微生物学检验(第3版)13分枝杆菌属和诺卡菌属(自制)
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分枝杆菌属及检验分枝杆菌属是一类细长或略带弯曲、为数众多(包括54个种)呈分支状生长的需氧杆菌。
因其繁殖时呈分支状生长故称分枝杆菌。
本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂类,可占其干重的60%,这与其染色性、抵抗力、致病性等密切相关。
耐受酸和抗乙醇,一般不易着色,若经加温或延长染色时间而着色后,能抵抗3%盐酸乙醇的脱色作用,故又称抗酸杆菌。
需氧生长,无鞭毛,无芽胞和荚膜。
引起的疾病均为慢性,有肉芽肿病变的炎症特点。
分枝杆菌的种类较多,包括结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌和麻风分枝杆菌。
非典型分枝杆菌是一大群分枝杆菌的总称,与人类有关的非典型分枝杆菌主要有堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、戈分枝杆菌、鸟分枝杆菌、蟾分枝杆菌、龟分枝杆菌、偶发分枝杆菌和耻垢分枝杆菌等。
本属细菌无内外毒素,其致病性与菌体某些成分如索状因子、蜡质D及分枝菌酸有关。
根据国际分枝杆菌分类研究组(IWGMT)的方案将本属细菌分为三类,即缓慢生长菌、迅速生长菌和不能培养菌。
一、结核分枝杆菌在我国引起人类结核病的主要有人型和牛型结核分枝杆菌。
(一)生物学特性1.形态与染色结核分枝杆菌为细长或略带弯曲的杆菌。
在培养基中可呈球状或丝状,陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状。
抗酸染色时因菌体含有大量脂类而不易着色,无论是否经碘液处理,着色后均不易被盐酸乙醇脱色,所以使菌体呈红色。
本菌无芽胞、无鞭毛,近年发现有荚膜。
2.培养特性本菌专性需氧,在无氧条件下迅速死亡,在5%~10%CO2环境中可刺激其生长。
烛缸不适合本菌培养,需用二氧化碳培养箱。
培养温度适应范围较大,35~40℃均可生长,最适温度为35~37℃。
最适pH为6.5~6.8。
兼性胞内寄生菌,在细胞内外均可发育繁殖,强毒株可长期生存于巨噬细胞内。
生长时还需适当的湿度。
本菌生长缓慢,最快的分裂速度为18小时一代。
在固体培养基上,一般需2~6周才能长出菌落。
菌落呈干燥颗粒状,不透明,乳白色或米黄色,表面呈皱纹状,形似菜花。
分枝杆菌1. 分枝杆菌属(Mycobacterium):(1)一类细长、略带弯曲、呈分枝状生长细菌,革兰染色阳性,无芽胞、无荚膜;(2)抗酸染色阳性,故又称抗酸杆菌;(3)营养要求较高,常用罗琴培养基;(4)生长缓慢,2~8周后方可见菌落;(5)G+C mol%为62%~70%;(6)由于结核分枝杆菌的耐药和AIDS发病率呈上升趋势,结核病成为危胁人类健康的一个严重的全球性公共卫生问题。
2. 主要致病种类:人结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌3. 分枝杆菌属分类(1)典型结核分枝杆菌:人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌(2)非典型分枝杆菌:(3)其他:副结核分枝杆菌、麻风杆菌、鼠麻风杆菌4. 结核分枝杆菌(1)临床意义A. 本菌抵抗力强,可存活6~8月,随着漂浮于空气中的微滴核被吸入呼吸道,植入肺泡发育繁殖导致结核发生;B. 引起结核病,随社区人群生活状况不同发病率有所差异,全球约有1/3人感染,有人类死亡之首和白色瘟疫之称;C. 免疫性:有菌免疫或称传染性免疫,细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用。
D. 细菌可经血、淋巴,在骨、关节、肾、脑膜等处引起相应的结核病(2)致病物质荚膜:抗吞噬;细胞壁脂质;磷脂:刺激单核细胞增生、结核结节形成、干酪样坏死;分枝菌酸:抗酸性;索状因子:破坏线粒体膜;蜡质D:诱发IV型超敏反应;硫酸脑苷脂:抑制吞噬细胞;蛋白质;致病机制:胞内寄生,细胞免疫为主,在巨噬细胞中存活,引起Ⅳ型超敏反应。
(3)结核结节的形成:A. 是单核细胞参与的炎性肉芽肿反应,是细胞免疫和IV型变态反应平衡的结果;B. 细菌的脂质抵抗吞噬,巨噬细胞被破坏,形成原发感染。
3~6周后,细胞变形,IV型变态反应产生;C. 磷脂刺激巨噬细胞转化为上皮样细胞融合成多核巨细胞。
抑制蛋白酶对组织溶解,产生干酪样坏死;(4)Koch现象(郭霍现象)和IV型变态反应:有毒结核分枝杆菌被初次接种豚鼠10-14天,局部产生小节,形成肿块→坏死溃疡侵入附近淋巴结→淋巴血流全身播散,经久不愈→动物死亡。