肿瘤相关蛋白亚细胞结构定位的研究

蛋白质亚细胞定位的现有方法和技术蛋白质是细胞中最为重要的分子之一，它们可以通过不同的亚细胞定位来发挥特定的生物学功能。

由此，我们分离和定位蛋白质是研究细胞功能和疾病机理的关键部分。

在这篇文章中，我们将对现有的蛋白质亚细胞定位方法和技术进行概述。

1. 光学显微镜技术光学显微镜技术是最常用的细胞成像方法之一。

使用荧光标记的抗体、融合蛋白和荧光化学荧光染料等，将蛋白质可视化并定位在细胞中的不同位置。

除了普通荧光显微镜外，共聚焦显微镜（confocal microscopy）和双光子显微镜（two-photon）可以对物体进行三维成像和高分辨率成像，可以有效地提高成像的空间解析度和信号强度。

2. 分子生物学方法a.基因编辑技术基因组编辑技术如RNA干扰（RNAi）和基因敲除（gene knockout）技术能够针对特定基因，从而探究蛋白质分布的调控机理。

通过靶向特定基因的RNAi或knockout转化细胞系，可以验证蛋白质的分布是否与基因表达相关。

b.质谱分析蛋白质质谱分析是识别和鉴定蛋白质结构和定量的方法。

通过质谱仪进行电离化和光谱分析，可以发现蛋白质是否定位在细胞的不同亚细胞结构中。

3. 电子显微镜技术电子显微镜可以成像细胞中的超微结构，并确定蛋白质是否定位在细胞的不同亚细胞结构中。

透射电子显微镜（TEM）技术可以以高亮度和高分辨率成像细胞中的亚细胞结构。

扫描电子显微镜（SEM）技术可以以高分辨率成像表面微结构和蛋白质分布。

综上所述，现有的蛋白质亚细胞定位方法和技术是多种多样的，每种方法都有其优缺点。

如何选择最适合的方法则需要从具体研究问题、信号强度、时间要求以及经济成本等多个因素综合考虑。

随着技术的不断发展和创新，相信在将来会有更多的方法和技术来进一步完善我们对蛋白质准确细胞定位的认识。

综㊀㊀述㊀基金项目:国家自然科学基金(Ｎｏ.８２００２９７１)㊀作者简介:张艺新ꎬ女ꎬ研究方向:肿瘤药理学ꎬＥ－ｍａｉｌ:１１３４８０８６２５＠ｑｑ.ｃｏｍ㊀通信作者:陈真ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ教授ꎬ博士生导师ꎬ研究方向:药理学ꎬＴｅｌ:０２５－８３２７１１８１ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｃｚｃｐｕ＠１６３.ｃｏｍ肿瘤相关蛋白分子核转运机制研究进展张艺新１ꎬ戴蓓英２ꎬ杨勇３ꎬ陈真１(１.中国药科大学药学院ꎬ江苏南京２１１１９８ꎻ２.中国药科大学药物科学研究院ꎬ江苏南京２１１１９８ꎻ３.中国药科大学基础医学与临床药学学院ꎬ江苏南京２１１１９８)摘要:信号分子的核转运是多种信号传导通路的基础ꎮ肿瘤的发生和发展常与多种信号蛋白异常的亚细胞定位相关ꎬ因此阐明肿瘤相关蛋白的核转运机制对于研究肿瘤的发病机制和开发新的疗法至关重要ꎮ本文介绍了核转运系统的基本组成ꎬ并对多种重要的肿瘤相关蛋白的核转运机制进行综述ꎮ关键词:肿瘤相关蛋白分子ꎻ核转运ꎻ核转运系统ꎻ分子机制中图分类号:Ｒ７３０.２３１㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２１)１０－０６６８－００５ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２１.１０.０１０Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓＺＨＡＮＧＹｉｘｉｎ１ꎬＤＡＩＢｅｉｙｉｎｇ２ꎬＹＡＮＧＹｏｎｇ３ꎬＣＨＥＮＺｈｅｎ１(１.ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙꎬＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＮａｎｊｉｎｇ２１１１９８ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＮａｎｊｉｎｇ２１１１９８ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｙꎬＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＮａｎｊｉｎｇ２１１１９８ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｏｆｓｉｇｎａｌｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｓｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｍａｎｙｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓ.Ｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｕｍｏｒｓａｒｅｏｆｔｅｎｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅａｂｎｏｒｍａｌｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｖａｒｉｅｔｙｏｆｓｉｇｎａｌｐｒｏｔｅｉｎｓ.Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅꎬｅｌｕｃｉｄａｔｉｎｇｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｕｍｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｉｓｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｓａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｎｅｗｔｈｅｒａｐｉｅｓ.Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｔｈｅｂａｓｉｃｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｓｙｓｔｅｍａｎｄｒｅｖｉｅｗｅｄｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｍａｎｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｔｕｍｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:Ｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎꎻＮｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔꎻＮｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｓｙｓｔｅｍꎻＭｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍ㊀㊀细胞的生命活动基于错综复杂的信号传导ꎬ其中多种信号分子的传导依赖于正常运转的核转运系统(ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｓｙｓｔｅｍꎬＮＴＳ)ꎬ如转录因子入核调控下游靶基因的表达以及靶基因产物出核发挥功能等ꎮ研究表明ꎬ核转运异常会导致某些信号通路的持续激活或抑制ꎬ进而导致包括肿瘤在内的多种疾病的发生ꎮ肿瘤的发生和发展常与多种信号蛋白异常的亚细胞定位相关ꎬ阐明信号蛋白的核转运机制对于研究肿瘤发生发展过程至关重要ꎮ１㊀核转运系统的组成以及核转运机制核转运系统主要由核孔复合体(ｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｃｏｍｐｌｅｘꎬＮＰＣ)和核转运受体(ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｒｅｃｅｐｔｏｒｓꎬＮＴＲ)组成ꎬ可允许分子量大于４０ｋＤａ的大分子物质进行选择性的核－质交换ꎮＮＰＣ是镶嵌在核膜上的一种运输通道ꎬ由３０多种核孔蛋白(ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｉｎｓꎬＮＵＰ)分别构成胞质纤丝㊁胞质环㊁核质环㊁核篮等ＮＰＣ亚结构[１]ꎮ约三分之一的ＮＵＰｓ都含有苯丙氨酸－甘氨酸(ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ－ｇｌｙｃｉｎｅꎬＦＧ)重复域ꎬ该结构域可延伸至核孔的中央通道ꎬ用于构建选择性相关的网状结构[１－２]ꎮＮＴＲ主要由核蛋白－β(ｋａｒｙｏｐｈｅｒｉｎ－β)超家族组成ꎬ其中１０个参与核输入如ｉｍｐｏｒｔｉｎｓꎬ７个参与核输出如ｅｘｐｏｒｔ￣ｉｎｓꎬ２个参与双向转运ꎬ以及１个尚未鉴定的蛋白[３－４]ꎮ通常ꎬｉｍｐｏｒｔｉｎ－α可识别货物蛋白的核定位序列(ｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅꎬＮＬＳ)并与之结合ꎬ然后与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－β结合形成 ＮＬＳ/ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α/ｉｍｐｏｒｔｉｎ－β 三聚体[５]ꎮ此外ꎬｉｍｐｏｒｔｉｎ－β也可直接与ＮＬＳ序列结合ꎬ而不依赖于ｉｍｐｏｒｔｉｎ－αꎮ在这两种情况下ꎬｉｍｐｏｒｔｉｎｓ和货物蛋白复合体均可与ＮＵＰ的ＦＧ重复域结合并通过ＮＰＣ进入核内ꎬ然后与Ｒａｎ－ＧＴＰ[Ｒａｎ(ｒａｓ－ｒｅｌａｔｅｄｎｕｃｌｅａｒｐｒｏｔｅｉｎ)ｉｎｃｏｍｐｌｅｘｗｉｔｈＧＴＰ]结合ꎬ从而使货物蛋白与ｉｍｐｏｒｔｉｎｓ解离ꎬ随后ｉｍｐｏｒｔｉｎｓ可与Ｒａｎ结合ꎬ通过其特定的核输出受体ｅｘｐｏｒｔｉｎ－２重新穿梭至胞质内[６]ꎬ以进行下一次的核转运ꎮ值得注意的是ꎬ有些蛋白可直接与ＮＵＰ结合并转运至核内ꎬ而不依赖于ＮＴＲꎬ如β－ｃａｔｅｎｉｎ㊁ＳＭＡＤｓ等[７]ꎮ在出核转运过程中ꎬ货物蛋白可通过其核输出序列(ｎｕｃｌｅａｒｅｘｐｏｒｔｓｅｑｕｅｎｃｅꎬＮＥＳ)与ｅｘｐｏｒｔｉｎｓ和Ｒａｎ－ＧＴＰ在核内形成三聚体ꎬ通过扩散作用出核ꎮ到达胞质后ꎬＧＴＰ被水解成ＧＤＰꎬ货物蛋白被释放至胞质内[５ꎬ８]ꎮ２　肿瘤相关信号分子的核转运机制２.１㊀ｐ５３信号通路㊀ｐ５３是一种肿瘤抑制蛋白ꎬ可通过调控细胞周期㊁细胞凋亡㊁ＤＮＡ损伤修复等避免癌变的发生ꎬ因此其被称为 基因组守护者 ꎮ临床上约５０％的肿瘤患者都存在ｐ５３的突变[９]ꎮｐ５３中ＮＬＳ的泛素化可阻碍其与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α３结合ꎬ并抑制其向核内转运ꎬ滞留在胞质内的ｐ５３可被蛋白酶体降解ꎬ使得ｐ５３维持在较低的表达水平ꎮ在ＤＮＡ损伤㊁癌基因异常激活等应激条件下ꎬｐ５３泛素化水平降低ꎬ从而导致其ＮＬＳ与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α３结合[１０]ꎬ促进ｐ５３向核内转运ꎬ入核的ｐ５３可形成四聚体ꎬ使其ＮＥＳ被包裹在内ꎬ并导致其不能与ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１结合而被滞留在核内[１１]ꎬ从而持续激活下游信号通路ꎮ综上ꎬ早期ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α３介导的ｐ５３主动转运增强以及后期ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１介导的ｐ５３核输出受阻均与ＤＮＡ损伤㊁癌基因异常激活等应激反应相关[１２]ꎮ此外ｐ５３/ＭＤＭ２调节因子ＲＹＢＰ的亚细胞定位对于ｐ５３功能的发挥十分重要[１３]ꎮＴａｎ等[１３]的研究表明ꎬ野生型ＲＹＢＰ主要定位于核内ꎬ将其ＮＬＳ进行突变后ꎬＲＹＢＰ则主要定位于胞质内ꎮ胞质定位的ＲＹＢＰ突变体可显著抑制ＭＤＭ２介导的ｐ５３泛素化ꎬ从而抑制ｐ５３的降解并促使其向核内转运ꎮ因此ꎬ相比于野生型ＲＹＢＰꎬ定位于胞质的ＲＹＢＰ突变体可显著抑制细胞增殖并诱导其凋亡ꎬ这将为临床肿瘤的治疗提供新的思路[１３]ꎮ核转运复合体除了可以介导ｐ５３的核转运之外ꎬ还参与调控ｐ５３靶基因的表达ꎬ但这种功能不依赖于核转运过程ꎮ例如ｅｘｐｏｒｔｉｎ－２可以与ｐ５３靶基因(如ＴＰ５３－ＡＩＰ)的启动子结合ꎬ从而诱导其表达[１４]ꎮ此外ꎬ靶向ＲＮＡｉ筛选结果显示ꎬＮＵＰ９８可通过与ｐ２１[１５](ＣＤＫＮ１Ａꎬｐ５３下游的细胞周期调控因子[１６])ｍＲＮＡ的３ᶄＵＴＲ区结合ꎬ从而在转录后水平调节ｐ２１的表达ꎬ避免ｐ２１被外泌体降解ꎮｐ２１在肿瘤生物学方面具有复杂的作用ꎬ既可抑制肿瘤的生长ꎬ但是在ｐ５３缺失的情况下又能促进肿瘤细胞的增殖ꎮ其复杂的生物学功能与多种决定因素相关ꎬ其中就包括ｐ２１的亚细胞定位[１７－１８]ꎮ作为ｐ５３的下游靶基因ꎬ核内的ｐ２１通过其对细胞周期的调控作用抑制肿瘤细胞的增殖[１７－１９]ꎬ但是胞质内的ｐ２１可通过抑制ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ３㊁ｃａｓｐａｓｅ８ꎬ以及ｃａｓｐａｓｅ１０发挥抗凋亡作用ꎬ因此胞质内的ｐ２１具有致癌性并可导致较差的预后[１７－１９]ꎮＥｘｐｏｒｔｉｎ－１可介导ｐ２１的核输出[２０]ꎬ因此ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１的过表达可促进ｐ２１在胞质中的积累ꎬ从而发挥其促癌作用ꎮ２.２㊀ＷＮＴ/β－ｃａｔｅｎｉｎ信号通路㊀ＣＴＮＮＢ１外显子３的错义突变常会导致ＷＮＴ级联信号的异常激活ꎮ在这一过程中ꎬβ－ｃａｔｅｎｉｎ在核内积聚ꎬ并与淋巴增强因子(ＬＥＦ)/Ｔ细胞因子(ＴＣＦ)相互作用ꎬ驱动ＭＹＣ㊁ＣＣＮＤ１等促癌基因的表达[２１－２２]ꎬ从而促进肝癌的发生ꎮ由于β－ｃａｔｅｎｉｎ不含有ＮＬＳꎬ因此其核转运不依赖于ＮＴＲ和Ｒａｎ－ＧＴＰ[７]ꎬ而是通过直接与ＮＵＰ６２㊁ＮＵＰ９８㊁ＮＵＰ１５３㊁ＮＵＰ３５８结合并向核内转运[２３]ꎮ截短体实验表明ꎬβ－ｃａｔｅｎｉｎ通过其Ｃ端以及ＡＲＭ重复序列(Ａｒｍａｄｉｌｌｏｒｅｐｅａｔｓ)与ＮＵＰ结合被转运至核内[２４]ꎬ同样该区域可与Ｒａｎ－ＢＰ３结合介导β－ｃａｔｅｎｉｎ的出核转运[２４－２５]ꎮ尽管Ｒａｎ－ＢＰ３是ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１的辅助因子ꎬ但是β－ｃａｔｅｎｉｎ的核输出并不依赖于ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１[２５]ꎮ综上所述ꎬβ－ｃａｔｅｎｉｎ的入核和出核转运均不依赖于ＮＴＲꎮ２.３㊀ＮＦ－κＢ信号通路㊀ＮＦ－κＢ信号通路在炎症和免疫反应中发挥重要作用ꎬ并且与炎症相关型肿瘤的发生和发展密切相关ꎮＮＦ－κＢ作为转录因子可激活下游靶基因从而调控细胞增殖㊁凋亡㊁分化㊁应激和免疫应答等细胞活动[２６]ꎮＮＦ－κＢ是由ｐ５０㊁ｐ５２㊁ｐ６５(ＲＥＬＡ)㊁ｃ－ＲＥＬ㊁ＲＥＬＢ５种亚基两两组合形成的二聚体ꎬ多数情况下是由ｐ５０和ｐ６５组成异二聚体[２６]ꎮＩκＢｓ(如ＩκＢα㊁ＩκＢβ)是ＮＦ－κＢ的抑制剂ꎬ其通过与ＮＦ－κＢ结合从而阻碍ＮＦ－κＢ的ＮＬＳ序列与ＮＴＲ结合ꎬ从而将ＮＦ－κＢ阻滞在胞质内[２７]ꎮ当细胞受胞外信号刺激后ꎬＩκＢ激酶复合体使ＩκＢ磷酸化ꎬ随后导致其泛素化并被蛋白酶体降解ꎬ从而暴露ＮＦ－κＢ的ＮＬＳꎬ随后ＮＦ－κＢ可迅速被转运至核内ꎬ诱导相关基因的表达[２７]ꎮＴＮＦ－α可诱导ＮＦ－κＢ(ｐ５０/ｐ６５)向核内转运[２７]ꎬ该转运过程由ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α３以及ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α４介导ꎮ此外ꎬＮＦ－κＢ亚基与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α的结合具有特异性ꎬ如ｐ５２可直接与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α３㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α４㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α６结合ꎻｃ－ＲＥＬ可与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α６㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α７结合ꎻＲＥＬＢ可与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α６结合[２７]ꎮ值得注意的是ꎬＮＦ－κＢ二聚体与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α结合的特异性仅取决于其中一个亚基ꎬ如ＲＥＬＢ介导ｐ５２/ＲＥＬＢ二聚体与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α的结合ꎬｐ５２则介导ｐ５２/ｐ６５二聚体与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α的结合[２８]ꎮＮＦ－κＢ不仅可与ＮＴＲ结合ꎬ同时还可与ＮＵＰ８８相互作用ꎮ过表达的ＮＵＰ８８可抑制ＮＦ－κＢ的核输出ꎬ从而导致其在核内积聚[２９－３１]ꎮ２.４㊀Ｒａｓ/ＭＡＰＫ和ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴ信号通路㊀受体酪氨酸激酶(ＲＴＫ)如胰岛素样生长因子受体(ＩＧＦ－Ｒ１)ꎬ可通过Ｒａｓ/Ｒａｆ/ＭＥＫ/ＥＲＫ信号通路促进细胞增殖和存活ꎬ亦可通过ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴ信号通路促进蛋白质的合成以及葡萄糖代谢ꎬ最终发挥促肿瘤作用[３２]ꎮ细胞外信号调节激酶(ＥＲＫ１/２)的亚细胞定位对于Ｒａｓ/Ｒａｆ/ＭＥＫ/ＥＲＫ激酶级联反应至关重要ꎮ在生理条件下ꎬＭＥＫ１/２可将ＥＲＫ１/２锚定在细胞质中[３３]ꎮ当接受外界刺激后ꎬＭＥＫ１/２对于ＥＲＫ１/２的磷酸化修饰导致其构象发生改变并与ＭＥＫ１/２亚基分离ꎬ随后ｉｍｐｏｒｔｉｎ－７识别ＥＲＫ１/２激酶插入区中磷酸化的ＳＰＳ(Ｓｅｒ－Ｐｒｏ－Ｓｅｒ)基序[３４]ꎬ从而将ＥＲＫ１/２转运至核内而不依赖于ｉｍｐｏｒｔｉｎ－αꎮ也有研究证明ＥＲＫ２可通过ＮＴＲ依赖的方式入核[３５－３６]ꎬ其核输出依赖于ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１[３７]ꎮ胞质内Ｃａ２＋浓度也可影响ＥＲＫ２的亚细胞定位ꎬ高浓度的Ｃａ２＋可增加ＥＲＫ２与ＮＵＰ１５３的结合ꎬ使ＥＲＫ２滞留在核膜上从而抑制其向核内转运[３８]ꎮ在ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴ信号通路中ꎬ磷酸化的ＡＫＴ可抑制ＴＳＣ１和ＴＳＣ２ꎬ从而激活ｍＴＯＲＣ１ꎮ激活的ｍＴＯＲＣ１对真核细胞翻译起始因子(ｅＩＦ４Ｅ)结合蛋白(４Ｅ－ＢＰｓ)进行磷酸化修饰ꎬ使其与ｅＩＦ４Ｅ分离ꎮ游离的ｅＩＦ４Ｅ可使ＮＰＣ胞质侧的成分发生重排ꎬ从而促进ｅＩＦ４Ｅ下游靶基因ｍＲＮＡ(如ＣｙｃｌｉｎＤ１㊁ｃ－ＭＹＣ㊁ＭＤＭ２)向胞质内转运并翻译成蛋白质[３９－４０]ꎮ有研究表明ꎬ在上述过程中ꎬｅＩＦ４Ｅ可促进Ｒａｎ－ＢＰ１以及ＤＤＸ１９的表达ꎬ抑制ＮＵＰ３５８/Ｒａｎ－ＢＰ２表达ꎬ并能使ＮＵＰ２１４重新定位ꎮ相反ꎬＮＵＰ３５８/Ｒａｎ－ＢＰ２过表达可抑制ｅＩＦ４Ｅ靶基因ｍＲｎａ的核输出ꎬ从而阻止肿瘤恶化[４０]ꎮ２.５㊀ＪＡＫ/ＳＴＡＴ信号通路㊀ＪＡＫ/ＳＴＡＴ信号通路可介导多种细胞因子ꎬ如表皮生长因子(ＥＧＦ)㊁粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(ＧＭ－ＣＳＦ)㊁白介素(ＩＬ)㊁干扰素(ＩＮＦ)等的信号传导ꎬ从而参与调节细胞增殖㊁分化㊁免疫等重要的生物学过程ꎮＪＡＫ/ＳＴＡＴ信号通路在多种血液瘤和实体瘤中均处于持续激活状态[４１]ꎮ当上述细胞因子与胞膜上相应的受体结合时ꎬ后者形成二聚体ꎬ从而激活胞内的酪氨酸激酶(ＪＡＫ)ꎮ活化的ＪＡＫ可使转录因子ＳＴＡＴ磷酸化并形成二聚体ꎬ随后被转运至核内ꎬ从而调节下游靶基因的表达ꎮＳＴＡＴ１和ＳＴＡＴ３可以较高的亲和力直接与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５结合[４２]ꎬ同时ＳＴＡＴ３与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α７也存在较弱的相互作用ꎬ而ＳＴＡＴ５ａ以及ＳＴＡＴ５ｂ则不与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α结合[４３]ꎮＲｉｋｕ等[４２]的研究表明ꎬＳＴＡＴ１与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５的结合依赖于ＳＴＡＴ１ＤＮＡ结合域中４１０~４１３位的氨基酸ꎮＳＴＡＴ３与ｉｍ￣ｐｏｒｔｉｎ－α５的结合则依赖于ＳＴＡＴ３中２１４和２１５位的精氨酸ꎬ其４１４和４１７位的精氨酸虽不直接参与ＳＴＡＴ３与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５的结合ꎬ但对于维持ＳＴＡＴ３二聚体的构象至关重要[４３]ꎮ在出核转运方面ꎬＳＴＡＴ１中４００~４０９位氨基酸ꎬ以及其卷曲螺旋结构域中３０２~３１４位的氨基酸均可充当ＮＥＳ与ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１结合ꎬ从而促进ＳＴＡＴ１向胞质内转运[４２ꎬ４４]ꎮ值得注意的是ＳＴＡＴ１４００~４０９位的ＮＥＳ与其４１０~４１３位的ＮＬＳ相邻ꎬ因此ＳＴＡＴ１中ＮＥＳ的突变不仅能影响其与ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１的结合ꎬ同时也可能干扰其ＮＬＳ与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α５的相互结合[４２]ꎮ２.６㊀ＴＧＦ－β信号通路㊀ＴＧＦ－β超家族配体与ＴＧＦ－β受体Ⅱ结合ꎬ后者可催化Ⅰ型受体的丝氨酸残基磷酸化并使其活化ꎬ活化的Ⅰ型受体可使ＳＭＡＤ蛋白磷酸化并转运至核内ꎬ从而与核内的其他辅因子一起调节靶基因的转录[４５]ꎮ由于ＴＧＦ－β信号通路通常会抑制细胞的生长ꎬ因此该通路的失活可促进肿瘤的发生和发展[４５]ꎮ此外ꎬＴＧＦ－β受体和ＳＭＡＤ蛋白的突变在肿瘤中均有报道[４５]ꎮＴＧＦ－β诱导的ＳＭＡＤ２㊁３磷酸化可降低其与ＳＡＲＡ(定位于细胞质的ＳＭＡＤ保留因子)的结合ꎬ从而促使其向核内转运[４６]ꎬ但是ＳＭＡＤ２㊁３的入核转运并不依赖于该磷酸化过程[４６]ꎮＳＭＡＤ２㊁３的ＭＨ２结构域含有３个疏水口袋ꎬ该疏水口袋可与ＣＡＮ/ＮＵＰ２１４㊁ＮＵＰ１５３的ＦＧ重复域结合ꎬ从而促进ＳＭＡＤ２㊁３的入核转运[４６]ꎮ虽然ＳＭＡＤ２的核转运不依赖于ＮＴＲꎬ但是ｉｍｐｏｒｔｉｎ－β可通过与ＣＡＮ/Ｎｕｐ２１４的竞争性结合抑制ＳＭＡＤ２向核内转运[４７]ꎮ磷酸酶ＰＰＭ１Ａ可将ｐ－ＳＭＡＤ２㊁３去磷酸化ꎬ以促进ＲａｎＢＰ３与ＳＭＡＤ２㊁３的结合ꎬ从而促进ＳＭＡＤ２㊁３的出核转运[４８]ꎮＳＭＡＤ蛋白家族包括Ｒ－ＳＭＡＤ㊁Ｃｏ－ＳＭＡ㊁Ｉ－ＳＭＡＤ３个亚家族ꎬ分别为ＳＭＡＤ１－９[４９]ꎮ与ＳＭＡＤ２㊁３相似ꎬＳＭＡＤ４的入核转运同样不依赖于ＮＴＲꎬ是由ＣＡＮ/ＮＵＰ２１４以及ＮＵＰ１５３介导的ꎬ但是该过程不受ＳＡＲＡ的影响[４６]ꎮＳＭＡＤ４的出核转运依赖于ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１ꎮ磷酸化的ＳＭＡＤ２㊁３或其他转录辅助因子可通过与ＳＭＡＤ４结合ꎬ从而干扰ＳＭＡＤ４与ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１的相互作用ꎬ导致ＳＭＡＤ４在细胞核中积聚[４６]ꎮ２.７㊀人端粒酶催化亚基(ｈＴＥＲＴ)㊀端粒是真核染色体末端的核蛋白复合物ꎬ对于维持染色体的完整性至关重要ꎮ高度保守的端粒ＤＮＡ在每次复制后都会缩短ꎬ当端粒缩短至一定程度ꎬ细胞则停止分裂ꎮ因此ꎬ端粒的长短和稳定性决定了细胞的寿命ꎬ并与细胞的衰老和癌变密切相关[５０]ꎮ染色体末端端粒重复序列的从头合成需要端粒酶的催化ꎬ该酶在成人体细胞中不表达ꎬ但肿瘤细胞可通过激活端粒酶的表达来躲避 端粒危机 ꎬ从而获得永生化ꎮ肿瘤细胞内端粒酶的活化依赖于人端粒酶催化亚基(ｈＴＥＲＴ)的入核转运ꎮ有研究表明ꎬ在ｈＴＥＲＴ的２２２~２２４位以及２３６~２４０位的氨基酸可作为其ＮＬＳꎬ同时ꎬ这两个ＮＬＳ之间的２２７位丝氨酸的磷酸化对于ｈＴＥＲＴ的入核转运也是必需的[５１]ꎮＮＬＳ的磷酸化可导致ｈＴＥＲＴ构象改变并暴露其ＮＬＳ[５１－５２]ꎬ后者可与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α１㊁３㊁５以及ｉｍｐｏｒｔｉｎ－β结合ꎬ并以Ｒａｎ依赖的方式将ｈＴＥＲＴ转运至核内[５１]ꎮ其次ꎬｈＴＥＲＴ磷酸化导致的构象转换也可能暴露其与其他因子结合的位点ꎬ例如ꎬＡＫＴ激酶对ｈＴＥＲＴ的磷酸化可促进ｈＴＥＲＴ与ＮＦ－κＢｐ６５亚基的结合ꎬ二者结合后可迅速转移至核内ꎬ从而激活端粒酶并使端粒得到延长[５３]ꎮｈＴＥＲＴ９７０－９８１位的ＮＥＳ通过与ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１结合从而将ｈＴＥＲＴ转运至胞质内[５４]ꎮ有研究表明ꎬ１４－３－３蛋白可通过其Ｃ端与ｈＴＥＲＴ的Ｃ端结合ꎬ抑制ｈＴＥＲＴ的ＮＥＳ与ｅｘ￣ｐｏｒｔｉｎ－１的结合ꎬ从而抑制ｈＴＥＲＴ向核外转运[５４]ꎮ２.８㊀ＪＮＫ/ｃ－Ｊｕｎ信号通路㊀ＪＮＫ可被多种细胞因子(如肿瘤坏死因子α㊁白介素－１㊁表皮生长因子)㊁应激条件(如氧化损伤ꎬ电离辐射)等多种因素激活并转运至核内ꎬ核内的ＪＮＫ可调节包括ｃ－Ｊｕｎ在内的多种转录因子的活性ꎬ转录因子ｃ－Ｊｕｎ可通过激活其下游靶基因从而调控肿瘤的发生和发展[５５]ꎮ在肿瘤中ꎬ异常激活的ｃ－Ｊｕｎ可使ＰＩ３Ｋ㊁ＥＲＫ介导的增殖相关通路持续活化[５６]ꎬ并可使ｐ５３㊁Ｂｃｌ－２介导的凋亡通路受阻ꎬ从而加速肿瘤的生长ꎮ在此过程中ꎬｃ－Ｊｕｎ的活化依赖于其在细胞核中的定位ꎬ因此ｃ－Ｊｕｎ在细胞核中的异常积累是导致肿瘤发生和发展的重要因素ꎮｃ－Ｊｕｎ有两种入核方式ꎮ首先ꎬ它可通过其２７３~２７６位的ＮＬＳ与多种ＮＴＲ(如ｉｍｐｏｒｔｉｎ－５㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－７㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－８㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－９㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－１３㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－β和ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎ)结合ꎬ并以Ｒａｎ依赖的方式转运至核内ꎬ这使得ｃ－Ｊｕｎ的核转运不依赖于某种特定的ＮＴＲꎬ从而确保其能稳定地转运至核内发挥作用[５７]ꎮ但是ｉｍｐｏｒｔｉｎ－α会抑制ｃ－Ｊｕｎ向核内转运[５８]ꎮ值得注意的是ꎬ在ＮＬＳ中ꎬ２７３和２７５位氨基酸的突变会显著降低ｃ－Ｊｕｎ与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－５㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－９㊁ｉｍｐｏｒｔｉｎ－１３以及ｉｍｐｏｒｔｉｎ－β的结合ꎬ而几乎不影响其与ｉｍｐｏｒｔｉｎ－７或ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎ的结合[５８]ꎮ其次ꎬｃ－Ｊｕｎ可通过 搭载 机制转运至核内ꎮｃ－Ｊｕｎ可与其他含有碱性亮氨酸拉链的内源性蛋白(如ｃ－Ｆｏｓ)形成异源二聚体ꎬ然后通过这些蛋白的ＮＬＳ与ｉｍｐｏｒｔｉｎｓ结合ꎬ从而转运至核内[５７－５８]ꎮ这些异二聚体在通过ＮＰＣ时可能需要多种转运蛋白的参与[７３]ꎮ有研究表明ꎬｃ－Ｊｕｎ的入核不依赖于ＪＮＫ介导的磷酸化以及二者的相互作用[５７]ꎮ但是ꎬｃ－Ｊｕｎ与ＪＮＫ的结合可促进ＪＮＫ向核内转运[５７]ꎮｃ－Ｊｕｎ在核内的积累不依赖于其ＤＮＡ结合能力ꎬ其核输出也不依赖于ｅｘｐｏｒｔｉｎ－１[５７]ꎮ３　总结与展望以往对肿瘤发生发展的机制研究ꎬ大多集中在信号蛋白的异常表达或基因的异常转录上ꎬ而较少关注蛋白在亚细胞定位方面的差异ꎮ本文着重介绍了８种经典的肿瘤相关蛋白的核转运机制ꎬ这将有助于了解肿瘤发生和发展的机制ꎬ并对肿瘤治疗及预后评估至关重要ꎮ未来需要进一步的研究来阐明核转运蛋白作为诊断㊁预后标志物ꎬ以及临床治疗靶标的潜力ꎮ参考文献:[１]㊀ＢＥＣＫＭꎬＨＵＲＴＥ.Ｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｃｏｍｐｌｅｘ:Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｉｔｓｆｕｎｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌꎬ２０１７ꎬ１８(２):７３－８９.[２]ＨÜＬＳＭＡＮＮＢＢꎬＬＡＢＯＫＨＡＡＡꎬＧÖＲＬＩＣＨＤ.Ｔｈｅｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｏｆｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｓｐｒｏｖｉｄｅｓｄｉｒｅｃｔｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓｅｌｅｃ￣ｔｉｖｅｐｈａｓｅｍｏｄｅｌ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２０１２ꎬ１５０(４):７３８－７５１.[３]ＫＩＭＵＲＡＭꎬＩＭＡＭＯＴＯＮ.ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｔｈｅＩｍｐｏｒｔｉｎ－βＦａｍｉｌｙ－ＤｅｐｅｎｄｅｎｔＮｕｃｌｅｏｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃＴｒａｎｓｐｏｒｔＰａｔｈｗａｙｓ[Ｊ].Ｔｒａｆｆｉｃꎬ２０１４ꎬ１５(７):７２７－７４８.[４]ＰＵＭＲＯＹＲＡꎬＣＩＮＧＯＬＡＮＩＧ.Ｄｉｖｅｒｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｍｐｏｒｔｉｎ－αｉｓｏ￣ｆｏｒｍｓｉｎｃｅｌｌｕｌａｒｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇａｎｄｄｉｓｅａｓｅｓｔａｔｅｓ[Ｊ].ＢｉｏｃｈｅｍＪꎬ２０１５ꎬ４６６(１):１３－２８.[５]ＭＯＲＡꎬＷＨＩＴＥＭＡꎬＦＯＮＴＯＵＲＡＢＭＡ.Ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇｉｎｈｅａｌｔｈａｎｄｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＣｕｒｒＯｐｉｎＣｅｌｌＢｉｏｌꎬ２０１４ꎬ２８(１):２８－３５. [６]ＫＵＴＡＹＵꎬＢＩＳＣＨＯＦＦＦＲꎬＫＯＳＴＫＡＳꎬｅｔａｌ.Ｅｘｐｏｒｔｏｆｉｍｐｏｒｔｉｎａｌｐｈａｆｒｏｍｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓｉｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙａｓｐｅｃｉｆｉｃｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｆａｃｔｏｒ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ１９９７ꎬ９０(６):１０６１－１０７１.[７]ＷＡＧＳＴＡＦＦＫＭꎬＪＡＮＳＤＡ.Ｉｍｐｏｒｔｉｎｓａｎｄｂｅｙｏｎｄ:Ｎｏｎ－ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ[Ｊ].Ｔｒａｆｆｉｃꎬ２００９ꎬ１０(９):１１８８－１１９８. [８]ＷＥＮＴＥＳＲꎬＲＯＵＴＭＰ.Ｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｃｏｍｐｌｅｘａｎｄｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔ[Ｊ].ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂＰｅｒｓｐｅｃｔＢｉｏｌꎬ２０１０ꎬ２(１０):ａ０００５６２.[９]ＢＹＫＯＶＶＪＮꎬＥＲＩＫＳＳＯＮＳＥꎬＢＩＡＮＣＨＩＪꎬｅｔａｌ.Ｔａｒｇｅｔｉｎｇｍｕｔａｎｔｐ５３ｆｏｒｅｆｆｉｃｉｅｎｔｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＣａｎｃｅｒꎬ２０１８ꎬ１８(２):８９－１０２.[１０]ＭＡＲＣＨＥＮＫＯＮＤꎬＨＡＮＥＬＷꎬＬＩＤꎬｅｔａｌ.Ｓｔｒｅｓｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄｎｕｃｌｅａｒｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｐ５３ｉｓｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｏｎａｎｄｉｍ￣ｐｏｒｔｉｎ－α３ｂｉｎｄｉｎｇ[Ｊ].ＣｅｌｌＤｅａｔｈａｎｄＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎꎬ２０１０ꎬ１７(２):２５５－２６７.[１１]ＳＴＯＭＭＥＬＪＭꎬＭＡＲＣＨＥＮＫＯＮＤꎬＪＩＭＥＮＥＺＧＳꎬｅｔａｌ.Ａｌｅｕｃｉｎｅ－ｒｉｃｈｎｕｃｌｅａｒｅｘｐｏｒｔｓｉｇｎａｌｉｎｔｈｅｐ５３ｔｅｔｒａｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｄｏ￣ｍａｉｎ:ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｐ５３ａｃｔｉｖｉｔｙｂｙＮＥＳｍａｓｋｉｎｇ[Ｊ].ＥＭＢＯＪꎬ１９９９ꎬ１８(６):１６６０－１６７２.[１２]ＭＡＲＩＮＥＪＣ.Ｐ５３ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ:Ｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｃｅｏｆｎｕｃｌｅａｒｉｍｐｏｒｔ[Ｊ].ＣｅｌｌＤｅａｔｈＤｉｆｆｅｒꎬ２０１０ꎬ１７(２):１９１－１９２.[１３]ＴＡＮＫꎬＺＨＡＮＧＸꎬＣＯＮＧＸꎬｅｔａｌ.ＴｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒＲＹＢＰｈａｒｂｏｒｓｔｈｒｅｅｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌｓａｎｄｉｔｓｃｙｔｏｐｌａｓｍ－ｌｏｃａｔｅｄｍｕｔａｎｔｅｘｅｒｔｓｍｏｒｅｐｏｔｅｎｔａｎｔｉ－ｃａｎｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｈａｎｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｗｉｌｄｔｙｐｅ[Ｊ].ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌꎬ２０１７(２９):１２７－１３７.[１４]ＴＡＮＡＫＡＴꎬＯＨＫＵＢＯＳꎬＴＡＴＳＵＮＯＩꎬｅｔａｌ.ｈＣＡＳ/ＣＳＥ１ＬＡｓｓｏｃｉ￣ａｔｅｓｗｉｔｈＣｈｒｏｍａｔｉｎａｎｄＲｅｇｕｌａｔｅｓＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳｅｌｅｃｔｐ５３ＴａｒｇｅｔＧｅｎｅｓ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２００７ꎬ１３０(４):６３８－６５０.[１５]ＳＩＮＧＥＲＳꎬＺＨＡＯＲꎬＢＡＲＳＯＴＴＩＡＭꎬｅｔａｌ.ＮｕｃｌｅａｒＰｏｒｅＣｏｍｐｏ￣ｎｅｎｔＮｕｐ９８ＩｓａＰｏｔｅｎｔｉａｌＴｕｍｏｒＳｕｐｐｒｅｓｓｏｒａｎｄＲｅｇｕｌａｔｅｓＰｏｓｔｔ￣ｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳｅｌｅｃｔｐ５３ＴａｒｇｅｔＧｅｎｅｓ[Ｊ].ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｅｌｌꎬ２０１２ꎬ４８(５):７９９－８１０.[１６]ＥＬ－ＤＥＩＲＹＷＳꎬＴＯＫＩＮＯＴꎬＶＥＬＣＵＬＥＳＣＵＶＥꎬｅｔａｌ.ＷＡＦ１ꎬａｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｄｉａｔｏｒｏｆｐ５３ｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ１９９３ꎬ７５(４):８１７－８２５.[１７]ＯＨＫＯＳＨＩＳꎬＹＡＮＯＭꎬＭＡＴＳＵＤＡＹ.Ｏｎｃｏｇｅｎｉｃｒｏｌｅｏｆｐ２１ｉｎｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓｓｕｇｇｅｓｔｓａｎｅｗｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｔｒａｔｅｇｙ[Ｊ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌꎬ２０１５ꎬ２１(４２):１２１５０－１２１５６.[１８]ＡＢＢＡＳＴꎬＤＵＴＴＡＡ.Ｐ２１ｉｎｃａｎｃｅｒ:Ｉｎｔｒｉｃａｔｅｎｅｔｗｏｒｋｓａｎｄｍｕｌｔｉｐｌｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗｓＣａｎｃｅｒꎬＮａｔｕｒｅＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＧｒｏｕｐꎬ２００９ꎬ９(６):４００－４１４.[１９]ＲＯＭＡＮＯＶＶＳꎬＲＵＤＯＬＰＨＫＬ.ｐ２１ｓｈａｐｅｓｃａｎｃｅｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙꎬＮａｔｕｒｅＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＧｒｏｕｐꎬ２０１６ꎬ１８(７):７２２－７２４.[２０]ＧＲＡＶＩＮＡＧＬꎬＳＥＮＡＰＥＤＩＳＷꎬＭＣＣＡＵＬＥＹＤꎬｅｔａｌ.Ｎｕｃｌｅｏ－ｃｙ￣ｔｏｐｌａｓｍｉｃｔｒａｎｓｐｏｒｔａｓａｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒｇｅｔｏｆｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＪＨｅｍａｔｏｌＯｎｃｏｌꎬ２０１４(７):８５.[２１]ＨÄＦＮＥＲＡＫꎬＫＡＨＮＴＡＳꎬＳＴＥＩＮＨＩＬＢＥＲＤ.Ｂｅｙｏｎｄｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｔｈｅｎｏｎｃａｎｏｎｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆ５－ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ[Ｊ].Ｐｒｏｓ￣ｔａｇｌａｎｄｉｎｓＯｔｈｅｒＬｉｐｉｄＭｅｄｉａｔꎬ２０１９(１４２):２４－３２.[２２]ＨＡＭＡＤＡＦ.Ｗｎｔｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＫａｉｂｏｇａｋｕＺａｓｓｈｉꎬ２００９ꎬ８４(４):１１１－１１２.[２３]ＳＨＡＲＭＡＭꎬＪＡＭＩＥＳＯＮＣꎬＪＯＨＮＳＯＮＭꎬｅｔａｌ.ＳｐｅｃｉｆｉｃＡｒｍａｄｉｌｌｏｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅｓｆａｃｉｌｉｔａｔｅβ－ｃａｔｅｎｉｎｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｌｉｖｅｃｅｌｌｓｖｉａｄｉｒｅｃｔｂｉｎｄｉｎｇｔｏｎｕｃｌｅｏｐｏｒｉｎｓＮｕｐ６２ꎬＮｕｐ１５３ꎬａｎｄＲａｎＢＰ２/Ｎｕｐ３５８[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２０１２ꎬ２８７(２):８１９－８３１.[２４]ＫＯＩＫＥＭꎬＫＯＳＥＳꎬＦＵＲＵＴＡＭꎬｅｔａｌ.ｂｅｔａ－Ｃａｔｅｎｉｎｓｈｏｗｓａｎｏ￣ｖｅｒｌａｐｐｉｎｇｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｂｕｔｄｉｓｔｉｎｃｔｍｏｌｅｃｕｌａｒｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｆｏｒｉｔｓｂｉｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌｐａｓｓａｇｅｔｈｒｏｕｇｈｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｓ[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００４ꎬ２７９(３２):３４０３８－３４０４７.[２５]ＨＥＮＤＲＩＫＳＥＮＪꎬＦＡＧＯＴＴＯＦꎬＶＡＮＤＥＲＶＥＬＤＥＨꎬｅｔａｌ.ＲａｎＢＰ３ｅｎｈａｎｃｅｓｎｕｃｌｅａｒｅｘｐｏｒｔｏｆａｃｔｉｖｅβ－ｃａｔｅｎｉｎｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙｏｆＣＲＭ１[Ｊ].ＪＣｅｌｌＢｉｏｌꎬ２００５ꎬ１７１(５):７８５－７９７.[２６]ＯＥＣＫＩＮＧＨＡＵＳＡꎬＧＨＯＳＨＳ.ＴｈｅＮＦ－ｋａｐｐａＢｆａｍｉｌｙｏｆｔｒａｎ￣ｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓａｎｄｉｔｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ[Ｊ].ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂＰｅｒｓｐｅｃｔＢｉｏｌꎬ２００９ꎬ１(４):ａ００００３４.[２７]ＦＡＧＥＲＬＵＮＤＲꎬＫＩＮＮＵＮＥＮＬꎬＫＯＨＬＥＲＭꎬｅｔａｌ.ＮＦ－{ｋａｐｐａ}Ｂｉｓｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓｂｙｉｍｐｏｒｔｉｎ{ａｌｐｈａ}３ａｎｄｉｍｐｏｒｔｉｎ{ａｌｐｈａ}４[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００５ꎬ２８０(１６):１５９４２－１５９５１.[２８]ＦＡＧＥＲＬＵＮＤＲꎬＭＥＬÉＮＫꎬＣＡＯＸꎬｅｔａｌ.ＮＦ－κＢｐ５２ꎬＲｅｌＢａｎｄｃ－Ｒｅｌａｒｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓｖｉａａｓｕｂｓｅｔｏｆｉｍｐｏｒｔｉｎαｍｏｌｅｃｕｌｅｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌꎬ２００８ꎬ２０(８):１４４２－１４５１.[２９]ＫＮＯＥＳＳＭꎬＫＵＲＺＡＫꎬＧＯＲＥＶＡＯꎬｅｔａｌ.Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｉｎ８８ｅｘｐｒｅｓ￣ｓｉｏｎｉｎｈｅｐａｔｉｔｉｓＢａｎｄＣｖｉｒｕｓ－ｒｅｌａｔｅｄｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ[Ｊ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌꎬ２００６ꎬ１２(３６):５８７０－５８７４.[３０]ＫＡＵＴＲꎬＷＡＹＪＣꎬＳＩＬＶＥＲＰＡ.Ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｃａｎｃｅｒ:Ｆｒｏｍｍｅｃｈａｎｉｓｍｔｏｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＣａｎｃｅｒꎬ２００４ꎬ４(２):１０６－１１７.[３１]ＸＵＳꎬＰＯＷＥＲＳＭＡ.Ｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｐｒｏｔｅｉｎｓａｎｄｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＳｅｍｉｎＣｅｌｌＤｅｖＢｉｏｌꎬ２００９ꎬ２０(５):６２０－６３０.[３２]ＤＥＮＤＵＬＵＲＩＳＫꎬＩＤＯＷＵＯꎬＷＡＮＧＺꎬｅｔａｌ.Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ(ＩＧＦ)ｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｃａｎｃｅｒｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ[Ｊ].ＧｅｎｅｓＤｉｓꎬ２０１５ꎬ２(１):１３－２５.[３３]ＣＨＵＤＥＲＬＡＮＤＤꎬＳＥＧＥＲＲ.Ｐｒｏｔｅｉｎ－ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ[Ｊ].ＭｏｌＢｉｏ￣ｔｅｃｈｎｏｌꎬ２００５ꎬ２９(１):５７－７４.[３４]ＣＨＵＤＥＲＬＡＮＤＤꎬＫＯＮＳＯＮＡꎬＳＥＧＥＲＲ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａＧｅｎｅｒａｌＮｕｃｌｅａｒＴｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎＳｉｇｎａｌｉｎＳｉｇｎａ￣ｌｉｎｇＰｒｏｔｅｉｎｓ[Ｊ].ＭｏｌＣｅｌｌꎬ２００８ꎬ３１(６):８５０－８６１.[３５]ＷＨＩＴＥＨＵＲＳＴＡＷꎬＷＩＬＳＢＡＣＨＥＲＪＬꎬＹＯＵＹꎬｅｔａｌ.ＥＲＫ２ｅｎ￣ｔｅｒｓｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓｂｙａｃａｒｒｉｅｒ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍｅｃｈａｎｉｓｍ[Ｊ].ＰｒｏｃＮａ￣ｔｉｏｎａｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡꎬ２００２ꎬ９９(１１):７４９６－７５０１.[３６]ＭＡＴＳＵＢＡＹＡＳＨＩＹꎬＦＵＫＵＤＡＭꎬＮＩＳＨＩＤＡＥ.Ｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒｅｘｉｓｔ￣ｅｎｃｅｏｆａｎｕｃｌｅａｒｐｏｒｅｃｏｍｐｌｅｘ－ｍｅｄｉａｔｅｄꎬｃｙｔｏｓｏｌ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｔｈｗａｙｏｆｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆＥＲＫＭＡＰｋｉｎａｓｅｉｎｐｅｒｍｅａｂｉ￣ｌｉｚｅｄｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００１ꎬ２７６(４５):４１７５５－４１７６０. [３７]ＸＵＬꎬＭＡＳＳＡＧＵÉＪ.Ｎｕｃｌｅｏｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｈｕｔｔｌｉｎｇｏｆｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓ￣ｄｕｃｅｒｓ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌꎬ２００４ꎬ５(３):２０９－２１９.[３８]ＣＨＵＤＥＲＬＡＮＤＤꎬＭＡＲＭＯＲＧꎬＳＨＡＩＮＳＫＡＹＡＡꎬｅｔａｌ.Ｃａｌｃｉｕｍ－ＭｅｄｉａｔｅｄＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓＲｅｇｕｌａｔｅｔｈｅＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒＬｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＥｘ￣ｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＳｉｇｎａｌ－ＲｅｇｕｌａｔｅｄＫｉｎａｓｅｓ(ＥＲＫｓ)[Ｊ].ＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌＢｉｏｃｈｅｍꎬ２０２０ꎬ５４(３):４７４－４９２.[３９]ＳＯＮＥＮＢＥＲＧＮꎬＨＩＮＮＥＢＵＳＣＨＡＧ.ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎＩｎ￣ｉｔｉａｔｉｏｎｉｎＥｕｋａｒｙｏｔｅｓ:ＭｅｃｈａｎｉｓｍｓａｎｄＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴａｒｇｅｔｓ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２００９ꎬ１３６(４):７３１－７４５.[４０]ＣＵＬＪＫＯＶＩＣ－ＫＲＡＬＪＡＣＩＣＢꎬＢＡＧＵＥＴＡꎬＶＯＬＰＯＮＬꎬｅｔａｌ.ＴｈｅＯｎｃｏｇｅｎｅｅＩＦ４ＥＲｅｐｒｏｇｒａｍｓｔｈｅＮｕｃｌｅａｒＰｏｒｅＣｏｍｐｌｅｘｔｏＰｒｏｍｏｔｅｍＲＮＡＥｘｐｏｒｔａｎｄＯｎｃｏｇｅｎｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ[Ｊ].ＣｅｌｌＲｅｐｏｒｔｓꎬ２０１２ꎬ２(２):２０７－２１５.[４１]ＴＨＯＭＡＳＳＪꎬＳＮＯＷＤＥＮＪＡꎬＺＥＩＤＬＥＲＭＰꎬｅｔａｌ.ＴｈｅｒｏｌｅｏｆＪＡＫ/ＳＴＡＴｓｉｇｎａｌｌｉｎｇｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓꎬｐｒｏｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｓｏｌｉｄｔｕｍｏｕｒｓ[Ｊ].ＢｒｉＪＣａｎｃｅｒꎬ２０１５ꎬ１１３(３):３６５－３７１. [４２]ＦＡＧＥＲＬＵＮＤＲꎬＭÉＬＥＮＫꎬＫＩＮＮＵＮＥＮＬꎬｅｔａｌ.Ａｒｇｉｎｉｎｅ/ｌｙｓｉｎｅ－ｒｉｃｈｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌｓｍｅｄｉａｔｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｄｉ￣ｍｅｒｉｃＳＴＡＴｓａｎｄｉｍｐｏｒｔｉｎａｌｐｈａ５[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００２ꎬ２７７(３３):３００７２－３００７８.[４３]ＭＡＪꎬＣＡＯＸ.ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＳｔａｔ３ｎｕｃｌｅａｒｉｍｐｏｒｔｂｙｉｍｐｏｒｔｉｎａｌｐｈａ５ａｎｄｉｍｐｏｒｔｉｎａｌｐｈａ７ｖｉａｔｗｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｅｑｕｅｎｃｅｅｌｅｍｅｎｔｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌꎬ２００６ꎬ１８(８):１１１７－１１２６.[４４]ＢＥＧＩＴＴＡꎬＭＥＹＥＲＴꎬＶＡＮＲＯＳＳＵＭＭꎬｅｔａｌ.ＮｕｃｌｅｏｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆＳｔａｔ１ｉｓｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙａｌｅｕｃｉｎｅ－ｒｉｃｈｅｘｐｏｒｔｓｉｇｎａｌｉｎｔｈｅｃｏｉｌｅｄ－ｃｏｉｌｄｏｍａｉｎ[Ｊ].ＰｒｏｃｎａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡꎬ２０００ꎬ９７(１９):１０４１８－１０４２３.[４５]ＳＨＩＹꎬＭＡＳＳＡＧＵÉＪ.ＭｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＴＧＦ－ｂｅｔａｓｉｇｎａｌｉｎｇｆｒｏｍｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｔｏｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２００３ꎬ１１３(６):６８５－７００. [４６]ＸＵＬꎬＡＬＡＲＣÓＮＣꎬＣÖＬＳꎬｅｔａｌ.ＤｉｓｔｉｎｃｔｄｏｍａｉｎｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｂｙＳｍａｄ３ａｎｄＳｍａｄ４ｆｏｒｎｕｃｌｅｏｐｏｒｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎａｎｄｎｕｃｌｅａｒｉｍｐｏｒｔ[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００３ꎬ２７８(４３):４２５６９－４２５７７.[４７]ＸＵＬꎬＫＡＮＧＹꎬＣÖＬＳꎬｅｔａｌ.Ｓｍａｄ２ｎｕｃｌｅｏｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｈｕｔｔｌｉｎｇｂｙｎｕｃｌｅｏｐｏｒｉｎｓＣＡＮ/Ｎｕｐ２１４ａｎｄＮｕｐ１５３ｆｅｅｄｓＴＧＦｂｅｔａｓｉｇｎａｌｉｎｇｃｏｍｐｌｅｘｅｓｉｎｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍａｎｄｎｕｃｌｅｕｓ[Ｊ].ＭｏｌＣｅｌｌꎬ２００２ꎬ１０(２):２７１－２８２.[４８]ＤＡＩＦꎬＬＩＮＸꎬＣＨＡＮＧＣꎬｅｔａｌ.ＮｕｃｌｅａｒｅｘｐｏｒｔｏｆＳｍａｄ２ａｎｄＳｍａｄ３ｂｙＲａｎＢＰ３ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴＧＦ－ｂｅｔａｓｉｇｎａｌｉｎｇ[Ｊ].ＤｅｖＣｅｌｌꎬ２００９ꎬ１６(３):３４５－３５７.[４９]ＭＡＴＳＵＺＡＫＩＫ.Ｓｍａｄｐｈｏｓｐｈｏ－ｉｓｏｆｏｒｍｓｄｉｒｅｃｔｃｏｎｔｅｘｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＴＧＦ－βｓｉｇｎａｌｉｎｇ[Ｊ].ＣｙｔｏｋｉｎｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＲｅｖꎬ２０１３ꎬ２４(４):３８５－３９９.[５０]ＳＴＥＷＡＲＴＳＡꎬＷＥＩＮＢＥＲＧＲＡ.Ｔｅｌｏｍｅｒｅｓ:ｃａｎｃｅｒｔｏｈｕｍａｎａｇｉｎｇ[Ｊ].ＡｎｎｕＲｅｖＣｅｌｌＤｅｖＢｉｏｌꎬ２００６(２２):５３１－５５７.[５１]ＣＨＵＮＧＪꎬＫＨＡＤＫＡＰꎬＣＨＵＮＧＩＫ.ＮｕｃｌｅａｒｉｍｐｏｒｔｏｆｈＴＥＲＴｒｅ￣ｑｕｉｒｅｓａｂｉｐａｒｔｉｔｅｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌａｎｄＡｋｔ－ｍｅｄｉａｔｅｄｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＣｅｌｌＳｃｉꎬ２０１２ꎬ１２５(Ｐｔ１１):２６８４－２６９７. [５２]ＡＫＩＹＡＭＡＭꎬＹＡＭＡＤＡＯꎬＨＩＤＥＳＨＩＭＡＴꎬｅｔａｌ.ＴＮＦａｌｐｈａｉｎｄｕｃｅｓｒａｐｉｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｎｈｕｍａｎｌｙｍ￣ｐｈｏｃｙｔｅｓ[Ｊ].ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎꎬ２００４ꎬ３１６(２):５２８－５３２. [５３]ＡＫＩＹＡＭＡＭꎬＨＩＤＥＳＨＩＭＡＴꎬＨＡＹＡＳＨＩＴꎬｅｔａｌ.Ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ－ｋａｐｐａＢｐ６５ｍｅｄｉａｔｅｓｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒａｌｐｈａ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅｐｒｏｔｅｉｎ[Ｊ].ＣａｎｃｅｒＲｅｓꎬ２００３ꎬ６３(１):１８－２１.[５４]ＳＥＩＭＩＹＡＨꎬＳＡＷＡＤＡＨꎬＭＵＲＡＭＡＴＳＵＹꎬｅｔａｌ.Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆ１４－３－３ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ[Ｊ].ＥＭＢＯＪꎬ２０００ꎬ１９(１１):２６５２－２６６１.[５５]ＢＯＧＯＹＥＶＩＴＣＨＭＡꎬＮＧＯＥＩＫＲＷꎬＺＨＡＯＴＴꎬｅｔａｌ.ｃ－ＪｕｎＮ－ｔｅｒｍｉｎａｌｋｉｎａｓｅ(ＪＮＫ)ｓｉｇｎａｌｉｎｇ:Ｒｅｃｅｎｔａｄｖａｎｃｅｓａｎｄｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ[Ｊ].ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａꎬ２０１０ꎬ１８０４(３):４６３－４７５.[５６]ＫＡＰＰＥＬＭＡＮＮ－ＦＥＮＺＬＭꎬＧＥＢＨＡＲＤＣꎬＭＡＴＴＨＩＥＳＡＯꎬｅｔａｌ.Ｃ－ＪｕｎｄｒｉｖｅｓｍｅｌａｎｏｍａｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎＰＴＥＮｗｉｌｄｔｙｐｅｍｅｌａｎｏｍａｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＤｅａｔｈＤｉｓꎬ２０１９ꎬ１０(８):５８４.[５７]ＳＣＨＲＥＣＫＩꎬＡＬ－ＲＡＷＩＭꎬＭＩＮＧＯＴＪ－Ｍꎬｅｔａｌ.ｃ－ＪｕｎｌｏｃａｌｉｚｅｓｔｏｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｆｉｔｓｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｂｙａｎｄｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈＪＮＫａｎｄｖｉｃｅｖｅｒｓａｐｒｏｍｏｔｅｓｎｕｃｌｅａｒａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆＪＮＫ[Ｊ].ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙＲｅｓＣｏｍｍｕｎꎬ２０１１ꎬ４０７(４):７３５－７４０. [５８]ＷＡＬＤＭＡＮＮＩꎬＷÄＬＤＥＳꎬＫＥＨＬＥＮＢＡＣＨＲＨ.Ｎｕｃｌｅａｒｉｍｐｏｒｔｏｆｃ－Ｊｕｎｉｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｒｅｃｅｐｔｏｒｓ[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００７ꎬ２８２(３８):２７６８５－２７６９２.。

蛋白质亚细胞定位及其功能研究蛋白质是生命活动中极为重要的分子，它们是生物体内构成细胞、组织和器官的基本组成部分。

蛋白质的特殊结构表现为它们在空间上呈现出巨大的多样性。

这种空间分布不只是随意的，蛋白质分布的外延横跨从细胞核到细胞外的所有场所，并对生命活动产生了重要影响。

通常情况下，它们在某一段时间内驻留在一些特定的细胞结构中，这些结构被称为亚细胞结构。

其亚细胞定位的好坏会直接影响蛋白质的最终功能，因此，研究蛋白质分布的亚细胞机理是目前细胞生物学的热门领域之一。

蛋白质的亚细胞定位是由信号序列和靶蛋白体系共同作用的结果。

信号序列是蛋白质的一部分氨基酸序列，它可以指引蛋白质在亚细胞结构中寻找到它的特定位置。

而靶蛋白体系则是在这个位置上发挥作用的一系列蛋白质复合物。

总体来说，蛋白质的亚细胞定位是基于这些靶蛋白体系。

细胞器是亚细胞结构的重要组成部分，因为它们在细胞生理和代谢过程中发挥着极其重要的作用。

例如，具有高度分化的细胞，如骨胶质细胞和肌肉细胞，会形成工艺复杂的细胞器，用于完成特定的蛋白质合成和质量控制过程。

另外，一些常见的细胞器如粒线体、内质网和高尔基体都与特定的蛋白质分布和细胞功能密切相关。

例如，线粒体是一个小的细胞器，它是能量合成最重要的细胞器之一，通过线粒体呼吸链生成的ATP来支持细胞代谢过程。

线粒体内部成功保持着我们身体最重要的化学反应：糖的不完全氧化。

此外，线粒体还承担着细胞凋亡、细胞信号转导等重要功能，其蛋白质成分的亚细胞定位对于人体健康和疾病诊断具有重要意义。

此外，内质网和高尔基体也是细胞生理所不可缺少的两个细胞器，它们内部的蛋白质以及与细胞数据合作所起的作用在于建立葡萄糖代谢、生理学循环和免疫系统。

内质网是一个有复杂结构和功能的细胞器，它是蛋白质合成、折叠和修饰的重要部位，还参与到细胞调节、快速响应与细胞间互做的作用机制。

高尔基体主要完成细胞内蛋白质的修饰、分泌和发挥一定作用的功能，它的分布和功能对于细胞内许多生化反应和病程的进程具有重要影响。

#综述与讲座#肿瘤相关蛋白的亚细胞定位方慧云综述 王秦秦审校作者单位:650032昆明医学院第一附属医院临床医学实验研究中心关键词:肿瘤;相关蛋白;亚细胞定位中图分类号:R73-34 文献标识码:B 文章编号:1001-5930(2005)01-0103-03随着分子生物学等学科领域水平的不断发展,发现肿瘤相关蛋白的种类和数量不断增多,它们在肿瘤细胞中的静态分布和动态移动过程,定性和定量,肿瘤细胞周期不同时期的变化,需要通过亚细胞定位技术进行观察,下面将不同定位技术进行分述。

1 绿色荧光蛋白(g reen fluor escent pr otein,G FP )的应用在生物发光的水母中,当能量从Ca 2+激活的水母发光蛋白转移到绿色荧光蛋白(GF P )时,水母就能发光,因此,当G F P 在真核或原核细胞中表达时,如受到蓝光或紫外光的照射,会产生1种明亮的绿色荧光。

目前,G F P 作为1种全新的报告系统,在基因的表达和蛋白的定位研究中得到了广泛的应用[1,2]。

1.1 GF P 的改进和突变体分型目前主要通过这样几个途径得到突变体GF P[1]:更换G FP生色团氨基酸;改变碱基组成;除去GF P 基因中隐蔽剪接位点;插入植物内含子;更换强启动子等。

突变体G FP 增加了荧光强度和热稳定性,促进了生色团的折叠,其荧光特性也得到了改善,甚至出现红色、黄绿色、蓝色等多种颜色的荧光蛋白,大大拓宽了GF P 研究的领域。

突变体分型有:增强型GF P ,人工G FP ,红移荧光蛋白,蓝色荧光蛋白。

1.2 GF P 的应用特点G FP 这一新型报告系统,在短短几年时间内就得到了众多研究者的青睐,其原因就在于它具有这样一些优点:¹检测方便;º荧光稳定;»无毒害;¼易于构建载体;½可进行活细胞定时定位观察;¾易于得到突变体。

1.3 GF P 用于肿瘤相关蛋白的亚细胞定位标记G FP 分子量小,能与多种不同的蛋白质N 端或C 端融合而保持其天然蛋白的特性,可特异地进行蛋白质细胞器的定位研究。