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液态奶中三聚氰胺检测方法（GC-MS）的比较1实验材料与方法1．1主要仪器设备及材料GC—MS(6890N／5973I)、高速冷冻离心机、固相萃取装置、微量加液器、恒温干燥箱、氦气以及经检测不含三聚氰胺的奶样等。
1．2主要试剂及溶液衍生化试剂：N，0一双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)+三甲基氯硅烷(TMCS)(99+1)；吡啶、三氯乙酸溶液(10g／L与50g/L)、乙酸铅溶液(22g／L与10g/L)、三聚氰胺标准溶液等。
1．3实验设计与方法实验方法为农业部饲料效价与安全检测中心的“牛奶中三聚氰胺的测定GC—MS”检测方法和国标GB，]r 22388—2008“原料乳与乳制品中三聚氰胺GC—MS检测方法”，前者简称方法1，后者简称方法2。
所有实验样品同步处理同步上机测定。
1.3．1方法检测限实验方法检测限实验的目的，主要是考察两种方法在0．05mg/kg的检测限附近的检出情况，即方法的灵敏度实验。
取5个10mL洁净的塑料离心管，每个离心管内准确加入浓度为2．0276μg/mL的三聚氰胺标准溶液125μL，用氮气吹干，然后向每个离心管内．准确移取5mL奶样并称其质量，每个样品的添加量约为0．05069mg，kg，按照方法l测定其含量．作为方法l的检测限实验。
另取5个50mL的干净纳氏比色管，每个比色管内准确加入浓度为2．0276μg/mL的三聚氰胺标准溶液125μL，用氮气吹干，然后在每个比色管内准确移取5mL奶样并称其质量，每个样品的添加量约为0．05069mg／kg，按照方法2步骤处理并测定其含量，作为方法2的检测限实验。
两种方法的检测结果都用基质加标曲线定量。
l.3．2方法的回收率实验和重复性方法的回收率实验和重复性的目的是比较两种方法在相同条件下，其方法的准确度和精密度。
取5个10mL洁净的塑料离心管，每个离心管内准确加入浓度为2．0276μg/mL的三聚氰胺标准溶液1．00mL，用氮气吹干，然后向每个离心管内．准确移取5mL奶样并称其质量，每个样品的添加量约为O．40552mg/kg，按照方法1测定含量，作为方法l的回收率和重复性实验。
三聚氰胺奶粉检测方法三聚氰胺奶粉的检测方法是保障食品安全的重要手段之一。
随着科技的不断发展，各种先进的检测方法被不断研发和应用。
本篇文章将介绍几种常见的三聚氰胺奶粉检测方法，以及它们的原理和应用情况。
1. 高效液相色谱法高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的三聚氰胺奶粉检测方法。
该方法基于样品中三聚氰胺的特征物理化学性质，通过色谱柱分离，再通过紫外灯或荧光检测器进行检测和定量分析。
这种方法具有检测灵敏度高、准确度高、可定量分析和操作简便等优点，被广泛应用于三聚氰胺奶粉的检测中。
2. 气相色谱质谱法气相色谱质谱法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）是一种高灵敏度的三聚氰胺奶粉检测方法。
该方法通过将样品中的三聚氰胺与气相色谱柱分离，再通过质谱仪检测和定量分析三聚氰胺的含量。
气相色谱质谱法具有灵敏度高、准确度高、避免了色谱柱选择的限制等优点，被广泛应用于三聚氰胺奶粉的检测领域。
3. 红外光谱法红外光谱法（Infrared Spectroscopy）是一种非破坏性的三聚氰胺奶粉检测方法。
该方法通过样品中三聚氰胺分子和红外光的相互作用，产生吸收峰或透射峰，再通过光谱仪进行检测和定量分析。
红外光谱法具有快速、直观、无需样品处理等优点，但其灵敏度相对较低，适用于大批量样品的初筛。
4. 质谱法质谱法（Mass Spectrometry，MS）是一种高灵敏度、高选择性的三聚氰胺奶粉检测方法。
该方法通过样品中三聚氰胺分子与质谱仪中的电子束或激光束相互作用，形成离子碎片，再通过质谱仪对离子碎片进行检测和定量分析。
质谱法由于其高灵敏度和高选择性的特点，在三聚氰胺奶粉的检测中具有较高的应用价值。
5. 快速检测试纸法快速检测试纸法是一种便携、迅速的三聚氰胺奶粉检测方法。
该方法通过在试纸上固定一定的试剂，当样品与试纸发生反应后，试纸上的颜色或形态发生变化，从而判断样品中是否存在三聚氰胺。
2008,17(2)福建分析测试F uji an A na l ysis&T esting研究报告GC-M S法测定动物食品中的三聚氰胺王征(福建省中心检验所,福建福州350002)摘要:建立了一种用于动物食品中三聚氰胺含量的气相色谱-质谱联用检测方法。
通过甲醇/水/三乙胺混合液提取动物食品中的三聚氰胺,氮气吹干、硅烷化衍生,再由气相色谱-质谱联用仪检测,苯代三聚氰胺内标法定量。
该方法在饲料和动物食品中三聚氰胺的加标回收率在82.0%~105.6%之间,相对标准偏差(RSD)不大于5.8%,在0.1m g~50.0m g/L范围内呈现良好的线性关系,灵敏度高,最低检测限达到0.1L g/g;选择性好,能有效消除复杂基体干扰。
可作为常见样品中三聚氰胺类有机物含量检测的确证方法。
关键词:气相色谱-质谱联用;三聚氰胺;动物食品中图分类号:O657.63文献标识码:A文章编号:1009-8143(2008)02-0001-04Deter m ination ofM ela m ine and the Related Analogs in Ani m alFood by G as Chro m atography-M ass Spectro m etryW ang Zheng(Fu jian P rov i ncia l Centra l Inspecti on Institute,Fuzhou350002,Ch i na)A bstrac t:A confir m atory m e t hod i s presented for t he determ i nation of M e l am i ne i n d ifferen t ani m a l food products by gaschrom atography-m ass spec trom etry(GC-M S).Samp l es are ex tracted us i ng a m i x t ure o f m ethano l/w ater/tr iet hy l am i ne and t he analytes are subsequen tly converted to tri m ethylsil y l der i vati v es for ana l ysis,and e m ploy i ng Benzoguana m i ne is e m-ployed as the i nterna l standard.U si ng the b lank an i m a l food samp l es sp i ked w it h the standards,the recover i es are i n the range o f82.0%~105.6%and t he re lati ve standard dev iati ons(RSD s)are no m ore than5.8%.The detection li m it of t he m et hod i s abou t0.1L g/gK eywords:G as Chro m atography-m ass Spectro m etry;m e l am ine;an i m a l food三聚氰胺简称三胺,是一种重要的氮杂环有机化工原料,白色结晶粉末,无味。
测定食品中三聚氰胺的标准操作程序1、范围规定了原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的三种测定方法，即高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱-质谱联用法[包括气相色谱-质谱法（GC-MS），气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）]。
适用于原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的定量测定；液相色谱-质谱/质谱法、气相色谱-质谱（包括气相色谱-质谱/质谱）法同时适用于原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的定性确证。
方法高效液相色谱法的定量限为2 mg/kg，液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01 mg/kg，气相色谱-质谱法的定量限为0.05 mg/kg（气相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.005 mg/kg）。
2、第一法高效液相色谱法（HPLC）2.1 原理试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。
2.2 试剂与材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
2.2.1 甲醇：色谱纯。
2.2.2 乙腈：色谱纯。
2.2.3 氨水：含量为25％～28％。
2.2.4 三氯乙酸。
2.2.5 柠檬酸。
2.2.6 辛烷磺酸钠：色谱纯。
2.2.7 甲醇水溶液：准确量取50 mL 甲醇和50 mL 水，混匀后备用。
2.2.8 三氯乙酸溶液（1％）：准确称取10 g 三氯乙酸于1 L 容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。
2.2.9 氨化甲醇溶液（5％）：准确量取5 mL 氨水和95 mL 甲醇，混匀后备用。
2.2.10 离子对试剂缓冲液：准确称取2.10 g 柠檬酸和2.16 g 辛烷磺酸钠，加入约980 mL 水溶解，调节pH 至3.0 后，定容至1L 备用。
2.2.11 三聚氰胺标准品：CAS 108-78-01，纯度大于99.0%。
2.2.12 三聚氰胺标准储备液：准确称取100 mg（精确到0.1 mg）三聚氰胺标准品于100 mL 容量瓶中，用甲醇水溶液（3.2.7）溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL 的标准储备液，于4℃避光保存。
三聚氰胺检测方法汇总三聚氰胺是一种有毒物质，长期暴露或过量摄入可能对人体健康产生严重影响。
因此，三聚氰胺的检测方法具有重要的意义。
以下是对三聚氰胺检测方法的一个汇总。
1.高效液相色谱法（HPLC法）：高效液相色谱法是目前广泛使用的三聚氰胺检测方法之一、该方法主要通过将样品中的三聚氰胺分离出来，然后使用紫外灯或者其他检测器进行定量分析。
2.气相色谱法（GC法）：气相色谱法是另一种常见的三聚氰胺检测方法。
该方法利用样品中三聚氰胺的挥发性特性，将其蒸发并进入气相色谱仪进行定量分析。
3.质谱法（MS法）：质谱法是一种高灵敏度的三聚氰胺检测方法。
该方法通过将样品中的三聚氰胺分子离子化，并利用质谱仪对其进行定量分析。
4.光谱法：光谱法是指利用样品中三聚氰胺特征吸收、发射或散射光的方式进行检测。
包括红外、紫外-可见、荧光光谱等。
这些方法可以通过测定样品吸收、发射或散射光的强度与三聚氰胺浓度之间的关系来进行定量分析。
5.生物传感器法：生物传感器法是利用生物反应的方式进行三聚氰胺检测的方法。
常用的生物传感器包括酶传感器、抗体传感器等。
这些传感器能够特异性地与三聚氰胺结合，并通过测量其与生物反应产生的信号来定量分析三聚氰胺的浓度。
6.免疫分析法：免疫分析法是基于抗原与抗体的特异性结合进行三聚氰胺检测的方法。
常用的免疫分析方法包括酶联免疫吸附检测法（ELISA）、放射免疫测定法（RIA）等。
这些方法具有高灵敏度和高特异性的优点，可以用于三聚氰胺的快速检测。
7.化学法：化学法是一种常见的三聚氰胺检测方法。
该方法通过样品中三聚氰胺与其中一化学试剂发生特定反应，产生颜色变化或其他可测量的信号，从而进行定量分析。
总结起来，目前常见的三聚氰胺检测方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法、光谱法、生物传感器法、免疫分析法和化学法等。
这些方法在不同情况下具有各自的优缺点和适用范围，可以根据实际需要选择合适的方法进行三聚氰胺的检测。
检测方法GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺Spectra-Quad实现三聚氰胺含量在线检测超高效液相色谱_电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量高效液相色谱-二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺高效液相色谱法(HPLC)测定饲料中三聚氰胺的含量高效液相色谱-四极杆质谱联用测定饲料中三聚氰胺含量固相萃取与高效液相色谱联用测定宠物食品中三聚氰胺液相色谱串联质谱法(LC-MSMS)分析宠物食品中三聚氰胺液相色谱-串联质谱法测定饲料中三聚氰胺残留GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺附：三聚氰胺检测方法示例仪器与条件高效液相色谱仪；二极管阵列检测器(DAD)，检测波长240nm，柱温：40℃。
(1)AgelaVenusilTMASBC18(4.6×250mm);缓冲液：10mM柠檬酸,10mM庚烷磺酸钠;流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15;流速：1.0mL/min。
(2)AgelaVenusilTMASBC8(4.6×250mm);流动相：缓冲液：乙腈=85：15;缓冲液：10mM 柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0;流速：1.0mL/min;离子交换固相萃取柱AgelaClearnertTMPCX试剂与样品宠物饲料样品(农业部饲料供应中心提供);甲醇、乙腈为北京艾杰尔科技有限公司提供;氨水、乙酸铅、三氯乙酸、均购于北京化学试剂公司;三聚氰胺标准品、柠檬酸、辛烷磺酸钠(Sigma公司);甲醇为色谱纯，其他均为化学纯。
实验方法1、样品前处理方法(1)标准样品配制：取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以提取液(0.1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。
(2)提取：称取饲料样品5g，加入50ml0.1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL2%乙酸铅溶液，超声20min。
然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)。
GC-MS三聚氰胺检测方法GC-MS Determination of MelamineDeviation of the results should not exceed 20% for two parallel independent tests by the same chemist using the same lab, equipment1方法原理Principles试样中的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用N，O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生化，以气相色谱质谱联用仪进行定性和定量。
Melamine in the sample is extracted by trichloroacetic acid, then purify it through Mixed Type Cationic Exchangeable Stationary phase Extraction column, followed by derivatization by N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide (BSTFA). Using a GC-MS method for qualitative and quantitative determinations..2试剂和材料Reagents and materials2.1衍生化试剂：BSTFA+1%三甲基氯硅烷（TMSC）。
Derivatization solution: BSTFA+1%Trimethylchlorosilane (TMCS)2.2吡啶：优级纯。
Pyridine: Excellent grade pure2.3甲醇：色谱纯。
Methanol: Chromatograph standard2.4乙腈: 色谱纯。
Acetonitrile: Chromatograph standard2.5氨水：25%-28%.Aqueous ammonia solution: concentration within the range of 25%-28%2.6混合型阳离子交换固相萃取柱：60mg，3ml。
中华人民共和国质量监督检验检疫ICS 67.100.10 X 82中华人民共和国国家标准中华人民共和国质量监督检验检疫总局 乳与乳制品中三聚氰胺残留的测定—高效液相色谱法Milk and Milk Product Detection ofMelamine Residues —HPLCA.1乳与乳制品中三聚氰胺残留的测定—高效液相色谱法1 范围本方法规定了用HPLC与GC-MS测定三聚氰胺的方法。
本方法适用于乳与乳制品中三聚氰胺含量的测定。
本方法三聚氰胺的最低检出限为1.0mg/kg。
1 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
NY/T 1372-2007 饲料中三聚氰胺的测定GB5009.1 食品卫生检验方法理化部分总则GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法2 原理试样中的三聚氰胺用乙腈、水的混合溶液萃取，乙酸锌溶液沉淀蛋白质后，提取液经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，净化液用高效液相色谱进行测定，外标法定量。
3 试剂与材料：除另有规定外，试剂为分析纯，水符合GB/T6682规定的三级水，色谱用水符合一级水的规定。
3.1 乙腈：色谱纯3.2 甲醇：色谱纯3.3 氨水：浓度25%～28%3.4混合型阳离子交换固相萃取小柱：60mg/3mL3.5 三氯乙酸溶液10g/L ：称取10g三氯乙酸加水至1000mL。
3.6 乙腈水溶液：乙腈:水为50：503.7 盐酸溶液：0.1mol/L3.8 氨水-甲醇溶液：量取5mL 氨水，溶解于100mL 甲醇中。
3.9 乙酸锌溶液219 g/L：取219g乙酸锌用300mL 水溶解后，定溶至1L。
3.10 20%甲醇溶液：200mL 甲醇，溶解于800mL 水中。
原料乳及乳制品中三聚氰胺检测方法作者：楚雪来源：《食品界》2019年第04期众所周知，三聚氰胺是一种常见的工业原料，在纺织、橡胶、塑料等行业得到了广泛的应用，而且它的含氮量极高，如果添加到原料乳以及乳制品中，可以造成数据假象，让人们误以为里面含有较多的蛋白质成分。
典型的三聚氰胺检测方法三聚氰胺是一种无色无味的晶体，低毒，微溶于乙醇，可溶于甲醇、甘油、乙酸，不溶于乙醚、苯酚。
目前，三聚氰胺的主要用途是加工塑料、胶水、涂料和阻燃剂。
虽然三聚氰胺毒性较低，但是对于幼儿而言，如果一次性摄入量过多，就会导致肾功能衰竭。
我国明确规定婴幼儿配方奶粉中三聚氰胺的含量不得超过1.0mg/L，其他食品中三聚氰胺的含量不得超过2.0mg/L。
色谱检测。
第一种，高效液相色谱法。
这种方法简称HPLC法，适用的范围特别广，而且分析速度很快，能够实现自动化检测，是最普遍的检测方法。
目前人们已经加大了研究的力度，并且对检测条件进行了优化，明显缩短了检测时间，而且高效液相色谱法日渐成熟，已经成为了人们检测三聚氰胺的首选方法，具体的检测内容会在本文的第二章节详细介绍。
第二种，气相色谱质谱法。
这种方法简称GC- MS法，灵敏度很高，但是由于三聚氰胺的分子质量较小，不容易挥发，所以需要进行衍生处理，提高挥发性，这一过程会造成一定的样品损失。
如果使用硅烷进行衍生处理，可以降低外界环境的干扰，而结合反吹技术，可以省略固相萃取柱净化的环节，这样简化了处理流程。
第三种，液相色谱-串联质谱法。
这种方法使用三氯乙酸溶液对目标分析物进行提取，然后通过离子固相萃取柱净化，在对三聚氰胺进行检测时，方法检测低限为18μg/kg，与上述两种方法相比，这种方法更加便捷，并且可以使用外标法和内标法进行测量。
光谱检测。
第一种，拉曼法。
SERS技术可以增强金属表面附着物质的散射信号，并且搜集到具体的结构信息，所以检测人员可以建立一套拉曼光谱扫描系统，对原料乳与三聚氰胺颗粒的混合样本进行检测，就会发现拉曼强度与三聚氰胺的比例存在明显的线性关系。
三聚氰胺检测方法GC-MS法(Adapted from FDA/ORA Forensic Chemistry Center SOP T015)2007年4月10日校订目的:本程序规定了针对麦麸和动物食品中三聚氰胺成分检测的样品制备和气相色谱-质谱联用（GC-MS）测定方法。
This procedure is designed to screen the TMS derivative of a methanol extract of the sample and it incorporates instrumental parameters which permit 10.5 minute run times.范围:本程序适用于干麦麸和动物食品。
本程序包括从甲醇中提取可溶于或部分可溶于甲醇的化合物。
由于三聚氰胺在甲醇中溶解度有限, 因此本方法只作为定性分析用.职责:分析者有责任注意到本程序的任何更改.专有名词定义:TMS--三甲基硅烷(貌似?)安全措施:工作环境含有化学药品和高压气体，使用一般公认的安全措施.设备:Agilent安杰伦5975型GC-MS系统，30m长的DB-5毛细柱（或等效设备）试剂:甲醇: HPLC 色谱纯级Pyridine(嘧啶): 经A.C.S. 检定BSTFA with 1% TMCS: bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide with 1%Trimethylchlorosilane（三甲基氯硅烷）(e.g. Sylon BFT, Supelco)质控原理:A blank should be run at the onset of each analysis and then randomly throughout the analysis if there is suspicion of carryover. A fortified sample (see Part C) should be analyzed with each set of samples to demonstrate effective system performance.程序(程序细节):本方法使用GC程序不分流进样或分流进样（1：20）中任一种。
通常，为了获得必须的检测灵敏度而采用不分流进样模式。
The split mode is suitable where sample availability is not limited and the recommended amount can be prepared (~0.5 g sample preparations).A. 甲醇萃取:未知的麦麸/动物食品样品：称取大约0.500 g 样品，移入20ml离心管中并加入 5 毫升甲醇，旋涡混合后超声波萃取10 分钟，4500转/分离心 6 分钟，使用0.45 μm水相针头滤器（尼龙膜）滤入GC样品瓶中。
如果样品有限, 可按比例减少样品量和萃取体积，并使用不分流进样方式。
推荐制备两份样品进行平行测定。
B. Trimethylsilyl (TMS) 衍生:Melamine is detected as the 3-TMS derivative with a nominal molecular weight of 342 amu. 3-TMS 衍生物在GC-MS谱图上，保留时间大约在7.1分钟(见附图).空白对照: 移取40μL 甲醇萃取液到自动进样器瓶中，70℃吹干，加入200 μl 嘧啶和200 μl BSTFA, 旋涡混合后于70 ℃孵育30分钟。
已知样品: 一般情况下，进行已知浓度物品的分析(比如，标准品), 需用pyridine/BSTFA适当的稀释到浓度不大于100 μg/ml（100 ppm），计算好稀释度后，转移适当量的标准溶液到自动取样器瓶中，70℃吹干，加入200 μl 嘧啶和200 μl BSTFA, 旋涡混合后于70 ℃孵育30分钟。
未知样品: 移取40μL 步骤A中得到的甲醇萃取液到自动进样器瓶中，70℃吹干，加入200 μl 嘧啶和200 μl BSTFA, 旋涡混合后于70 ℃孵育30分钟。
C. Sample Fortification:本方法成功应用于检出湿/干动物食品合成物(图2) 和麦麸(图3)中含有的三聚氰胺。
基于HPLC-UV的结果, 不分流进样时，本方法能检出低于0.01%(重量)水平的三聚氰胺。
（FDA官方样品，using ~0.500 g samples with TMS derivatization）Uncontaminated wheat gluten and pet food composites were spiked with various levels of melamine and taken through the method using ~0.500 g samples and splitless injection. The method successfully detected melamine (as the 3TMS derivative) at 14 micrograms/g in the wheat gluten and at 7 micrograms/g in the pet food composite. At low spike levels, extracted ionchromatograms were used to verify the presence of four major ions of the melamine-TMS mass spectrum (m/z=342, 327, 171, and 99). Sample fortification experiments to demonstrate successful detection of melamine in the specific matrix of interest should be performed by the individual laboratories.大意：检测定性离子为342，327，171，99D. 标准品准备:三聚氰胺能溶于甲醇，微溶于甲醇/水混合液。
在超声30 分钟条件下，三聚氰胺标准品在甲醇/水（50/50）混合液中能溶解至1.5mg/ml。
如果想得到更高浓度的三聚氰胺溶液, dimethyl sulfoxide (DMSO，二甲基亚枫) may be used as a primary solvent followed by methanol or acetonitrile for serial dilutions.Note: Due to the presence of water in the standard solution, dry down times for the melamine standard on the Reacti-Vap will be increased.E. 仪器参数:Agilent GC 6890N + 5975质谱带7683B 系列自动取样器仪器：检测器：Agilent Mass Selective Detector (MSD) model 5975i软件：Enhanced Chemstation version D.02.00.275; Wiley 7th Edition and NIST 02 MS Library柱子：J&W DB-5 聚苯基甲基硅氧烷（5%苯基）内径：0.25毫米膜厚: 0.25 微米长: 30 米载气：氦流速：1.3 ml/cm.线速度：35 cm/sec压力：17.5 P模式：恒流进样口：进样方式：不分流或分流(1:20)进样量：1μl进样口温度: 250℃隔垫吹扫气流：10ml/min，2minGC参数：开始温度: 75℃，保留1.0 分钟升温速率：30℃/min最终温度: 300℃，保留2.0 分钟转移线温度：280℃程序时间：10.5 分钟MS参数：Mass Range: 40-450 amuScan Mode: Full (Electron Ionization)Filament Delay: 4.2 min (splitless); 3.8 min (split)Threshold: 100MS Quad: 150ºCMS Source: 230ºCF. 峰鉴定:The mass spectrum of the 3-TMS derivative of melamine (Figure 1) exhibits the molecular ion at m/z=342, a methyl group loss at m/z=327, and significant ions at m/z=171, 99, and 73. The standard of melamine should be prepared (and TMS-derivatized) and analyzed along with the sample preps on the same day to confirm the identification. Figures 2a and 2b are examples of a GC-MS chromatogram of melamine contaminated pet food. Additional peaks present in the TIC are consistent with TMS derivatives of phosphate and various sugars. Figure 3 is an example of a GC-MS chromatogram of melamine contaminated wheat gluten.图 1图 2 a图2b图 3Updated FCC Developmental Melamine Quantitation (HPLC-UV)April 2, 2007样品取样/制备:麦麸:Retsch ZM 100 离心粉碎(0.5 毫米滤网).湿的动物食品: Moist chunks and gravy were blended to the consistency of a gritty pudding prior to sampling.样品称重于玻璃管中后，使用50:50 乙腈:水溶液进行萃取.程序: 增加指出体积的抽出溶剂(见到下面的笔记) 1. 无边帽和旋涡彻底地, 由于这一个步骤变得攻击性(紧要关头的适当减慢三聚氰胺的分解率). Sonicate 30 分钟. 经过 2 阶段的GMF 的榨出物的过滤器部分-尼龙(0.45 m m) 过滤器. 稀释的被过滤的榨出物250? ?l 吸取+750? ?l 溶剂 2 维持点阵式成份的可溶性.1 小麦麸质: 在比例方面吸取对10 毫升的0.1 g. 因为三聚氰胺在2% w/w 上面满足, 比例的榨出物对15 毫升的0.05g.1 潮湿的伴侣动物饲料: 在比例方面吸取对10 毫升的2.0-2.5 g.2 对于最后的稀释是有偿付能力的可能是水或0.1 N HCl. Final dilution is necessary for compatibility with ion-pairing chromatography. We have observed some differences in behavior between the wheat gluten and pet food samples with respect to maintaining solubility during final dilution (these are most likely matrix components which fall out). 0.1 N HCl seems to help maintain solubility for final dilution of the wheat glutens.HPLC-UV 工作条件:色谱柱: Zorbax Rx C8 (retention is too high on C18 column)Buffer: 10 mM citric acid, 10 mM sodium octane sulfonate, adjusted to pH 3.0流动相: 85:15乙腈缓冲液流速: 1.0 ml/min.进样体积: 10 μl柱温: 40 o C (column thermostatting is necessary for ion-pair separations)检测波长: 240 nm收集波长: 200 – 400 nm (look for λmax near 236 nm)保留时间: 4.2 - 4.3 min.运行时间: 10 min.Standard Preparation:Stock standard was prepared in 76:24 acetonitrile: water. A check stock standard was prepared in 60:40 acetonitrile: water. Dilutions were made in either water or 0.1N HCl giving equivalent calibration curves.Figures of Merit:Linear range: established from 1.0 – 400 μg/ml; calibration range 1.0 – 200 μg/ml used for most of workReproducibility: duplicate preparations agree within 0.1 - 5% relative basisSpike/recovery (based on spiking solid melamine powder into test matrix prior to extraction): 90-110%.。
