(参考课件)血涂片制作与染色

姬姆萨染色法
总结词
姬姆萨染色法是一种高分辨率的血涂片染色方法，能够更好地显示出细胞的细节 和特征。
详细描述
姬姆萨染色法使用姬姆萨染料对血涂片进行染色，能够使细胞核呈蓝色，细胞质 呈红色，各种血细胞在染色后呈现出不同的颜色和形态，易于鉴别。该方法染色 效果较为稳定，但需要较长的染色时间。
苏木素-伊红染色法
05 血涂片制作与染色注意事项
CHAPTER
采血注意事项
采血部位
选择合适的采血部位，通常为手指或耳垂，确保 采血过程无菌操作，避免感染。
采血量
根据实验需求，控制采血量，确保足够用于制作 血涂片，同时避免过多采血造成浪费。
采血时间
选择合适的时间进行采血，避免在进食、运动后 等情况下采血，以免影响结果。
染色注意事项
染色剂选择
根据实验需求选择合适的染色剂，确保染色效果良好，能够清晰 显示细胞结构。
染色时间
控制染色时间，确保染色均匀，避免染色过度或不足。
冲洗与脱水
在染色完成后，进行充分的冲洗与脱水，去除多余的染色剂，使观 察效果更佳。
结果观察注意事项
观察方法
01
采用正确的观察方法，如显微镜观察，确保观察结果准确可靠。
观察指标
02
关注细胞形态、大小、染色情况等指标，综合分析结果，避免
片面解读。
结果解读
03
结合临床情况和其他检查结果，综合分析血涂片结果，为临床
诊断和治疗提供依据。
谢谢
THANKS
总结词
苏木素-伊红染色法是一种常用的组织学染色方法，常用于显 示组织结构和细胞形态。
详细描述
苏木素-伊红染色法使用苏木素染料和伊红染料对组织切片进 行染色，能够使细胞核呈蓝色，细胞质呈粉红色，便于观察 组织结构和细胞形态。该方法染色效果稳定，但对某些特殊 类型的细胞可能染色效果不佳。

2）pH值的影响：血细胞多种成分属 于蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所 带电荷随着溶液的pH而定。因此，血细 胞染色对氢离子浓度十分敏感。
染色时常用缓冲液（pH6.4～6.8）来调节
染色时的pH值，以达到满意的染色效果（表111）。
（2）试剂
1）Wright染液： Wright染液是由伊
红和亚甲蓝溶解于甲醇而成。甲醇的作用：
床常用的方法，主要用于观察血细胞形态
及仪器法检测结果异常的复查。
（2）厚血膜涂片法：取新鲜血液1滴于载
玻片的中央，用推片的一角将血滴由内向外旋
转涂布，制成厚薄均匀、直径约1.5cm的圆形 血膜，待自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，使红 细胞溶解，脱去血红蛋白，倾去水，血涂片干 燥后即可染色并用显微镜检查。 本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。
（2）试剂：染液放置越久，其染色
效果越好。
（3）染色：Giemsa染色法的步骤与方 法见表1-11-2。
3．Wright-Giemsa染色法 Wright-
Giemsa染色法结合了Wright染色法和Giemsa
染色法的优点。在Wright染液配方的基础上，
每1.0g Wright染料添加0.3g Giemsa染料。染
色步骤与Wright染色法相同。
【方法学评价】血涂片染色的方法学评
价见表1-12。
【质量保证】染色过深、过浅与血
涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、 染液浓度、pH密切相关。Wright染色的
质量保证见表1-13。血涂片染色不佳的
原因及纠正措施见表1-14。
谢谢！
2．自动涂片法 目前有许多型号的自
动血液分析仪，配备有血涂片仪和染色仪，
可以按照检验人员的指令执行自动送片、 取血、推片、标记和染色等任务。

血小板
染色结果
血小板呈淡蓝色或蓝紫色，染色质呈 颗粒状或块状。
观察指标
观察血小板数量、形态、大小等，判 断是否存在血小板减少症、血小板增 多症等。
04 染色注意事项
CHAPTER
染色时间
染色时间过短
染色时间适中
染色效果不佳，细胞结构不清晰，颜 色偏淡。
染色效果良好，细胞结构清晰，颜色 适中，便于观察。
染色温度过低
染色效果不佳，细胞结构不清晰，颜色偏淡。
染色温度适中
染色效果良好，细胞核和细胞质对比度明显，易 于观察。
05 染色问题处理
CHAPTER
染色过深或过浅
染色过深
可能是由于染色时间过长或染色液浓 度过高所致。为避免这一问题，应严 格控制染色时间和染色液的浓度，确 保染色过程的一致性。
染色过浅
详细描述
瑞氏染色法使用瑞氏染料和伊红染料进行染色，能够使细胞核呈紫红色，细胞 质呈粉红色，便于观察和鉴别细胞的形态和结构。该方法具有染色鲜艳、对比 度高的优点，适用于多种血细胞染色。
姬姆萨染色法
总结词
姬姆萨染色法是一种特殊的血涂片染色方法，能够更好地显示出细胞的内部结构 和核仁。
详细描述
姬姆萨染色法使用姬姆萨染料进行染色，能够使细胞核呈蓝色或深紫色，细胞质 呈浅红色或粉红色，便于观察细胞的内部结构和核仁。该方法具有较高的染色敏 感性和特异性，适用于鉴别异常细胞和病原体。
采血量
采集适量血液，一般为 20-50微升，根据实验需 求而定。
推片
载玻片
选择清洁、无划痕的载玻片，用 纱布擦拭干净。
推片方法
将血液滴在载玻片的一端，用边缘 平滑的推片从血滴一侧轻轻推动， 使血液均匀展开成一层薄膜。

该法计数误差较大，费时、费力，已不能适应大批量 标本的测定，将逐渐被血细胞分析仪所取代。
Xingyue
【试剂】 各种不同的专用稀释液或染色稀释液。 【器材】 （1） 显微镜 （2） 微量吸管：Hb吸管：10、20μl两刻度
★毛细玻璃吸管：10、20μl两刻度 一人一管，定期用水银称重法进行校正 误差应< ±1% （3）计数板：血细胞计数板，常用改良Neubauer计数板
适用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）
3. 血液标本检验后的处理
血源性污染是医源性污染的主要来源之一，检验后 的血液标本处理不当，其危害极大。对于检验完毕的 血液标本首先要进行高压灭菌，然后再进行无害化处 理。带有血液的检验器材要用消毒液浸泡。采血用的 注射器要进行毁形、消毒并进行无害化处理。
混匀后30s后灌板,静置2～3min后
以低倍镜计数四角4个大方格内WBC数 （计数原则）
计算
WBC数/L =四个大方格细胞数/4×10×20×106/L =四个大方格细胞数×0.05×109/L
Xingyue
当 2、血液凝固 3、稀释倍数不准 4、充液不当 5、识别错误 6、器材不符合要求
四： 血液涂片制备
血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方 法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液 病的诊断具有重要的价值，近年来血细胞分析仪 的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结 果的简易方法。
血涂片的用途：血细胞形态学检验、网织红、
寄生虫检验。
1：玻片的清洁
将载玻片放入肥皂或洗衣粉水中煮沸20分钟， 再用热水将肥皂、血膜洗去，自来水反复冲洗， 必要时用95%的乙醇浸泡1小时，擦干备用。
解倒入容器中，未溶解完的继续加入甲醇研磨，重 复多次，最后把染液加至500ml。