The selection of antibiotics depends on the suspected infection and the local resistance patterns.5. Incubation: The agar plate is then incubated at 35-37°C for 18-24 hours. During this time, the bacteria grow and form visible colonies on the agar surface.6. Measurement of inhibition zones: After incubation, the plate is examined, and the diameter of the clear zones around each antibiotic disc is measured. These zones indicate the susceptibility of the bacteria to the respective antibiotics. Larger zones indicate greater sensitivity, while smaller or no zones indicate resistance.7. Interpretation of results: The measured zone diameters are compared to the interpretive standards provided by organizations such as the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). These standards categorize the bacteria as susceptible, intermediate, or resistant to each antibiotic.8. Reporting of results: The results of the drug sensitivity test are reported, indicating which antibiotics are effective against the Staphylococcus aureus strain and which are not. This information helps guide the selection of appropriate antibiotics for treatment.中文回答：葡萄球菌是一种常见的细菌，可以引起人类各种感染。

兔葡萄球菌病的病原学诊断作者：姜丽敏唐熔志来源：《现代畜牧科技》2017年第01期摘要：引起兔葡萄球菌病的病原体为金黄色葡萄球菌，典型临床特征是兔全身所有器官或部分化脓性炎症或败血症。

现介绍应用病原学的方法诊断兔葡萄球菌病，基本过程包括：采集样品、镜检、分离培养、细菌鉴定、动物接种。

关键词：兔；葡萄球菌病；病原学；诊断中图分类号：S858.291 文献标识码：B文章编号：2095-9737（2017）01-0125-011样品采集根据发病部位和发病特点分别采集不同的病料。

脓毒血症病毒采集脓肿和血液；乳房炎病兔用无菌手术采集乳房组织或脓汁；脚皮炎病兔采集脓汁或渗出物；仔兔黄尿病采集患兔小肠内容物；鼻炎病兔则采集消毒棉拭子采集鼻腔内分泌物，剖检时同时采集气管分泌物。

2镜检取脓汁、渗出液或病变组织抹片，染色镜检，根据细菌形态、排列特征和染色反应，可初步诊断。

葡萄球菌无鞭毛和芽孢，一般不形成荚膜，革兰氏染色阳性，直径0.4～1.2μm，常呈葡萄串状排列，但在脓汁或液体培养基中，有的呈双球或短链状排列。

3分离培养病料的采集、处理与细菌分离培养。

对于未接受任何药物治疗病兔的脓汁、渗出液等病料直接接种于鲜血琼脂平板，对粪便等污染材料需使用甘露醇高盐琼脂进行分离。

由于病兔大多接受过药物治疗，故对于来源于这样病兔的病料须经适当处理后进行分离培养方可得到较为满意结果：若使用过青霉素治疗，应在每100mL培养基中加入200IU的青霉素酶；若使用过磺胺类药物作添加剂或治疗药物，则应在培养基中加入5%（V/V）的对氨基苯甲酸；用过其他抗生素进行治疗时，则应用硫酸镁增菌汤进行培养。

接种培养。

将采集的标本立即接种于7.5%氯化钠肉汤管，同时接种血平板及高盐甘露醇平板，置36±1℃下培养24h，或7.5%氯化钠肉汤增菌后移植至高盐甘露醇平板，挑取金黄色或甘露醇阳性菌落（培养基呈淡黄色），革兰氏染色镜检，并作纯培养，进行血浆凝固酶试验及生化试验。