2021年甘草酸实验报告
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甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种常见的草药成分,具有广泛的药理活性和医疗应用价值。
本实验旨在通过提取和分离的方法获取纯度较高的甘草酸,并通过一系列鉴定实验确定其结构和纯度。
我们采用乙醇作为提取剂,将甘草粉碎成细粉,然后与乙醇进行浸泡提取。
乙醇具有较好的溶剂性能,可以有效提取甘草中的甘草酸成分。
浸泡时间一般为24小时,可在室温下进行。
提取后,将混合溶液过滤,得到乙醇溶液。
接下来,我们使用分离漏斗将乙醇溶液与等体积的正己烷进行液液分离。
甘草酸在正己烷中的溶解度较低,因此可以通过这种分离方法将甘草酸从乙醇溶液中分离出来。
分离后,我们得到了正己烷层和乙醇层。
然后,我们对正己烷层进行蒸馏提纯。
将正己烷层进行蒸馏,得到的蒸馏液中富含甘草酸。
此时,我们可以使用旋转蒸发仪将蒸馏液浓缩,以便于后续的鉴定实验。
蒸发浓缩后,我们得到了甘草酸的样品。
接下来,我们进行甘草酸的鉴定实验。
首先,我们可以通过比色法确定甘草酸的纯度。
将甘草酸溶解于乙醇中,然后使用紫外可见光谱仪测定其吸收峰的强度和波长。
根据甘草酸的吸收特性,可以确定其纯度。
我们还可以使用红外光谱仪对甘草酸进行鉴定。
根据甘草酸的分子结构,预测其可能的红外吸收峰位置,并通过红外光谱仪测定样品的红外吸收谱图,与数据库中的标准谱图进行对比,从而确定甘草酸的结构。
我们可以使用质谱仪对甘草酸进行质谱分析。
将甘草酸样品溶解于适当的溶剂中,然后通过质谱仪进行质谱测定。
根据质谱图谱的分子离子峰和碎裂峰,可以确定甘草酸的分子量和结构。
通过以上一系列的实验步骤,我们成功提取分离并鉴定了甘草酸。
实验结果表明,我们得到的甘草酸样品具有较高的纯度,并且其结构与甘草酸的结构一致。
这为甘草酸的进一步研究和应用提供了基础。
同时,该实验方法也为其他草药成分的提取和分离鉴定提供了参考。
甘草酸的微波提取与含量测定实验报告实验目的:
本实验旨在通过微波提取的方法提取甘草酸,并对提取物中甘草酸的含量进行测定。
实验原理:
甘草酸是一种具有丰富药用价值的天然产物,常见于甘草等植物中。
微波提取是一种高效、快速的提取方法,能够在较短的时间内从样品中提取目标成分。
实验步骤:
1.准备样品:将甘草酸含量已知的甘草药材研磨成粉末状。
2.称量样品:称取适量的甘草药材粉末,精确记录其质量。
3.加入提取溶剂:将甘草药材粉末与适量的提取溶剂(如乙醇)混合,待溶解。
4.微波提取:将混合物置于微波提取仪中,设置合适的提取条件(如温度、时间等),进行微波提取。
5.提取液浓缩:将提取液转移至烧杯中,通过蒸发或其他浓缩方法使其浓缩。
6.甘草酸含量测定:采用合适的分析方法(如高效液相色谱法)对提取物中的甘草酸进行测定,记录结果。
实验结果与讨论:
根据实验测定,我们成功提取到了甘草酸,并测定出其含量为X%。
这表明微波提取是一种有效的甘草酸提取方法。
在实验过程中,我们注意到微波提取的优点在于提取速度快、操作简便,同时提取效果也较好。
然而,仍需要进一步的研究来优化提取条件以获得更高的提取效率。
结论:
本实验通过微波提取的方法成功提取到甘草酸,并测定出其含量为X%。
这为进一步研究甘草酸的药用价值提供了基础数据。
微波提取是一种高效、快速的提取方法,值得在其他天然产物的提取中进行深入研究和应用。
实验八甘草中甘草酸的精制及检识
【实验目的】
1、学会运用溶解度差异,精制甘草酸
2、学会用显色反应检识甘草酸
【实验原理】
由于甘草酸不易精制,一般将其转变为甘草酸的单钾盐。
甘草酸可溶于丙酮,加氢氧化钾后生成甘草酸三钾盐,此结晶用热冰醋酸溶解生成甘草酸的单钾盐,该盐难溶于冷冰醋酸而结晶析出。
【实验材料】
设备: 电炉、量筒、玻璃棒、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、烧杯、锥形瓶
药品: 甘草酸粗品、浓硫酸、氢氧化钾、乙醇、三氯甲烷、丙酮、醋酐、20%五氯化锑
【实验步骤】
1、甘草酸单钾盐的制备
取甘草酸粗品,加丙酮回流提取,滤取丙酮液,加KOH乙醇液调pH至弱碱性,静置析晶,得结晶(甘草酸三钾盐)。
结晶物干燥,冰醋酸热溶,冷却,析晶,滤过得甘草酸单钾盐结晶,75%乙醇重结晶即可。
2、检识
(1)醋酐-浓硫酸反应:将样品溶于醋酐中,加浓硫酸-醋酐(1:20),观察颜色变化。
(2)三氯甲烷-浓硫酸反应:样品溶于三氯甲烷,加入浓硫酸后,观察两层的颜色变化及荧光。
(3)五氯化锑反应:将样品三氯甲烷或醇溶液点于滤纸上,喷以20%五氯化锑的三氯甲烷溶液(不应含乙醇和水),干燥后60-70℃加热,观察颜色变化。
【注意事项】
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
HPLC法测定益中颗粒中甘草酸的含量测定益中颗粒中甘草酸的含量。
方法:采用高效液相色谱法。
流动相甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67:33:1),检测波长250nm,流速1ml/min,柱温40℃。
结果:平均回收率99.02%,RSD0.4%。
结论:本方法可用于益中颗粒中甘草酸的测定。
标签:益中颗粒甘草酸HPLC益中颗粒由党参、炙甘草、当归、陈皮等十味中药组成,具有补中益气,消积和胃等功效。
为了控制产品质量,本文用高效液相色谱法对本品中所含甘草酸进行了含量测定。
1、仪器与试药Agilent1100高效液相色谱仪,包括G1379A脱气机,G1311A四元泵,G1316A 柱温箱,G1314A可变波长检测器,G1328B手动进样器及支架,G2170AA色谱工作站。
甘草酸对照品(中国生物制品检定所,73129403),甲醇为色谱纯,水为二次蒸馏水,其余试剂为分析纯,益中颗粒(自制)。
2、实验条件2.1色谱条件Alltima-C18(4.6×250)mm;甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67:33:1);检测波长为250nm,流速1ml/min,柱温40℃;灵敏度0.032AUFS,理论板数2000。
2.2样品预处理取装量差异项下本品,研细,取2g,精密称定,置50ml容量瓶中,加入上述流动相约35ml,超声处理(功率250W,频率20kHz)30min,取出,放冷,加流动相至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
3、方法与结果3.1色谱条件与系统适应性试验照2.2项下方法制备供试品溶液,另取甘草酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.2mg的对照品溶液,照2.1项下色谱条件,各进样10μl,对照品和供试品溶液的色谱图见图A、B。
A-甘草酸对照品B-供试品3.2标准曲线精密称取甘草酸对照品10.25mg,置25ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得标准品贮备液。
精密吸取上述标准品贮备液0.5ml、1.5ml、2.5ml、0.35ml、0.45ml,分别置5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,分别制成每1ml含甘草酸0.041、0.123、0.205、0.287、0.369mg的溶液,分别精密吸取上述溶液各10μl,注入液相色谱仪,记录色谱图。
甘草中甘草酸的提取实验报告甘草中甘草酸的提取实验报告概述:本实验旨在通过提取甘草中的甘草酸,了解其提取方法和纯化过程,以及甘草酸的性质和应用。
实验采用了溶剂提取法和结晶法,最终成功提取出纯度较高的甘草酸。
实验步骤:1. 材料准备:甘草、无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯、无水乙醚、浓盐酸、浓氨水。
2. 提取甘草酸:将甘草研磨成粉末状,加入无水乙醇中,搅拌均匀,静置一段时间,过滤得到甘草提取液。
3. 萃取甘草酸:将甘草提取液与石油醚混合,振荡均匀,分液漏斗分离有机相和水相。
4. 纯化甘草酸:将有机相转移至蒸馏烧瓶中,加入醋酸乙酯,加热回流,蒸发醋酸乙酯,得到甘草酸溶液。
5. 结晶甘草酸:将甘草酸溶液冷却至室温,加入无水乙醚,搅拌均匀,静置结晶,过滤得到甘草酸晶体。
6. 纯化甘草酸晶体:将甘草酸晶体溶解于浓盐酸中,加热搅拌,过滤得到甘草酸纯品。
7. 验证甘草酸:将甘草酸溶解于浓氨水中,观察其颜色变化,测定其溶解度。
结果与讨论:通过以上实验步骤,成功提取出了纯度较高的甘草酸。
在提取过程中,溶剂的选择和比例对提取效果有重要影响。
无水乙醇是较好的提取溶剂,能够将甘草中的甘草酸有效溶解出来。
而石油醚和醋酸乙酯则用于萃取和纯化过程,能够去除杂质,提高甘草酸的纯度。
在结晶过程中,温度和溶剂的选择也是关键。
将甘草酸溶液冷却至室温后,加入无水乙醚,可以通过溶剂效应促进结晶的发生,得到较大且纯度较高的甘草酸晶体。
而浓盐酸则用于纯化甘草酸晶体,通过酸解结晶,去除杂质,得到纯净的甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性,广泛应用于中药和食品工业中。
它具有抗炎、抗氧化、抗溃疡、降血压等作用,可用于治疗消化系统疾病、心血管疾病等。
此外,甘草酸还可用于食品添加剂,具有增香、保鲜等功能。
结论:本实验成功提取出了纯度较高的甘草酸,并验证了其性质和应用。
通过溶剂提取法和结晶法,可以有效提取和纯化甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性和广泛应用前景,对于中药研究和食品工业具有重要意义。
实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内,易溶于热水,因此可用水提取甘草酸钾盐,水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸,因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。
也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀,将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中,用三氯甲烷除去黄酮类化合物,即可得甘草皂苷。
【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸(粗品)的提取
(1)水提法:取甘草粗粉100g,加水煎煮提取2-3次,滤过得水提液,静置,取上清液,浓缩得甘草浸膏(含甘草酸>20%)。
浸膏加3倍量水溶解,加硫酸酸化,放置,滤过得甘草酸粗品。
(2)醇提法:取甘草粗粉100g,加10%乙醇渗漉,收集渗漉液酸化,放置过夜,滤过得沉淀(甘草总皂苷)。
总皂苷用7%盐酸的甲醇,回流4~6小时,滤取甲醇液,冷却,放置后滤取沉淀,溶于三滤甲烷,用5%KOH萃取除去黄酮类,再用蒸馏水洗去碱性,所得沉淀用80%乙醇重结晶,滤过得甘草酸白色针状结晶。
【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时,水提液酸化后析出的沉淀,杂质较多难以过滤,故可倾出上清液再抽滤。
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
复方甘草酸苷和异甘草酸镁治疗慢性肝炎降低转氨酶疗效的研究摘要:目的:探讨复方甘草酸苷和异甘草酸镁治疗慢性肝炎降低转氨酶疗效。
方法:研究期2021年1月-2022年12月,入组观察对象慢性肝炎患者60例,进入研究后以随机数字表法分组(共两组,每组25例),一组观察组实行异甘草酸镁治疗,一组对照组实行复方甘草酸苷治疗,对比不同治疗方案的临床应用效果。
结果:经治疗,观察组中患者转氨酶谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平均低于对照组,(P<0.05);观察组中患者治疗期间乏力、消化道症状等不良反应总发生率低于对照组,(p<0.05)。
结论:针对慢性肝炎患者的治疗,异甘草酸镁治疗效果更加显著,能够有效改善患者的转氨酶水平,价值显著,推荐参考使用。
关键词:复方甘草酸苷;异甘草酸镁;慢性肝炎;转氨酶;疗效慢性肝炎是临床的常见病与多发病,病毒感染、长期饮酒与长期不良用药是引起慢性肝炎的主要原因。
慢性肝炎患者患病后会产生腹胀、恶心、呕吐、黄疸等临床表现,病情越严重,患者的预后越差,身体健康影响较大[1]。
近年来,随着临床中慢性肝炎的发病率呈逐渐上升趋势,如何结合此类患者的病理特点,予以其更加安全、有效的治疗,是临床关注的重点[2]。
研究设计对照试验,引入复方甘草酸苷和异甘草酸镁治疗方案,就其实践效果差异展开对比,过程、结果如下。
1资料与方法1.1一般资料研究期2021年1月-2022年12月,入组观察对象慢性肝炎患者60例,进入研究后以随机数字表法分组(共两组,每组25例),一组观察组实行异甘草酸镁治疗,一组对照组实行复方甘草酸苷治疗。
观察组中,男性患者15例,女性患者10例,年龄24-58岁,平均(40.41±4.29)岁,平病程1-9年,平均(4.75±1.51)岁,病毒性肝炎患者17例,酒精性脂肪性肝炎患者5例,药物性肝炎患者3例;对照组中,男性患者14例,女性患者11例,年龄22-58岁,平均(40.35±4.33)岁,平病程1-9年,平均(4.67±1.53)岁,病毒性肝炎患者15例,酒精性脂肪性肝炎患者6例,药物性肝炎患者4例;整理前述各项资料,将其统一输入统计学软件进行分析,输出结果(p>0.05),反映可比较。
甘草酸与甘草多糖的提取与测定摘要:甘草酸的提取是甘草开发和甘草应用的关键技术之一。
综述了甘草中有效成分甘草酸、甘草多糖的提取和测定方法的研究概况。
稀醇溶液对甘草酸的提取效果较好,添加稀氨水后可以提高甘草酸的提取收率,超声辅助提取可以提高并节约提取溶剂和提取时间。
因此,本次试验以甘草粉末为原料,乙醇与稀氨水作溶剂,用超声波辅助提取法提取甘草酸。
关键词:甘草酸甘草多糖超声提取测定1、前言甘草是蝶形花科(Fabaceae)、甘草属(Glycyrrhiza)植物,我国药典记载药用甘草有乌拉尔甘草、胀果甘草、光果甘草。
甘草地下部分是名贵中药材,地上部分是多年生牧草。
甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性,适生性和抗逆性强,生命力旺盛,为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。
早在2000多年前,《神农本草经》就将其列为药之上乘,医药家陶弘景将甘草尊为“国老”。
甘草味甘、性平,有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能,用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。
现代研究表明,甘草还有肾上腺皮质激素样的作用,可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡,以甘草配伍的古方有“四君子汤”、“甘草甘姜汤”、“凉隔丸”、“复脉丸”、“甘草大枣汤”等,近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病,又是预防和治疗SARS的复方组份之一。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。
药理研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。
近年来,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。
甘草酸作为其主要有效成分, 随产地不同含量亦不同,一般在(4~14)%之内,它属于三萜皂苷,甘草根及根茎含甘草甜素,为甘草酸的钾、钙盐。
甘草酸作为甘草的主要成分,质量分数一般在4%--14%之间。
甘草酸一般为白色或淡黄色的结晶型粉末。
甘草中甘草酸含量测定论文【关键词】甘草甘草为豆科植物甘草(glycyrrhizauralensisfisch)、胀果甘草(glycyrrhizainflatabat)或光果甘草(glycyrrhizaglabral)的干燥根及根茎,始载于《本经》,药用历史悠久。
其功能补脾益气、润肺止咳、缓急止痛、清热解毒、缓和药性。
主要含有甘草酸及甘草苷类成分,其中甘草酸为现代药理应用研究证实具有抗纤维化、抗炎、抗病毒和保肝解毒及增强免疫功能等作用[1]。
目前针对甘草的内在质量控制,主要围绕甘草酸成分进行定性、定量一类的检查。
2005版《中国药典》收载了RP-HPLC三元等度洗脱法测定甘草酸的方法,规定甘草酸含量不得低于2%[2]。
本实验依托2005版《中国药典》一部甘草酸含量测定(附录VID)项下操作主线,采用RP-HPLC法测定甘草酸的含量,方法简便、快速,重现性好,结果稳定,用于甘草酸的检测专属性强,1仪器与试剂1.1仪器Agilend1100系列液相色谱仪、四元泵、在线真空脱气、DAD检测器、化学工作站、1200型自动进样器。
1.2试剂甘草酸单铵盐(monoam0niumglycyrrhitinate)对照品(中国药品生物制品检定所);甘草(glycyrrhizainflatabat)样品,产地新疆(华东医药股份有限公司);甲醇(色谱纯)、醋酸铵(分析纯)、冰醋酸(分析纯)、水(双蒸水)。
2实验方法与结果2.1色谱条件美国ZORBAXExundC18分析柱(4.6mm×250mm,5μm)为固定相;甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67∶33∶1)为流动相;检测波长250nm;流速1ml·min-1;柱温为室温。
柱效以甘草酸计,理论塔板数不应低于2000。
结果被测成分于7min内即可出完,三元等度洗脱全程为0~20min。
记录的色谱图结果见图1,2。
2.2对照品溶液的制备精密称取80℃干燥至恒重的甘草酸单铵盐0.1g对照品,置100ml量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,摇匀,使成每ml含有甘草酸单铵盐1mg对照品溶液。
甘草中甘草酸的提取实验报告
实验目的:了解分离纯化技术的应用,掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
实验原理:甘草又名甘草根,是一种广泛使用的中草药。
其主要成分是甘草酸、甘草素、甘草皂苷等。
甘草酸是甘草的主要有效成分,具有降糖、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用。
该实验是利用无机酸法将甘草酸从甘草中提取出来。
实验步骤:
1.样品制备:取适量甘草,去除杂质后切碎成小片备用。
2.提取:将切碎的甘草用石英研钵研成粉末,加入适量无水乙醇,浸泡6小时后,过滤得到提取液。
3.提取液浓缩:将提取液加热至70℃左右,缓慢加入盐酸,使pH达到1左右,再继续加热浓缩。
4.结晶:将制得的浓缩液室温下静置冷却,过滤得到结晶固体,用少量无水乙醇反复洗涤,干燥后得到纯净的甘草酸。
实验结果:经过提取、浓缩和结晶得到了白色粉末状的甘草酸,对其进行紫外分光光度计检测其吸收峰在235nm处。
经过质谱实验表明,得到的结晶物是纯净的甘草酸。
实验讨论与分析:通过本实验我们可以了解分离纯化技术的应用,掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
甘草酸是甘草中的主要有效成分,具有重要的药理作用。
本实验采用无机酸法提取甘草酸,操作简单易行,效果良好。
不过,无机酸法提取时要注意浓
度和pH值的控制,以免影响提取效率。
同时,在结晶过程中还需要注意温度和过滤的方式和时间,以得到高纯度的甘草酸。
实验总结:本次实验采用无机酸法提取甘草酸,操作简单易行,效果良好。
通过本次实验,我们了解了分离纯化技术的应用、掌握了无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作,同时也体验了一把科学实验并学到了新的实验技能。
高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量
清肺颗粒是一种中药制剂,主要成分含有多种活性成分,其中甘草酸是一种重要的有效成分。
甘草酸具有很多药理作用,如镇咳、祛痰、抗炎等。
准确测定清肺颗粒中甘草酸的含量对产品质量评价具有重要意义。
准备样品。
将清肺颗粒取约50g,粉碎,并通过80目筛子进行筛选,确保样品细腻均匀。
制备标准曲线。
准备不同浓度的甘草酸标准溶液,常用的浓度为0.5、1、2、4、8 μg/mL。
以甘草酸为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
然后,液相色谱仪参数设置。
选用一种C18色谱柱,柱温设定为30 °C。
流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(35:65, v/v),流速为1.0 mL/min。
检测波长设定为232 nm。
接下来,样品处理。
将样品取约1.0 g,加入100 mL甲醇溶液中,超声提取20 min,然后过滤。
进行样品分析。
取适量的样品溶液进样,测定峰的面积,并参照标准曲线计算样品中甘草酸的含量。
还可以对样品进行液相色谱-串联质谱联用分析,以提高测定的准确性和灵敏度。
通过以上方法,可以准确测定清肺颗粒中甘草酸的含量。
在实际应用中,还需进行重复性试验和采样验证,以确保测定结果的可靠性。
还需要将该方法应用于其他批次的清肺颗粒中甘草酸含量的测定,以评估产品的一致性和稳定性。
甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种重要的天然产物,具有多种药理活性,如抗炎、抗氧化、抗病毒等作用。
本实验旨在通过提取和分离的方法,获得纯度较高的甘草酸,并通过鉴定手段确认其结构。
我们选择了甘草的根茎作为提取甘草酸的原料。
将甘草的根茎切碎并研磨成细粉,然后加入适量的乙醇进行浸泡。
浸泡时间为24小时,浸泡温度为室温。
乙醇的选择是因为其对甘草酸具有较好的溶解性。
浸泡结束后,我们将浸泡液进行过滤,将固体部分分离出来。
然后,我们对固体进行洗涤,以去除杂质。
洗涤使用的溶剂是乙醇和水的混合物,比例为1:1。
将洗涤液过滤后,得到洗涤得到的固体部分。
接下来是分离的步骤。
我们使用了液液萃取法,以乙醚作为有机相,以水为无机相。
将浸泡液与乙醚进行充分摇匀后,分为两相。
然后,分别将有机相和无机相取出,进行分离。
此时,有机相中含有甘草酸,但还有一定的杂质存在。
为了去除杂质,我们使用了减压蒸馏法。
将有机相进行蒸馏,使甘草酸和其他挥发性物质蒸馏出来,得到纯度较高的甘草酸。
接下来,我们通过一系列鉴定手段确认了甘草酸的结构。
首先,使用红外光谱法进行了鉴定。
红外光谱图显示了甘草酸特有的吸收峰,如羧基C=O的伸缩振动峰和羟基O-H的伸缩振动峰,从而确保了甘草酸的存在。
然后,我们使用核磁共振波谱(NMR)对甘草酸进行了进一步的鉴定。
NMR谱图显示了甘草酸特有的峰,如羧基的化学位移峰和羟基的化学位移峰,从而确认了甘草酸的结构。
我们使用高效液相色谱法(HPLC)对提取得到的甘草酸样品进行了定性和定量分析。
通过与标准品的比对,确定了甘草酸的含量,并验证了提取方法的有效性。
通过甘草酸的提取、分离和鉴定实验,我们成功地获得了纯度较高的甘草酸,并通过红外光谱、核磁共振波谱和高效液相色谱法等手段确认了其结构。
这为进一步研究甘草酸的药理活性和应用提供了基础。
甘草酸提取及抑菌活性研究甘草酸提取及抑菌活性研究摘要:以新疆乌拉尔甘草饮片为原料,研究了在超声波条件下影响甘草酸提取率的几个因素,结果表明:以浓度为60%的乙醇为提取剂,料液比1:15,超声作用时间40min,浸泡4h为最佳。
此外,分别以甘草酸对真菌(包括棉花枯萎病菌、小麦纹枯病菌、辣椒根腐病菌、辣椒疫病病菌)进行抑菌活性研究,结果表明浓度为1000mg/L 的甘草酸对小麦纹枯病菌抑制率为68.15%,抑菌作用明显,对棉花枯萎病菌、辣椒根腐病菌、辣椒疫病病菌抑制作用相对较弱。
关键词:甘草;甘草酸;提取工艺;抑菌研究中图分类号:TB文献标识码:A文章编号:1672-3198(2013)08-0187-02甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)是豆科(legumrrihiza)甘草属(glycyrrhiza)植物的根或根茎中提取的一种天然甜味剂。
研究表明甘草酸具有广阔的应用领域,且应用价值极高,但提取效率、成本、纯度又是影响效能的关键问题之一。
超声辅助提取在天然植物有效成分的提取中取得良好的效果,且在甘草酸类或同类物质的提取中收效明显,表现出省时、选择性好、收率高、操作方便等一系列满足技术和市场方面的优点。
为此,我们提出利用超声波的各种优良特性,在不影响甘草酸的物化、生物活性的基础上,不同条件下促进甘草酸的提取率。
从保护生态环境的角度来看,甘草酸对人体无害而有益,本研究以甘草酸乙醇提取液对真菌进行抑菌活性研究,以甘草酸做为新型杀菌剂防除农田有害病源微生物,将可能成为绿色农药发展的一个新方向。
1材料与方法1.1材料及设备材料:甘草饮片购于益和大药房;试剂:glycyrrhizicacid (SIGMA),其他试剂均为分析纯;供试菌种为吉林农业大学实验室提供。
主要设备:KQ5200E超声波清洗器昆山超声仪器有限公司;RE-52A 旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂;UV-2000紫外-可见分光光度计尤尼柯有限公司;DHP-9162电热温恒培养箱上海齐欣科学仪器有限公司。
甘草中甘草酸的提取实验报告实验名称:甘草中甘草酸的提取实验报告实验目的:1.了解甘草酸的特性以及其在中药中的应用;2.学习甘草中甘草酸的提取方法;3.掌握色谱层析分离技术。
实验原理:甘草酸是甘草中的主要有效成分,在中药中有着较广泛的应用。
本实验采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)为溶剂体系,采用色谱层析技术将甘草酸从甘草中提取出来。
色谱柱为硅胶柱,进行激光检测,检测波长为254nm。
实验步骤:1.将50g甘草粉末加入400mL甲醇中,搅拌2小时,过滤,取得提取液;2.将提取液浓缩至200mL后,加入等量的水,再用2mol/L的醋酸调节pH至4.0;3.将上述液体用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)混合物合并,混合均匀后放置15分钟,将有机相分离;4.收集有机相,过滤后浓缩至20mL;5.将浓缩后的样品以60mL/h的流速通过硅胶柱(20cm×2.6cm),梯度洗脱,洗脱液分别为乙酸乙酯-丙酮(2:3),乙酸乙酯-丙酮(1:1),乙酸乙酯-丙酮(3:2),乙酸乙酯-丙酮(4:1),每次洗脱液用量为50mL;6.取得提纯后的甘草酸,测定其产率。
实验结果与分析:经过色谱层析分离,可以得到100mg左右纯度高达95%的甘草酸。
同时,通过计算得到甘草中甘草酸的提取产率约为1.9%。
结论:本实验成功地从甘草中提取出了甘草酸,得到了较高的提取产率和纯度。
实验结果具有一定的参考价值和应用价值。
实验中存在的问题与不足:虽然本实验得到了较高的提取产率和较高的纯度,但是在实验过程中还是存在着一些问题和不足之处。
1.通过计算得到的提取产率较低,不同操作条件下产率有很大的偏差;2.采用硅胶柱进行分离时,洗脱液的选择和流速等条件对产率有很大的影响,需要更进一步的研究和优化;3.还需要对甘草中其它成分的提取方法进行研究,提高提取效率和纯度。
•论著•替代对照品法测定甘草流浸膏中甘草苜和甘草酸含量刘航,魏长勇,余敏灵#(乐山市食品药品检验检测中心,四川乐山614000)[摘要]目的建立以橙皮昔为替代对照O测定甘草流浸膏中甘草昔和甘草酸含量的高效液相色谱法$方法采用替代对照o内加入法,•橙皮昔为替代对照o,通过测定甘草酸y与橙皮r、甘草r与橙皮r的相对校正因子(值),利用f值计算甘草流浸膏中甘草r和甘草酸含量$色谱条件:Welch Ultimate C^色谱柱(250mm X4.6mm,5$m),以乙~-0.1%三乙胺溶液(用磷酸调pH值为2.5)为流动相,梯度洗脱,检测波长为284nm(橙皮r)>276nm(甘草r)>252nm(甘草酸y),柱温为30g,流速为10mL/min$结果橙皮昔、甘草昔、甘草酸鞍进样量分别为0.0332-0.4983,0.0493-0.740 2.0.43306.4951遽,与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 5.0.999 2.0.9993);甘草昔和甘草酸鞍与橙皮昔的f值分别为10814、0.4492;甘草r和甘草酸的平均回收率分别为9896%、97.67%$替代对照O法样O含量测定数据与外标法比较,差异无统计学意义(p>0.05)$结论以橙皮r为对照o,测定甘草流浸膏中甘草r和甘草酸含量的高效液相色谱法具有成本低、实验时间短、操作过程和仪器噪音影响小等特点。
[关键词]高效液相色谱法;甘草酸;替代对照o;内加入法;甘草流浸膏DOI:10.3969/j.issn.1009-5519.202101013中图法分类号:R917;R446文章编号:1009-5519(2021)01-0047-05文献标识码:AContent determination of liquiritin and glycyrrhizic acid in Licorice Liquid Extract by substitute reference substance methodLIU Hang,WEF ChangYong f YU Minting^(Leshan Municipal Food and Drug Inspection and Testing Center,Leshan,Sichuan614000,China) [Abstract]Objective To establish a HPLC method for the determination of liquiritin and glycyrrhizic acid contents in Lico-riceLiquidExtractbyusinghesperidinassubstitutereferencesubstance Methods Thesubstitutereferencesubstanceinternalad-dition methodwasusedandhesperidinservedasthesubstitutereferencesubstance Therelativecorrectionfactors(fvalue)ofam-monium glycyrrhizinate to hesperidin and liquiritin to hesperidin were measured andthefvalueswereusedtocalculatethecontent ofglycyrrhizicacidandliquiritinin LicoriceLiquid Extract Thechromatographicconditions:the Welch Ultimate C18chromatographic column(250mmX46mm,5$m)was used,acetonitrile-0.1%triethylamine solution(adjusting the pH value to2.5with phosphoric acid)as the mobile phase,gradient elution,the detection wavelength:284nm(hesperidin),276nm(liquiritin)and 252nm(ammonium glycyrrhizinate),the column temperature30g,and the flow r ate1.0mL/min.Results The sample amounts ofliquirtin hesperidinandammonium glycyrrhizinate wereintherangeof0.0332—0.4983!0.0493—0.7402!0.4330—6.4951$g,which showed the good linear relationship with the peak area(r=0.9995,0.9992,0.9993).The f values of liquiritin and ammonium glycyrrhizinate to hesperidin were1.0814and0.4492theaveragerecoveryratesofliquiritinandglycyrrhizicacid were98.96%and97.67%,paring the contents measurement data by the substitute reference substance method with the external standard method,the difference was n ot statistically significant(P>0.05).Conclusion With hesperidin as the reference substance the HPLC method for the determination of liquiritin and ammonium glycyrrhizinate contents in Licorice Liquid Extracthasthecharacteristicsoflowcostshortexperimentaltimeandli t leinfluenceofoperationprocessandinstrumentnoise> [Key words]High pressure liquid chromatography;Glycyrrhizic acid;Substitute reference substance;Internal addition meth-od;Lico3iceliquidext3act甘草流浸膏是由甘草浸膏加工制成的流浸膏,收载于《中华人民共和国药典0015年版一部,标准对制剂中甘草酸采用以甘草酸钱为对照品的高效液相色谱法进行含量测定未对甘草昔含量进行控制,而甘草酸钱存在价格贵、易吸潮等缺陷$参照文献[2-5],本研究设计了以橙皮昔为对照品替代甘草酸钱,以色谱峰保留时间为辅,探索性地将紫外光谱特征和纯度检查因子应用于色谱峰定性中$在定量分析中,通过测定橙皮昔和被测定物质的相对校正因子)值),并运用f值计算甘草昔和甘草酸在制剂中的含量「1013'。
河北工大学毕业论文作者:贾晋阳学号:学院:化工学院系(专业):制药工程题目:甘草酸的纯化工艺研究指导者:(姓名) (专业技术职务)评阅者:(姓名) (专业技术职务)2021年6月9日目次1 引言 (1)1.1 甘草酸简介 (1)1.2 甘草酸及其生产概述 (2)1.3 大孔树脂别离纯化技术 (3)1.4 本论文研究内容 (3)2 实验原理及材料 (4)2.1 实验原理 (4)2.2 实验试剂和设备 (5)3 甘草酸的纯化研究 (7)3.1 大孔树脂的预处理及再生 (7)3.2 甘草酸检测方法确实定 (8)3.3 树脂种类的选择 (9)3.4 甘草酸的动态吸附 (11)3.5 甘草酸的梯度洗脱 (14)3.6 18β-甘草酸到18α-甘草酸的构型转换 (17)4 实验数据与讨论 (19)4.1 静态实验结果分析 (20)4.2 动态试验结果分析 (20)4.3 构型转换结果分析 (20)结论 (22)参考文献 (23)致谢 (25)附录 (26)1引言甘草酸(GA),是从甘草的根茎中提取出的一种高甜度、低热值的具有天然活性的成分,其在甘草中的存在形式主要为钾盐和钙盐,游离的甘草酸含量并不多。
它的植物来源——甘草也是一种我国的传统中药,具有悠久的使用历史,中医上认为:甘草味甘,是补脾益气,止咳、止痛的良药,并且已被美国FDA收录为平安无毒物质[1]。
科学研究说明,甘草中的主要成分有甘草酸和黄酮类,具有抗炎、镇咳、抗肿瘤、等作用,有较强的人体免疫功能促进作用[2],在医疗领域具有极高应用价值。
因此本文阐述了将大孔树脂用于甘草酸纯化的原理、方法及应用,并在此根底上提出本论文的研究内容。
1.1 甘草酸简介中文名:甘草酸,又称甘草甜素、甘草皂甙CAS:1405-86-3英文名:Glycyrrhizic acid分子式:C42H62O16分子量:化学名:(3β,20β)-20-羧基-11-氧代-30-去甲基-(18α-H)-整齐墩果-12-烯-3β-羟基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛酸基-α-D-葡萄吡喃糖醛酸[3]结构式为:甘草酸是一种三萜皂苷类天然药物,分解温度220℃,在醋酸中为无色柱状结晶,易溶于热水,可溶于热稀醇,但难溶于无水乙醇或乙醚[4]。
*欧阳光明*创编2021.03.07 甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定欧阳光明(2021.03.07)实验报告学院:生物科学与工程学院班级:姓名:学号:组别:第七组组员:目录一、实验目的 ................................................................................ 错误!未定义书签。
二、实验器材 (2)三、实验原理 (2)1.甘草简介 (2)2. 甘草酸的提取方法 (3)2.1 水提法 (3)2.2 稀氨水提取法 (4)2.3超声波提取法 (5)3 甘草酸的分离与纯化 (5)3.1 超滤法 (5)3.2 结晶法 (5)*欧阳光明*创编2021.03.073.3 树脂法 (5)4.多糖提取方法 (6)5.多糖含量测定 (6)四、实验内容及步骤 (6)1.甘草酸的提取(稀氨水提取法) (6)1.1 (6)1.2 (6)1.3 (6)2. 甘草酸的纯化(大孔树脂吸附法) (7)3.残渣中甘草多糖的提取分离(溶剂提取法) (7)五、实验数据及处理 (8)1.甘草酸标准曲线 (8)2.测定样品甘草酸浓度,计算甘草提取率 (8)3.甘草酸粗品质量 (9)4.洗脱液中甘草酸的含量测定 (9)5.纯化后甘草酸的质量2.132g (9)六、实验结论及误差分析 (9)实验结论: (9)误差分析: (10)一、实验目的1.掌握甘草酸提取、纯化的原理和方法,了解甘草酸定量测定方法。
2.掌握多糖类的提取及测定方法。
3.熟悉皂甙的性质。
4.进一步熟悉物质提取与纯化的技术,掌握相关原理。
二、实验器材1.试剂:70%的乙醇、0.6%的稀氨水、3.5mol/l的浓硫酸、XAD9型树脂、6%盐酸、50%乙醇、95%乙醇、苯酚、铝片、碳酸氢钠、葡萄糖、标准甘草酸等。
2.器材:紫外分光光度计、石英比色皿、旋转蒸发仪、真空抽滤机、恒温水浴锅、1000ml量筒、玻璃棒、烧杯、纱布、玻璃漏斗、滤纸、烧杯等。
三、实验原理1.甘草简介甘草是蝶形花科(Fabaceae)、甘草属(Glycyrrhiza)植物,甘草地下部分是名贵*欧阳光明*创编2021.03.07中药材,地上部分是多年生牧草。
甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性,适生性和抗逆性强,生命力旺盛,为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。
早甘草味甘、性平,有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能,用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。
现代研究表明,甘草还有肾上腺皮质激素样的作用,可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡,近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病,又是预防和治疗SARS的复方组份之一。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。
药理研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。
近年来,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。
甘草酸约占甘草根茎的3-14%,分子式为C42H62O16,分子量822.92,熔点212 ºC -217 ºC,其结构式为五环三萜皂甙,结构图如图1-1所示:图1-1 甘草酸结构分子式纯品甘草酸为白色针状晶体,不溶于冷水,可溶于热水,故溶于热水后,经冷却则呈胶体状沉淀析出。
加热、加压及在稀酸作用下可水解为一分子甘草次酸和两分子葡萄糖醛酸。
甘草次酸与单葡萄糖醛酸结合成甘草酸苷元单葡糖苷酸(MGGR)。
2. 甘草酸的提取方法2.1 水提法水提法是最为古老、也是最为常用的一种提取方法。
其操作简单,溶剂成本低廉,但得率较低,按1990年版中国药典中含量测定方法测得甘草酸得率仅约3.0%。
据推测可能是因为水提法提取出的杂质较多,在去除杂质的过程中夹带了甘草酸,损失较大。
工艺流程如1-2所示:*欧阳光明*创编2021.03.07甘草水回流提取3次。
浓缩到原体积的1/5。
离心,药渣提取过滤浓缩成稠膏甘草酸得率(3.05%左图1-2 水提法提取甘草酸的工艺流程2.2 稀氨水提取法甘草酸成铵盐后水溶性增加可增加提取率。
稀氨水提取法常采取冷渗的方法。
工艺流程如下:图1-3稀氨水提法工艺流程1.4.2.3 氨性醇提取法在对甘草提取工艺的研究中,发现用含氨0.8%的65%乙醇回流提取乌拉尔甘草的效果优于含氨0.6%的65%乙醇和0.6%的氨水,甘草酸的得率达21%,比水提法提高了两倍以上,节省了资源,降低了成本,也避免了糖类、淀粉等大量水溶性杂质的混入,便于精制。
如果能够解决加热回流过程中氨气逸出造成的污染问题,氨性醇提取法将成为一种较为理想的方法。
工艺流程如图1-4所示。
*欧阳光明*创编2021.03.07图1-4氨醇溶液提取甘草酸的工艺流程2.3超声波提取法谢果等研究了超声条件下不同因素对甘草酸得率的影响,通过选择,可以得到最佳提取工艺:溶剂为70%乙醇溶液、超声频率为18kHz、浸泡时间为90min、粒度为18~20目,在此工艺进行提取,甘草酸的提取率可以达到87.4%。
3 甘草酸的分离与纯化3.1 超滤法将甘草提取液酸析后所得的粗品用氨水溶解,然后在一定的压力下进行超滤,滤液浓缩干燥得甘草酸铵。
3.2 结晶法结晶法是利用甘草酸转化为铵盐后在某些特定溶剂中溶解度下降而结晶出来,达到纯化的目的。
较为常用的有晶种法和反复结晶法。
晶种法是先将甘草提取液进行酸析,再用适量甲醇回流提取沉淀物,提取液氨化后减压蒸干得糖浆状物,趁热加入适量冰醋酸使溶解、静置,投入甘草酸单铵盐晶种,隔日吸滤,冰醋酸洗涤,减压蒸干即得甘草酸单铵盐。
反复结晶法是先将甘草提取液进行酸析,再经乙醇或丙酮溶解提取,氨化成盐析出,再经活性炭脱色,反复重结晶得纯品。
3.3 树脂法树脂法包括离子交换树脂法和大孔吸附树脂法,两种方法均是利用甘草酸与杂质理化性质的不同,通过吸附和解吸附的过程,达到纯化的目的。
*欧阳光明*创编2021.03.07离子交换树脂法:因为甘草酸中含有3个羧基,可与阴离子交换树脂上的阳离子结合而吸附在树脂上,其他一些非酸性的杂质不被吸附,从而得以与这些杂质分离。
日本专利中以弱碱性树脂DuoliteA374吸附甘草酸水提液,再用2.0%氨水洗脱即得铵盐产品。
原苏联专利是先用阴离子交换树脂AB-6G富集甘草酸,再用弱酸性阳离子交换树脂除去铵离子,从而得到高纯度的产品。
大孔吸附树脂法:大孔吸附树脂法是一种较为经济实用的方法。
通常选用的树脂有Amblite XAD4, XAD8, XAD9,XAD11,DA201以及AB-8等。
姚德佳等用以苯乙烯和二乙烯苯为骨架,由丙烯腈组成的主链上带有CN基的DA-201型大孔树脂柱吸附,以水或稀的低级醇洗脱,收集洗脱液,回收溶剂后得到的甘草酸纯度可90.0%以上。
4.多糖提取方法种类繁多的植物多糖,存在于植物中的部位不尽相同。
一般植物细胞壁比较牢固,在提取前需进行专门的破细胞操作,包括机械破碎(研磨法、组织捣碎法、超声波法、压榨法、冻融法)、溶胀和自胀、化学处理和生物酶降解。
因此,植物多糖提取的研究中采用了许多不同的方法,包括溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超滤法、超声波强化法、微波法。
本实验中采用的是最常用的方法------- 溶剂提取法.溶剂提取法一般应遵循相似相溶的原则。
多糖是极性大分子化合物,在所有溶剂中,水、乙醇是典型的强极性溶剂,对植物组织的穿透力强,提取效率高,在生产上使用安全。
5.多糖含量测定糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定其吸光度,并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量。
四、实验内容及步骤1.甘草酸的提取(稀氨水提取法)1.1用粉碎机将甘草片粉碎,称取20g甘草粉,加0.6%的稀氨水300mL,在沸水浴中加热60min, 过滤,分别收集滤液和滤渣。
1.2将滤渣加300ml稀氨水重复浸提两次,合并滤液,记录滤液体积。
1.3测定提取液中的甘草酸含量:a.制作标准曲线精密称取甘草酸标准品10.00mg,置于10ml容量瓶中,加70%乙醇溶解并定容。
精密吸取0.50ml、0.75ml、1.00ml、1.25ml、1.50ml,分别置于25ml容量瓶中,*欧阳光明*创编2021.03.07加70%乙醇摇匀定容,静置20min,在波长254nm处测定吸光值。
b. 测定甘草酸含量将提取液摇匀,准确移取一定量的提取液转移到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容,静置20min后,于254nm处测定吸光度。
据标准曲线计算提取液中甘草酸的浓度,再计算甘草酸提取率。
计算公式如下:A=13.17C—0.017 (参考)式中:A-吸光度;C-浓度,mg/ml甘草酸提取率= nCV/m×100%其中:n-提取液稀释倍数C-提取液中甘草酸的浓度mg/mlV-提取液体积mlm-甘草的质量mg将提取液减压浓缩至200ml,滴加3.5mol/l的硫酸至pH2~3,静置使之完全沉淀,离心(拟定为3000r/min 10min),沉淀用去离子水洗2~3次,放入真空干燥箱中干燥,得甘草酸粗品。
2. 甘草酸的纯化(大孔树脂吸附法)2.1取甘草酸粗品(2,53g),加热使之溶于700mL的水中。
2.2将甘草酸溶液与XAD9型树脂(25g活化树脂)混合,静态吸附2h,用四层纱布过滤,取其滤液,并进行抽滤。
2.3滤渣(树脂)用300mL 50%乙醇溶液搅拌洗脱2h。
2.4滤液进行减压蒸发浓缩至干,称重,即得到纯化后的甘草酸。
2.5洗脱液中甘草酸含量的测定:方法如实验一3.残渣中甘草多糖的提取分离(溶剂提取法)3.1称取1g甘草酸残渣,加50ml60℃,在60 ℃恒温水浴锅中浸提3h。
3.2加95% 的乙醇至乙醇终浓度为80%,放置过夜沉淀。
3.3将过滤残渣连同滤纸一起干燥,置于烧杯中,加蒸馏水50mL,分别在60℃水浴锅中加热30min。
3.4溶液趁热过滤,残渣用5mL 热水洗涤3 次,洗液并入滤液,放冷后移至100mL 容量瓶中,稀释至刻度,得甘草多糖样液,备用。
3.5甘草多糖的测定制备葡萄糖标准液:取适量葡萄糖在105℃中干燥至恒重,然后精密称取100mg,置100mL 容量瓶中,加蒸馏水溶解,并稀释至刻度。
此葡萄糖标准溶液浓度为1.0mg/mL。
制备苯酚液:取苯酚100g,加铝片0.1g,碳酸氢钠0.05g。
再取以上混合物10.0g,加蒸馏水150ml,置于棕色瓶中备用。
制作标准曲线:吸取葡萄糖标准液 1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.0 mL、8.0 mL、9.0 mL、10.0 mL,分别置于100mL 容量瓶中,加蒸馏水*欧阳光明*创编2021.03.07定容。