维生素a含量测定方法

学术论坛　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｌｎｎｏｖ　两种方法测定维生素Ｄ３含量　胡鑫鹦盛翠凤　《浙江新和成股份有限公司　浙江３１　２５００）　摘要；本文此较中国药典和ＥＰ２Ｏ０２的基础上，通过试验对二种方法进行了比较。说明外标法在维生素Ｄ３含量检测上可以应用，并且　曼有利于有关物质的分析。　关键词：维生素Ｄ３　内标法　外标法　中图分类号：Ｑ５６　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７４—０９８ｘ（２Ｏ０８）ｌｌ（ａ）一０１９７—０１　将外标法和内标法进行对比实验，发现表　维生素Ｄ３的总量（　ｆ　ｆ。＋　ｉ２）ｍ　／Ａ。），并　维生素Ｄ３的校正因子Ｆ　明两方法测得结果一致，外标法可同时进行含　量与有关物质的检测。　１仪器与试药　仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ　ｌｌＯ０高效液相色谱仪，　ＶＷＤ紫外检测器。　色谱条件：　色谱柱：用硅胶为填充剂；　流动相：正己烷：正戊醇＝９９７：３；　检测波长：２５４ｎｍ；　流速：２．０ｍｌ／ｍｉｎ　进样量：２００　ｌ。　维生素Ｄ３对照品（中国药品生物制品检　定所）；　供试品：自制。　其他试剂均为分析纯。　２内标法　参照中国药典２０００年版附录ｖⅡＫ维生　素Ｄ测定法　色谱柱：　ｌｔｉｍａ　ＳｉＡｃａ（５肚ｍ，２５０　ｘ　４。　６ｒａｍ）　内标溶液的制备：称取邻苯二甲酸二甲酯　２５ｒａｇ，置２５ｍｌ量瓶中，加正己烷至刻度，摇　匀。　供试品溶液的制备：精密移取供试品原液　２ｍｌ，置２０ｍｌ棕色量瓶中，精密加内标溶液　２ｍｌ，加正己烷至刻度，摇匀。一　校正因子测定：精密量取对照品贮备溶液　和内标溶液各２ｍｌ，置２０ｍｌ量瓶中，加正己烷　至刻度，摇匀；取一定量注入液相色谱仪，计算　维生素Ｄ３的校正因子ｆ＜（１］＞。　取对照品贮备溶液２ｍｌ置２０ｍｌ量瓶中，加　入２，６一二叔丁基对甲酚结晶ｌ粒，，加热ｌ。　５小时内标溶液５ｍｌ，加正己烷摇匀；取适量注　入液相色谱仪，计算前维生素Ｄ３折算成维生　素Ｄ３的校正因子　（＝（Ａ　ｍ　一ｆｌｍ　Ａ　）／　Ａｒ２ｍｓ）。　含量测定：取供试品溶液进行测定，按下　列公式计算维生素Ｄ３及前维生素Ｄ３折算成　计算含量。　２。１线性关系考察　移取对照品贮备溶液２　０ｍｌ、３。０ｍｌ、　４．０ｍｌ、５．０ｍｌ、６。０ｍｌ于五个２０ｍｌ的容量瓶　中，加内标溶液２ｍｔ，加正己烷至刻度，摇匀得　五个不同浓度的稀释液测定。得相关系数　Ｒ　＝Ｏ．９９９８，Ｒ＝０．９９９９。　．　２。２精密度试验　取供试品共６份，依法测定，并计算相对　标准偏差，不同实验者间的偏差为０．０４％。　２。３回收率试验　采用标准加入法，每个浓度平行三次，计　算回收率。平均回收率（ｎ＝９）　为９９。９％，ＲＳＤ（　＝９）为０．５８％。　２．４样品含量测定　测定样品含量为９９．２％、ｌ（）（Ｊ．１％、９９．　６％。　３外标法　参照ＥＰ２Ｏ０２口１维生素Ｄ３含量测定方法及　中国药典２０００年版附录ｖⅡＫ维生素Ｄ测定　法　色谱柱：ＡⅡｔｊＩＩ】ａ　Ｓｉｌｉｃａ（５　ｍ，１５０×４。　６ｍｍ）　供试品溶液的配制：移取供试品原液５ｍｌ，　置５０ｍｌ棕色容量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀　即得。　对照品溶液的配制：移取对照品贮备液　５ｍｌ于５０ｍｌ棕色容量瓶中，用正己烷稀至刻　度，摇匀，即得。　校正因子测定液的配制　精密移取对照品　贮备液５ｒａｔ置５０ｍｌ棕色量瓶中，加入２，６一二　叔丁基对甲酚结晶一粒，通氮排除空气后，密　塞，置９０￣Ｃ水浴中避光加热１。５ｈ，取出迅速冷　却至室温后，用正己烷定容，摇匀，即得。　校正因子测定：分别取２００　１对照品溶　液与校正因子测定液按上述色谱条件进样分　析，记录对照品溶液中维生素Ｄ３的峰面积，及　校正因子测定液中前维生素Ｄ３与维生素Ｄ３　的峰面积，并按下式计算前维生素Ｄ３折算成　表１维生素Ｄ３含量测定精密度试验结果　ｌ复验鼋　孚　测定拣臻矗　坞缓《　》　羲鬟》　＿　羔　象　善　壤　蓦　ｇ　（甏｝　＾　雾雾　窑慧　雾露　０５　霉鐾　擎嚣　１，００　雾雾　０　羹　０　ｃ《　０　鹩　童　∞　２　瓣　ｉｌ　馨棼　警　嚣嚣　≤罐　雾嚣　巍　雾嚣　美　０　《§　幂圈鬟验者蠕熟壤蓬　０　ｉ致　Ａｒ—Ａ　Ａｒ＝—’　一　ｐ　ｒｅ　式中：Ａ，——对照品溶液中维生素Ｄ３的　峰面积；　Ａ　——校正因子测定液中维生素Ｄ３的峰　面积　Ａ　——校正因子测定液中前维生素Ｄ３　的峰面积　含量测定取供试品溶液进行测定，按下　列公式计算维生素Ｄ３及前维生素Ｄ３折算成　维生素Ｄ３的总峰面积（Ａ　＝Ａ　＋Ｆ×Ａ　２），按　外标法以峰面积计算供试品含量。　３．１线性关系考察　取对照品贮备液２．０ｍｌ、３．０ｉｎｌ、　４。０ｍｌ、５．０ｍｌ、６．０ｍｌ于五个２０ｍｌ的　容量瓶中，取此五个稀释液按上述色谱条　件进样分析。　结论：供试品溶液浓度在ｌ０．３２～３０．９６　“ｇ／ｍｌ之间，ｌｌｉ￣ｌ当于称样范围在４１％～　１２４％之间时，峰面积与其浓度呈良好的线性。　３．２精密度试验　平行６次测定供试品的含量，并计算相对　标准偏差见表ｌ。　３。３准确度　用本法测定本品三个批号的含量分别为　９９。３％、１００．０％、９９。６％。　外标法测得结果与内标法测定的结果基　本一致。　４结语　通过两种方法的比较，表明两方法测得结　果一致。三批供试品的含量分别为：９　９．　２％、ｌ　００．１％、９９．６％。　外标法可同时进行含量与有关物质的检　测，所以在进行检测时，不防采用外标法，进行　适当的改进，以更有利于进行有关物质的控　制。　参考文献　［１】中国药典．二部，２００５：附录ⅦＫ维生素　Ｄ测定法一．　【２】ＥＰ２００２维生素Ｄ３含量测定方法．　

按摩与康复医学２０１０．８（下）　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ＆Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　２０１０，Ｎｏ．２４　

维生素Ｂ　片含量测定方法的验证　

高雅杰　

（四川大学华西药学院　成都　６１ｏｏｏｏ）　论著　

摘要：目的：采用紫外分光光度法测定维生素Ｂ１片中维生素Ｂ１的含量并对该方法进行验证。方法：用紫外分光光度法在２４６ｎｍ处测定吸光　

度，并用百分吸收系数法和对照品比较法计算。结果：用紫外分光光度法测定维生素Ｂ　含量的方法专属性好；当维生素Ｂ１浓度在７．５～１７．５ｐｇ／ｍｌ　范围时线性关系良好，回归方程为Ｙ一０．０４１ＩＸ＋０．００９４，线性相关系数ｒ一１；平均回收率为９９．６０　，ＲＳＤ＝０．４５　；精密度为０．７６　；用百分吸收　

系数法计算平均标示量为１０１．７　，用对照品比较法计算平均标示量为１０４．３　。结论：用紫外分光光度法测定维生素Ｂｌ片中维生素Ｂｌ的含量操　

作简便、快速、准确、精密度好。　

关键词：紫外分光光度法维生素Ｂｌ　含量测定　、　

Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ　１　ｐｉｅｃｅ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ　

Ｇａｏ　Ｙａｊｉｅ　Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｕｓｅｓ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ　１　ｐｉｅｃｅ　ｏｆ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ　１　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｃａｒｒｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｆｉｒ—　

ｍａｒｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　２４６ｎｍ　ｐｌａｃｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｅｘｔｉｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ　ａｂｓｏｒｂｓ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　

ｏｆ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｔｅｓｔ　ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ　ｔｈｅ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ　１　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　

维生素C及其制剂的质量控制研究

一、 实验目的

测定维生素C的含量

二、 实验原理

利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化剂，可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C，而染料本身被还原成无色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚淀粉立即被还原成无色。当溶液从无色转变成为红色时，即为滴定终点。

三、 实验试剂和仪器

1. 实验材料：水果或蔬菜。

2. 仪器：（1）微量滴定管；500毫升×1；（2）量瓶：50毫升×2；（3）三角瓶；500毫升×2；（4）研钵；（5）量筒； （6）刻度吸管；10毫升×2；

3. 试剂：

（1）1%草酸：秤取5.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。

（2）2%草酸：秤取10.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。

（3）0.001N 2，6-二氯酚靛酚钠溶液：称取干燥的2，6-二氯酚靛酚钠60毫克，放入200毫升量瓶中，加热蒸馏水中100-150毫升，滴加0.01N NaOH4-5滴，强烈摇动10分钟冷却后加水至刻度。摇匀后用紧密滤纸滤于棕色瓶中，贮于冰箱中备用，有效期一周。使用前需标定（见附注）。

四、 实验步骤

样品的处理和提取： 称取4.0克新鲜样品，至研钵中，加5毫升2%草酸，研成匀浆。通过漏斗将样品提取液转移到50毫升量瓶中。残 渣再用2%草酸提取2-3次，提取液及残渣一并转入量瓶。2%草酸总量为35毫升，最后以水定容。溶液定容时若泡沫较多，可加几滴乙醇消除泡沫后再定容。 摇匀，过滤，滤液备用。

2. 样品的测定：

吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的红色，并在15秒内不消失为止。记录所用滴定液体积。

3. 空白测定：

在另一50毫升三角瓶内，放入35毫升2%草酸，并用1%草酸定溶，摇匀，取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠滴定至终点，记录染料用量。

实验十一、维生素C含量的测定

一、实验目的

1、掌握碘标准溶液的配制方法与标定原理。

2、掌握直接碘量法测定维生素C的原理、方法及其操作。

二、实验原理

用I2标准溶液可以直接测定维生素C等一些还原性的物质。维生素C分子中含有还原性的二烯醇基，能被I2定量氧化成二酮基，反应式如下：

COCCCCCH2OHOOHOHHOHH+ I2COCCCCCH2OHOOHHHOO+ 2HI

由于反应速率较快，可以直接用I2标准溶液滴定。通过消耗I2溶液的体积及其浓度即可计算试样中维生素C的含量。直接碘量法可测定药片、注射液、蔬菜、水果中维生素C的含量。

等物质的量关系:n(Vc)==n(I2)

即：310)(176%(2ICcVVm试样）

∴ Vc%=试样）()(176.02mcVI

三、仪器和试剂

(1)仪器

分析天平，250ml锥形瓶，100ml量筒，10ml量筒，酸式滴定管，滴定基管架，25ml移液管。

(2)试剂

医药维生素C药片，HAc(2 mol/L)，淀粉(0.5%)，Na2S2O3标准溶液(0.1 mol/L)，I2标准溶液(0.1 mol/L)。

三、实验步骤

1. 0.05 mol·L-1 I2标准溶液的配制与标定

将3.3g I2与5g KI置于研钵中，在通风柜中加入少量水（切不可多加！）研磨，待I2全部溶解后，将溶液转入棕色瓶中，加水稀释至250mL，摇匀。

用移液管移取25.00mL Na2S2O3 标准溶液于250mL锥形瓶中，加50mL水、5mL0.5%淀粉溶液，用I2标准溶液滴定至稳定的蓝色，30s内不褪色即为终点。平行标定三次。

2. 维生素C含量的测定

准确称取约0.2g维生素C片（研成粉末即用），置于250mL锥形瓶中，加入新煮沸过并冷却的蒸馏水100mL、10mL 2mol·L-1 HAc和5mL0.5%淀粉指定剂，立即用I2标准溶液滴定至溶液显稳定的蓝色, 30s内不褪色即为终点。平行滴定3次，计算维生素C的含量。