抗荧光衰减封片剂(AntifadeSolution)

DAPI-抗荧光淬灭封片剂
产品编号：F-0045 规格：10ml
产品简介
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，它能与DNA结合，在紫外光下可观察到蓝色荧光，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm。

使用范围
本产品为即用型工作液，无须稀释，直接用于FISH、IF、TUNEL等细胞核的荧光染色。

储存条件
-20℃，避光
本产品需要严格避光，可放于铝饭盒中或用锡纸包裹。

本产品为淡黄色粘稠液体，由于其中的抗荧光淬灭成分会吸收光，使用时间长后，液体会慢慢变深，最终为变为深褐色时，请勿使用。

使用方法
FISH
杂交结束，标本经过洗液洗涤、再经梯度酒精脱水、干燥，直接在标本上滴加10～20μl DAPI，加上盖玻片，室温下，大约20分钟后可观察荧光。

IF
孵育二抗结束，PBS洗涤后，直接在标本上滴加10～20μl DAPI，加上盖玻片，避光，室温下，大约20分钟后可观察荧光。

注意：
本产品含有甘油、抗荧光淬灭剂，也具备封片作用，在细胞核染色后，无须清洗，可减缓荧光淬灭，在严格避光情况下，4℃保存一周，荧光仍不会淬灭。

相关产品
广州市外显子生物技术有限公司
广州市海珠区敦和路189号留学人员创业基地1栋308室
技术支持：QQ 2251645850 订购：QQ 1050304988
咨询：E-mail：focobio@; exonlab@; Tel: 86-020-********。

北京雷根生物技术有限公司
DAPI 荧光封片剂
简介：
DAPI 荧光封片剂是一种专门用于染色体C 带的DA-DAPI 染色的减缓荧光淬灭的封固剂。

DA 和DAPI 易与A-T 碱基对结合，DAPI 染色可同时检测C 带和G 带，进行DA 对比染色后图像荧光强度减弱，只能特异的C 带呈强荧光染色。

按每个样本需要50～100μl 封片剂计算，5ml 可以用于至少50样本的封片。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 染色样本用DA 染色液染色，McIlvaine 缓冲液轻轻清洗。

2、 DAPI 染色液染色，McIlvaine 缓冲液轻轻清洗。

3、 滴一滴DAPI 荧光封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽
量避免气泡封片。

4、 用透明黏合剂密封盖玻片。

注意事项：
1、 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。

2、 在使用DAPI 荧光封片剂的情况下，虽然可减缓淬灭，仍需尽量避光。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 DZ0125 Storage DAPI 荧光封片剂 10ml 4℃ 避光 使用说明书 1份。

TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(显色法)产品编号 产品名称包装 C1098TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(显色法)50次产品简介：碧云天生产的显色法TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。

对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB 显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA 内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA 。

细胞凋亡时抽提DNA 进行电泳检测，可以发现180-200bp 的DNA ladder 。

基因组DNA 断裂时，暴露的3'-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP 的催化下通过DAB 显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

本试剂盒有如下优点。

(1) 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA 断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。

(2) 特异性好：TUNEL 检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。

(3) 快速：仅需约2-3个小时即可完成。

(4) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

(5) 实测效果好：参考图1。

图1. 本试剂盒的检测效果图。

A. HeLa 细胞未处理或用DNase I 室温孵育10分钟后的检测效果图。

抗荧光衰减封片剂(Antifade Solution)SC1210 5 ml 200 元10 ml 350 元概述：抗荧光衰减封片剂以高纯度甘油为介质，内含抗荧光淬灭剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。

样品封片后4ºC或－20ºC避光保存2-3周，可最大限度延长荧光持续时间和维持荧光发光强度，同时封片剂中的其它成分有助于保持组织抗原抗体处于结合状态。

适用于所有光谱范围的荧光如FITC，Cy2, Cy3, Rhodamine, Texas Red, Cy5, Cy7，DAPI, AMCA, R6G, Hoechst 33258 and 33342。

适用：1. 组织细胞免疫荧光组织化学染色样品封片；2. 染色体荧光观察封片；3. 核酸荧光原位杂交样品封片。

对所有光谱范围的荧光均有抗衰减作用，如FITC，Cy2, Cy3, Rhodamine, Texas Red, Cy5, Cy7，DAPI, AMCA, R6G, Hoechst 33258 and 33342。

使用方法：1. 吸去载玻片上的液体，略微晾干残留液体。

2. 取约20µl封片试剂滴加在载玻片的样品处。

也可取适量直接加到细胞培养孔内。

3. 盖上盖玻片。

盖玻片规格为24 x 24 mm或24 x 60 mm大小。

4. 轻轻压盖玻片，用滤纸小心吸除盖玻片周围多余液体，室温放置数分钟。

5. 直接进行荧光显微镜观察。

片子于4ºC或－20ºC避光保存2周，荧光无明显衰减。

6. 如需永久封片可用市售指甲油封固盖玻片周围，但通常这样做并无必要。

规格：5 ml或10 ml包装，每一24 x 24 mm盖玻片用约10-20µl。

储存：自然温度运输，收到后－20ºC避光保存。

组织自发荧光淬灭剂AutoFluo QuencherSC1212 20 ml 200 元概述：许多组织会产生可透过各种波长滤光片的内源性自发荧光，显著干扰抗体标记荧光观察甚至导致荧光组化染色失败。

FISH（荧光原位杂交）技术全攻略荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示核酸序列位置的方法。

该技术问世与70年代中期左右，其曾多于与染色体异常的研究，近年来随着FISH探针种类的不断增多，使得该技术逐步应用于各种领域。

该技术具有快速，安全，灵敏度高以及探针可长期保存等特点，目前已广泛应用于细胞遗传学，肿瘤生物学，基因定位，基因作图，基因扩增及分子诊断等领域。

1对于FISH操作来说，那些因素比较重要？在FISH中最重要的因素是温度、光照、湿度和各种试剂的PH值。

温度和湿度直接影响着探针和目标DNA的杂交效率；光照影响了荧光染料的强度，因此探针要避光保存，其已经杂交的片子可用防荧光淬灭剂封片且避光保存；各种试剂pH也要精确达到要求，这也直接关系到FISH的稳定性。

2 如何保证FISH操作中的温度？最佳的措施是使用一些FISH的专用仪器进行操作，如Vysis的Hybrit FISH杂交仪。

如果是手工操作，首先要对FISH操作过程中可能使用的一些仪器进行温控能力的检查，如水浴锅、孵箱，对其中不符合要求的要进行更换（疾病诊断中的探针要求温控精度在0.5度以内）。

其次，要尽可能地保持操作环境温度在20度以上，对于在冬季进行的FISH操作尤为重要。

此外对于需要预热以达到要求温度的试剂，在使用前必须使用温度计对其进行测温。

同时检测的样本最好不能超过4块。

操作中的行动一定要迅速。

操作者还往往忽视一些小部件的温度，诸如载玻片和盖玻片。

特别是在冬季，盖玻片本身温度就低，加之探针的量本就不多（10ul），因此事先没有预热的盖玻片会使得杂交液的温度急剧下降严重地影响了探针和目标DNA的杂交效率。

因此对上述小部件的要进行预热处理，不然会影响FISH 的杂交效果。

3 使用荧光显微镜观察结果时，最初有清晰而明亮的信号，但随后信号急剧衰减，几分钟后信号就消失了。

相关疾病：•产品名称：罗氏(Roche)公司Tunel试剂盒英文名称：Tunel产品货号：产品规格：50T试剂级别：试剂级产品产地：USA产品商标：RocheIn situ cell death detection kit-POD法一、原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡初期进程中细胞核DNA的断裂情形。

其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP 在脱氧核糖核苷酸结尾转移酶（TdT Enzyme）的作用下，能够连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH结尾，并与连接辣根过氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的荧光素抗体特异性结合，后者又与HRP底物二氨基联苯胺（DAB）反映产生很强的颜色反映（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因此在光学显微镜下即可观看凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂，因此没有3‘-OH形成，很少能够被染色。

本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）在单细胞水平上的凋亡原位检测。

还可应用于抗肿瘤药的药效评判，和通过双色法确信细胞死亡类型和分化时期。

二、器材与试剂器材：光学显微镜及其成像系统、小型染色缸、湿盒（塑料饭盒与纱布）、塑料盖玻片或封口膜、吸管、各种规格的加样器及枪头等；试剂：试剂盒含TdT 10×、荧光素标记的dUTP 1×、标记荧光素抗体的HRP；自备试剂：PBS、双蒸水、二甲苯、梯度乙醇（100、95、90、80、70%）、DAB工作液（临用前配制，5 μl 20×DAB+1μL 30%H2O2+94 μl PBS）、ProteinaseK工作液（10-20 μg/ml in 10 mM Tris/HCl，pH ）或细胞通透液（% Triton X-100 in % sodium citrate，临用前配制）、苏木素或甲基绿、DNase 1（3000 U/ml– 3 U/ml in 50 mM Tris-HCl，pH ，10 mM MgCl2，1 mg/ml BSA）等。

防止细胞荧光淬灭的方法
选择合适的荧光染料和荧光蛋白：使用与荧光显微镜的激发波长和发射波长相匹配的荧光染料和荧光蛋白进行细胞成像。

降低激发光的强度：尽可能降低激发光的强度，减少曝光时间。

避免长时间暴露：避免长时间将样品暴露在“无用”的光照条件下，例如在没有收集数据时在镜下长时间观察。

使用抗荧光淬灭封片剂：为尽量减少实验样品的光漂白，可以使用抗荧光淬灭封片剂，以提高活细胞和固定细胞样品中荧光染料的光稳定性。

使用荧光淬灭剂：荧光淬灭剂中的离子可通过碰撞方式，捕获自发荧光光源分子发出的电子，阻止该电子从激发态回归基态和能量释放，从而淬灭自发荧光。

使用Evan’s蓝或者台盼蓝：可以采用0.001%或至0.1%浓度的Evan’s蓝或者台盼蓝染色，这种物质会均匀分布到组织或者细胞上，它能够结合不必要的固有荧光物质或背景性荧光物质，显著减少自发荧光。

免疫荧光层析试剂信号弱免疫荧光层析试剂（immunofluorescence assay reagents）是一种常用的实验工具，用于检测和研究生物样品中特定分子的存在和定量。

然而，有时候我们可能会遇到免疫荧光层析试剂信号弱的情况，这给我们的实验带来了一定的挑战。

信号弱可能是由多种原因造成的。

首先，可能是样品中目标分子的浓度较低。

在样品中，目标分子的浓度越低，与试剂结合的机会就越少，从而导致信号弱。

此外，样品中存在其他干扰物质也可能会影响信号的强度。

这些干扰物质可能与试剂结合，使得试剂与目标分子结合的机会减少，进而导致信号减弱。

另外，试剂的质量也会对信号强度产生影响。

如果试剂的纯度不高或保存不当，可能会导致信号弱。

为了解决信号弱的问题，我们可以采取一些策略。

首先，可以尝试增加目标分子的浓度。

这可以通过对样品进行浓缩或纯化来实现。

其次，我们可以优化试剂的使用条件。

例如，调整试剂的浓度、温度和反应时间等参数，以提高试剂与目标分子的结合效率。

此外，我们还可以尝试使用其他更敏感的检测方法，如放射免疫测定法（radioimmunoassay）或酶联免疫测定法（enzyme-linked immunosorbent assay），以提高信号的强度。

最后，我们还可以选择更高质量的试剂供应商，确保试剂的质量可靠。

除了以上策略，我们还可以通过优化实验步骤来改善信号弱的问题。

首先，我们可以仔细选择样品的处理方法，确保样品中的目标分子不会受到损坏或降解。

其次，我们可以优化固定和染色步骤，确保试剂与目标分子的结合效率最大化。

此外，我们还可以优化显微镜的设置，如调整曝光时间和增益等参数，以提高信号的可见性。

在实验过程中，我们还需注意一些可能导致信号弱的常见错误。

首先，我们应该避免使用过期的试剂，因为过期的试剂可能会导致信号弱。

其次，我们应该避免使用不适当的控制组，以确保我们的实验结果可靠。

此外，我们还应该注意实验条件的一致性，如温度、湿度和pH值等，以减少不确定性因素对信号的影响。

抗荧光衰减封片剂（含DAPI）说明书货号：S2110规格：5ml/25ml保存：-20℃保存，一年有效。

产品简介：抗荧光衰减封片剂是一种用于减缓荧光衰减的封片试剂。

以甘油为基础，加入抗荧光衰减剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。

封片后，样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。

本试剂操作简单，在封片时用移液枪滴一滴抗荧光衰减封片液，盖上盖玻片就可以了。

抗荧光衰减封片剂内含DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用与荧光显微镜观测。

因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色，显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞。

DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360nm，最大发射波长为460nm。

使用说明：使用前平衡至室温。

1.贴壁细胞样品：A.染色完毕后，吸尽液体。

B.滴一滴(20-50ul)抗荧光衰减封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。

C.随后即可通过荧光显微镜观察样品。

2.组织切片：A.染色完毕后，吸尽液体。

B.滴一滴(20-50ul)抗荧光衰减封片液于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。

C.随后即可通过荧光显微镜观察样品。

3.其它样品：其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。

注意事项：1.荧光物质均易发生衰减，染色后的样品宜避光保存。

2.在使用抗衰减封片液的情况下可以减缓衰减，但仍宜尽量避光和尽早拍照。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

抗荧光淬灭封片剂配方一、简介抗荧光淬灭封片剂是一种用于荧光显微镜下观察细胞的试剂。

在荧光显微镜下，由于荧光分子的不可逆性猝灭作用，会导致样品中的荧光信号逐渐减弱或消失，影响观察效果。

抗荧光淬灭封片剂可以有效地减轻这种猝灭作用，提高样品中荧光信号的稳定性和持久性。

二、配方1. PVA（聚乙烯醇）：PVA是本试剂的主要成分之一，在封片剂中起到增稠、降低表面张力、防止气泡生成等作用。

常见的PVA型号有17-88和10-98两种，前者的粘度较低，后者较高。

2. Glycerol（甘油）：甘油是一种具有保湿性质的化合物，在本试剂中起到保持细胞膜完整性、减少蒸发和挥发等作用。

3. DABCO（1,4-二氨基环己烷）：DABCO是一种具有活性氮原子的化合物，在本试剂中起到抗荧光淬灭的作用。

它可以与氧气、水和其他有机分子形成复合物，从而减少荧光分子的不可逆性猝灭作用。

4. PBS（磷酸盐缓冲液）：PBS是一种缓冲液，可以调节试剂的pH 值，使其适合于细胞生长和显微镜观察。

5. DAPI（4',6-二氨基-2-苯基吡啶）：DAPI是一种DNA染料，在本试剂中起到标记细胞核的作用。

它可以与DNA结合，发出蓝色荧光。

6. Mounting medium（封片剂）：封片剂是一种用于固定细胞和显微镜观察的介质。

常见的封片剂有DABCO、Vectashield等。

三、制备方法1. 加入PVA：将适量的PVA加入PBS中，并在50℃下搅拌至完全溶解。

2. 加入甘油：将适量的甘油加入PVA溶液中，并搅拌至均匀混合。

3. 加入DABCO：将适量的DABCO加入甘油-PVA溶液中，并搅拌至均匀混合。

4. 加入DAPI：将适量的DAPI加入甘油-PVA-DABCO溶液中，并搅拌至均匀混合。

5. 制备封片：将制备好的样品滴在载玻片上，加入适量的封片剂，然后用盖玻片覆盖。

最后用胶水固定盖玻片。

四、注意事项1. 避免过度搅拌：过度搅拌会使PVA分子链断裂，导致溶液黏度降低。