牛白细胞粘附缺陷病(BLAD)的调查

奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序检测方法的建立及应用周莉;贾广乐;林祥梅;廖娟红【摘要】奶牛白细胞黏附缺陷症(bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD)是一种常染色体隐性、致死性、遗传性疾病,严重影响奶牛生产性能和奶牛场的经济效益.为建立快速可靠的BLAD检测方法,本试验根据GenBank中BLAD CD18序列设计引物,PCR扩增后纯化产物,构建A/A、A/G和G/G 3种基因型标准质粒.用标准质粒建立焦磷酸测序检测方法.用建立的方法检测奶牛血液样品,其结果与Sanger测序结果进行比较,分析和验证检测结果的准确性.用建立的方法对300份奶牛血液样品进行检测,结果显示样品中A/A基因型检出294例,占总体比例的98％;A/G基因型检出6例,占总体比例的2％.随机抽取30份已检测样品进行Sanger测序,结果显示与焦磷酸测序法结果一致.本试验结果表明焦磷酸测序法检测BLAD,具有特异、灵敏、快速的特点,其检测结果准确可靠,适合于试剂盒的研发及应用于BLAD的临床诊断.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2014(041)005【总页数】5页(P66-70)【关键词】奶牛白细胞黏附缺陷症;CD18基因;焦磷酸测序【作者】周莉;贾广乐;林祥梅;廖娟红【作者单位】中国检验检疫科学研究院,北京 100121;河南省商业科学研究所有限责任公司,河南郑州450002;中国检验检疫科学研究院,北京 100121;中国检验检疫科学研究院,北京 100121;中国检验检疫科学研究院,北京 100121【正文语种】中文【中图分类】Q78奶牛白细胞黏附缺陷症（bovine leukocyte adhesion deficiency，BLAD）是一种常染色体隐性致死性的遗传性疾病，由白细胞表面的整合素β2（CD18）所编码的碱基A突变为G所引起的（Schutz等，2008），与之对应的天门冬氨酸变为甘氨酸，导致白细胞表面的整合素β2表达量减少或缺乏（Nagahata等，2004），进而在发生炎症时外周血液中的中性粒细胞无法在血管内皮上黏附和无法穿过血管壁到达病原存在部位，造成机体发病。

REPRODUCTION & BREEDING繁殖育种122019·1北京地区荷斯坦母牛群体HH1遗传缺陷基因抽样调研吕小青1，劳兰兰2，赵凤1，李艳华1，麻柱1，刘林1（1.北京奶牛中心，北京 100192；2.中国农业大学动物科技学院，北京 100193）中图分类号：S823.3 文献标识码：A 文章编号：1004-4264（2019）01-0012-03DOI: 10.19305/ki.11-3009/s.2019.01.004摘 要：HH1（holstein haplotype1）是近年来在荷斯坦牛群中发现的一种遗传缺陷，其致病机理是牛5号染色体APAF1（apoptotic peptidase activating factor 1）基因上的C/T突变，导致编码谷氨酰胺的密码子突变为终止密码子，纯合时个体致死，大多数表现为妊娠早期流产。

本研究运用竞争性等位基因特异性PCR（KASP）方法，共随机检测了北京地区158头荷斯坦母牛，发现HH1携带者20头，携带率为12.66%，提示HH1在我国荷斯坦母牛群体中存在一定的比例，牛场有必要定期对HH1携带者进行筛查并合理选种选配。

关键词：荷斯坦母牛；遗传缺陷；HH1；APAF1基因近年来，为了提高奶牛的生产性能，我国大量从国外引进遗传物质，促进了国内奶牛群体的遗传改良。

然而，在引进遗传物质的过程中也导致了一些遗传缺陷在我国奶牛群体间传播。

2016年10月28日，农业部畜牧业司发布了《中华人民共和国农业部公告第2460号》，公告中规定从境外引进种牛及冷冻精液和胚胎的，应在系谱上标识或在销售合同条款中写明种牛及冷冻精液和胚胎未携带脊椎弯曲综合征(CVM)、白细胞黏附缺陷综合征(BLAD)、短脊椎综合征(BS)等主要遗传缺陷基因。

国家建立的种牛缺陷基因监督措施，对保障种牛及遗传物质的质量安全，提高奶农的经济效益具有重要意义。

遗传缺陷所引起的经济损失包括动物胚胎损失、新生畜死亡以及病畜的生产性能和利用价值降低等，例如牛短脊椎综合征（BS）[1]、牛脊椎弯曲综合征（CVM）[2]等遗传缺陷，致病基因纯合时可导致胚胎死亡，直接造成生产和经济上的损失。

动物科学现代农业科技2019年第8期进境种牛及遗传物质的遗传缺陷病检测方法的建立与应用马飞I许文超I宿雅彬「王建昌2李涛I('唐山海关，河北唐山063000；2石家庄海关)摘要本研究运用分子生物学方法，对进口荷新坦奶牛遗传物质、进口种牛、国产牛精液等进行BLAD、CVM、DUMPS、FDS4种主要遗传病筛查，来用的PCR-RFLP方法是对提取产物的致病序列进彳亍PCR扩增，后均釆用酶切的方法对标本进彳亍纯合子和隐性杂合于飾鉴定，本丈标本来自进口52份牛精液(美国、加拿大)、国产112份牛赭液标本、650份进口种牛血液样品(澳大利亚、新西兰、乌拉圭、智利等国家)，通过对814份样品的筛查，共检出鶴带BLAD隐性有害基因的样品6份，携带CVM陰性有害基因鈴样品15份，携带DUMPS隐性有害基因的样品4份，未检测到携带FDS隐性有害基因的样品。

基于此，我国有必要冬快建立荷斯坦牛隐性遗传缺陷监控体系并进行系谱标注，以逐步降低我国奶牛群体中遗传缺陷隐性等位基因频率。

关键词进境种牛；遗传缺陷病；检测方法；应用中图分类号S858.23文献标识码A文章编号1007-5739(2019)08-0218-051综述遗传缺陷病是动物个体发生基因突变或染色体畸变导致的遗传疾病，导致发育个体出现身体结构上的缺陷或者功能性障碍，从而影响生产性能，具有先天性和家族性的特征。

遗传缺陷病分为单染色体遗传病、染色体遗传病和多染色体遗传病。

单基因遗传病是指一对主基因突变造成的疾病，其遗传符合孟德尔定律,荷斯坦牛中最常见以常染色体隐性为主如荷斯坦牛脊柱畸形综合症(CVM)、荷斯坦牛白细胞粘附缺陷(BLAD)、荷斯坦牛尿氨酸合酶缺陷症(DUMP),以及新发现的牛面部畸形综合症(FDS)等。

近年来，由于人工授精技术的普及以及奶牛生产力和养殖效益的大幅提高，奶牛遗传缺陷病危害逐年增加。

目前，一些国家每年都会检测公牛的一些遗传缺陷，并淘汰携带者…2017年我国进口种牛逾10万头，进口牛精液及胚胎300万只，种公牛数百头。

牛白细胞黏附缺陷病的牛白细胞功能检测作者：曹宏伟, 马金柱, 夏红兵, 张大生, 朱战波, 崔玉东, 朴范泽【关键词】牛白细胞黏附缺陷病（BLAD）; 白细胞; 牛1974 年, 世界上首次报道人发生一种容易感染、白细胞增生和趋化、吞噬功能缺陷的疾病, 1984 年确定其病因, 它是一种与白细胞黏附有关的细胞表面糖蛋白整合素表达缺陷所致, 并定名为白细胞黏附缺陷病［1］。

1983 年报道了牛白细胞黏附缺陷病(bovine leukocyte adhesion deficiency, BLAD)［2］, 该病是一种常染色体单基因隐性遗传疾病, 病因为白细胞表面整合素CD18（β2）亚单位383位碱基由A突变为G, 与之相应的位于胞外高度保守区的128位天门冬氨酸突变成甘氨酸, 致使白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏, 白细胞的黏附、趋化、吞噬和过氧化物生成等功能下降, 进而导致中性粒细胞不能黏附到血管壁而到达炎症部位发挥病原清除作用, 使机体出现严重的重复感染［3］。

BLAD主要发生于1～14个月龄的Holstein牛, 且多在犊牛时期死亡, 但Muller 等［4］进一步研究发现,一旦病牛超过12月龄, 感染的严重性和频率下降, 而且只需要零星的抗生素治疗即可维持其生存。

2004年10月, 我们对成年奶牛进行BLAD携带情况调查时, 在大庆市某牛场发现1头 3.5岁Holstein奶牛为BLAD病牛, 该牛经常发生感染和不断使用抗生素治疗。

为了解该BLAD病牛的白细胞功能变化情况, 本研究中对白细胞的黏附、趋化、吞噬和过氧化物生成等功能进行了检测。

1 材料和方法1.1 材料患有BLAD的Holstein奶牛(编号为1054) 和同龄健康牛（编号为1038）均来自于黑龙江省大庆市奶牛繁殖育种中心; 酵母菌和酵母聚糖zymosan为Sigma公司产品; 发光氨 Luminol为 Aldrich产品。

中国动物保健2023.04疾病防治摘要：牛地方性白血病，又名牛淋巴瘤病、牛恶性淋巴瘤、牛淋巴肉瘤等，是牛的一种致死性恶性肿瘤病。

该病在世界范围内广泛流行，是世界牛养殖业和公共卫生安全的重要威胁之一。

本文对牛地方性白血病的病原、发病机制、临床症状和病理变化进行综述，并提出预防建议，希望为牛地方性白血病的诊断和预防提供参考。

关键词：牛地方性白血病；诊断；预防收稿日期：2022-12-11doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2023.04.024牛地方性白血病的诊断和预防王瑞林（内蒙古自治区鄂尔多斯市达拉特旗恩格贝镇人民政府内蒙古鄂尔多斯014321）牛地方性白血病又名牛淋巴瘤病、牛恶性淋巴瘤、牛淋巴肉瘤，是由牛白血病病毒引发的一种慢性肿瘤性致死性疾病。

该病最早发现德国的牛群，随后在丹麦、瑞典、美国、古巴等国家也发现该病，我国于1974年上海首次发现该病，随后在江苏、陕西、北京等省市发现该病，对我国和全世界牛养殖业的发展构成了严重的威胁[1]。

本文对牛地方性白血病的病原、发病机制、临床症状和病理变化进行综述，并提出预防建议，希望为牛地方性白血病的诊断和预防提供参考。

1病原牛地方性白血病的病原为C 型致瘤病毒群反转录病毒科丁型反转录病毒属的成员。

牛白血病病毒粒子基本呈球形，也有呈杆状，直径为90~120nm ，有囊膜，囊膜上有纤突，长10~15nm ，核衣壳呈20面体对称，膜内有丝状和点状结构。

病毒基因组为单股RNA ，编码多种蛋白，其中结构蛋白主要为位于芯髓的P 蛋白和囊膜中的糖基化蛋白。

牛白血病病毒具有凝集绵羊和鼠红细胞的功能。

牛白细胞病毒可在牛源或羊源原代细胞、犬和蝙蝠细胞中增殖，以出芽增殖在细胞表面出芽释放，但不形成蚀斑。

将感染病毒的细胞和牛、羊、人、猴细胞进行共培养可形成合胞体。

牛白血病病病毒对外界环境抵抗能力较弱，对温度敏感，56℃作用30min 即可被灭活，60℃以上可迅速失去感染能力，用巴氏消毒法可灭活牛奶中的牛白血病病毒。

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的检测与单倍型分析李艳华;韩广文;张胜利;李宁;孙凤俊【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2008(039)009【摘要】牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)是由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响生产性能的表现,严重的影响了奶牛场的经济效益.本研究重点对牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的致病基因CD18基因第2外显子(exon2)进行检测分析,通过对样品进行PCR-SSCP分析,结果发现了4种单倍型:单倍型H1、H2、H3及H4,经测序发现,此扩增片段共存在2个SNPs位点,分别位于CD18基因 exon2 的C20T 和A55G位点,其中C20T突变是首次发现,属于同义突变,而A55G突变即是引起BLAD的错义碱基突变,单倍型为H1、H2和H3的个体是正常牛,单倍型H4是BLAD携带者,从而建立了一种筛选BLAD有害基因的新方法-SSCP法.【总页数】4页(P1285-1288)【作者】李艳华;韩广文;张胜利;李宁;孙凤俊【作者单位】北京奶牛中心,北京,100085;北京奶牛中心,北京,100085;北京奶牛中心,北京,100085;中国农业大学,农业生物技术国家重点实验室,北京,100193;北京奶牛中心,北京,100085【正文语种】中文【中图分类】S858.23;Q754【相关文献】1.牛白细胞粘附缺陷病(BLAD)检测方法的建立 [J], 马金柱;崔玉东;周晓秋;王北艳;曹宏伟;朱战波2.北京地区荷斯坦牛白细胞黏附缺陷症的检测分析 [J], 杨宇泽;冯涛;肖炜;靳月生;路永强3.利用单链构象多态性检测牛白细胞黏附缺陷症方法的建立 [J], 李艳华;张胜利;韩广文;薛建华;赵鹏4.奶牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)检测方法的研究进展 [J], 周莉;贾广乐;张映;韩雪清;林祥梅5.建立检测牛白细胞黏附缺陷症的方法 [J],因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

奶牛的一种先天性免疫缺陷──牛白细胞粘连缺陷
余为一;潘玲
【期刊名称】《畜牧与兽医》
【年(卷),期】1995(27)4
【摘要】奶牛的一种先天性免疫缺陷──牛白细胞粘连缺陷余为一，潘玲（安徽农业大学畜牧兽医系）随着畜牧业的良种化程度越来越高，即用极少的种畜进行繁殖而获得较高的经济效益，使一些潜在的遗传性疾病得以传播。

近年来，在美国、日本和德国相继报道了奶牛的一种遗传性免疫缺陷...
【总页数】2页(P179-180)
【关键词】牛病;乳牛;白细胞粘连缺陷;免疫缺陷
【作者】余为一;潘玲
【作者单位】安徽农业大学畜牧兽医系
【正文语种】中文
【中图分类】S858.232.4
【相关文献】
1.牛免疫缺陷病毒对牛是一种潜在病因吗？ [J], 倪贵勤
2.韩国奶牛和肉牛群的牛免疫缺陷病毒血清流行病学调查 [J], 闫高峰;张君
3.密西西比奶牛对牛免疫缺陷病毒和牛白血病病毒的双重感染 [J], Co.,KSC;闫玉河
4.用PCR检测牛血源及乳源白细胞中免疫缺陷病病毒 [J], Nash,JW;赵增连
5.牛免疫缺陷病病毒和牛白血病病毒在密西西比奶牛的双重感染 [J], Co.,KSC;叶红丽
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。