磷细菌的分离培养与筛选

组长：孙海组员：王琦，宋路遥，杨菌，冯立实验题目：磷细菌的分离1 样品采集在养殖场周围或者在落叶较多的地方采集土样2 培养基的配置磷细菌培养基I 葡萄糖10g，(NH)：SO 0．5g，MgSO4 ·7H2O 0．3g，NaC10．3g，FeSO4 ·7H2O 0．036g，MnSO4·7H200．03g，CaCO3 35g，琼脂20g ,蒸馏水馏水1000mL，pH7.2～7．4。

121 ℃40min灭菌后，冷却至5O℃，立即加入无菌卵黄50mL，摇匀，倒平板。

磷细菌培养基II 葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0．5g，MgSO4 ·7H2O 0．3g，NaC1 0．3g，FeSO4 0．3g，KC1 0．3g，MnSO4 0．03g，Ca3(PO4)2 10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7．2～7．4。

121℃40min灭菌后；冷却50℃，倒平板。

3 分离采取稀释平板和划线分离法。

称取样品5g装于250mL盛有若干玻璃珠的无菌三角瓶，加入lOOmL无菌水，充分振荡摇匀，静置一段时间，取上清液进行10倍递减稀释至10～g ／mL，用吸管分别吸取10-2～g／mL，10-3g／mL，10-4g／mL，10-5g／mL，10-6g／mL，10-7g／mL，稀释液各0．1mL分别涂布于培养基I 和培养基II，在无菌条件下进行稀释平板法分离，置28℃条件下倒置培养。

分别在24h，36h，48h时，将在温箱中培养的平皿取出并观察。

培养基I上菌落周围出现混浊圈的可视为有解有机磷能力，培养基Ⅱ上菌落周围出现透明圈的可视为有解无机磷能力的菌株。

1．2．3 将初步判断为磷细菌的菌株接入斜面培养基，经划线分离纯化，镜检确定有芽孢的菌株进行再次分离纯化，纯化后的菌株作为初筛菌株接入斜面培养基，保存备用。

解磷能力测定取初筛菌株培养24h后，制成菌悬液，并调整菌体浓度为10。

茶树根际土壤解磷细菌的筛选及解磷活性分析杨艳华;李俊州;臧睿;才艺【摘要】为了获得具有高效解磷活性和应用潜力的根际促生菌，从河南省信阳黄棕壤茶区采集茶树根际土壤样品，采用选择性培养基，以稀释培养法筛选具有解磷能力的细菌。

结果表明，共筛选获得具有较强解磷能力的根际细菌36株，其中，解无机磷细菌23株，解有机磷细菌13株；解磷细菌主要分布于芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属、伯克氏菌属、肠杆菌属、不动杆菌属和假单胞菌属，其中，芽孢杆菌和类芽孢杆菌为优势种群。

解磷特性和活性测定结果表明，蜡样芽孢杆菌、类芽孢杆菌和伯克氏菌兼具解无机磷和有机磷的作用，而假单胞菌仅具有解有机磷的作用；23株解无机磷细菌中，18株的解磷活性大于100μg/mL，13株解有机磷细菌的解磷活性均大于40μg/mL。

%In order to screen the strains with potential applications in microbial fertilizer,phosphate-solubilizing microorganisms were screened from rhizosphere soil of tea plants grown in brown-yellow soil of Xinyang area in Henan province,using dilution-culture method on selective media.The results showed that a total of 36 phosphate-solubilizing bacterial strains(PSBs)were obtained.Among the 36 PSBs,23 strains could solubilize inorganic phosphate,and 1 3 strains could solubilize organic phosphate.The 3 6 PSBs mainly distributed inBacillus,Paenibacillus,Burkholdeia,Enterobacter,Acinetobacter and Pseudomonas,in which,Bacillus spp.and Paenibacillus spp.were the dominant population in rhizosphere soil of tea plants.Phosphate-solubilizing ability of 3 6 PSBs were assayed,and the results indicated that strains of Bacillus cereus,Paenibacillus spp.and Burkholdeia spp.couldsolubilize both inorganic phosphate and organic phosphate,but strains of Pseudomonas spp.could only solubilize organic phosphate.Among 2 3 inorganic PSBs,the inorganic phosphate-solubilizng activities of 1 8 strains were more than 100μg/mL,and the organic phosphate-solubilizng activities of 13 strains were more than 4 0μg/mL.【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2014(000)009【总页数】6页(P60-65)【关键词】茶树;根际微生物;解磷细菌;解磷活性【作者】杨艳华;李俊州;臧睿;才艺【作者单位】河南农业大学植物保护学院，河南郑州 450002;河南农业大学植物保护学院，河南郑州 450002;河南农业大学植物保护学院，河南郑州 450002;河南农业大学植物保护学院，河南郑州 450002【正文语种】中文【中图分类】S182磷是植物生长发育的重要营养元素之一。

第 45 卷第 1 期 Vol.45 No.12024 年 3 月Mar. 2024农业科学研究Journal of Agricultural Sciences荒漠植物根际解磷细菌的筛选及抑菌和促生特性研究杜艺，周波，袁娜娜，姚佳妮，代金霞（宁夏大学生命科学学院，宁夏银川750021）摘要：从荒漠植物根际筛选解磷菌株并研究其促生效应，为推动荒漠区微生物资源的开发和利用提供有效的参考。

采用平板培养和钼锑抗比色法筛选荒漠植物根际土壤中具有解磷活性的细菌菌株，测定其促生和抑菌活性，并利用盆栽接种试验分析代表菌株对柠条幼苗生长的促进作用。

结果表明：筛选出6株溶解无机磷的菌株，溶磷量为52.82~63.93 mg/L，其中菌株IP6的溶磷量最高；筛选出4株溶解有机磷的菌株，溶磷量为2.33~2.80 mg/L；多数解磷菌同时具备固氮、产IAA和分泌铁载体能力，所有菌株对玉米大斑病菌和马铃薯干腐病菌都能产生明显的抑制作用。

与不接菌对照相比，接种沙雷氏菌IP6使柠条幼苗的株高、根长和鲜质量显著提高12.39%、9.85%和30.68%；接种假单胞菌OP2使柠条幼苗的株高、根长和叶片数显著提高13.29%、8.62%和19.56%，鲜质量和干质量显著增加46.32%和37.98%，二者促生效果显著，具有进一步开发为微生物肥料的潜能。

关键词：根际细菌；解磷菌；抑菌活性；促生作用中图分类号：S182 文献标志码：A磷是植物营养中仅次于氮的最重要的关键元素，它在植物的光合作用、能量传递、信号传导、大分子生物合成和呼吸等主要代谢过程中发挥着重要作用[1]。

植物所利用的磷素主要来源于土壤，虽然土壤中含有大量且丰富的磷元素，但绝大部分以难溶性的无效磷形式存在，仅有0.1%的总磷可被植物利用，致使植物生长发育所需的有效磷含量不能够得到满足，限制了植物生长[2]。

尽管化学磷肥的添加能够提高作物产量，但长期施用会改变土壤微生物的群落结构，使土壤中有益微生物数量和多样性降低，土壤质量下降，从而导致土壤肥力的丧失和环境退化[3]。