维生素e的含量测定方法

《 维 生 素 的 检 测 》

一、维生素E

取样品0.18g，置于100mL的量瓶中，加无水乙醇稀释到刻度，摇30s，用干滤纸滤过，弃取初滤液，吸取50mL，置于回流瓶中，加硫酸3mL，摇匀，加热回流3小时放冷，移至于100mL量瓶中，用无水乙醇洗条容器，洗液并加入量瓶中，再加入无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取25mL/L，加乙醇(95%)20mL，水10mL/L，二苯胺硫酸溶液2滴(10g/L)，用0.01mol/L硫酸铈标准液滴定结果用空白试验校正。

计算公式：(试样滴定数—空白滴定数)×标准液浓度×0.002364×8÷质量÷维生素E的标示量×100

二、维生素K3(亚硫酸氢钠甲苯酯含量测定)

标准溶液配制：取甲萘醌对照品约0.05g，置于250mL的量瓶中，用三氯甲烷溶解，并稀释到刻度，摇匀。吸取2mL置于100mL量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度，摇匀。

样品溶液的配制：取样品1.3g，置于250mL量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。吸取25mL至于分液漏斗中，加三氯甲烷40mL/L，碳酸钠溶液5mL(1/100)，剧烈振摇30s，静止分层，分出的三氯甲烷层通过预先用三氯甲烷湿润的棉花过滤到250mL的量瓶中，再加三氯甲烷40mL迅速洗条滤器，洗液并加入量瓶中，水层用三氯甲烷萃取2次，每次约20mL，萃取液过滤，并用三氯甲烷20mL洗条滤器，洗液和全部滤并到量瓶中，用三氯甲烷稀释到刻度,摇匀.吸取2mL至于100mL量瓶中,用无水乙醇稀释到刻度,摇匀.(用分光光度计在250nm波长处平行测定吸收度,用2%三氯甲烷的无水乙醇溶液做空白).

计算公式：样品溶液的吸光度×标准溶液的吸光度÷标准溶液的吸光度÷样品溶液的浓度×191.82

三、维生素B1 (硝酸硫胺含量的测定)

取样0.1g,加水50mL溶解后,加盐酸2mL,煮沸,立即滴加硅钨酸溶液10mL,继续煮沸2nim,用在80℃干燥至恒重有4号垂溶坩埚滤过,沉淀先用煮沸的盐酸溶液洗条2次,每次10mL,再用水10mL洗条一次,最后用丙酮洗条2次,每次5mL,沉淀物在80℃干燥至恒重.

第 1 页 共 2 页 测定食品中的维生素A、维生素E的基本测定方法

一、案例 乳粉是人们认识的养分品，它除了提供丰盛的蛋白质、脂肪等养分物质外，还含有大量的维生素。维生素A又名视黄醇，只存在于动物组织中，在植物体内则以胡萝卜素的形式存在。维生素A为条状淡黄色晶体，熔点62～64℃，不溶于水，能溶于乙醇、甲醇、氯仿、乙醚和苯等有机溶剂，易被氧化破坏，对酸不稳定。维生素E又称生育酚，属于酚类物质，为黄色油状液体，溶于脂溶性溶剂，对热稳定，在酸性环境比碱性环境稳定，在无氧条件下，对热与光以及对碱性环境也相对较为稳定。 二、选用的国家标准 GB／T 5009．82 2003食品中维生素A和维生素E的测定。 三、测定办法 1．皂化 称取适量样品1.0～10.0g(含维生素A约3μg，维生素E各异构体约40μg于皂化瓶中，加30mL无水乙醇，振摇使样品簇拥；加入5mL 100g／L抗坏血酸溶液和2.00mL苯并[e]芘溶液(5μg／L，内标用)，混匀，加10mL 50％氢氧化钾溶液，混匀，于沸水浴上回流30min，使皂化彻低，皂化后立刻放入冰水中冷却。 2．提取 将皂化后的样品移入分液漏斗中，用50mL水分2～3次洗皂化瓶，洗液并人分液漏斗中；用100mL无水乙醚分2次洗皂化瓶及残渣，乙醚液并入分液漏斗中；轻轻振摇分液漏斗2min，静置分层，弃去水层；每次用约50mL水将乙醚液洗至中性，约4～5次。 3．浓缩 将乙醚提取液经无水硫酸钠(约5g)滤入与旋转蒸发器配套的250～300mL球形蒸发瓶内，用约100mL乙醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠3次，并入蒸发瓶内，于55℃水浴中减压蒸馏并回收乙醚，待瓶中乙醚剩下约2mL时，取下蒸发瓶，用氮气吹于乙醚，随即加入2mL乙醇，充分混合、溶解提取物；将乙醇液移人塑料离心管中，于3000r／min下离心5min，上清液供色谱分析用。 4．液相色谱分析 色谱推举条件如下。 预柱：ODS 10μm，4mm×4．5cm 分析柱：ODS 5μm，4．6mm×25cm。 流淌相：甲醇：水= 98：2，混匀，临用前脱气。

饲料中维生素E的测定高效液相色谱法

1范围

本文件描述了饲料中维生素E的高效液相色谱测定方法。

本文件中“第一法皂化提取法”适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、复合预混合饲料和维生

素预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚）的测定，“第二法直接提取法”适用于维生素预混合饲料、复

合预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚乙酸酯）的测定。

本文件“第一法皂化提取法”的定量限为1mg/kg，“第二法直接提取法”的定量限为20mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T20195动物饲料试样的制备

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4第一法皂化提取法

注意：使用的器皿不含有氧化性物质；分液漏斗活塞玻璃表面不涂油，处理过程在避光下操作；提取过程在通风柜

中操作。

4.1原理

试样用碱溶液皂化后，经液液萃取或固相萃取净化后，用高效液相色谱仪分离测定，外标法定量。

4.2试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4.2.1水：GB/T6682，一级。

4.2.2无水乙醇：色谱纯。

4.2.3无水乙醇。

4.2.4石油醚（沸程30℃-60℃）。4.2.5甲醇：色谱纯。

4.2.6乙腈：色谱纯。

4.2.7甲酸。

4.2.8L-抗坏血酸。

4.2.9二丁基羟基甲苯（BHT）。

4.2.10无水硫酸钠。

4.2.11氢氧化钾溶液（500g/L）：称取500g氢氧化钾，加水溶解，冷却后用水定容至1000mL，混

匀。4.2.1270%乙醇溶液：取无水乙醇70mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。

4.2.1310%甲醇溶液：取甲醇10mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。

4.2.140.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水稀释，定容至1000mL，混匀。

ＨＰＬＣ法测定维生素Ｅ搽剂中维生素Ｅ的含量

目的：建立HPLC法测定维生素E搽剂中维生素E含量的方法。方法：色谱柱为SHIMADZUVP-ODSCl8柱(4.6mmx150mm)；流动相为甲醇-水(98:2)，流速为1.0 ml/min，检测波长为284nm。结果：线性范围为0.025～0.200

mg/ml,r=0.9999。平均回收率为98.80％，RSD为0.5％。结论：HPLC法测定维生素E搽剂中维生素E的含量，方法准确可靠，简单可行。可用于维生素E搽荆中维生素E的含量测定。

标签：维生素E搽剂；维生素E；高效液相色谱法；含量测定

维生素E搽剂是信阳职业技术学院附属医院的医院制剂，由维生素E、氮酮加适量无水乙醇制成，主要用于增强毛细血管抗力，改善血液循环。用于治疗单纯性紫瘢、局限性硬皮病、萎缩性硬化性苔藓、萎缩性扁平苔癣、慢性溃疡等皮肤病。为了更有效地控制产品质量。笔者建立了测定产品中维生素E含量的高效液相色谱方法，该法专属性强，结果准确。

1 仪器与试剂

仪器：日本岛津LC-20lOC高效液相色谱仪，UV／VISDetc-tor检测器,Lcsolution工作站。试剂：甲醇为色谱级，水为纯化水，其他化学试剂均为分析纯。维生素E对照品(中国药品生物制品检定所，批号：10062-0007)，维生素E搽剂(信阳职业技术学院附属医院制剂室，批号：20080312、20080421、20080518)。

2 方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱为SHIMADZU VP-ODS C18柱(46 mm×150mm)；流动相为甲醇_水(98.2)，流速为1.0ml/min,检测波长为284nm，进样体积为20 μl，柱温为室温，分别吸取对照品溶液，供试品溶液，阴性供试品溶液注入色谱仪记录色谱图，阴性供试品溶液在维生素E出峰位置无干扰。见图1-3。

2.2对照品溶液的制备

精密称定维生素E对照品25mg，置25 ml量瓶中，加无水乙醇适量，振摇使溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精取5ml，置50ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.1 mg/ml的维生素E溶液，作为对照品溶液。量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精取5 ml,置50 ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀经0，45 μm微孔滤膜滤过，即得。