实验一 小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构观察

实验一精子的制片、活力及密度测定一目的1. 掌握小鼠精子的制片方法。

2.了解评定精液品质的方法。

3. 掌握精子活力的估测方法及血球计数器进行精子密度测定的方法。

二小鼠精子制片及观察1.仪器和试剂眼科手术剪、镊子、玻璃平皿、显微镜、擦镜纸、带橡皮头吸管、载玻片、盖玻片、生理盐水、甲醇（分析纯）、2%伊红溶液2.动物选择成熟的大鼠、小鼠均可使用。

一般采用雄性小鼠，年龄6-8周。

3.制片用颈椎脱臼法处死小鼠，剪开腹腔，分离并摘取双侧附睾，将附睾放入盛有约3ml 的生理盐水平皿中，以眼科剪将附睾剪成小块，用吸管将悬液轻轻吹打5-6次，静置3-5分钟，用四层擦镜纸滤除组织碎片，制得精子悬液。

左手食指和拇指向上捏住载玻片两端，使载玻片处于水平状态，取此精子悬液滴至载玻片右侧。

右手拿一载玻片或盖玻片，使其与左手拿的载玻片呈向右的45度角，并使其接触面在精液滴的左侧。

将载玻片向右拉至精液刚好进入两载玻片形成的角缝中，然后平稳地推至左边（不得再向回拉），做成精液抹片。

必须注意精液抹片不要太厚，同时要防止用力过大而造成人为的畸形精子数增多。

抹片后，使其自然风干。

晾干后用甲醇固定5分钟，干燥后即可镜检。

也可用2%的伊红溶液染色1-2小时后再做镜检。

三精液品质检查(一) 直观检查1. 精液量：将采得的精液倒在有刻度的试管或杯中，测其容量。

各种常用实验动物的射精量平均为：大鼠0.05～0.2毫升，豚鼠0.4～0.8毫升，兔0.4～6.0毫升，犬2.0～15.0毫升。

2. 观察精液的色泽并嗅闻气味。

色泽：正常精液一般为乳白色或白色，密度越高，乳白色程度越浓，其透明度也越低。

其它颜色均为不正常颜色。

气味：一般为无味或略带腥味。

3.精液的云雾状翻腾滚动。

云雾状显著者以“＋＋＋”表示，有云雾状以“＋＋”表示，云雾状不明显者以“＋”表示。

(二)精子活力检查精子的活动有三种类型：前进运动、旋转运动和振摆运动，评价精子活力是根据精液中呈直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。

《动物胚胎工程实验教程》王子玉自编南京农业大学动科院2005年8月实验一小鼠卵母细胞的体外成熟实验一、实验目的熟悉雌鼠的生殖器官的结构特点;掌握小鼠的超数排卵方案；掌握从卵巢上扎取未成熟卵母细胞的方法、卵母细胞的分类方法、体外成熟培养方法及核成熟情况和卵丘扩展程度的观察。

二、实验器材和材料1. 器材及药品体视显微镜，手术器械（眼科剪，眼科镊），1mL注射器，胶头滴管，口吸管，CO2培养箱，水浴锅，移液器，枪头，塑料培养皿,记号笔。

操作液（M2），成熟培养液（M－199）,激素(PMSG和HCG)，石蜡油.2．实验动物：3-4周龄昆明系雌性小白鼠，自由采食饮水。

三、实验内容1。

小鼠的超数排卵注射剂量皮下或腹腔注射PMSG 10 IU/只小鼠.注射方法皮下注射：用手指捏住小鼠的头及尾部固定（图1—1)，以酒精棉球消毒其背部，提起皮肤，将注射针头平插刺入皮下，将针头微向上挑起不露出针尖时,再注入药物。

随着药物的推入，在皮下可看到鼓起一个小泡，即证实药物确已注入皮下部位.皮下注射时防止药液从针孔处逸出。

腹腔注射：针头刚进入腹腔后向上挑，防止损伤小鼠腹腔内器官。

注射针头宜选用小号细针头。

注射药物后的小鼠自由饮水、采饲，自然光照。

2.卵巢的采集方法在注射PMSG 后46h 利用颈椎脱臼法处死小鼠（将供体鼠置于饲养笼上,鼠爪自然抓紧笼上铁支架，此时一只手拉紧鼠尾，另一只手食指与拇指压紧鼠颈部,或用镊子压紧颈部即可致死，此为引颈法。

用75%酒精喷湿鼠全身以消毒并防止毛发飞扬）。

将小鼠头部固定，用力牵拉鼠尾，可感到颈椎部位脱臼的振动；也可用食指和拇指直接掐断颈椎致死。

然后用图钉将小鼠呈仰卧姿势固定于小木板上或鼠解剖台上.图1－1 小鼠的固定将处死并固定好的小鼠,在下腹部中间剪开1个小口，一只手抓住鼠尾，另一只手抓住切开的皮肤向头部牵拉直至充分暴露腹部(图1—2）。

剪开腹膜,向前方揭去肠胃内脏，即暴露出生殖器官，可在肾脏后方看到两侧呈乳白色的卵巢及与输尿管相平行的两子宫角（图1—3）。

小鼠的解剖及组织观察实验报告一、实验目的1、熟悉小鼠的外部形态和内部结构。

2、掌握小鼠的解剖方法和操作技巧。

3、观察小鼠主要器官的组织形态和结构特点。

二、实验材料1、实验动物：健康成年小鼠若干只。

2、实验器械：解剖盘、解剖剪、镊子、手术刀、大头针等。

3、实验试剂：75%酒精、生理盐水等。

三、实验步骤（一）小鼠的处死1、采用颈椎脱臼法处死小鼠。

用左手拇指和食指捏住小鼠的头颈部，右手拉住小鼠的尾巴，将小鼠头部用力向后上方牵拉，使小鼠的颈椎脱位，迅速死亡。

（二）小鼠的外部形态观察1、观察小鼠的整体外形，包括体型、毛色、头尾、四肢等。

2、注意小鼠的性别特征，雄鼠的生殖器距离肛门较远，有明显的睾丸；雌鼠生殖器距离肛门较近。

（三）小鼠的解剖1、将处死的小鼠仰卧固定在解剖盘上，用大头针固定四肢。

2、用酒精棉球擦拭小鼠腹部的皮毛，使其湿润。

3、用手术刀在小鼠腹部正中线从胸骨剑突下至耻骨联合处做一个纵切口，然后沿两侧腹股沟向左右横切，小心地剥离腹部皮肤。

4、沿腹白线切开腹壁肌肉，暴露腹腔。

注意不要损伤腹腔内的脏器。

5、观察腹腔内的脏器位置和形态，依次辨认肝、胃、肠、脾、肾等器官。

（四）小鼠器官的观察和组织取样1、肝脏：观察肝脏的颜色、质地和分叶情况。

用镊子轻轻夹取一小块肝脏组织，放入盛有生理盐水的培养皿中，用于后续的组织切片制作。

2、胃：观察胃的形态和位置，区分胃的贲门、幽门和胃体。

3、肠：观察小肠和大肠的区别，注意肠壁的结构和肠系膜的分布。

4、脾：观察脾的形状和颜色，注意其与周围组织的连接。

5、肾：观察肾的位置、形态和颜色，区分皮质和髓质。

（五）小鼠胸腔的解剖1、用剪刀小心地剪断肋骨，打开胸腔，暴露心肺等器官。

2、观察心脏的外形和位置，区分心房和心室。

3、观察肺的形态和颜色，注意其与气管的连接。

（六）小鼠组织切片的制作和观察（如有条件）1、将取好的组织块经过固定、脱水、包埋、切片等步骤制作成组织切片。

2、用苏木精伊红（HE）染色法对切片进行染色。

小鼠输精管结扎和简单精子操作121140052 王哲迪 174一、实验目的1、掌握小鼠手术的基本技巧2、学习雄性小鼠生殖系统特点3、练习显微操作技术二、实验结果及分析1、以腹部横切法剪开小鼠腹壁后，用镊子夹住脂肪垫将睾丸、附睾和输精管拉出切口。

实验时我们将下面图片中镊子夹着的地方剪掉了1cm。

但是在仔细观察过右边这个图后发现，我们错把附睾体当做了输精管。

我们剪掉的是附睾体，而不是输精管。

2、下面这张图片是小鼠腹壁缝合后的照片。

我们采取了方洁的打结方式。

在将睾丸放回腹腔的过程中，发现不管怎么推，都不能把睾丸推回阴囊，这给缝合带来了一定的难度。

缝合腹壁时一定要小心，因为缝合针很容易扎到皮肤和腹腔内的脏器。

3、下图为皮肤缝合后的照片，同样采用的是方结的打结方式。

皮肤相对于腹壁而言较容易缝合。

4、下图为在解剖镜下观察得到的照片。

可能由于角度问题，这张图片上只能分辨出脂肪体和睾丸，并不能看到附睾体和输精管。

取出睾丸时的操作也存在问题，并没有注意到输精管在哪里。

上面剪切输精管时也没有找对输精管，所以实验失败在没有观察到输精管。

脂肪体睾丸4、下图为在显微镜下观察精子得到的照片。

正如细线所指的，图中有着尖尖的头部和一条细长的尾巴的就是精子。

由于载玻片上有一些脂肪体残留的脂肪，所以在显微镜下会看到很多油花，影响精子的观察。

但是仔细看还是可以看到许多在快速无规则运动的精子。

精子三、备注1、本人在实验中操作的部分：对小鼠进行断颈处理切开腹壁夹出睾丸、附睾和脂肪体剪掉1cm输精管（其实剪掉的是附睾）部分缝合操作2、实验要求用乙醚麻醉小鼠，但是实验过程中发现用乙醚麻醉的方法并不好，小鼠经常会醒过来，而且用乙醚操作时间长了，实验人员出现头疼恶心等不适症状。

由于并不需要对小鼠进行回收，所以为了方便操作我们直接采取了断颈处理的方法。

实验六、小鼠采精方法中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVEMEDICINE2005年4月第15卷第2期April, 2005 Vol.15 No。

2郑新民,李聚学，魏雁，乔宪凤,周荆荣（湖北省农科院生物技术研究所，武汉430072小鼠是世界上研究最为详尽的哺乳类动物［1］.但是目前人们仍然是通过手术法从小鼠附睾中获取精子，国内外尚无小鼠非手术法采精的报道.手术法采精为众多的科学研究带来了不便：（1)手术法采精必须将雄鼠处死，分离其附睾和输精管来获取精子,过程繁琐，费时费工,且造成不必要的经济浪费［2]。

另外，从附睾中获取的精子由于缺少副性腺中的诸多有益成分，精子品质难以保证[3];（2）不利于小鼠生殖生理的研究,在医学上,人们都是通过“杀鸡取卵”式地宰杀大量的雄鼠来获取精子进行科研分析[4-6],不但造成了很大的经济浪费，而且增加了实验的误差和难度;(3)不利于某些动物模型的建立,例如，由于小鼠精子获取繁琐，人工授精技术不易建立，精子载体转基因技术尚无理想的动物模型,这极不利于该项研究的开展［7］。

由此可见,建立一种方便快速的小鼠非手术法采精技术对解决小鼠手术法采精中存在的问题、小鼠生殖生理的研究和建立某些小鼠动物模型都是很有意义的。

1 材料和方法1。

1 实验动物SPF级昆明小白鼠雄鼠,购自湖北省预防医学科学院。

合格证号为：SYXK(鄂）20035853。

1.2 小鼠假阴道抽吸器的制备小鼠假阴道的制作：取一段长约2 cm,内径8 mm的软质透明塑料管,在其内侧套上一层厚度约0.1 mm的胶膜,胶膜要求透明且有良好的弹性。

在塑料管中部钻一直径为2 mm的小孔,将一外径与小孔相当的硬质插管插入小孔中，深度与塑料管管壁厚度相当,小孔周围用强力胶水密封,向小管中轻轻吹入空气即可将塑料管内侧胶膜充起。

将制好的小鼠假阴道与胶头吸管相连,小鼠假阴道抽吸器即制作完毕。

1.3 电刺激采精仪的制备电刺激采精仪由电刺激发生器和直肠探子两部分组成。

小鼠输精管结扎及小鼠各时期精子形态观察
121140066 许克波 253
一、实验目的
1、学习小鼠结扎方法；
2、学习雄性小鼠生殖系统特点；
3、观察小鼠生殖系统各部位的精子形态特点；
二、实验原理
断颈法处死小鼠：
小鼠不能用毁髓法处死，最简单的方法便是断颈法对小鼠进行处死。

先给小鼠一个抓着物，然后左手捏住小鼠颈部毛皮并轻摁在桌面上，右手拉住小鼠尾巴后三分之一处向上30度左右使劲一拉，将小鼠颈椎拉断就可以了。

这样处死小鼠可以让小鼠在痛苦最小的情况下死去，是符合动物福利学的一种实验方法。

三、实验动物及器材
雄性小鼠；
基本解剖器械、注射器、显微镜、生理盐水等；
四、实验操作
1、处死小鼠；（我做的）
2、解剖小鼠并找到小鼠生殖系统；
3、输精管结扎；（每人做一边）
4、取精观察；（合作）
五、实验结果
实验中观察到的生殖系统结构：
睾丸内精子图片：
输精管内精子图片：
六、分析及讨论
我们只在睾丸和输精管内取出了精子，但是由于附睾的头、体、尾、三部分过小，而且不能切开取精，注射器也没能吸出来，所以没能观察到附睾内的精子形态。

科目细胞生物学实验题目_观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征【实验目的】1、掌握染色体的制备方法；2、观察小鼠睾丸染色体的数目及其形态特征；3、认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组型图【实验原理】(一) 制作染色体标本的先决条件：1、细胞具有旺盛的分裂能力（a.选择活跃的组织如睾丸，骨髓。

b.施加药物使细胞分裂如PHA）2、设法得到大量中期细胞，秋水仙素处理。

染色体特征：1. 数目（2n=？）2. 长度（绝对长度、相对长度）3. 着丝粒位置（M\SM\ST\T）4. 随体与次溢痕的数目、大小和位置5. 带型分析(二) 操作方法利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作，但其基本程序是简便的。

在小鼠睾丸中，细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。

通过小鼠睾丸得到染色体比较简便，一般不需要无菌操作。

用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂。

由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。

减数分裂是细胞分裂染色体数目减半时发生在性细胞的形成过程中。

哺乳动物在性成熟以后，精巢内的性细胞总是在分批分期不断的成熟，因此，对哺乳动物的精巢进行一定的技术处理，随时都可以获得减数分裂过程中各个时期染色体的标本。

用适量的秋水仙素溶液注入动物腹腔内，可以阻止分裂细胞纺锤丝的形成，从而积累大量处于分裂中期的细胞。

利用上述原理，通过常规的制片方法，观察小鼠睾丸细胞的染色体。

(三) 中期染色体的特征1、突出在纺锤丝的牵引下，染色体的着丝点集中到细胞中央的道板上；2、DNA高度螺旋化。

短粗的染色体清晰可见，染色体数目形态稳定，便于观察；3、由于染色体高度集中，造成纺锤体清晰可见。

通过本实验的结果看，本实验要想做的较好不太容易，需要娴熟的技术和耐心，(四) 原理分析通过获取小鼠睾丸细胞（分裂能力强），本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。

小鼠睾丸输出管注射法建立转基因小鼠的试验研究作者：王鹤曹文广来源：《天津农业科学》2013年第04期摘要：应用玻璃针将脂质体包裹的质粒pEGFP-C1通过睾丸输出管注射到4周龄昆明（KM）小白鼠睾丸曲精细管内。

共注射6只小鼠，其中一只注射后马上做石蜡切片观察转染液注射入曲细精管内的情况，其他5只继续饲养，1周后取1只小鼠培养睾丸的支持细胞，观察是否有荧光出现。

4周后，用PCR法检测剩余4只小鼠睾丸组织曲细精管基因组中的外源DNA，4只都显示为阳性。

表明用睾丸输出小管注射法将外源基因导入小鼠睾丸是一条简便可行的新途径。

关键词：小鼠；转基因；睾丸输出管注射法中图分类号：S865.1文献标识码：ADOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.04.008Construction of Transgenic Mice by Testicular Efferent Duct InjectionWANG He1，2， CAO Wen-guang2（1. College of Animal Science， Xinjiang Agriculture University， Urumqi， Xinjiang 830052， China； 2.Institute of Animal Science， Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100193， China）Abstract： Using glass needle plasmid pEGFP-C1 liposome-encapsulated was injected into the testicular efferent of 4 weeks male KM mice. Do immediately after an injection of paraffin sections to obserne the transfection solution was injected into the seminiferous tules， remanent mouse to continue to raise， after a week， take one mouse cultivating testicular sertoli cells. After four weeks， exogenous DNA in the PCR method for detecting the remaining four mouse testis seminiferous tubules genome， all as positive. The result indicated that the data in this study to transgenic animals could be established by testicular efferent injection.Key words： mice；transgenic；testis efferent injection转基因动物在生命科学、医学、生物制药等领域有着广泛的研究和应用前景，因此，科学家们一直在探索一种更简便易行、经济实用而又高效的转基因方法。

小鼠发育生物学实验内容实验一：小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的：掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法，观察精子结构和运动状态，评估精子活力，观察卵母细胞结构，了解体外授精操作过程。

二、操作过程：1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管，连上乳胶管即可。

2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠，打开腹腔，找到睾丸和附睾，剪取附睾尾，剪碎，置1.5ml离心管底部，加0.5ml 生理盐水，置37度水浴锅20分钟，用吸管从离心管上部取50微升液体，置细胞计数板，观察精子结构、密度和活力。

精子活力计算公式：精子活力＝视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集：母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG（每只10单位），48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG（每只10单位），18小时后断颈处死母鼠，打开腹腔，剪下输卵管，用镊子刺破输卵管壶腹部，释放卵母细胞，用透明质酸酶溶液（10毫克/毫升生理盐水）处理卵母细胞以除去颗粒细胞，在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。

未成熟卵母细胞的收集：断颈处死性成熟前母鼠，打开腹腔，剪取卵巢，加入1毫升盐水，用刀片或镊子捣碎卵巢，寻找生发泡状态的卵母细胞，观察卵母细胞结构。

5 体外授精将卵母细胞与精子共培养（微滴培养法）（演示）三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图；精子活力；精子密度四、实验收获与体会，存在问题和改进意见。

实验二：小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的：掌握小鼠附植前胚胎收集方法，观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构，认识小鼠早期胚胎形态学，并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系，了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。

二、操作过程：1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG，48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配，次日清晨检查阴道栓，如果发现阴道栓则妊娠0.5天。

一、实验目的本研究旨在通过利用shRNA慢病毒技术，高效敲降雄性小鼠睾丸基因，建立快速、高效的睾丸特定基因敲降动物模型，为生殖生物学研究提供有力工具。

二、实验材料1. 实验动物：出生24天昆明小鼠（雄性），由南京医科大学生殖医学国家重点实验室提供。

2. 试剂：shRNA表达载体（pSliencer-GFP-shSox30）、对照质粒（pSliencer-GFP-shScramble）、慢病毒颗粒、免疫荧光试剂等。

3. 仪器：显微镜、荧光显微镜、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统等。

三、实验方法1. 构建shRNA表达载体：设计靶向睾丸特异性表达基因Sox30的shRNA序列，构建pSliencer-GFP-shSox30表达载体及其对照质粒pSliencer-GFP-shScramble。

2. 慢病毒包装：将shRNA表达载体和对照质粒分别与慢病毒包装载体共转染293T 细胞，收集慢病毒颗粒。

3. 动物模型制备：将慢病毒颗粒通过网微注射转导至出生24天小鼠睾丸生精小管管腔。

4. 免疫荧光检测：利用免疫荧光技术检测敲降组小鼠睾丸组织中Sox30蛋白表达水平。

5. 生精细胞发育观察：观察敲降组小鼠生精细胞发育情况，包括圆形精子、期生精细胞等。

四、实验结果1. Sox30蛋白表达水平检测：敲降组小鼠睾丸组织中Sox30蛋白表达水平显著下调，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。

2. 生精细胞发育观察：敲降组小鼠生精管腔中圆形精子发育阻滞在23步，期生精管腔中无长型精子，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。

五、实验讨论1. Sox30基因在生殖生物学中的重要作用：Sox30基因是Sox基因家族的一员，具有促进生殖细胞发育、维持生殖系统稳态等功能。

本研究通过敲降Sox30基因，发现小鼠生精细胞发育受到显著影响，说明Sox30基因在生殖细胞发育过程中具有重要作用。

2. shRNA慢病毒技术在基因敲降中的应用：shRNA慢病毒技术具有高效、特异性强、易于操作等优点，在基因敲除研究中具有广泛应用。

小鼠发育生物学实验内容实验一：小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的：掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法，观察精子结构和运动状态，评估精子活力，观察卵母细胞结构，了解体外授精操作过程。

二、操作过程：1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管，连上乳胶管即可。

2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠，打开腹腔，找到睾丸和附睾，剪取附睾尾，剪碎，置1.5ml离心管底部，加0.5ml 生理盐水，置37度水浴锅20分钟，用吸管从离心管上部取50微升液体，置细胞计数板，观察精子结构、密度和活力。

精子活力计算公式：精子活力＝视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集：母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG（每只10单位），48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG（每只10单位），18小时后断颈处死母鼠，打开腹腔，剪下输卵管，用镊子刺破输卵管壶腹部，释放卵母细胞，用透明质酸酶溶液（10毫克/毫升生理盐水）处理卵母细胞以除去颗粒细胞，在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。

未成熟卵母细胞的收集：断颈处死性成熟前母鼠，打开腹腔，剪取卵巢，加入1毫升盐水，用刀片或镊子捣碎卵巢，寻找生发泡状态的卵母细胞，观察卵母细胞结构。

5 体外授精将卵母细胞与精子共培养（微滴培养法）（演示）三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图；精子活力；精子密度四、实验收获与体会，存在问题和改进意见。

实验二：小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的：掌握小鼠附植前胚胎收集方法，观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构，认识小鼠早期胚胎形态学，并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系，了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。

二、操作过程：1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG，48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配，次日清晨检查阴道栓，如果发现阴道栓则妊娠0.5天。

小鼠精子畸形实验报告
实验目的：
本实验旨在观察小鼠种公对辐射的敏感性和精子畸形情况，进
一步探究辐射对生殖系统的影响，为人类辐射防护提供科学依据。

实验方法：
选取雄性C57BL/6J小鼠10只，年龄在8~12周之间，均无生
殖系统疾病等慢性病史。

将小鼠随机分为两组：对照组（5只）和辐射组（5只）。

对照组小鼠暴露于正常环境，无额外操作。

辐射组小鼠在对照组操作基础上，于每日9:00-10:00和16:00-17:00左右，接受单次0.5Gy X射线辐射，共连续6天。

辐照前，检测所
有小鼠前列腺并记录体重。

辐射后第11天晚间，左双侧睾丸进行
离体解剖，取出精液供检测精子形态和结构。

实验结果：
与对照组相比，辐射组的平均体重有所下降，辐射组的平均体
重下降了2.3克；对照组的前列腺质量为12.4±2.3（mg），辐射组为10.0 ± 1.2(mg)，辐照组比对照组减轻了19.4%（p＜0.05）。

检
测精液样本可知，辐射组的精子畸形率为15.74±0.8%，对照组的
精子畸形率为7.32±2.6%。

辐射组的畸形率高出对照组8.4% （p＜0.01）。

实验结论：
小鼠对辐射的敏感性显著，在短时间辐射后，辐射组小鼠体重
减轻和前列腺质量流失均有显著差异。

同时，精子畸形率显著提高，证实辐射对生殖系统造成伤害。

因此，对于长期接触辐射工
作者应加强防护，减少辐照量，防止过大辐照对生殖系统的影响。

通过本次实验，了解性器官的解剖结构，掌握性器官的生理功能和病理变化，为今后从事相关领域的工作奠定基础。

二、实验对象实验动物：成年雄性大白鼠实验器材：解剖显微镜、解剖刀、镊子、剪刀、解剖盘、生理盐水、注射器、解剖针、实验记录本等。

三、实验方法1. 实验动物麻醉：采用腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉。

2. 解剖部位：性器官。

3. 解剖步骤：（1）首先观察雄性大白鼠的性器官，了解其大致位置和形态。

（2）用解剖刀沿腹中线切开皮肤，分离肌肉层，暴露腹腔。

（3）找到性器官所在位置，用解剖镊子轻轻提起，观察睾丸、附睾、输精管、精囊腺、前列腺、阴茎等结构。

（4）观察睾丸的形态、颜色、大小，记录睾丸的重量。

（5）分离附睾、输精管，观察其形态、颜色、直径，记录长度。

（6）分离精囊腺、前列腺，观察其形态、颜色、大小，记录重量。

（7）观察阴茎的形态、颜色、长度，记录阴茎的重量。

（8）对性器官进行解剖分离，观察其内部结构。

（9）观察生殖细胞（精子）在附睾、输精管中的形态、颜色、大小。

（10）观察生殖细胞在精囊腺、前列腺中的分泌情况。

（11）观察性器官的血管分布、神经分布。

（12）对性器官进行测量，记录数据。

1. 睾丸：呈椭圆形，颜色呈粉红色，重量约为5克。

2. 附睾：呈长条形，颜色呈灰白色，长度约为10厘米。

3. 输精管：呈细长管状，颜色呈粉红色，直径约为1毫米，长度约为20厘米。

4. 精囊腺：呈长椭圆形，颜色呈灰白色，重量约为1克。

5. 前列腺：呈圆形，颜色呈灰白色，重量约为2克。

6. 阴茎：呈圆柱形，颜色呈粉红色，长度约为8厘米。

7. 生殖细胞：在附睾、输精管中呈椭圆形，颜色呈灰白色，直径约为0.1毫米。

8. 生殖细胞在精囊腺、前列腺中分泌情况：观察到精囊腺、前列腺内有分泌物质，颜色呈乳白色。

9. 性器官血管分布：睾丸、附睾、输精管、精囊腺、前列腺、阴茎等部位均有丰富的血管分布。

10. 性器官神经分布：睾丸、附睾、输精管、精囊腺、前列腺、阴茎等部位均有丰富的神经分布。