疟疾筛查血片复核记录表

龙口市人民医院疟疾病例血片镜检复核与分析王志富【摘要】目的了解龙口市人民医院疟疾病例血片镜检复核结果,并对其进行分析.方法收集、登记龙口市人民医院2013年1月-2016年12月的疟疾病例血片,进行再次逐片复核评分.结果 (1)选取的624片血片中,阴性血片的复检符合率为99.98％(620/621),阳性血片复检符合率为100.00％(3/3);(2)本组研究纳入血片的血片制作合格率为93.43％(583/624)、血片染色合格率为90.54％(565/624)、清洁度合格率为94.23％(588/624).结论通过复核疟疾血片,能及时发现血片质量和制作存在的问题.督促血片质量提升,不断完善和提高业务水平,规范血栓质量.【期刊名称】《中国卫生标准管理》【年(卷),期】2017(008)020【总页数】3页(P120-122)【关键词】疟疾;血片;镜检【作者】王志富【作者单位】山东省龙口市人民医院检验科,山东龙口265711【正文语种】中文【中图分类】R446疟疾指人由于蚊虫叮咬等途径导致血液感染疟原虫所引起的虫媒传染病[1]。

目前，人体寄生的疟原虫有恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫等4种[2]。

龙口市人民医院自2013年已经开始实施消除疟疾达标的工作。

以提高疟原虫的实验室诊断水平，并将其作为消除疟疾达标的重点工作之一。

本研究通过疟疾阳性血片镜检来了解和评估基层疾控人员镜检水平、血片制作及染色水平，为龙口市实现消除疟疾工作提供科学依据。

收集、登记龙口市人民医院2013年1月—2016年12月的疟疾病例血片，抽取血片总量参照《消除疟疾技术方案（2011年版）》[3]，该年度抽取的血片数超过全年血片数的3%，本研究共抽取624片血片。

本次复核由我院长期从事疟原虫镜检的资深检验员进行。

复检评价标准：阴性血片以未检出疟原虫为合格；阳性血片以检出疟原虫为合格，所有血片复检需由2名以上检验员复核并一致认可。

ICS11.020C62WS 中华人民共和国卫生行业标准WS/T 569—2017疟原虫检测血涂片镜检法Microscopic examination of blood films for malaria parasites2017-08-01发布2018-02-01实施前言本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

本标准起草单位：海南省疾病预防控制中心、江苏省寄生虫病防治研究所、中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、云南省寄生虫病防治所、海南省农垦总局医院。

本标准主要起草人：王善青、高琪、汤林华、杨恒林、郑彬、胡锡敏、王光泽、李雨春、刘莹、欧阳范献。

疟原虫检测血涂片镜检法1 范围本标准规定了血涂片镜检法检测疟原虫的技术规范。

本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对疟原虫的显微镜检测。

2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

2.1疟原虫Plasmodium spp疟原虫是一类单细胞、寄生性的真核动物，是疟疾（malaria）的病原体。

寄生于人体的疟原虫主要有恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）、间日疟原虫（Plasmodium vivax）、三日疟原虫（Plasmodium malariae）和卵形疟原虫（Plasmodium ovale）等。

2.2血涂片 blood films将血液涂制于载玻片上制成的涂片。

供显微镜疟原虫检查用的血涂片包括厚血膜涂片和薄血膜涂片两种。

3 仪器和器材3.1 生物显微镜（100×油浸物镜、5×或10×目镜）。

3.2 计数器。

3.3 载玻片（无划痕无油污的洁净载玻片）。

3.4 推片。

3.5 血片染色架。

3.6 血片干燥架。

3.7 玻片盒。

3.8 染色盘和染色缸。

4 试剂和材料4.1 吉氏染色原液。

4.2 pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS）。

4.3 甲醇（分析纯）。

4.4 香柏油或专用浸油（折射率≥1.5）。

消除疟疾督导记录表消除疟疾督导记录表林州市疾控中心消除疟疾督导记录表科室参加人员地点及单位方法及内容时间结果及问题查看上级文件、工作方案、计划与总结查阅到村工作督导计划、记录与总结等查阅例会资料劳务补助登记资料查看报表及疫情登记本查阅病例服药督导记录是否全程足量治疗：查阅疟疾病例流行病学个案调填写是否完整：查表疫点基本情况调查记录表：疫点主动病例侦查记录表：查阅疫点处置资料疫点处置室内滞留喷洒记录表（活动疫点）：处置报告：疟疾休止期治疗情况统计表：查阅间日疟病例休止期根治记疟疾休止期治疗服药督导表：录间日疟疾病例休根治疗登记表：查阅培训计划、教材、通知、签到、照片、总结等资料（包括对本级相关工作人员和村医）查阅健康教育计划、材料、照片、总结等；资料流动人口管理资料；督导意见：记录人被调查单位领导签字：林州市疾控中心消除疟疾镜检站督导记录表科室参加人员地点及单位方法及内容时间结果及问题查看与发热病人血检有关的文件：一、文件资料工作方案、工作总结：管理办法或制度，各类表格：镜检站血检登记本：镜检站工作职责：二、上墙资料：疟原虫镜检操作规程：1、省中心下发的试剂架是否在用：2、镜检工作台上要有：显微镜、新载玻片、染过色的玻片、发热病人血检登记本、香柏油、擦镜纸、B2铅笔；试剂架上四个100ml的滴瓶（是否贴标签），三、镜检站要具备的物品和用具分别是吉氏原液、二甲苯、蒸馏水、甲醇；标本盒、脱油纸本、染色方盘、配应用液用的指管、冲洗用水。

（有什么在字上打√，无则打×）3、血检登记本登记项目是否齐全：4、是否有当月血检片：1-3月份完成数：四、血检完成情况没有完成任务的原因：督导意见：记录人：被调查单位领导签字：扩展阅读：华坪县乡级消除疟疾项目现场督导与评估执行指南华坪县消除疟疾项目现场督导与评估执行指南（一）目的1、核实各级项目报表数据质量；2、及时发现解决项目执行中存在的问题；3、指导帮助下级项目人员识别解决问题，提高项目各级人员的技能与管理能力；4、评估项目工作进展。

疟原⾍检测⾎涂⽚镜检法ICS11.020C62WS 中华⼈民共和国卫⽣⾏业标准WS/T 569—2017疟原⾍检测⾎涂⽚镜检法Microscopic examination of blood films for malaria parasites2017-08-01发布2018-02-01实施前⾔本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

本标准起草单位：海南省疾病预防控制中⼼、江苏省寄⽣⾍病防治研究所、中国疾病预防控制中⼼寄⽣⾍病预防控制所、云南省寄⽣⾍病防治所、海南省农垦总局医院。

本标准主要起草⼈：王善青、⾼琪、汤林华、杨恒林、郑彬、胡锡敏、王光泽、李⾬春、刘莹、欧阳范献。

疟原⾍检测⾎涂⽚镜检法1 范围本标准规定了⾎涂⽚镜检法检测疟原⾍的技术规范。

本标准适⽤于各级疾病预防控制机构和医疗机构对疟原⾍的显微镜检测。

2 术语和定义下列术语和定义适⽤于本⽂件。

2.1疟原⾍Plasmodium spp疟原⾍是⼀类单细胞、寄⽣性的真核动物，是疟疾（malaria）的病原体。

寄⽣于⼈体的疟原⾍主要有恶性疟原⾍（Plasmodium falciparum）、间⽇疟原⾍（Plasmodium vivax）、三⽇疟原⾍（Plasmodium malariae）和卵形疟原⾍（Plasmodium ovale）等。

2.2⾎涂⽚ blood films将⾎液涂制于载玻⽚上制成的涂⽚。

供显微镜疟原⾍检查⽤的⾎涂⽚包括厚⾎膜涂⽚和薄⾎膜涂⽚两种。

3 仪器和器材3.1 ⽣物显微镜（100×油浸物镜、5×或10×⽬镜）。

3.2 计数器。

3.3 载玻⽚（⽆划痕⽆油污的洁净载玻⽚）。

3.4 推⽚。

3.5 ⾎⽚染⾊架。

3.6 ⾎⽚⼲燥架。

3.7 玻⽚盒。

3.8 染⾊盘和染⾊缸。

4 试剂和材料4.1 吉⽒染⾊原液。

4.2 pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS）。

4.3 甲醇（分析纯）。

4.4 ⾹柏油或专⽤浸油（折射率≥1.5）。

疟疾实验室检查方法疟疾是一种由疟原虫引起的传染病，该病在全球范围内广泛分布，并造成了大量的疾病和死亡。

为了及时准确地诊断和治疗疟疾，实验室检查方法起着至关重要的作用。

本文将介绍疟疾实验室检查的常见方法。

1. 血涂片检查血涂片检查是最常用的疟疾实验室检查方法之一。

该方法通过在玻片上涂抹患者的血液样本，并使用特殊的染色剂染色，然后在显微镜下观察。

疟原虫在血液中的形态特征使其能够与其他细胞区分开来，从而能够准确地诊断疟疾。

血涂片检查的优点是简单易行，结果迅速可靠。

然而，该方法需要经过专业人员的训练和经验，以确保结果的准确性。

2. 快速诊断试纸检测快速诊断试纸检测是一种简便快速的疟疾实验室检查方法。

该方法基于抗原-抗体反应原理，通过在试纸上加入患者血液样本，检测疟原虫抗原或抗体的存在与否。

试纸通常具有几个测试线，每个测试线代表一种疟原虫类型。

根据试纸上测试线的出现情况，可以快速诊断疟疾的类型。

快速诊断试纸检测的优点是操作简单，结果迅速，适用于一线医疗机构和偏远地区的疟疾筛查。

3. 分子生物学检测分子生物学检测是一种高灵敏度和高特异性的疟疾实验室检查方法。

该方法通过提取患者血液中的疟原虫DNA或RNA，然后使用特定的引物和荧光探针进行PCR扩增和实时荧光检测。

分子生物学检测能够检测到非常低浓度的疟原虫，具有高度的准确性和敏感性。

然而，该方法需要复杂的实验室设备和专业人员的操作技术，限制了其在资源匮乏地区的应用。

4. 免疫荧光检测免疫荧光检测是一种基于抗原-抗体反应的疟疾实验室检查方法。

该方法通过在患者血液样本中加入特定的荧光标记抗体，与疟原虫抗原结合形成复合物，然后在荧光显微镜下观察。

免疫荧光检测可以同时检测多种疟原虫类型，并具有高度的特异性和敏感性。

然而，该方法需要昂贵的设备和专业人员的操作技术，限制了其在一线医疗机构和偏远地区的广泛应用。

总结起来，疟疾实验室检查方法包括血涂片检查、快速诊断试纸检测、分子生物学检测和免疫荧光检测。

各级医疗机构医院疟原虫检测血涂片镜检法1 范围本标准规定了血涂片镜检法检测疟原虫的技术规范。

本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对疟原虫的显微镜检测。

2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

2.1疟原虫Plasmodium spp疟原虫是一类单细胞、寄生性的真核动物，是疟疾（malaria）的病原体。

寄生于人体的疟原虫主要有恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）、间日疟原虫（Plasmodium vivax）、三日疟原虫（Plasmodium malariae）和卵形疟原虫（Plasmodium ovale）等。

2.2血涂片 blood films将血液涂制于载玻片上制成的涂片。

供显微镜疟原虫检查用的血涂片包括厚血膜涂片和薄血膜涂片两种。

3 仪器和器材3.1 生物显微镜（100×油浸物镜、5×或10×目镜）。

3.2 计数器。

3.3 载玻片（无划痕无油污的洁净载玻片）。

3.4 推片。

3.5 血片染色架。

3.6 血片干燥架。

3.7 玻片盒。

3.8 染色盘和染色缸。

4 试剂和材料4.1 吉氏染色原液。

4.2 pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS）。

4.3 甲醇（分析纯）。

4.4 香柏油或专用浸油（折射率≥1.5）。

4.5 二甲苯（分析纯）。

4.6 75%酒精。

4.7 一次性采血针。

4.8 一次性手套。

5 检测步骤5.1 血涂片的制作5.1.1 采血部位及取血方法经75%乙醇消毒采血部位，待干后，用一次性采血针在耳垂或指端扎刺取血，婴儿可从拇趾或足跟扎刺取血。

取1张已消毒推片，用拇指和食指夹持推片侧缘中部，用推片左下角刮取血液4μL～5μL用于制作厚血膜，再用该端中部刮取血液1μL～1.5μL用于制作薄血膜。

5.1.2 厚血膜制作取1张载玻片，将推片左下角的血滴涂于载玻片的中央偏左，由里向外划圈涂成直径0.8cm～1.0cm 的圆形厚血膜,厚度以1个油镜视野内可见到5个～10个白细胞为宜。

不明原因发热病人血检工作要求不明原因发热病人血检是疟疾诊断、确定虫种和发现传染源的重要手段和方法，各级医疗卫生机构对就诊的不明原因发热病人采制血涂片镜检疟原虫或采用RDT进行检测。

为了规范不明原因发热病人血检管理，保质保量完成血检任务，特提出以下要求。

一、任务和指标县（市、区）疾病预防控制中心应按不明原因发热病人血检工作要求，于每年年初制定出年度血检工作计划，明确各级医疗卫生机构不明原因发热病人血检工作任务指标和职责，并以本级卫生计生行政部门文件形式下发到各相关单位。

二类县（市、区）：以乡为单位,每年血检人数不低于辖区总人口数的1‰，传播季节(5-10月份)血检人数不低于血检总数的80％。

三类县（市、区）:以县（市、区）为单位,每年血检人数不低于辖区总人口数的‰，传播季节（5-10月份）血检人数不低于血检总数的80％。

二、血检1、各级医疗卫生机构的临床医生根据患者的流行病学史或既往病史及临床表现进行初步诊断为：疟疾、疑似疟疾、不明原因发热病人后应填写门诊日志和/或不明原因发病人就诊登记表（表1），同时开具检验单，送交实验室血检查找疟原虫。

临床医生在填写门诊日志和/或不明原因发热病人就诊登记表时，其“主要症状”栏应填写发冷、发热、出汗等主要临床表现；“初步诊断”栏应填写疟疾或疑似疟疾或不明原因发热。

2、实验室检验人员对“查找疟原虫”的病人应填写不明原因发热病人血检登记表（表2），采血镜检疟原虫或采用RDT 检测。

实验室检验人员在采血镜检时应按照相关操作要求，认真做好疟原虫血片（厚、薄血膜）的制作、染色、镜检和检验结果登记工作，应全项填写不明原因发热病人血检登记表格，不得遗漏或空缺。

同一病例血片编号应与其在不明原因发热病人血检登记表中的编号一致，编号原则为：srx-年份-血检机构代码-血片顺序号（如srx）。

血检机构代码就是2016年不明原因血检任务数前面的序号。

如医疗机构的检验人员采用非吉氏染色，则应按照该染色方法的说明书进行操作。

湘阴县疟疾发热病人血检工作方案发热病人血检疟原虫是及时发现疟疾病人的重要手段，也是疟疾监测的重要措施之一。

根据《湘阴县消除疟疾行动计划（2010-2018）》要求，全县各级各类医疗卫生机构要建立“三热”（临床诊断为疟疾、疑似疟疾、不明原因的发热病人）病人疟原虫血检制度，开展“三热”病人疟原虫镜检，及时发现病人、及时治疗，为消除疟疾评估提供重要依据。

为规范管理，明确工作职责和程序，确保工作质量，特制定本方案。

一、目的规范“三热”病人疟原虫血检工作管理，统一方法和程序，提高疟原虫血检质量，为消除疟疾提供科学依据。

二、血检对象“三热”病人，即临床诊断为疟疾、疑似疟疾和不明原因的发热病人均为疟原虫血检对象。

特别是来自非洲、东南亚等国家疟疾流行地区的入境人员和自疟疾流行区返回人员的发热病人是重点血检对象。

三、血检指标及工作任务以乡镇为单位开展“三热”病人血检，各乡镇年疟原虫血检总数分别不低于辖区人口总数的2‰；其中疟疾传播季节（5-10月）血检人数不低于年血检总人数的80%。

各乡镇“三热”病人血检任务（见附表1）。

四、血检方法发热病人的血检方法按照《疟疾诊断标准（WS259-2006），附录C（规范性附录）病原学检查》（见附件）。

五、血检工作管理（一）建立疟疾实验室网络1、县疾控中心建立疟疾病原学实验室，负责对全县所有网络报告的疟疾病人血片进行复核，并抽查复核5%以上的发热病人阴性血片和复查全部阳性血片。

2、各县级综合医院及乡镇卫生院建立疟原虫镜检站，开展“三热”病人血检。

（二）镜检站工作管理1、发热病人血检工作，应列入各级医疗机构常规检验工作的内容之一，乡镇卫生院至少有1人负责发热病人血检工作。

2、各级医疗机构应全年对就诊的疑似疟疾发热病人进行血检，所有从高疟区回归的当地居民中的发热病人均进行血检。

3、所有血检对象应及时登记，发现阳性应立即报告临床医生和院感科。

4、血片应保留至消除疟疾考核后，以备上级中心镜检站抽片检查。