细胞培养所需耗材有哪些
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细胞培养费用背景细胞培养是生物学研究中一项重要的实验技术,它可以帮助研究人员在体外环境中培养和繁殖细胞。
然而,细胞培养不仅需要耗费时间和精力,同时也需要一定的费用来购买培养基、细胞培养器具和其他必需品。
本文档将详细介绍细胞培养费用的相关内容。
细胞培养费用的组成细胞培养费用通常包括以下几个方面的开支:1. 培养基费用:培养基是细胞培养的基础,它提供了细胞所需的养分和环境条件。
根据不同细胞类型和研究需求的不同,培养基的成分和配方也有所差异。
培养基费用的多少取决于所选用的培养基品牌和规格。
培养基费用:培养基是细胞培养的基础,它提供了细胞所需的养分和环境条件。
根据不同细胞类型和研究需求的不同,培养基的成分和配方也有所差异。
培养基费用的多少取决于所选用的培养基品牌和规格。
2. 细胞系费用:如果需要进行细胞培养研究,就需要购买相应的细胞系。
不同细胞系的价格各不相同,通常受到细胞类型、来源和研究用途的影响。
一些常用的细胞系可能需要长期维持和更新,这也会增加细胞培养费用的开支。
细胞系费用:如果需要进行细胞培养研究,就需要购买相应的细胞系。
不同细胞系的价格各不相同,通常受到细胞类型、来源和研究用途的影响。
一些常用的细胞系可能需要长期维持和更新,这也会增加细胞培养费用的开支。
3. 培养器具费用:细胞培养所需的器具包括细胞培养箱、培养皿、离心管等。
这些器具的价格也不同,一般根据品牌、规格、材质和用途来确定。
培养器具费用:细胞培养所需的器具包括细胞培养箱、培养皿、离心管等。
这些器具的价格也不同,一般根据品牌、规格、材质和用途来确定。
4. 实验室耗材费用:在进行细胞培养过程中,还需要使用一些实验室耗材,如离心管、移液器、显微镜片等。
这些耗材的费用视实验需要以及使用频率而有所不同。
实验室耗材费用:在进行细胞培养过程中,还需要使用一些实验室耗材,如离心管、移液器、显微镜片等。
这些耗材的费用视实验需要以及使用频率而有所不同。
5. 设备维护费用:细胞培养过程中使用的设备,如细胞培养箱、显微镜等需要定期维护和保养。
细胞制备常用耗材材料
细胞制备过程中需要使用多种耗材材料,这些材料对于细胞制备
的成功至关重要。
下面就为大家介绍常用的耗材材料及其作用。
1、细胞培养基
细胞培养基是细胞生长、分化、增殖所必须的基础。
不同类型的
细胞需要使用不同种类的培养基,例如EMEM培养基可用于培养小鼠成纤维细胞,DMEM培养基可用于培养人类细胞等。
在使用培养基时需要注意培养基的配制和储存条件,以保证细胞的健康生长。
2、细胞冻存液
细胞冻存液是将细胞保存在低温条件下的重要介质,可以延长细
胞的寿命。
细胞冻存液的配制要与细胞类型相匹配,含量的浓度、PH
值和添加物的选择具有很大关联。
一般情况下,细胞冻存液中含有10% DMSO和20%人血清可以有效保护细胞。
3、消毒液
消毒液主要用于对培养室、培养箱、培养器、试管等实验室设备
进行消毒。
为防止不同菌株的污染对细胞的影响,消毒液的选择应根
据不同细胞类型和实验要求来决定。
一般工作台、镊子、移液管、培
养板应每天进行消毒。
4、细胞培养器皿
细胞培养器皿一般包括培养瓶、培养箱、平板、离心管等。
正确
选用容器可以确保细胞生长环境卫生、稳定。
注意过期日期,选择质
量可靠的细胞培养器皿,以免对细胞生长带来影响。
细胞制备耗材材料是细胞培养的基础,要保证细胞培养以顺利的
进行,科学的选择和使用这些耗材材料具有重要意义。
选择定期更新,正确使用和保养这些耗材材料,可以更好的保证细胞培养的成功。
器材与试剂干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器等具体步骤1. 水:细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。
需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.2. PBS (也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO4 0. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml,摇匀即成新配制的PBS溶液。
用HCl或NaOH调PH到7.4。
移入溶液瓶内待消毒:将PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。
注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。
3. 胰蛋白酶溶液:胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。
不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。
胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为8.0、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力最强。
使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。
因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。
终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为0.25%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。
搅拌混匀,置于4℃内过夜。
用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。
然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。
4. 0.05%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液称取胰蛋白酶粉末(1:250)0.05g,EDTA 0.02g,加入PBSA 100ml,0.22um微孔滤膜过滤除菌,分装,于-20℃保存。
检验科微生物室建设所需物品清单一、仪器设备部分:1.离心机:用于分离悬浮液中的微生物和细胞等。
2.自动培养箱:用于微生物的培养以及细胞和组织的培养。
3.高速冷冻离心机:用于快速冷冻并离心微生物和细胞以保持其完整性。
4.PCR仪:用于聚合酶链式反应,用于扩增或检测微生物DNA序列。
5.电子天平:用于精确称量微生物培养基、试剂和样品等。
6.透析器:用于通过渗透压差将微生物培养液中的溶质透析出来。
7.快速制冷仪:用于迅速冷却微生物和细胞样品。
8.超速冷冻切片机:用于快速冷冻并切割微生物和细胞样品。
二、实验室用品部分:1.培养皿和试管:用于培养微生物。
2.移液器:用于移液和加样。
3.调理架与烧杯:用于制备微生物培养基等溶液。
4.微孔板:用于承载多个微生物或细胞培养样品。
5.显微镜:用于观察细胞和微生物样品。
6.无菌操作台:用于进行无菌操作,以防止样品受到细菌污染。
7.人工培养基:用于培养细菌和真菌等微生物。
8.常用试剂:如酶、染料和缓冲液等。
9.洗涤剂:用于清洗仪器、设备和实验室器皿。
10.防护用品:如实验服、手套、护目镜等。
三、耗材部分:1.细胞培养耗材:细胞培养瓶、培养皿、移液器、细胞过滤器等。
2.微生物培养耗材:培养皿、试管、琼脂瓶等。
3.采样和分离耗材:纱布、洗涤液、离心管等。
4.实验室手套:一次性或可重复使用的实验室手套。
5.注射器和针头:用于注射培养基、溶液和样品等。
6.培养基和试剂:各种微生物培养基和实验室试剂。
7.消毒液:用于清洁实验室平台、仪器设备和器皿等。
四、安全设备部分:1.灭菌器:用于对实验器具进行灭菌处理。
2.实验室安全柜:用于保存和处理有毒或有害微生物样品。
3.柜子和抽屉:用于储存实验用品和化学试剂。
4.紧急洗眼器和淋浴器:用于处理实验中的化学溅洒事故。
以上只是一个基础的示例清单,具体物品的种类和数量还需要根据实际情况进行调整和补充。
在购买物品时,要根据实验需求、实验室规模以及经费预算等因素进行合理选择。
细胞培养的必需营养物质
细胞培养所需的必需营养物质包括以下几类:
1. 基础培养基:如RPMI-1640、DMEM 等,提供细胞生长所需的基本营养成分。
2. 血清:胎牛血清或新生牛血清,提供细胞生长所需的生长因子和激素。
3. 氨基酸:细胞合成蛋白质所需的必需氨基酸。
4. 维生素:如维生素C、维生素E 等,对细胞的生长和代谢有重要作用。
5. 无机盐:如钠、钾、钙、镁等,维持细胞的渗透压和酸碱平衡。
6. 葡萄糖:细胞的主要能量来源。
7. 生长因子:如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子等,促进细胞的生长和分化。
8. 抗生素:防止细菌和真菌污染。
细胞培养准备工作常用器具:细胞培养瓶、细胞培养板、移液器、三角瓶、烧杯、量筒、平皿、滤器、滤膜、磁力搅拌器、电子天平、酒精灯、镊子、剪刀、瓶架、吸管架、超净工作台、倒置显微镜、CO2培养箱、烘箱、移液管、枪头、离心管、酸缸、细胞冻存管、液氮罐、封口膜、喷壶、以及洗刷用品等。
清洁液的配制及酸缸的使用:清洁液的配置:1. 分别称取适量的重铬酸钾和蒸馏水,把重铬酸钾转移到塑料容器中(或不锈钢容器中),然后用蒸馏水溶解重铬酸钾。
2. 待重铬酸钾溶解充分之后,缓缓加入称量好的浓硫酸,一边加一边搅拌。
注意:切不可把重铬酸钾溶液加入到浓硫酸中。
3. 待酸液自然冷却后,移入酸缸中。
弱液:重铬酸钾——100g,浓硫酸——100mL,蒸馏水——1L次强液:重铬酸钾——120g,浓硫酸——200mL,蒸馏水——1L强液:重铬酸钾——63g,浓硫酸——1L,蒸馏水——200mL酸缸的使用:1. 将内缸取出置于外缸的支架上,静置使酸液沥干。
2. 将干燥后的培养用具放入内缸,然后缓缓将内缸放入酸液中。
注意:如瓶中仍有气泡需要将气泡赶净,确保瓶中不留气泡。
清洗:1. 玻璃器皿的清洗(1)新买的玻璃器皿:用自来水初步刷洗——5%的稀盐酸浸泡过夜——自来水冲洗5~6次——洗涤剂刷洗——自来水冲洗5~6次,甩干——泡酸过夜——自来水冲洗20遍——蒸馏水冲洗3~5遍——双蒸水冲洗3遍——烘干(50~60℃)——包装(2)使用过的玻璃器皿的清洗:自来水浸泡——洗涤剂刷洗——自来水冲洗5~6次,甩干——泡酸过夜——自来水冲洗20遍——蒸馏水冲洗3~5遍——双蒸水冲洗3遍——烘干(50~60℃)——包装2. 塑料器皿的清洗细胞培养皿、培养板及培养瓶新的可直接使用。
使用过的器皿:清水冲洗干净——晾干——2%NaOH浸泡过夜——自来水冲洗——5%盐酸浸泡30min——流水彻底冲洗——蒸馏水漂洗——晾干3. 瓶盖的清洗塑料盖和胶塞的清洗方法相同,但需要分开清洗自来水冲洗(新的)或浸泡(使用过的)——洗涤剂刷洗——自来水冲洗5~6次——蒸馏水浸泡过夜——用双蒸水煮沸2~3次,10min /次,每次煮完要换水——烘干(50~60℃)——包装4. 剪刀、镊子的清洗洗涤剂刷洗——自来水冲洗5~6次——蒸馏水冲洗——酒精棉球擦拭(需用双蒸水配置酒精)——包装消毒:干热消毒:160~170℃,2h 主要用于玻璃器皿,待冷却后取出湿热消毒:121℃,20min 主要用于塑料器皿、金属器械过滤除菌:主要用于培养液、血清、酶等细胞培养瓶(板)生长面积容量与细胞数(大约)96孔板 4-5X104 35mm培养皿 1X10648 孔板 1.3X10 5 60mm培养皿 2.6X10 624孔板 2.5X10 5 100mm培养皿 7X10 612孔板 5X 10 5 150mm培养皿 1.8X10 7 6孔板 1.2X10 6细胞瓶面积容量工作体积细胞数目12.5cm2 25ml 2ml 5X10525cm2 50ml 5ml 1X10 635cm2 75ml 10ml 2X10 675 cm2 250ml 15ml 4X 10 6150cm2 700ml 40ml 1.1X107。
细胞培养环境、设备、耗材与试剂1.环境:细胞培养需要创造一个尽量无菌的环境,所以基本要求是一间密闭的带有空气净化系统的实验室。
实验室要安装能够进行表面杀菌的紫外灯,一般装置在室内顶部,与日光灯分开控制。
2.设备:一般的细胞培养需要二氧化碳细胞培养箱,达到细胞实验操作要求的超净台,倒置显微镜,液氮罐,冰箱,水浴锅,离心机,微量移液器等。
3.耗材:基本的细胞实验耗材包括酒精灯、脱脂棉花、封口胶、细胞培养瓶、细胞培养皿、移液管、50ml 离心管等。
耗材可以购买细胞培养专用的一次性耗材,也可使用长久性的玻璃器皿。
但是如果是使用长久性的玻璃器皿,必须将其用牛皮纸包裹好,然后经过湿热高压灭菌和灭菌后烘干。
牛皮纸在放进超净台时才能拆除。
4.试剂:根据培养的细胞种类的不同,需要的试剂也不同。
基本要求包括培养的细胞对应的培养液,胎牛血清,L谷氨酸,双抗(青霉素和链霉素),% 胰酶以及PBS。
1.试剂可以通过生物公司订购,其中双抗、胰酶和PBS也可以自行购买原料配制。
1、配制双抗时要用灭过菌的双蒸水,用一次性无菌注射器进行配制,整个配制过程要在超净台内操作。
2.配制胰酶时要使用灭菌后的双蒸水,配制好可以用带微米微孔滤膜的过滤器进行过滤灭菌,整个过滤灭菌过程要在超净台内操作。
3.配制PBS可以使用不灭菌的双蒸水,配制完成后再经过湿热灭菌。
5.部分试剂的配方1.100×L谷氨酸:L谷氨酰胺2.10×PBS:1000ml中含NaCl ,,3.100×双抗:青霉素10000U/ml,链霉素10000ug/ml4.胰酶:%胰酶,6.细胞完全培养液的配置细胞完全培养液,以293细胞为例,需要含10%胎牛血清、2mmol/L的L谷氨酸的DMEM培养液。
配置好的DMEM培养液,根据实验要求的不同,选择是否加入双抗。
双抗终浓度为100单位/ml。
细胞培养实验基本操作要求1.每天应该对细胞实验室进行半小时的紫外照射灭菌。
一、培养细胞常用配置培养基的配置:基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml冻存液的配置:10 % DMSO + 90%依次比例酌量配置。
超净工作台常规配置移液器1套(μl、20μl、200μl、1ml),酒精灯1盏,液器1台,斜架1台,酒精喷壶1个,酒精棉球缸1个,污缸1个,常规耗材:培养瓶(50㎝2),定量移液管(5ml、10ml),枪头(1ml、200μl、10μl),培养皿,6/24/48/96孔板,医用脱脂棉球,冻存管所需试剂:培养基,胎牛血清,双抗,DMSO,胰酶,75%酒精……实验前准备:所需的各项高压后的耗材及污物缸放于超净工作台内,用酒精喷壶喷洒实验台面,并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。
培养基及胰酶恢复常温后使用,可37℃水浴5-10min二、细胞复苏步骤:1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。
2. 培养液(DMEM),恒温水浴箱37℃预热20min,备用。
超净台内准备一支15ml离心管备用。
3.将所需的培养基确保瓶身干净后酒精消毒放于工作台面内,点燃酒精灯,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后需再次分别消毒瓶口和瓶盖。
4. 从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入37℃水浴中,快速摇晃,直至冻存液融化至黄豆粒大小后迅速取出。
5. 将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心(1000r/min,5min)。
6. 取出2个培养皿并做好标记(复苏日期等),提前加入5-10ml培养液;离心结束后用1ml培养液悬液混悬沉淀细胞后分别加入培养皿内。
7. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧,熄灭酒精灯,整理实验台面,取出实验试剂及污缸等,关闭超净工作台。
8. 将培养瓶放入培养箱内培养注意事项:1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套。
此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。
培养系列:细胞培养耗材三角摇瓶培养系列:细胞培养耗材三角摇瓶产品简介细胞培养耗材三角摇瓶适用于对氧气要求较高的细胞系,也可用在悬浮液中培养细菌、真菌和动植物细胞,或用于培养基的配制、混合及储存,是一款经济实惠的细胞培养工具。
细胞摇瓶主要用于悬浮细胞的培养,也用于各种培养基的制备和储存。
在材质上,这种细胞培养耗材有PETG和PC两种材质。
PETG是一种透明、非结晶型共聚酯,全称为聚对苯二甲酸乙二醇酯-1,4-环己烷二甲醇酯。
它具有突出的韧性和高抗冲击强度,其抗冲击强度是改性聚丙烯酸酯类的3~10倍,并具有很宽的加工范围,高的机械强度和优异的柔性,比起PVC透明度高,光泽好,容易印刷并具有环保优势。
高透明度加上各种优良性能,是细胞摇瓶的良好生产原料。
PC,即聚碳酸酯,又称PC塑料;是分子链中含有碳酸酯基的高分子聚合物,根据酯基的结构可分为脂肪族、芳香族、脂肪族-芳香族等多种类型。
其中由于脂肪族和脂肪族-芳香族聚碳酸酯的机械性能较低,从而限制了其在工程塑料方面的应用。
它具高强度及弹性系数、高冲击强度、耐疲劳性佳、尺寸稳定性良好、蠕变也小(高温条件下也极少有变化)、高度透明性及自由染色性。
使用温度范围广,增强后的UL温度指数达120~140℃(户外长期老化性也很好)。
产品特点►产品材质:符合USP VI级PETG材料►按照cGMP标准生产完成,无人员直接接触,产品一致性好►瓶盖釆用高强度HDPE材料,配合PTFE疏水透气膜设计,与液体接触后不影响透气膜的密封性和透气效果►刻度清晰、准确,便于观察培养基容量►产品规格:125ml、250ml、500ml、l000ml►独立无菌包装,无DNA酶、无RNA酶、无热原,使用方便细胞培养耗材三角摇瓶本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。
公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。
细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术。
细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。
细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。
通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。
因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。
细胞培养泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。
细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础科学之一。
细胞培养专用试剂
细胞培养专用耗材。
细胞培养耗材应用细胞培养是生物学研究中常用的一种实验技术,通过将细胞放置在适宜的培养基中,提供适当的营养物质和环境条件,使细胞能够在体外生长和繁殖。
细胞培养耗材是进行细胞培养实验时所必需的工具和材料,它们的应用范围广泛,包括生物医学研究、药物研发、生物工程等领域。
常见的细胞培养耗材包括培养皿、培养瓶、离心管、移液器、细胞培养板等。
这些耗材通常由聚苯乙烯、聚丙烯等材料制成,具有良好的透明度和耐受性,能够提供良好的细胞附着表面,同时能够耐受细胞培养所需的消毒和清洗过程。
培养皿是进行细胞培养的基本容器,通常由聚苯乙烯制成。
培养皿的底部为平整的生长面,可以提供细胞附着的表面。
培养皿的尺寸有多种规格可选,通常根据实验需求选择合适的尺寸。
培养皿通常需要经过高温高压灭菌处理,以确保实验的无菌性。
培养瓶是用于大规模细胞培养的容器,通常由聚丙烯制成。
培养瓶具有较大的容积和较宽的底部面积,可以提供更多的细胞生长空间。
培养瓶通常配有螺纹盖或滤膜盖,以便通气和预防污染。
培养瓶的选择要根据细胞的生长特性和培养的规模来确定。
离心管是进行细胞离心和样品分装的常用工具,通常由聚丙烯制成。
离心管具有良好的耐受性和密封性,能够承受高速离心的力矩。
离心管通常有不同容量的规格可选,可以满足不同实验需求。
移液器是进行细胞培养液的移液和分配的常用工具,通常由聚乙烯制成。
移液器分为手动移液器和电动移液器两种类型,可以根据实验需要选择不同类型的移液器。
移液器通常配有不同容量的移液头,可以方便地进行微量和大容量的移液操作。
细胞培养板是进行细胞培养的特殊容器,通常由聚苯乙烯制成。
细胞培养板的底部覆盖有一层特殊的涂层,可以提供良好的细胞附着表面。
细胞培养板通常有不同孔数和不同规格可选,可以满足不同实验需求。
细胞培养耗材的选择和应用对于细胞培养实验的成功与否至关重要。
在选择细胞培养耗材时,需要考虑实验的目的、细胞类型、培养规模等因素,并根据实验需求选择合适的耗材。
细胞培养是一项常用的生物技术,其原理是基于细胞在适当的培养条件下能够维持存活和增殖的能力。
通过细胞培养,可以获得大量的细胞样本,用于研究、药物筛选、疾病治疗等应用。
以下是细胞培养的原理、所需试剂和耗材、实验仪器、准备工作、实验方法、注意事项、常见问题及解决方法。
一、原理细胞培养的基本原理是模拟细胞在生物体内的生长环境,提供细胞生存和增殖所需的基本条件。
这些条件包括适当的温度、湿度、营养物质(如氨基酸、葡萄糖、脂肪酸等)和气体环境(如氧气、二氧化碳等)。
通过提供这些适宜的条件,细胞可以在体外环境中维持生存和增殖。
细胞培养中涉及的关键生物学过程包括细胞的贴壁、增殖和传代。
细胞的贴壁是指细胞在培养瓶内附着于瓶壁上的过程,这通常发生在细胞悬液加入培养液之后。
细胞贴壁后,会开始进行有丝分裂,进行增殖生长。
当细胞数量增加到一定程度时,需要将培养瓶中的细胞传代到新的培养瓶中,以维持细胞的适宜生长密度。
二、所需试剂和耗材细胞培养所需的主要试剂和耗材包括:1.培养基:为细胞提供基本的营养物质,如胎牛血清、氨基酸、葡萄糖等。
2.添加剂:包括抗生素、抗真菌药物等,用于防止培养过程中的污染。
3.培养瓶:用于细胞的培养,有不同的规格和形状。
4.移液器:用于吸取和转移细胞悬液和培养液。
5.离心管:用于离心收集细胞。
6.过滤器:用于过滤培养液中的杂质和颗粒。
7.DEPC水:用于制备无RNA酶的水。
8.无菌操作台:用于进行无菌操作,防止污染。
三、实验仪器细胞培养常用的实验仪器包括:1.细胞计数器:用于细胞计数和细胞密度测量。
2.显微镜:观察细胞的生长情况和形态变化。
3.CO2培养箱:为细胞提供适宜的生长温度和气体环境。
4.高压灭菌器:用于消毒处理实验器材和试剂。
5.超净工作台:用于进行无菌操作。
6.分光光度计:用于测量细胞生长的生化指标,如蛋白质含量等。
四、准备工作在进行细胞培养前,需要进行以下准备工作:1.选择适当的细胞:根据实验需求选择适合的细胞,了解其特性、来源和培养条件。
细胞培养实验用品准备方案1.种类:1.1.细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与PaSteUrPiPet外,其它均为塑料无菌制品。
1.2.TC级培养盘表面均有coating高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask,plates,dishes,rollerbottle 依实验需要使用。
1.3.plasticsterilepipet:1ml,2ml,5ml,10ml,25ml1.4.塑料离心管:15ml,50ml,均有2种不同材质,*ψpolypropylene(PP)为不透明材质,polystyrene(PS)为透明材质,可依实验需要而选择适合材质之离心管。
1.5.glasspastuerpipet:9inch,用以抽掉废弃培养液等。
1.6.玻璃血清瓶(PyreXorDuranglassware):100ml,250ml,500ml,1000ml2.清洗:2.1.新购玻璃血清瓶先以0.1~0.05NHCl浸泡数小时,洗净后才开始使用。
2.2.用过之玻璃血清瓶,以高压蒸汽灭菌,洗净后分别用一次与二次去离子水冲洗干净,勿加清洁剂清洗。
3.灭菌:3.1.实验用玻璃血清瓶以铝箔纸包覆瓶盖,高压蒸汽灭菌121C,151b,20分钟,置于oven中烘干O3.2.实验用玻璃PaSteUrPiPet以干热灭菌170℃,4小时。
3.3.液体或是固体废弃物可用10%hypochloride溶液(次氯酸,即漂白水)或是蒸汽高压灭菌121℃,151b,20分钟处理。
无菌室的灭菌:1.定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3%。
来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%过氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3%。
新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%过氧乙酸,再用紫外灯照射3.实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟4.实验后灭菌:用75%酒精(3%。
培育技术中细胞培养器材与耗材的使用注意事项细胞培养是生物学研究中常用的重要手段,可以用于研究细胞的生理机制、药物筛选等。
细胞培养所用的器材与耗材对于实验结果的准确性和可靠性起到至关重要的作用。
本文将从培养器材的选择、使用条件的控制以及消毒与清洗几个方面介绍在细胞培养中使用器材与耗材的注意事项。
1. 培养器材的选择在进行细胞培养时,选择合适的培养器材非常重要。
常用的培养器材包括培养皿、离心管、移液器、显微镜镜片等。
这些器材都必须符合相关的品质标准,并且要与细胞生长环境相适应。
例如,一些细胞对于塑料培养皿表面的亲和性较高,而另一些细胞则对玻璃培养皿更适应。
因此,在选择培养器材时,要根据细胞类型和实验需求进行综合考虑。
2. 使用条件的控制在进行细胞培养实验前,需要正确设置使用条件。
细胞的培养需要一定的温度、湿度和气体环境等条件。
常见的细胞培养条件包括37摄氏度的恒温培养箱、5%的二氧化碳气体培养箱以及无菌的湿度控制环境。
此外,细胞培养液的pH值和营养成分也需根据细胞类型进行调整。
在进行实验时,需要根据具体需求确定适合的使用条件,以保证细胞的正常生长与表型稳定。
3. 器材的消毒与清洗细胞培养中,器材的消毒与清洗是非常重要的环节。
任何不符合要求的器材都可能对细胞培养产生不良影响,甚至导致实验结果的偏差。
首先,所有使用过的器材都应该进行彻底的清洗,以去除污物与残留物。
其次,进行高压高温消毒是非常重要的,可以有效杀灭潜在的病原微生物和其他污染物。
消毒方法可以选用高压蒸汽灭菌器或消毒柜等设备进行。
注意,在消毒过程中需确保器材在高温下的耐受性与完整性。
另外,使用培养皿时应避免直接触碰表面,以免带入微生物或其他杂质影响细胞生长。
4. 耗材的选择与使用在细胞培养实验中,耗材的选择和使用同样重要。
培养液、培养基、细胞分离液等都属于重要的耗材。
要确保使用的耗材质量合格,不含有潜在的毒性物质。
此外,培养液的配制要精确,各项成分的浓度要根据需求进行调整。
【细胞培养耗材】如何选择细胞培养耗材细胞培养器材的选择:从培养量大小来讲,从小到大有细胞培养板、细胞反应管、摇瓶、细胞培养瓶、细胞工厂等,更大就是反应器了。
细胞培养瓶培养面积从25-225平方厘米不等,一般都经过表面改性处理,适合细胞贴壁和生长。
225ml 、175ml的多用于大规模培养时用(如单克隆细胞的培养等),75ml的多用于一般性细胞实验用(一般性的传代,保存细胞,为实验提供细胞等),25ml一般是用来复苏细胞或细胞较少时的培养,还有做原代细胞时也可以做多瓶而避免交叉污染。
细胞培养瓶当然还有其他如摇瓶,五层细胞培养瓶等,都可根据个人爱好和实验需要自己选择。
摇瓶系列五层培养瓶多孔板利用多孔板的细胞培养模式正倍受青睐,因为这有助于研究多个动态变量,减少实验时间,并节约昂贵的试剂。
除了标准的高通量微孔板,还有一些特殊的微孔板被开发出来,助力3D和器官型细胞培养。
1. 孔的数量取决于所需的通量水平,以及是否有机器的协助。
6、12、24等较少孔板的可以手动添加。
到96孔板,有电动移液器或机器的帮助比较好。
扩展到384孔板,或1536孔板更加绝对需要。
当然,高密度多孔板的挑战还在于分析小型化。
细胞培养板2. 孔的形状孔的底部可以选择平的、圆的,或锥形的,这取决于细胞类型和下游应用。
•对于传统的2D细胞培养(如HeLa或MDCK细胞),特别是需要对培养物进行成像或分光光度测定,通常首选平底(F-bottom)。
•对于不存在接触抑制的细胞,弧形底(C-bottom)也不错。
•圆底(U-bottom)适合悬浮培养(如球体细胞培养),因为圆的表面让细胞难以附着和生长。
•而锥形底很少用于细胞培养实验,但在细胞沉淀时可能有用。
3. 微孔板的颜色多孔板的颜色也与应用息息相关。
如果用相差显微镜或肉眼观察细胞,可选择透明的多孔板。
不过,对于可见光光谱以外的应用(如冷光或荧光),有颜色的多孔板(如白色或黑色)则是必需的。
细胞培养的路上,有多虐心就有多少需要值得注意的地方。
小小的平皿之中,细胞点点,引无数英雄竞挂东南枝。
正所谓“万事开头难”,即便是细胞复苏与保存这两件看似简单的事情,也能造成实验汪内心无比巨大的阴影面积。
下面就给各位实验室新手介绍一下细胞培养具体需要哪些耗材。
一、细胞培养基础试剂
1、培养基:一般是用不完全培养基+10% FBS(胎牛血清)自己配的,有时也添加双抗预防细胞感染。
具体培养基类型根据你养的细胞类型去选择。
2、胰蛋白酶:简称是胰酶,消化细胞用的。
一般消化1-2 min,时间太短,细胞消化不完全,时间太长,会消化过度损伤细胞。
3、常用试剂:酒精,PBS 缓冲液。
二、细胞培养基础耗材
1、细胞培养容器。
(1)培养瓶:如果你们是实验室小规模一般选50ML 100ML 250ML。
(2)玻璃瓶:培养基可以买胰酶的配置需要的成本很低所以准备两三个150ML的瓶子自己配就行了。
配置胰酶需要购买一种过滤器。
(3)细胞4102培养1653板(我们自己常用的有96空、24孔、6孔,当然还有其他的规格,可以根据需回要选择)。
(4)培养基:如果自己配置的话要买一些蓝盖的瓶子,一般规格会有1000ml、500ml、250ml、100ml的,也要买一些装血清的血清瓶,10ml的玻璃试管也要买一些。
2、耗材。
吸管、移液管、各种枪和枪头、离心管、封口膜等。
(1)玻璃吸管:长25-30CM 玻璃器2113皿总是摔5261断所以稍稍长一点比较好。
(2)EP管:4ML的塑料管、冻存管、这些塑料的管子是必须的。
(3)移液枪:(各种型号都要一把吧)这个不算是耗材但是枪头是耗材。
三、细胞冻存试剂和耗材
1、冻存液:一般用10% DMSO+FBS+培养基组成,FBS 和培养基的比例依细胞类型决定,比较珍贵的细胞一般用90% FBS,一般的细胞可以用50% FBS+40% 培养基来配制。
2、胰蛋白酶等用于细胞培养的一般试剂。
3、冻存管、离心管、离心机、吸管、枪头、显微镜、冻存盒、冰箱、液氮罐等。
贝兰伯生物技术(杭州)有限公司是由教授级高工带队,博硕士及十几年生命科学领域的研发、销售团队构成,致力于研发、生产高品质实验室耗材、科研产品,为科研事业贡献力量。
我们的产品包括PCR管、离心管、无酶无热源诊断包装瓶,无酶无热源吸头、细胞培养类、酶标板、检测板、深孔板、磁套等,可广泛用于疫苗、抗体药物、基因治疗药物、细胞治疗药物、蛋白质药物、核酸药物、药物研发与核酸提取(DNA和RNA)、基因测序、分子诊断、疫苗研究开发。