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实验二细菌的形态观察（简单染色法和革兰氏染色法）实验二细菌的形态观察（简单染色法和革兰氏染色法）一目的要求1．了解简单染色法和革兰氏染色法的基本原理，熟练掌握细菌的涂片与革兰氏染色技术。
2．初步学习细菌细胞特殊结构的染色方法，并观察细菌的特殊结构。
3．观察细菌的菌落平板，学会识别大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的菌落特征，学会初步鉴别微生物的种类的方法。
二实验内容与原理1．简单染色法原理简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法，一般用于观察个体形态与细菌排列。
由于细菌在中性、碱性或弱酸性环境中带负电荷，所以通常采用一种碱性染料如美蓝、碱性复红、结晶紫对细菌进行染色。
美蓝是美蓝的盐酸盐，可解离为带正电荷的美蓝，很容易与细菌结合使菌体着色。
染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。
简单染色过程：涂片→固定→染色→水洗→干燥→镜检涂片→ 固定→ 干燥→ 水洗、吸干→镜检→染色 1mim2．革兰氏染色法原理革兰氏染色法是由丹麦医生 Hans Christian Gram于 1884 年创立。
它是细菌学中很重要的鉴别染色法，因为通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌（G + ）和革兰氏阴性菌（G －）两大类。
革兰氏染色过程：涂片→固定→结晶紫初染（1min）→碘液媒染（1min）→乙醇脱色（95% 酒精,30s）→番红复染（30 秒）→干燥→镜检阳性菌：紫色阴性菌：红色革兰氏染色要点：（1）初染：用结晶紫，染色 1 分钟，水洗。
（2）媒染：加碘液覆盖 1 分钟后水洗。
（3）脱色：连续滴加 95％乙醇，约 30 秒，直到滴下的乙醇无色为止，水洗。
（4）复染：加番红染色 1 分钟，水洗。
（5）干燥。
（6）镜检：先低倍镜，后油镜观察。
注意：涂片要薄而均匀，脱色程度要控制得当。
学生做大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，枯草杆菌的革兰氏染色。
观察细菌个体形态与排列，绘图。
3．芽孢染色原理细菌的芽孢壁比营养细胞壁厚，致密，透性差，着色和脱色都比营养细胞困难，故一般采用一种碱性染料并在微火上加热，或延长染色时间，使菌体和芽孢都染上颜色以后水洗或稀酸冲去菌体的染料，芽孢仍保留颜色，再用另一种对比鲜明的染料使菌体着色，如此可明显区分芽孢和营养体结构。
实验一免疫学实验一、免疫细胞检测：1、淋巴细胞转化试验2、E花环形成试验3、大吞噬试验4、小吞噬试验二、凝集试验（玻片法）凝集+ 不凝集-细菌鉴定结果：三、酶联免疫吸附试验（ELISA）示教原理：结果：实验二细菌形态观察及革兰染色一、观察细菌的基本形态：1、球菌2、杆菌3、螺形菌葡萄球菌大肠杆菌霍乱弧菌（革兰染色）（革兰染色）（革兰染色）二、观察细菌的特殊结构：1、芽胞2、荚膜3、鞭毛破伤风杆菌肺炎链球菌伤寒杆菌（革兰染色）（荚膜染色）（镀银染色）三、革兰染色1、步骤：2、结果：葡萄球菌呈色，为革兰性菌；大肠杆菌呈色，为革兰性菌。
3、简述革兰染色的技术关键及医学意义。
实验三细菌人工培养及其代谢产物的观察一、常用培养基的制备：1、怎样配制100ml普通肉汤培基？2、含有%琼脂的培基为固体培基，制成平板用于；制成斜面用于。
3、含有%琼脂的培基为半固体培基，主要用于。
二、细菌在培养基中的生长情况1、平板划线分离培养结果（记录菌落形态）2、在液体培基中的生长情况：葡萄球菌：枯草杆菌：链球菌：3、在半固体培基中穿刺接种培养结果伤寒杆菌呈生长，运动；痢疾杆菌呈 生长， 运动。
三、细菌代谢产物的观察 1、糖发酵试验：产酸产气产酸不产气＋ 不分解－2、蛋白质分解试验：阳性＋阴性－3、细菌的色素：4、简述细菌代谢产物检查的意义。
实验四消毒灭菌与细菌分布试验一、记录并分析细菌分布检查的结果：根据上述检查结果，简述其在医学、药学工作中的实际意义。
二、高压蒸汽灭菌常用压力、温度及时间为：高压蒸汽灭菌器的使用要注意的是：三、紫外线杀菌试验1、培养后菌苔生长情况（绘图）：2、简述紫外线杀菌的特点及适用范围。
实验五药物的抗菌试验一、琼脂扩散法1、纸片法2、打孔法二、液体培养基连续稀释法（试管法）药物：浓度：菌种：结果：报告MIC：实验六病原性细菌一、观察下列细菌形态并绘图链球菌淋杆菌结核杆菌（革兰染色）（革兰染色）（抗酸染色）二、化脓性球菌1、葡萄球菌：阳性＋阴性－2、链球菌：3、抗链球菌溶血素“O”试验（简称抗“O”或ASO试验）：抗体效价为：简述其原理及临床意义：三、肠道杆菌：1、观察大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌在SS平板和双糖铁培养基中的菌落特点、生化反应、动力等。
细菌一般形态染色观察一、实验目的学习了解微生物染色的基本原理与方法学习掌握细菌的简单染色和革兰氏鉴别染色技术巩固显微镜油镜的使用方法。
二、实验原理细菌的个体极微小，无色透明，必须借助于染色法，使细菌（或背景）着色，与背景（或菌体）形成明显的对比便于在显微镜下观察细菌的形态构造。
染色方法主要有：见下图简单染色法简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。
适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。
常用染料有：碱性染料：结晶紫、碱性复红、龙胆紫、番红、中性红、孔雀绿等。
酸性染料：酸性复红、刚果红、曙红等简单染色一般常用碱性染料进行染色原因：在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，带正电荷，因此碱性染料很容易与细菌结合使细菌着色细菌细胞壁含有蛋白质或多肽，也就有等电点已知细菌的等电点pH为2～5。
革兰氏阳性菌为2～3，革兰氏阴性菌为4～5。
当细菌的培养液pH值大于等电点时，细菌带有负电荷；反之，带有正电荷。
一般，细菌的培养、染色、试验过程均在偏碱性（7～7.5）、中性、偏酸性（6～7）条件下，都高于细菌的等电点，故均带有负电荷革兰氏染色革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法，根据细菌对这种染色反应的不同，可分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类，其机理是由于细菌细胞壁的化学组成及结构不同和通透性不同的缘故。
革兰氏染色对于细菌的分类、鉴定及食品卫生检测都有重要意义。
革兰氏染色原理影响革兰氏染色结果的因素菌龄培养基pH值染色技术：涂片质量、染色时间、脱色时间、染色脱色均匀度等三、实验器材1. 器材：显微镜，擦镜纸，二甲苯，香柏油，载玻片，接种环，酒精灯,火柴，吸水纸，无菌牙签。
2. 染色液及试剂：石碳酸复红染液、碱性美蓝染液、结晶紫染色液，路戈氏碘液，95％的酒精，蕃红染色液，黑色素水溶液，蒸馏水。
3. 菌种：白葡萄球菌、大肠杆菌的新鲜斜面菌种各1支。
四、操作步骤（一）简单染色涂片火焰固定染色水洗干燥镜检（二）革兰氏染色涂片→干燥→火焰固定结晶紫染色→水洗碘液媒染95%酒精脱色→水洗蕃红复染→水洗干燥镜检（三）口腔中微生物观察负染色五、实验报告1、实验结果绘图2、思考题（1）细菌制片过程应注意哪些？（2）试分析菌龄、培养pH、染色技术对革兰氏染色结果的影响。
一、实验目的1. 掌握显微镜油镜的使用方法。
2. 观察细菌的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。
3. 了解细菌的特殊结构，如鞭毛、荚膜、芽孢等。
4. 培养对细菌形态结构的识别能力。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有多种形态结构。
通过显微镜观察，可以了解细菌的基本形态和特殊结构，为细菌的分类、鉴定和致病性研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细菌样本、革兰氏染色液、芽孢染色液、水浸片、盖玻片、载玻片等。
2. 仪器：光学显微镜、酒精灯、载物台、切片刀、镊子等。
四、实验步骤1. 观察细菌样本（1）将细菌样本滴在载玻片上，用盖玻片封口。
（2）在显微镜下观察细菌的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等。
2. 革兰氏染色（1）将革兰氏染色液滴在细菌样本上，用酒精灯加热。
（2）观察染色后的细菌，判断其革兰氏分类。
3. 芽孢染色（1）将芽孢染色液滴在细菌样本上，用酒精灯加热。
（2）观察染色后的细菌，判断其芽孢存在与否。
4. 观察细菌特殊结构（1）观察细菌是否有鞭毛、荚膜等特殊结构。
（2）通过水浸片观察细菌的运动。
五、实验结果与分析1. 细菌样本的基本形态结构（1）观察到的细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等基本结构。
（2）部分细菌具有鞭毛、荚膜等特殊结构。
2. 革兰氏染色结果（1）部分细菌呈现革兰氏阳性，细胞壁较厚，不易着色。
（2）部分细菌呈现革兰氏阴性，细胞壁较薄，易着色。
3. 芽孢染色结果（1）部分细菌存在芽孢，呈圆形或椭圆形。
（2）部分细菌无芽孢。
4. 细菌特殊结构观察结果（1）部分细菌具有鞭毛，呈螺旋状。
（2）部分细菌具有荚膜，呈透明状。
六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了显微镜油镜的使用方法。
2. 观察了细菌的基本形态结构和特殊结构，了解了细菌的生物学特性。
3. 培养了对细菌形态结构的识别能力，为今后的学习和研究奠定了基础。
七、注意事项1. 使用显微镜时，注意调节光圈和焦距，确保观察清晰。
细菌的形态观察实验报告细菌的形态观察实验报告一、实验目的1.学习并掌握细菌的基本形态和观察方法。
2.通过实验，提高自己的实验操作能力和显微镜使用技巧。
二、实验原理细菌是一种单细胞生物体，具有多种形态和类型。
根据细菌的形态和结构特征，可以将其分为球菌、杆菌和螺旋菌等。
本实验将通过显微镜观察不同类型细菌的形态和结构特点，以加深对细菌的了解。
三、实验步骤1.准备实验材料：显微镜、细菌样品（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乳酸菌等）、细菌染色液、载玻片、盖玻片。
2.将细菌样品分别涂抹在载玻片上，用染色液进行染色。
3.用显微镜观察不同类型细菌的形态和结构特点，并记录观察结果。
4.清理实验器材，包括显微镜、载玻片、盖玻片等。
四、实验结果及分析1.实验结果（见下表）通过观察不同类型细菌的形态和结构特点，可以发现以下规律：（1）球菌：呈球形或近似球形，直径大小不一，无芽孢和鞭毛。
其中，葡萄球菌属的细菌菌落较大、隆起、边缘整齐，呈金黄色；链球菌属的细菌菌落较小、平坦、边缘不整齐，呈灰白色。
（2）杆菌：呈圆柱状或略扁，有长、短鞭毛。
其中，大肠杆菌的菌落较大、湿润、有光泽，边缘整齐；沙门氏菌的菌落较小、干燥、无光泽，边缘不整齐。
（3）螺旋菌：呈螺旋状或弯曲状，有鞭毛。
其中，幽门螺杆菌呈螺旋状，长可达6μm，有4-8根鞭毛。
此外，从实验结果还可以看出，不同类型细菌的形态和结构特点存在差异，这与其生物学特性和适应环境的能力密切相关。
例如，大肠杆菌是肠道中的主要菌群之一，其形态和结构特点使其能够在肠道中生存和繁殖；金黄色葡萄球菌是一种常见的化脓性球菌，其形态和结构特点使其具有较强的致病性；乳酸菌则是一类与人体健康密切相关的益生菌，其形态和结构特点使其能够在肠道中定植并发挥重要作用。
五、结论总结通过本次实验，我们观察了不同类型细菌的形态和结构特点，了解了细菌的基本形态和观察方法。
同时，实验过程中也锻炼了自己的实验操作能力和显微镜使用技巧。
细菌基本形态及特殊结构实验报告篇一：《细菌基本形态及特殊结构实验报告》嘿，同学们！今天我要跟你们讲讲我做的这个超级有趣的细菌基本形态及特殊结构实验！实验前，老师就跟我们说：“这实验可神奇啦，能让你们看到那些小得不得了的细菌到底长啥样！”我心里那叫一个好奇，细菌到底是啥样的呢？我们先准备了好多东西，显微镜、载玻片、盖玻片、染色剂，还有培养好的细菌样本。
看着这些东西，我心里就像揣了只小兔子，怦怦直跳，心想：“这能行吗？我能看到细菌吗？”开始实验啦！第一步，我们要制作细菌涂片。
这可不容易，得小心翼翼的，就像在照顾一个刚出生的小宝宝。
我轻轻拿起载玻片，心里念叨着：“千万别弄坏啦！”同学在旁边也紧张得不敢大声喘气。
做好涂片，接下来就是染色。
这染色剂的味道可不好闻，我皱着眉头，心想：“这味道，细菌能喜欢吗？”不过为了能看清细菌，也顾不上那么多啦。
终于到了最关键的时刻——用显微镜观察。
我眼睛紧紧盯着目镜，哇！我看到啦！那些小小的细菌就像一个个小点点。
有的像圆圆的小球，这难道不像我们玩的弹珠吗？有的像细细的小棍儿，难道是细菌界的金箍棒？还有的聚在一起，就像一群小伙伴在开派对！我兴奋地叫起来：“快看呀，太神奇啦！”旁边的同学也凑过来，“哇，真的呀！”我们叽叽喳喳地讨论着，就像一群小鸟发现了新大陆。
老师走过来说：“同学们，你们看到的这些就是细菌的基本形态。
”我忍不住问老师：“老师，那这些细菌都有啥用呀？”老师笑着说：“有的细菌对我们有好处，能帮助我们消化食物；可有的细菌却会让我们生病哟。
”我恍然大悟，原来细菌还有好坏之分呐！通过这次实验，我明白了细菌虽然小得我们看不见，但它们却有着各种各样的形态和作用。
这不就像我们人一样吗？虽然大家看起来差不多，但每个人都有自己独特的性格和能力。
这次实验可太有趣啦，让我对微观世界充满了好奇和向往。
我真想以后能多做这样的实验，去探索更多的奥秘！篇二：《细菌基本形态及特殊结构实验报告》嘿，亲爱的小伙伴们！今天我要给你们讲讲我做的那个超级有趣的细菌基本形态及特殊结构实验，你们准备好和我一起探索这个神秘的微观世界了吗？一进实验室，那一堆瓶瓶罐罐和奇奇怪怪的仪器就让我兴奋不已。
一、实验目的1. 学习并掌握细菌特殊形态的观察方法。
2. 了解细菌特殊结构的功能及其在微生物学研究中的应用。
3. 通过观察不同细菌的特殊形态，加深对细菌分类和鉴定的认识。
二、实验原理细菌特殊形态是指细菌除基本形态（如球状、杆状、螺旋状）外的其他形态，如丝状、分支状、放射状、束状等。
这些特殊形态可能与细菌的生长环境、生存策略、繁殖方式等因素有关。
观察细菌特殊形态有助于微生物学研究和细菌分类。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 细菌培养物：包括球状、杆状、螺旋状等基本形态的细菌。
- 特殊形态细菌培养物：丝状、分支状、放射状、束状等。
- 革兰氏染色液、酒精、水、甘油、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2. 实验仪器：- 普通光学显微镜- 高倍显微镜- 烧杯、酒精灯、酒精棉球、镊子等四、实验步骤1. 制备细菌涂片：- 将培养好的细菌用无菌镊子取出，轻轻涂抹在载玻片上。
- 待涂片干燥后，滴加革兰氏染色液，染色约1分钟。
- 用水洗去染色液，滴加碘液，染色约1分钟。
- 用水洗去碘液，滴加酒精脱色，观察细菌颜色变化。
- 用水洗去酒精，滴加复染液（如番红染液），染色约1分钟。
- 用水洗去复染液，用甘油封片。
2. 观察细菌特殊形态：- 使用高倍显微镜观察载玻片上的细菌。
- 仔细观察细菌的形态，记录其特殊结构。
3. 数据分析：- 对观察到的细菌特殊形态进行分类和描述。
- 分析特殊形态与细菌生存环境、繁殖方式等因素的关系。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 观察到的细菌特殊形态包括丝状、分支状、放射状、束状等。
- 丝状细菌：形态细长，具有分支，如放线菌。
- 分支状细菌：形态呈分支状，如葡萄球菌。
- 放射状细菌：形态呈放射状，如放线菌。
- 束状细菌：形态呈束状，如螺旋菌。
2. 分析：- 细菌的特殊形态与其生存环境和繁殖方式密切相关。
- 丝状细菌的分支形态有利于其在土壤等复杂环境中生长。
- 分支状细菌的放射状生长方式有利于其在食物链中占据有利位置。
实验二酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别一、实验目的与要求观察酵母菌的形态及出芽生殖方式；学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
二、基本原理1.单个的酵母菌合同是常见细菌的几倍甚至几十倍。
为单细胞，呈圆形，卵形或椭圆形，内有细胞核，液泡和颗粒体物质。
有的种类能产生子囊孢子或掷孢子、冬孢子、担孢子等。
有的种类一定条件下形成假菌丝或真菌丝。
大多数采取出芽方式进行无性繁殖，也可通过结合产生子囊孢子进行有性生殖。
2.酵母菌在液体培养基中生长时，能利用其中的可发酵型糖，并产生气体，有些产生挥发性的酯香味，菌体可沉于管的底部或悬浮在培养液中，或漂浮在培养液省形成菌膜或菌醭（分析一下为什么）。
当其生长在固体培养基上时，菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。
随时间延长，菌落颜色往往变暗，有些菌落边缘呈皱褶状。
3. 由于细胞个体大，采取涂片的方法制片有可能损伤细胞，一般通过美蓝染液水浸法或水-碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。
美兰对细胞无毒，其氧化型呈蓝色，还原型呈无色。
由于细胞的新陈代谢，，活细胞内有较强还原能力，使美兰由氧化型转变为无色的还原型，染色后活细胞呈无色。
死细胞或代谢能力微弱的衰老细胞内还原力弱，染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
三、实验材料1.酵母液体培养物和斜面培养物。
2.吕氏碱性美兰染液，革兰氏染色用碘液。
3.仪器和其他用品四、方法步骤1.制片先在载玻片中央滴加一滴0.1％吕氏碱性美蓝染液，再滴加少量水稀释。
无菌操作取试管中培养的酵母菌少许，放在吕氏碱性美蓝染液中，使菌体与染液均匀混合。
用镊子夹盖玻片一块，小心地盖在液滴上。
2.镜检将制好的水浸片放置3分钟后镜检。
先用低倍镜，再用高倍镜，观察酵母菌的形态和出芽情况，同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。
染色30分钟后再次观察，注意死活细胞比例是否发生变化。
用0.05%染液作对照同时进行上述实验。
五、注意事项1.用接种环将菌体与染液混合式不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。
实验二细菌的染色及形态观察一、目的要求1、了解细菌染色的基本原理。
2、掌握细菌的简单染、革兰氏染色及其他染色方法。
3、观察和识别细菌的形态及细菌细胞的特殊结构。
二、实验说明细菌菌体微小、而且折光率低，在显微镜下特别是在油浸物镜下几乎与背景无反差，很难看清楚，如将其染色，使折光率增大，便容易观察。
由于菌体的性质及各部分对某些染料的着色性不同，因此可以利用不同的染色方法来区别不同的细菌及其结构。
用于细菌染色的染色剂是苯环上含有发色基团和助色基团的化合物。
发色基团使化合物本身具有染色之能力，助色基团有电离特性，可以于被染物结合，使被染物着色。
染色剂有三种：酸性染色剂（电离后分子带负电荷）；碱性染色剂（电离后分子带电荷）；复合染色剂（在电离后分子不带电荷，故也称为中性染色剂）。
酸性染色剂主要用于染细胞质；碱性染色剂主要用于染核和异染颗粒等细胞结构；复合染色剂主要用来染螺旋体和立克次氏体。
三、实验材料1、显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸。
2、酒精灯、接种环、载玻片。
3、石炭酸复红染色液、革兰氏染色液、荚膜染色液、鞭毛染色液（配方见附录）。
四、方法步骤（一）简单染色法步骤：涂片干燥固定染色水洗干燥镜检。
1、涂片在干净的载玻片中央加一滴蒸馏水，以无菌操作法，从斜面上挑取少量菌种，在载玻片上和水混合后，涂成一均匀薄层。
2、干燥固定涂片让其在空气中自然干燥，有时为使其干燥得快点，也可在酒精灯上加温，但勿贤紧靠火焰。
3、固定待涂片干燥徨，手持载玻片一端，有菌膜的一面向上，在酒精灯火焰上通过几次（用手背触载玻片背面，以不烫手为宜），待冷却后，再加染料。
4、染色玻片置于水平位置。
加石炭酸复红液于菌膜部位。
染1-2min。
5、水洗倾去染液，斜置玻片，用很细水流的自来水冲洗（切勿使水流直接冲刷在菌膜处），直至洗下水呈无色为止。
6、干燥自然干燥或用吸水纸吸干。
7、镜检。
（二）革兰氏染色法步骤：涂片干燥固定结晶紫染色水洗吸干 95%酒精脱色水洗吸干蕃红复染水洗干燥镜检。
