用酸酶法水解玉米蛋白质制备复合氨基酸 (2)

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202111643845.9(22)申请日 2021.12.30(71)申请人 呼伦贝尔东北阜丰生物科技有限公司地址 021000 内蒙古自治区呼伦贝尔市岭东工业开发区（扎兰屯）开创大街(72)发明人 孙钦波　赵兰坤　王小平　王峰　白红兵　刘世周　王新芳　(51)Int.Cl.C12N 1/20(2006.01)C12N 1/38(2006.01)C12P 13/18(2006.01)C12R 1/15(2006.01)(54)发明名称一种高磷复合氨基酸营养液的制备方法(57)摘要本发明属于生物发酵技术领域，公开了一种高磷复合氨基酸营养液的制备方法，其包括如下步骤：往经过水解处理的玉米浆处理物中添加苏氨酸母液，并添加其他发酵培养基组分，搅拌均匀，高压蒸汽灭菌，得到高磷复合氨基酸营养液。

本发明能够提高玉米浆价值，降低氨基酸生产成本。

权利要求书1页 说明书4页CN 114317349 A 2022.04.12C N 114317349A1.一种处理玉米浆的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：将玉米浆进入水解罐中进行水解，水解工艺为：升温至110‑130℃，保温10‑20min，然后降至70‑80℃，然后添加硫酸，以100rpm的速度搅拌水解30min；降至50‑60℃，调整pH为2‑3，然后添加酸性蛋白酶，酶解时间为8‑12h；灭酶即得玉米浆处理物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述硫酸和玉米浆的体积比为1：1‑5。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述硫酸的质量分数为50%。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酸性蛋白酶的酶活力为5万u/g。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酸性蛋白酶的添加量为0.05%质量体积比。

6.一种高磷复合氨基酸营养液的制备方法，其包括如下步骤：往权利要求1‑5任其一所述的玉米浆处理物中添加1‑3倍体积的苏氨酸母液，并添加其他发酵培养基组分，搅拌均匀，高压蒸汽灭菌，得到高磷复合氨基酸营养液。

氨基酸螯合钙的研究进展李翠芹;何腊平;仇保权【摘要】从制备氨基酸螯合钙的原料及氨基酸螯合钙的制备方法两方面进行综述,为更好的开发复合氨基酸螯合钙产品提供思路.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2011(032)010【总页数】3页(P162-164)【关键词】氨基酸螯合钙;原料;制备方法【作者】李翠芹;何腊平;仇保权【作者单位】贵州大学化学与化工学院,贵州贵阳550003;贵州大学生命科学学院,贵州贵阳550025;广水市第一中学化学教研组,湖北广水432700【正文语种】中文钙是人体生命活动所必需的元素，是机体新陈代谢的源泉。

钙也是人体中含量最丰富的矿物元素，它对维持人体的循环、呼吸、神经、消化、内分泌、肌肉、骨骼、泌尿及免疫等系统的正常生理功能具有重要意义。

然而，全国营养调查结果表明：我国不同年龄、职业的人群、钙摄入量普遍偏低、平均每人每天摄入钙只有400mg，仅达到营养学推荐供给量的1/2左右（800mg/d），儿童和青少年缺钙的现象更为严重。

补钙，特别是儿童补钙已成为一个刻不容缓的问题[1]。

因此，科研人员和企业在不断研制和推出钙制剂：无机钙盐、传统的有机钙盐以及新型可溶性有机钙。

不过，无机钙盐有吸收率低，且易在肾脏停留，容易引起肾结石等缺陷；传统的有机钙盐也存在着有不同程度的毒副作用的缺点。

相比较来说，新型可溶性有机钙，代表为氨基酸钙，其特点是：稳定性好，吸收率高；生物效价高；抗病、抗应激作用，人体在摄入微量氨基酸螯合物时，同时摄入了一般食物中往往缺乏的2种营养物质——微量元素和氨基酸，因而具有双重营养作用[2]。

而且氨基酸钙的毒性小，所以对氨基酸钙的研制，日益受到研究人员的重视。

本文就该领域的研究进行了综述，希望能为更好的开发复合氨基酸螯合钙产品提供思路。

1 制备氨基酸螯合钙的原料1.1 制备氨基酸螯合钙的氨基酸原料用来制备氨基酸螯合钙的氨基酸原料主要有纯的氨基酸、水解动物蛋白制得氨基酸复合液和水解植物蛋白制得氨基酸复合液3类。

酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉的研究的开题报告
一、研究背景
玉米蛋白粉是一种重要的植物蛋白质来源，具有营养丰富、价格低廉、易保存等优点，在食品工业、饲料工业、医药等领域有广泛的应用。

然而，玉米蛋白粉中常含有较高水平的抗营养成分和限制性氨基酸，影
响了其营养价值和应用效果。

一种有效的提高玉米蛋白粉品质的方法是
利用酸性蛋白酶进行水解，破坏抗营养成分和限制性氨基酸，增加其营
养价值和应用效果。

因此，本研究将探讨用酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉
的可行性及其效果。

二、研究目的
本研究的目的是运用酸性蛋白酶对玉米蛋白进行水解，研究水解条
件对玉米蛋白粉功能性质的影响，以提高其营养价值和应用效果。

三、研究内容
本研究的主要内容包括：
1、玉米蛋白粉的制备和酸性蛋白酶的筛选：采用玉米为原料，制备出玉米蛋白粉；通过对不同来源的酸性蛋白酶进行试验筛选，获得较为
适宜的酸性蛋白酶。

2、酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉的工艺条件优化：试验中对酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉的pH、酶解时间、酶解温度等工艺条件进行优化，以获得最佳的水解效果。

3、水解产物的分析：对不同水解条件下的玉米蛋白粉水解产物进行分析，包括其氨基酸组成、分子量分布等。

4、功能性质的测定：测试不同水解条件下的玉米蛋白粉水解产物的溶解性、泡沫性、凝胶性等功能性质，并与未水解的玉米蛋白粉进行比较。

四、研究意义
本研究将探讨酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉的方式，优化水解条件，分析水解产物的氨基酸组成和分子量分布，测定其功能性质，以期在提高玉米蛋白粉的营养价值和应用效果方面发挥作用，进一步丰富和完善玉米蛋白粉的应用领域，对于拓宽农产品的附加值具有重要意义。

复合氨基酸提取方法
复合氨基酸提取方法可以分为酶解法和化学法两种：
1.酶解法。

酶解法是利用蛋白酶对蛋白质进行酶解，得到复合氨基酸的方法。

常用的酶有胃蛋白酶、胰蛋白酶等。

具体操作步骤为：
（1）取一定量的蛋白质，加入适量的酶，控制酶解的时间和温度。

（2）酶解后，使用酸、碱等方法使其中和，得到复合氨基酸。

（3）利用离子交换色谱、凝胶过滤等方法进行纯化和富集。

2.化学法。

化学法是利用化学反应提取复合氨基酸。

此方法的缺点是需要使用一些有毒、有害的化学试剂，操作时需要注意安全防护。

具体操作步骤为：（1）将蛋白质加入到酸或者碱中进行水解。

（2）对水解产生的混合氨基酸进行分离、纯化。

（3）利用离子交换色谱等手段进行混合氨基酸的纯化和富集。

这两种方法各有优缺点，应根据实际情况选取合适的方法。

植物蛋白的研究进展高蕾蕾;李迎秋【摘要】植物蛋白来源广泛,营养全面,易被人体消化吸收,具有多种生理保健功能.从植物蛋白的提取、分离纯化、功能特性及其相应水解产物的生理作用四个方面阐述植物蛋白的研究进展,以期为植物蛋白的研究开发奠定基础.【期刊名称】《江苏调味副食品》【年(卷),期】2018(000)004【总页数】6页(P6-10,16)【关键词】植物蛋白;提取分离;功能特性;水解产物;生理作用【作者】高蕾蕾;李迎秋【作者单位】齐鲁工业大学食品科学与工程学院,山东济南250353;齐鲁工业大学食品科学与工程学院,山东济南250353【正文语种】中文【中图分类】TS201.21蛋白质可被定义为由多种氨基酸通过肽键彼此连接的具有一定空间结构的生物大分子,包含C、H、O、N,通常还含有P、S等元素,是所有细胞原生质的主要组成,广泛存在于动物与植物体内,为生命所必需[1]。

蛋白质体现着机体的生命现象,深入研究蛋白质的结构和功能,将有助于阐明生命的本质。

1 植物蛋白的概况蛋白质按照食物来源，可分为动物性蛋白质和植物性蛋白质。

动物性蛋白质的来源主要是肉、蛋、奶及鱼虾等,且大多属于优质蛋白质,包含人体必需的各种氨基酸,营养价值较高。

但是,动物性食品摄取的比重过大会导致一系列健康问题,诸如高血压、心脏病、肥胖症等[2]。

另外,世界人口的增长和蛋白质资源的不足,同样也促使人们去寻求替代动物蛋白的优质蛋白质资源——植物蛋白。

植物蛋白来源广泛,营养与动物蛋白类似,但更易被人体消化吸收[3]。

此外,植物蛋白具有多种生理保健功能,如降低胆固醇、抗氧化和降血压等,因此植物蛋白的研究开发变得尤为重要[4]。

李帅斐[5]利用碱法提取和酶法改性的方法得到米糠蛋白,并对米糠蛋白的功能和抗氧化性质进行了研究，且将其应用到面包生产中。

结果表明，添加了米糠蛋白的面包不仅品质得到改善,而且营养价值提高、货架期延长。

郑亚军[6]从植物蛋白资源丰富的油棕粕中分离筛选出具有降血压作用的蛋白质,采用超高压辅助复合酶解技术制备降血压肽。

专利名称：玉米蛋白的酶解产物及其制备方法与应用专利类型：发明专利
发明人：马长庆,刘强
申请号：CN201210114593.5
申请日：20120418
公开号：CN102696857A
公开日：
20121003
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种玉米蛋白的酶解产物，是通过以下制备方法得到的：取玉米蛋白，加入2～6倍量水，搅拌均匀，然后加入玉米蛋白重量的0.02％～0.05％的复合蛋白酶，在搅拌下控制酶水解温度35～55℃、pH值5.0～7.5，酶水解6～10小时后，加热至沸腾灭活，经过滤，活性炭脱色得酶解蛋白液，即为玉米蛋白的酶解产物；所述复合蛋白酶是由等质量的酸性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶组成的。

本发明的玉米蛋白的酶解产物，为天然型复合增味剂，主要成分为各种氨基酸、肽类，且含量很高，具有特殊的香味和鲜味，可作为食品增味剂、营养强化剂以及肉类香精的原料等进行应用。

申请人：马长庆
地址：252100 山东省聊城市茌平县东外环路1号齐鲁味精生态园
国籍：CN
代理机构：济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：杨琪
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景言，刘晓兰，王今雨，等. 玉米蛋白水解物的酶法制备及其对结肠炎的缓解作用[J]. 食品工业科技，2023，44（8）：270−278. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022110266JING Yan, LIU Xiaolan, WANG Jinyu, et al. Enzymatic Preparation of Corn Protein Hydrolysate and Its Alleviating Effect on Colitis[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(8): 270−278. (in Chinese with English abstract). doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022110266· 工艺技术 ·玉米蛋白水解物的酶法制备及其对结肠炎的缓解作用景　言1,2，刘晓兰1,2,3, *，王今雨1,2，赵玉昊2，马永强1, *，郑喜群2,3（1.哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江哈尔滨 150028；2.齐齐哈尔大学食品与生物工程学院，黑龙江省玉米深加工理论与技术重点实验室，黑龙江齐齐哈尔 161006；3.黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆 163319）摘　要：为了探究玉米蛋白水解物对肠道屏障功能的保护作用，本文首先以玉米蛋白粉为原料，采用Alcalase 对其进行酶解，考察了不同酶解条件对水解物中谷氨酰胺含量的影响，建立了玉米蛋白的最适水解体系。

然后以葡聚糖硫酸钠为诱导剂构建小鼠结肠炎模型，系统的评价了玉米蛋白水解物对小鼠结肠炎的缓解作用。

结果表明：Alcalase 的最适酶解条件为酶解温度64 ℃，酶解时间2.5 h ，加酶量1300 U/g ；在此条件下，水解物中谷氨酰胺含量可达到8.79%。

所制得的玉米蛋白水解物（375和625 mg/kg·bw ）能够明显改善结肠炎小鼠体重下降，缓解结肠缩短，降低疾病活动指数，减轻结肠组织中炎症细胞的浸润，调节炎症细胞因子水平。

酶法水解玉米蛋白工艺条件的优化1 引言玉米蛋白是一种优质的植物性蛋白质，含有丰富的优质氨基酸，可增强人体免疫力，具有抗疲劳、滋补、健脾、补血等药效，是营养、功能食品开发非常宝贵的蛋白来源。

水解技术作为一种特殊的加工技术，可以将大分子蛋白改性，改变其结构、活性和物性，使其更为温和，更易于消化吸收，更容易被使用，为科学合理利用玉米蛋白新型营养功能食品奠定了基础。

2 酶解法水解技术的基本原理酶解法水解技术通过使用酶溶解玉米蛋白的底物调控，在特定温度、pH值、抑制剂浓度等条件下，通过酶的酶入分解蛋白质分子链，使其变为氨基酸或小肽，既增强了玉米蛋白的可溶性，又降低了其赖氨酸含量，从而改善其口感。

3 酶解法水解玉米蛋白工艺优化（1）温度条件的调节。

温度的上升使酶的活性增加，使玉米蛋白水解速率加快，但太高的温度又会致使酶的失活和反应速率降低，增加体积分离的成本，一般酶解温度应在30~50℃之间；（2）pH值调节。

pH值与酶水解玉米蛋白反应有着密切的关系，太低或太高的pH值均会使酶活性降低，造成水解反应过程慢，酶解反应应当在5.5~9.5之间。

（3）酶浓度优化。

酶浓度过高和过低会影响玉米蛋白水解速率，优化思路主要以d使酶产物和糖浆浓度达到最优化条件，通常酶水解玉米蛋白的最低用量为0.2kU/mL；（4）抑制剂的使用。

抑制剂的使用可以使酶水解玉米蛋白反应稳定；常见的抑制剂有有机酸、盐、无机离子等，但这种抑制剂必须慎重选用，以免影响玉米蛋白的水解速率。

4 结论酶解法水解技术是一种优质、有效、绿色的玉米蛋白处理技术，在温度、pH值、抑制剂浓度和酶浓度等条件下，通过酶处理可以有效增强玉米蛋白的活性，并有效改变其结构，改善其口感，利于它的利用，使玉米蛋白的营养价值得到最大化。

玉米黄粉蛋白的酶法水解工艺
曹方
【期刊名称】《大连工业大学学报》
【年(卷),期】2003(022)001
【摘要】玉米黄粉中含有约60%的蛋白质,但很难直接应用,必须预处理.作者以玉米黄粉为原料,运用变性处理和酶法水解的方法,获得具有生理功能的活性肽, 可开发保健型功能食品.通过测定水解度(DH%)和酸溶性肽得率(YASP%)确定As1.398中性蛋白酶的酶解效果最好.实验结果表明:Na2SO3对玉米黄粉蛋白变性处理可以较大程度地提高水解度.变性处理的最佳条件为:Na2SO3浓度0.15%,温度45 ℃,变性反应时间15 min.最佳水解条件为:pH7.2,温度45 ℃,加酶量91 700 U,底物玉米黄粉的质量分数为0.9%,时间2 h. 水解度和酸溶性肽得率可分别达到52.27%和63.17%.
【总页数】4页(P36-39)
【作者】曹方
【作者单位】大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034
【正文语种】中文
【中图分类】TS239;TQ925.2
【相关文献】
1.酶法水解牛骨蛋白制备蛋白胨生化试剂的工艺 [J], 黄菊; 杨君丽; 曾吉伟
2.酶法水解牛骨蛋白制备蛋白胨生化试剂的工艺 [J], 黄菊; 杨君丽; 曾吉伟
3.超声波辅助提取玉米黄粉中醇溶蛋白工艺优化 [J], 陈静;陈志宏;张汆;刘洋;何晓伟
4.玉米黄粉预处理工艺优化及其蛋白水解成分分析 [J], 皮诗宇;王常高;杜馨;蔡俊
5.超声波辅助提取玉米黄粉中醇溶蛋白工艺优化 [J], 陈静;陈志宏;张氽;刘洋;何晓伟
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玉米蛋白中可溶性蛋白水解氨基酸组成的测定
张华;杨鑫;张英春;王静
【期刊名称】《中国粮油学报》
【年(卷),期】2007(022)006
【摘要】利用氨基酸自动分析仪建立了玉米黄粉蛋白酶解产物中可溶性蛋白中氨基酸组成的分析方法,结果显示酶解产物中含有丰富的苯丙氨酸、亮氨酸等必需氨基酸以及脯氨酸,该方法具有操作简便、快速、重现性好,结果可靠的优点,为寻找玉米蛋白酶解最佳工艺条件提供依据.
【总页数】4页(P19-22)
【作者】张华;杨鑫;张英春;王静
【作者单位】哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,哈尔滨,150090;哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,哈尔滨,150090;哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,哈尔滨,150090;中国农业科学院质标所,北京,100081
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.富硒玉米蛋白水解物中硒肽及含硒氨基酸的结构鉴定 [J], 王真真;张久亮;王驰;侯焘;张岩;何慧
2.柱前衍生HPLC法测定玉米蛋白粉中的谷氨酸 [J], 张志华;高剑波
3.玉米蛋白酶解产物氨基酸组成的测定 [J], 黄国清;李世敏;刘冬;郭勇
4.玉米蛋白水解液在温度敏感型菌种中的尝试 [J], 邓涛;刘利锋
5.绢纺精练液中丝胶蛋白的氨基酸组成、相对分子量及溶解性的测定 [J], 王志强;张慧华
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