用HPLC法测定丹参素棕榈醇酯脂质体药物含量

丹参为唇形科植物丹参 (Salvia miltiorrhiza Bge) 的干燥根及根茎 ,具有祛瘀止痛 、活血通经 、清心除 烦之功效[1] 。现代中药药理学研究表明 ,丹参能够 增加冠状动脉血流量 、降血脂 、抑制血栓形成或抗血 栓 、改善微循环作用 。其主要有效成分为水溶性酚 性酸 (丹参素和原儿茶醛) 及脂溶性二萜醌类 (丹参 酮 ⅡA) [2] 。传统和现代医学使用丹参 ,主要是以其 水溶性成分为主的各种制剂 。因此 ,为了临床和科 研的需要 ,笔者用高效液相色谱法对丹参中水溶性 成分丹参素和原儿茶醛进行测定 ,比较 5 种产地丹 参中丹参素和原儿茶醛的含量 。 1 材料 1. 1 仪器 美国 Waters 公司产高效液相色谱系统 (7725 手动进样器 ,600 泵 ,996 二级管阵列检测器 , M32数据处理系统) ,Digital 586 计算机 , TGL ·16 G 台 式高速离心机 ,SZ293 自动双重纯水蒸馏器 , TN2100 B 型托盘扭力天平 , GB2204 型电子天平 。 1. 2 药材 陕南丹参 ,购自陕西省药材公司 ;洛阳 丹参 ,购自河南省洛阳药材站 ;蒲城丹参 ,购自陕西 省蒲城药材公司 ;卢氏家种丹参 、卢氏野生丹参 ,均 购自河南省三门峡药材采购供应站中成药经营部 。 以上 5 种产地丹参均经中国人民解放军第四军医大 学药物研究所孙玲变副主任药师鉴定为唇形科植物 丹参 (Salvia miltiorrhiza Bge) 的干燥根茎 。
表 2 5 种不同产地丹参煎液中丹参素和原儿茶醛含量测定 结果 ( n = 3 , x ±s)
产 地 洛阳丹参 (A) 蒲城丹参 (B) 陕南丹参 (C) 卢氏野生丹参 (D) 卢氏家种丹参 ( E)
丹参素 (μg/ ml) 290. 54 ±15. 18 218. 840 ±2. 15 212. 330 ±7. 33 299. 400 ±1. 14 268. 870 ±5. 23

2.1.2供试品溶液的制备
取本品粉末(过3号筛)0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇50 mL,密塞,称定重量,加热回流1 h,取出,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液,即得。
2.1.3对照品溶液的制备
取丹酚酸B对照品适量,加75%甲醇溶解并制成每1 mL含0.14 mg的溶液,即得。
2.1.5精密度试验
取供试品溶液1份,在上述色谱条件下连续进样5次,每次进样5μL,测定丹酚酸B含量,经计算,RSD＝0.28%。
2.1.6重复性试验
平行制备5份供试品溶液,分别在上述同一色谱条件下,分别进样5μL,测定丹酚酸B含量,经计算, RSD＝2.24%。
2.1.7稳定性试验
取供试品溶液1份,上述色谱条件下,分别于样品制备后第0、1、2、4、8、16、24 h进行测定,测定丹酚酸B含量,经计算,RSD＝1.76%。
2方法与结果
2.1丹酚酸B的含量测定
2.1.1色谱条件
色谱柱：Kromasil C18(4.6 mm×250 mm, 5μm)；流动相：甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)；流速：1 mL/min；柱温：35℃；检测波长λs＝286 nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于4 000。在此条件下丹酚酸B与其他组分达到良好分离(见图1)。
2.2丹参素和原儿茶醛的含量测定
2.2.1色谱条件
色谱柱：Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)；流动相：甲醇-冰醋酸-水(20∶1∶80)；流速：1 mL/min；柱温：35℃；检测波长λs＝280 nm。理论板数按丹参素峰计算应不低于4 000。在此条件下,丹参素、原儿茶醛与其他组分达到良好分离(见图2)。

HPLC法测定复方丹参滴丸中丹参素的含量张琴【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2015(000)019【摘要】目的：建立高效液相色谱法（HPLC）快速测定复方丹参滴丸中丹参素的含量。

方法色谱柱为Hypersil C18（4.6 mm×250 mm，5μm）；流动相为甲醇-水-冰醋酸（20∶80∶0.5）,柱温为室温；流速为0.9 mL/min；检测波长为281 nm。

结果丹参素对照品在0.01~0.10 mg/mL范围内呈良好线性关系，r=0.9997,含量丹参素平均回收率为99.6%，RSD为0.89%。

所测复方丹参滴丸中丹参素的平均含量为8.034 mg/g，符合2010年版药典对其含量的要求。

结论 HPLC法测定复方丹参滴丸中丹参素的含量方法操作流程简单、快速、准确，可用于该制剂的质量控制中大力推广使用。

%Objective To establish a HPLC method for content determination (HPLC) of Danshensu in Compound Danshen dropping pill.Methods The chromatographic column was Hypersil C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm); the mobile phase of methanol-water-acetic acid (20∶80∶0.5), the column temperature was room temperature; the flow rate was 0.9 mL/min; the detection wavelength was 281 nm.Results Danshensu control sample showed good linear relationship in the range of 0.01-0.10 mg/mLr=0.997, Danshensu content, the average recovery was 99.6%, RSD 0.89%. The average content of pigment compound danshendropping pill for 8.034mg/g, consistent with the 2010 edition of Pharmacopoeia requirements for its content.Conclusion The HPLC methodfor the determination of content of Danshensu in Compound Danshen Dropping Pill operation is simple, fast, accurate, and can be used for the quality control of the preparation in vigorously promoting the use of.【总页数】2页(P62-63)【作者】张琴【作者单位】湖南省中医药大学附一医院药剂科，湖南长沙410000【正文语种】中文【中图分类】R282.710.3【相关文献】1.高效液相色谱法测定复方丹参滴丸中丹参素和原儿茶醛的含量 [J], 蔡喜;方冬梅2.HPLC法测定同仁乌鸡白凤丸中芍药苷和丹参素的含量 [J], 董勇3.RP-HPLC法测定活血复脉合剂中丹参素、原儿茶醛的含量 [J], 彭勉;马莹4.HPLC法测定复方丹参滴丸中丹参素的含量 [J], 袁琦;赵辉5.高效液相色谱法测定复方丹参滴丸中丹参素和原儿茶醛的含量 [J], 洪馨;宓穗卿;王宁生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定丹参药材中丹参素含量研究摘要：目的：采用高效液相色谱法测定丹参药材中丹参素的含量。

方法：色谱柱：KromailsC18（250mm×4.6，5μm）；流动相：甲醇-0.5%冰醋酸（1：5）；流速：1.0ml/min；温度为室温；检测波长：280nm。

结果：该批丹参中丹参素的含量为0.38%，平均回收率为98.6%，RSD=1.6%。

结论：该法操作简便，精确度高，可靠性强，可作为丹参和复方丹参制剂质量控制的标准。

关键词：高效液相色法；丹参；丹参素；含量测定作为一种较为珍贵的中药药材，丹参在中医临床上发挥了非常大的作用，尤其是在祛瘀止痛、活血通经与清心除烦等方面更是有着显著疗效。

丹参是一种唇形科植物，在中药的应用中，所指的丹参一般是指该植物的干燥根茎。

从药理学上来讲，丹参的主要药效成分是其脂溶性丹参酮类物质以及水溶性丹参素与丹参酸类物质。

基于这种原理，在丹参的提取中一般多使用水提取法。

为了能够对丹参药材中的丹参素含量有一个较为全面的掌握，需要对其进行含量测定。

测定方法有很多种，本研究选取了使用较为广泛的高效液相色谱法来对丹参药材中的丹参素含量进行测定，希望能够为相关研究提供一些帮助。

1 仪器与试药1.1 仪器高效液相色谱仪：Agilentll00系列四元梯度泵、Agilentll00手动进样器、Agilentll00系列二极管阵列检测器、Agilent1100工作站（Agilent公司）；超声波清洗器；1/10000电子分析天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）。

1.2 试药甲醇（色谱纯）；水为二次石英亚沸蒸馏水；冰醋酸（分析纯）；丹参素钠对照品（复旦大学药学院天然药物化学教研室提供，含量>99%；批号：2003-08-29）；所用化学试剂均为分析纯。

不同批号丹参药材样品均经鉴定为Salviamiltiorrhiza。

2 实验方法与结果2.1 色谱条件色谱柱KromailsC18（250mm×4.6，5μm）；流动相：甲醇-0.5%冰醋酸（1：5）；流速：1.0ml/min；丹参素的保留时间（tR）约为11min。