十三、精子畸形试验
Sperm Malformation Test
1 范围
本规范规定了动物精子畸形试验的基本原则、要求和方法。
本规范适用于化妆品原料的遗传毒性检测。
2 引用标准
GB 14924 试验动物与饲料标准
GB 15193·94 食品安全性毒理学评价程序
3 定义
精子畸形（sperm malformation）
指精子形态的异常改变。
4 原理
已知精子畸形是决定精子形成的基因发生突变的结果。常染色体和Y-性连锁基因突变及某些染色体重排，如性-常染色体易位，也可使精子发生畸形。
小鼠精子畸形试验能评价受试物对精子生成、发育的影响，可检测受试物在体内对生殖细胞的遗传毒性作用。
5 试验的基本原则
通过适当的途径使动物接触受试物，经过一定时间后处死动物，取其附睾，制备涂片，经固定、染色，在显微镜下计数畸形精子。
6 仪器和器械
生物显微镜、解剖剪、镊子、表面皿、离心管、小漏斗、吸管、滴管、载玻片、擦镜纸等。
7试剂
7.1 1%伊红染色液
称取伊红1g溶于100mL蒸馏水中。
7.2 生理盐水、甲醇（A.R）
8 实验动物和饲养环境
常规使用动物是雄性小鼠。6周~8周龄，体重为30g ~35g。
实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。
9 剂量分组
受试物至少设三个剂量组。分别取1/2、1/5、1/10或1/20LD50剂量。当受试物的LD50大于5g/kg体重时，可取5g/kg体重为最高剂量。另外设阴性（溶剂）对照组和阳性物对照组。常用溶剂为水、生理盐水、植物油（玉米油、花生油）等。阳性物对照组可采用环磷酰胺40mg/kg/
日。每组至少有5只存活动物。
10 染毒途径和方式
染毒途径视实验目的而定。常用途径为经口灌胃方式。受试物各剂量组、阴性对照组和阳性物对照组的动物，均连续染毒5d，每日一次。一般于首次染毒后的第35d处死动物。
11 试验方法
11.1 制片
用颈椎脱臼法处死小鼠，剖开腹腔，暴露睾丸，分离两侧附睾，用眼科剪剖开附睾组织，与适量生理盐水混匀，涂片。
11.2 固定
待涂片干燥后，放入甲醇（A.R）液中固定5min。取出晾干。
11.3 染色
将涂片于1%伊红染液中染色1h，然后用蒸馏水轻轻冲洗，晾干。
11.4 观察与计数
首先，在低倍镜下选择背景清晰、精子分布均匀、重叠较少的区域，然后，在高倍镜下观察结构完整的1000个精子，计数其中畸形的精子。精子畸形主要表现在头部。按Wyrobeks 的分类标准，主要类型有：无钩、香蕉形、无定形、胖头、尾折叠、双头及双尾。无尾精子、头部重叠的或整个与另一个重叠的精子均不计数。判断双头、双尾精子时，要注意与两条精子的部分重叠相区别。
12 数据处理和结果判断
每只动物应按精子畸形类型分别记录，以便计算各实验组的精子畸形发生率和精子畸形类型的构成比。
利用Wilcoxon秩和检验法和其他适当的统计学方法。将受试物各剂量组精子畸形发生率分别与阴性对照组进行比较。
精子畸形试验阳性的判断标准是畸形发生率至少为阴性对照组的倍量或经统计学处理有显著性差异，并存在剂量-反应关系者。
一般正常小鼠的精子畸形率为0.8%~3.4%，但每个实验室应有自己稳定的精子自发畸形率。
13 试验报告
试验报告应包括以下内容：
（1）受试物名称、理化性状、配制方法、所用溶剂；
（2）动物种属和品系、体重、数量、来源（注明合格证号和动物级别）；
（3）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物室合格证号；
（4）剂量分组，染毒途径和方式；
（5）试验方法：简述操作步骤，所用统计学方法；
（6）结果：以列表方式报告受试物对动物精子畸形发生率和精子畸形类型分析的结果（表1和表2）；
（7）结论。
表1 ×××精子畸形发生率
组别剂量
(g/kg)
动物数
(只)
受检精子总数
(个)
畸变精子数
(个)
畸变率
（%）
P值
受试物
溶剂对照
阳性物对照(mg/kg)
注：畸变率以均数 标准差表示。
表2 ×××精子畸形类型分析
组别剂量
(g/kg)
动物数
(只)
受检精子
总数(个)
精子畸形分类及比例（%）
无钩香蕉形胖头无定型其他总计
受试物
溶剂对照
阳性物对照(mg/kg)
食品安全模拟试卷一（第一、二章） 一、选择 1. WHO已将下列_____________列为极危险的有害农药。 A 甲萘威B涕灭威C 甲氰菊酯D 二氯苯醚菊酯 2. 蔬菜对有机磷农药的吸收能力下列正确的是： A 根菜类>叶菜类>果菜类 B 叶菜类>根菜类>果菜类 C 果菜类>叶菜类>根菜类 D 以上都不对 3. 1967年，日本米糠油事件导致5000多人患病，该病由_____________引起。 A 多氯联苯 B 二噁英 C 氰化物 D 3,4-苯并芘 4. 下列能引起运动失调、视野变窄的重金属是_____________。 A 汞 B 镉 C 砷D铅 5. 水俣病是由下列_____________引起的。 A 汞 B 镉 C 砷D铅 6. 痛痛病是由下列_____________引起的。 A 汞 B 镉 C 砷D铅 7. 下列具有“世纪之毒”之称的是_____________。 A 多氯联苯 B 二噁英 C 氰化物 D 3,4-苯并芘 8. 下列植物最容易受到氟化物污染的是_____________。 A 豆科植物 B 谷类植物 C 十字花科植物 D 山茶科植物 9. 下列植物对重金属吸收能力最强的是___________，最弱的是_____________。 A 小麦 B 大米 C 果类 D 蔬菜 10. 下列物质有类似人体激素作用的是_____________。 A 多氯联苯 B 二噁英 C 氰化物 D 3,4-苯并芘 11. 下列不属于有毒蛋白的是_____________。 A 蓖麻毒素 B 巴豆毒素 C 刺槐毒素D龙葵毒素 12. 去除胰蛋白酶抑制剂的方法最简单有效的方法是_____________。 A 用水浸泡至60%含水量 B 干热 C 浸泡后高压 D 高温加热 二、名词解释 1. 食品安全性 2. 食品安全 3. 过敏 4. 农药残留 5. 兽药残留 6. 实质等同性 7. 转基因食品 三、填空 1.影响食品卫生和安全最主要的因素是____________污染，其中包括 _____________和______________。 2.我国食品污染物监测网数据显示，___________、_____________和 ______________3种常见的食源性致病菌检测阳性率逐年上升。 3.环境污染物包括_____________和_____________。 4.二噁英、多环芳烃、多氯联苯等工业化合物都具有_____________和 _____________等特点，对食品安全性威胁极大。 5.食品加工过程中使用的各种包装和容器可能给食品带来有毒物质的污染，如 _____________可从聚苯乙烯塑料包装进入食品；陶瓷器皿表面的釉料中所含的_____________、_____________和_____________等盐溶入酸性食品中； _____________处理的包装纸上残留有毒的胺类化合物；不锈钢器皿存放酸性食品时间较长渗出的_____________、_____________等也可污染食物。 6.食品烹饪过程中因高温产生的_____________、_____________都是毒性极强
五大因素影响精子质量 作者：御药行用药：对精子有直接不良的影响 健康的身体是产生健康精子的前提。如果身体患有疾病很可能就会对精子产生过程中产生不良影响。比如性传播疾病不仅会造成生殖系统炎症损害和结构改变，有的还会影响生殖细胞的形成，诱发基因突变、精子畸形等情况。另外，药物在治疗疾病的同时也对孕育发生一些不良影响，有的药物对精子有直接不良的影响，因此处于生育期的男性最好避免滥用药物。 长期吸烟：畸形精子数量多 吸烟、熬夜、喝酒……这些不良生活习惯不可避免地会对精子的质量产生影响。就拿吸烟来说，长期吸烟的男性，畸形精子的数量就越多，同时降低精子的存活率；而长期酒精地浸染，也会带来不少“次品”精子。 饮食：有毒物导致少精、弱精 日常饮食也会影响精子的质量。饮料、油炸食品、烧烤等食物中，所含有的有毒物质及反式脂肪酸等等都会对精子质量产生影响，导致少精、弱精的发生。同时，需要谨慎的是食物安全问题，食物上残留的重金属镉、农药残留均对精子产生毒性。因此，蔬菜水果要尽量洗干净，避免农药化肥的影响等。周兴表示，想要质量好的精子，首先要规律饮食，适当地可以吃高热量、高蛋白，低脂肪的食物。还要补充新鲜的蔬菜水果等。 辐射：裤兜里的手机谋杀精子 电子产品在生活中的应用越来越频繁，当我们被电子产品所包围时候，就要警惕身体所受到的电磁辐射的影响，特别是对于脆弱的精子来说，一部经常揣在裤兜里无限接近精子安身之所的手机，很可能就会对健康精子的产生带来影响。因此，有造人计划的男性，最好减少与电磁辐射接触的时间。 温度：泡温泉破坏精子生长环境 阴囊温度过高，会影响精子孕育过程，甚至是存活与否。一般来说，35摄氏度是最适合精子发育的温度。如果经常穿太过紧和不透气的裤子，长时间坐着，又或者洗热水、泡温泉等，都容易导致阴囊温度过高，极易破坏精子的生长环境，或造成“死精”过多而致不育。 周兴表示，精子产生的整个周期大约是三个月左右，如果在这期间发生了可能影响精子质量的事情，就要再等三个月的周期。所以，想做爸爸的男性如果担心精子质量问题，可以到医院做精液质量分析。 建议： 男人的黄金生育年龄是25-40岁 周兴表示，从优生的角度来看，男性也是有黄金生育年龄的。一般来说，25到40岁是男性比较理想的生育年龄。由于在这段时期中，男性无论是体力还是精力都比较充沛，身体健康的男性精子在这段时间质量会达到巅峰。另外，在这个年龄段男性除了拥有身体的内部优势之外，也有其他的外部优势，如事业有成、经济稳定，丰富的生活阅历，成熟的心理准备等，为准备进入爸爸的角色做足了铺垫。
正确看待精子畸形率. 来源：邓天勤 黄永汉 日期：2009-1-14 在泌尿、男科门诊，经常遇到病人拿着精子畸形率检查的报告单，问医生：从报告单上看，我的精子畸形率80%左右，那么高，会不会以后生的孩子可能是畸形的？跟患者解释这个跟孩子的畸形是无关的，是与生育及体外受精相关的，但是对这个解释患者还是半信半疑的。 那让我们先了解下，精子畸形率是如何来的？泌尿男科研究室是根据WHO第四版人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册，对精液常规推片，采用改良巴氏染色法进行染色，在光镜下计数200条精子，分析精子形态。WHO将经染色后畸形精子分为：头部缺陷、颈部和中段缺陷、尾部缺陷和胞浆小滴异常4类。我们检查报告通常分为：头部缺陷、中段缺陷、尾部缺陷。其计算例如以下过程： 计数的精子数：200 正常精子数：78 正常精子百分比：（78/200×100%）39% 缺陷精子数：（200-78） 122（61%） 头部缺陷精子数：110（55%） 中段缺陷精子数：18 （9%） 尾部缺陷精子数：16 （8%） 缺陷总数：（122+18+16） 144 畸形精子指数(TZI)（缺陷总数/缺陷精子数）=144/122 1.18 精子畸形指数(SDI)（缺陷总数/所数精子总数）=144/200 0.72
畸形精子指数（teratozoospermia index, TZI）的数值介于1.00（每个异常精子只有一种缺陷）和3.00（每个异常精子都有头、中段及尾部缺陷），有报道提示，TZI ＞1.6与未经治疗不育夫妇的低生育率有关，而且精子畸形指数(sperm deformity index,SDI )1.6是体外受精失败的阈值。TZI和 SDI预示精子在体内和体外的功能情况。 因为WHO第4版手册中未给出正常参考值，仅说明当正常形态精子率<15%时体外受精率显著降低，所以我们的报告的正常参考值为：正常精子形态>15%, TZI0~1.5, SDI 0~1.5。其临床意义：正常形态精子率>15%；精子畸形率越高，生育机会越低，而流产、死胎的可能性就越大，当精子畸形率>85%或TZI>1.6时，可引起生育障碍，导致不育症。如果正常形态<15%或SDI>1.6时体外受精降低。 通过上述分析，应该知道精子畸形率跟婴儿畸形是不相关，婴儿的畸形应该是与遗传相关。对于一份精子畸形率报告，我们所要看的是：精子正常形态、TZI、SDI，通过这几项指标及综合精液分析报告来说明精子在体内和体外的功能情况，对男性不育症的诊断及治疗具有辅助意义。
动物繁殖学试题库 一、名词解释 11隐睾；2副性腺 21生殖激素；2神经激素；3长反馈；4短反馈；5超短反馈；6外激素；7大神经内分泌系统；8小神经内分泌系统；9动物的化学通讯；10动物的物理通讯;11局部激素；12神经内分泌； 31性成熟；2体成熟；3行为系列；4精子发生；5精子发生周期；6果糖酵解；7外源性呼吸；8精子冷休克；9呼吸商；10精子成熟；11精子的趋流性； 41母畜初情期；2发情周期；3季节性发情；4排卵率；5产后发情；6安静排卵；7卵泡期；8黄体期；9自发性排卵;10发情鉴定；11初配适龄;12诱发性排卵； 51人工授精；2精子活率；3精子密度；4精子畸形率；5精液稀释；6变温保存；7液态保存；8冷冻精液；9精液平衡； 61受精；2精子获能；3透明带发应；4卵黄封闭作用；5妊娠识别；6妊娠的建立；7胎盘；8怀孕脉搏；9附植；10精子顶体反应；11卵裂；12子宫拴； 71分娩预兆；2产道；3胎向；4胎位；5胎势；6子宫复原；7产后期；8分娩;9牛胎衣不下;10破水;11努责;12产力;13恶露;14前置； 81发情控制；2同期发情；3诱发发情；4胚胎移植；5超数排卵；6诱发分娩；7核移植；8胚胎分割；9卵子培养；10排卵控制； 91繁殖力；2正常繁殖力；3情期受胎率；4不返情率；5配种指数；6产犊指数；7窝产仔数；8繁殖成活率；9第一情期受胎率；10繁殖率；11总受胎率；12总情期受胎率；13公羊效应； 二、填空题 11家畜的睾丸为（）形； 2成年未孕母牛卵巢的形状为（）形； 3公畜的交配器官是（）； 4母畜的交配器官是（）；
5精子在（）中最后成熟； 6原始卵泡位于卵巢的（）部； 7对分子宫二角基部之间的纵隔有一纵沟，称（）； 8胎儿的发育场所是（）； 21各种家畜孕酮的含量，在卵泡期都低于（）； 2前列腺素是（）分泌的局部激素； 3催产素分泌的调节一般是（）性的； 4调节松果腺激素分泌的主要因素是（）； 5PMSG是由马属动物子宫内膜的（）组织所分泌； 6HCG主要来源于孕妇胎盘绒毛的（）； 7在调节家畜繁殖机能方面起重要作用的前列腺素是（）； 8在所有的家畜中，发情周期内雌激素的含量以（）期最高； 9对生殖活动有间接调节作用的激素称（）； 10控制LHRH分泌调节的高级神经中枢，位于大脑基底部的中枢神经（）；11低等动物中的松果腺是（）； 31雄性动物的性成熟一般比雌性动物（）； 2精子的头部呈（）形； 3精子的呼吸主要在（）进行； 4精子的正常运动型式是（）； 5精子的发生是在睾丸内的（）中进行的； 6对精子起营养、支持作用的细胞称作（）细胞； 7精子蛋白质的分解往往表示精子品质已（）； 8精子的比重比精清略（）； 9新采出的牛、羊精液偏（）性； 10新采出的猪、马精液偏（）性； 11早期幼畜的性腺对微量促性腺激素缺乏（）； 12培育品种的性成熟比原始品种（）； 13公畜的初配年龄主要决定于（）； 14大家畜的性成熟时间比小家畜（）； 15精子向附睾内运行发生的最显著的变化是（）； 16精子最脆弱的部分是（）； 17精清中的磷脂主要来源于（）；
须正确看待精子畸形率的态度 精子畸形率检查的报告单显示精子畸形率80%左右，会不会以后生的孩子可能是畸形的？其实这个跟孩子的畸形是无关的，是与生育及体外受精相关的。 精子畸形率是如何来的？根据WHO第四版人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册，对精液常规推片，采用改良巴氏染色法进行染色，在光镜下计数200条精子，分析精子形态。WHO将经染色后畸形精子分为：头部缺陷、颈部和中段缺陷、尾部缺陷和胞浆小滴异常4类。检查报告通常分为：头部缺陷、中段缺陷、尾部缺陷。其计算例如以下过程： 计数的精子数：200 正常精子数：78 正常精子百分比：(78/200×100%)39% 缺陷精子数：(200-78) 122(61%) 头部缺陷精子数：110(55%) 中段缺陷精子数：18 (9%) 尾部缺陷精子数：16 (8%) 缺陷总数：(122+18+16) 144 畸形精子指数(TZI)(缺陷总数/缺陷精子数)=144/122 1.18 精子畸形指数(SDI)(缺陷总数/所数精子总数)=144/200 0.72 畸形精子指数(teratozoospermia index，TZI)的数值介于1.00(每个异常精子只有一种缺陷)和3.00(每个异常精子都有头、中段及尾部缺陷)，有报道提示，TZI>1.6与未经治疗不育夫妇的低生育率有关，而且精子畸形指数(sperm deformity index，SDI )1.6是体外受精失败的阈值。TZI和SDI预示精子在体内和体外的功能情况。 因为WHO第4版手册中未给出正常参考值，仅说明当正常形态精子率<15%时体外受精率显著降低，所以报告的正常参考值为：正常精子形态>15%，TZI0~1.5，SDI 0~1.5。其临床意义：正常形态精子率>15%；精子畸形率越高，生育机会越低，而流产、死胎的可能性就越大，当精子畸形率>85%或TZI>1.6时，可引起生育障碍，导致不育症。如果正常形态<15%或SDI>1.6时体外受精降低。 通过上述分析，应该知道精子畸形率跟婴儿畸形是不相关，婴儿的畸形应该是与遗传相关。对于一份精子畸形率报告，我们所要看的是：精子正常形态、TZI、SDI，通过这几项指标及综合精液分析报告来说明精子在体内和体外的功能情况，对男性不育症的诊断及治疗具有辅助意义。
＊ 安徽省教育委员会资助课题 作者单位:233003 蚌埠医学院卫生学教研室 小鼠精子畸形试验方法的改进 ＊ 周纯先 肖 棣 王帮霞 王允滋 摘要 目的:改进检测小鼠精子畸形的试验方法。方法:采用改进的小鼠精子畸形试验方法进行观察,并与有关试验方法作对比研究。结果:两种不同量0.9%生理盐水制备的小鼠精子玻片镜检显示,环磷酰胺阳性组和生理盐水对照组,其观察结果均以用1ml 0.9%生理盐水作稀释液制备的玻片镜检满意,符合小鼠精子畸形分析的试验要求。结论:本法具有操作简便、镜检满意和结果可靠等优点。关键词 精子计数 小鼠 中国图书资料分类法分类号 R 321.1 Improvement in method of sperm aberration test in mice Zhou Chunxian ,Xiao Di ,Wang Bangxia ,Wang Yunzi (Department of Hygiology ,Bengbu Medical College ,Anhui 233003) A bstract Objective :To improve the method of sperm aberration test in mice .Methods :The im proved method for sperm aberration test was used in mice to compare w ith o ther methods .Results :Tests taken from cyclophosphamide mice and norm al saline treated mice w ere used to make sperm suspension in 2different volume (1and 3ml )of 0.9%saline for smear examination of abno rmal sperm under microscope .The result show ed that sperm suspended in 1m l saline w as satisfactory .Conclusions :This method has m any adventages ;it is easy to perfo rm ,the amount of sperm obtained is satisfactory fo r ex amination and the results are reliable .Key words sperm count ;mice 精子畸形试验常用于观察精子头部和尾部的形态异常,是研究外来化学毒物诱发人或动物精细胞突变和判断有无生殖毒性作用的常用方法之一。目前用于检测小鼠精子畸形的试验方法有多种〔1,2〕,但其操作过程过于复杂,有的试验结果甚至不够理想。本文目的是对有关试验方法进行改进,简化操作步骤,建立本实验室条件下的小鼠精子畸形试验 方法,现作报道。1 材料与方法 1.1 动物 选用本院实验动物科提供的昆明种雄性小鼠,体重25～28g 。 1.2 试剂 环磷酰胺(上海产);0.9%生理盐水;1%伊红溶液。 1.3 实验方法 试验分2组,每组4只。Ⅰ组为环磷酰胺阳性组,按40mg /kg 体重腹腔注射;Ⅱ组为0.9%生理盐水阴性对照组,按0.1ml /10g 体重腹腔注射。各试剂物均每 恩医科大学学报,1989,15(5)∶442 3 李柏青,杨贵贞.小鼠胸腺上皮细胞增养上清的生物学活性.中 华微生物学和免疫学杂志,1989,9(4)∶2224 Geenen V ,Legros JJ ,Franchimont P ,et al .Coexsis tenc e of oxytoc in and neurophysin in the human thymus .Science ,1986,232(4749)∶5085 Geenen V ,Defresne M P ,Robert F ,et al .The neurohormonal thymic microenvironment :Immunocytochemical evidence that thymic nurse cell s are neuroendocrine cells .Neuroendocrinology ,1988,47(4)∶365 6 Amsen D ,K ruisbeek AM .T hymocyte selection :Not by TC R alone . Immunol Rev ,1998,165∶2097 M arkwick AJ ,Lolait SJ ,Funder JW .Immunoreactive arginine vasopressin in the rat thymus .Endocrinology ,1986,119(4)∶16908 Geenen V ,Kecha O ,Brilot F ,et al .The thymic repertoire of neuroendocrine -related self antigens :Biol ogical rol e in T -cell selection and pharmacological impl ications .Neu roimmunomodulation ,1999,6(1,2)∶115 9 M artens H ,Kecha O ,Charlet -Renard C ,et al .Neurohypophysial peptides stimulate the phosphorylation of pre -T cell focal adhesion kinases .Neuroendocrinology ,1998,67(4)∶282 10 Geenen V ,M artens H ,Vandersmissen E ,et al .Cellular and molecular aspects of thymic T -cell education in neuroendocrine self principl es .Implications for autoimmunity .Ann NY Acad S ci ,1998,840∶328 〔收稿日期 1999-06-04〕 223 蚌埠医学院学报1999年7月第24卷第4期DOI :10.13898/j .cn ki .issn .1000-2200.1999.04.002
精子畸形指数sdi 【导读】正常的精液的质量是：正凡人精液中也存在异常精子，一般所占百分率低于30%，活力优+良的精子占有比率是>50%，假如畸形精子百分率高于50%，那么就称为精子畸形指数高。精子畸形率标准是检验精子是否健康的指标。精子畸形是临床比较常见的现象。精子畸形过多，常常是不孕不育中的某种疾病。 正常的精液的质量是：正凡人精液中也存在异常精子，一般所占百分率低于30%，活力优+良的精子占有比率是50%，假如畸形精子百分率高于50%，那么就称为精子畸形指数高。受精卵就像一颗种子，要经历精子和卵子相结合以及一系列复杂而奇妙的过程，才会最终成长为一个健康的宝贝。如果，在最初精子和卵子结合的时候，受精卵没有成长好，那么它很可能就会停止继续生长，我们把这种发生在孕早期的胚胎发育异常现象称为“胎停育”，出现这种现象其实就和流产差不多。 而精子畸形是临床比较常见的现象。精子畸形过多，常常是不孕不育中的某种疾病。精子畸形率高，胎停育出现的几率也会比较高。从优生优育的角度，精子畸形率过高，是需要治疗的，应该改善之后再生育，否则往往出现更多的麻烦。 精子畸形指数sdi正常指标 假如畸形精子百分率高于50%，那么就称为精子畸形率高。精子畸形率标准是检验精子是否健康的指标。精子畸形率标准，精子高畸形率出现的一般症状是正常形态的精子数明显少于50%，畸形精子超过了70%的时候，应进行染色体检查，一旦发现问题，就要及时治疗。精液中有支原体、衣原体感染时，精子活力就会降低，精子密度也会减少，畸形精子就会增多。畸形精子检查是对男性精子进行染色涂片然后根据它的形态，所做的诊断。男性精子头部、中部与尾部等，出现形态变异情况，其中，头部畸形主要表现有无定形、巨大头、双头等；中部畸形有体部粗大、折裂、不完整等；尾部畸形有双尾、卷尾、缺尾等。 精子畸形指数sdi高的原因 精子畸形指数高可能是有两种情况。如果形态异常的精子超过７０％，特别是妻子有习惯性流产时，就应该考虑进行染色体核型检查，男方很可能具有染色体异常，需要通过检查排除这种可能性。如果异常精子少于７０％，那么，也许是精索静脉曲张、职业或环境接触毒物、放射线、微波、服用药物、感染及应激等因素影响了睾丸生精过程。无论是哪种情况，都应该去检查并且分析原因，排除可能性，及时治疗。 而引起畸形精子症的原因主要是： 1、因为穿着的裤子、内裤导致阴囊局部长期高热，长期酗酒（特别是高浓度的烈性酒），均可使精子发生畸变； 2、泌尿生殖道感染、腮腺炎并发的睾丸炎、附睾结核、精索静脉曲张等； 3、使用激素或某些化学药物，如抗癌药、利血平、马利兰、呋喃类等，可使精子发育不成熟； 4、生殖腺受到放射线照射，可引起精子的突变。 精子畸形指数sdi高怎么办 精子畸形指数高会导致不育，如果消除可不利因素（药物、放射线、高温、酒等），就应该针对病因进行治疗。由生殖道感染引起的患者，要进行抗炎治疗；如果是内分泌异常所致的患者，就要作出内分泌功能调整；对精索静脉曲张的患者，应考虑手术治疗，并且越早越好。 当精子畸形率超过70%的时候，就应进行染色体检查，如有染色体病，治疗会相对困难。
毒理学实验五 小鼠精子畸形实验 一、实验目的 1、学习观察小鼠精子畸形的实验方法。 2、检测受试物对雄性生殖细胞的遗传毒性。 二、实验原理 小鼠精子畸形受基因控制，具有高度遗传性，许多常染色体及X、Y性染色体基因直接或间接地决定精子形态。 在正常情况下，人与其它哺乳动物的精液中也有少量畸形精子，毒物影响下，数量大大提高。 三、试剂材料 1、健康成年雄性小鼠，体重25 g ~30g 2、器材 剪子、镊子、玻璃小平皿、滴管、载玻片、擦镜纸、染色缸、显微镜 3、试剂 生理盐水、甲醇、2％伊红水溶液、受试物及阳性对照物环磷酰胺 四、实验内容 1、解剖小鼠、摘取附睾、涂片、固定。 2、镜下观察精子形态，记录畸形精子。 3、计算精子畸形率。 4、结果分析与评价。 五、操作步骤 1、染毒：染毒5天，途径（一般经口） 2、处死：35天后颈椎脱臼处死 3、取材：附睾 4、涂片：将附睾所有内容物直接涂片（一滴生理盐水） 5、晾干： 6、固定：甲醇固定5分钟 7、冲洗和干燥
8、镜检：低倍镜----油镜，镜检1000个精子，记录座标。阴性对照组精子畸变率一般为1-3% 精子畸形主要表现： (1)头部：无钩、香蕉形、胖头、无定形、双头 (2)尾部：卷尾、双尾 六、实验设计 剂量和分组方法: 受试物至少设3个剂量组，同时设阳性和阴性对照组。 最高剂量组应能使部分动物死亡，然后以高剂量组的1/2～1/4递减作为中、低剂量组。 阳性对照组给予环磷酰胺(20mg/kgBW～40mg/kgBW)，腹腔注射，连续5d，每天一次。阴性对照组给予等体积的溶剂。 七、实验结果及分析 1、正常小鼠精子涂片：由于是正常小鼠的精子涂片，因其畸形精子比例较低，没有观察到畸形精子，观察到一些正常精子，但由于没有进行固定染色，所以不是非常清晰。 在观察图片过程中，看到了一些条纹状的结构，阻碍了精子的观察，考虑可能是浓度太浓或者除精子外的其他组织被涂在载玻片上所致。 2、通过小鼠染毒的畸形精子样片，在镜下观察到了正常精子及畸形精子。畸形精子包括香蕉型，以及双头双尾等。（在附件图1中可以见到正常小鼠精子及香蕉型畸形的小鼠精子） 八、注意事项 1、涂片时生理盐水不要多，精子密度太稀不易观察。 2、涂片时需将附睾剪碎将所有内容物（精子）都点到整个片子上，然后再推片。 3、阅片时，注意区分人为剪碎的精子与精子畸形。
十三、精子畸形试验 Sperm Malformation Test 1 范围 本规范规定了动物精子畸形试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于化妆品原料的遗传毒性检测。 2 引用标准 GB 14924 试验动物与饲料标准 GB 15193·94 食品安全性毒理学评价程序 3 定义 精子畸形（sperm malformation） 指精子形态的异常改变。 4 原理 已知精子畸形是决定精子形成的基因发生突变的结果。常染色体和Y-性连锁基因突变及某些染色体重排，如性-常染色体易位，也可使精子发生畸形。 小鼠精子畸形试验能评价受试物对精子生成、发育的影响，可检测受试物在体内对生殖细胞的遗传毒性作用。 5 试验的基本原则 通过适当的途径使动物接触受试物，经过一定时间后处死动物，取其附睾，制备涂片，经固定、染色，在显微镜下计数畸形精子。 6 仪器和器械 生物显微镜、解剖剪、镊子、表面皿、离心管、小漏斗、吸管、滴管、载玻片、擦镜纸等。 7试剂 7.1 1%伊红染色液 称取伊红1g溶于100mL蒸馏水中。 7.2 生理盐水、甲醇（A.R） 8 实验动物和饲养环境 常规使用动物是雄性小鼠。6周~8周龄，体重为30g ~35g。 实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。 9 剂量分组 受试物至少设三个剂量组。分别取1/2、1/5、1/10或1/20LD50剂量。当受试物的LD50大于5g/kg体重时，可取5g/kg体重为最高剂量。另外设阴性（溶剂）对照组和阳性物对照组。常用溶剂为水、生理盐水、植物油（玉米油、花生油）等。阳性物对照组可采用环磷酰胺40mg/kg/
日。每组至少有5只存活动物。 10 染毒途径和方式 染毒途径视实验目的而定。常用途径为经口灌胃方式。受试物各剂量组、阴性对照组和阳性物对照组的动物，均连续染毒5d，每日一次。一般于首次染毒后的第35d处死动物。 11 试验方法 11.1 制片 用颈椎脱臼法处死小鼠，剖开腹腔，暴露睾丸，分离两侧附睾，用眼科剪剖开附睾组织，与适量生理盐水混匀，涂片。 11.2 固定 待涂片干燥后，放入甲醇（A.R）液中固定5min。取出晾干。 11.3 染色 将涂片于1%伊红染液中染色1h，然后用蒸馏水轻轻冲洗，晾干。 11.4 观察与计数 首先，在低倍镜下选择背景清晰、精子分布均匀、重叠较少的区域，然后，在高倍镜下观察结构完整的1000个精子，计数其中畸形的精子。精子畸形主要表现在头部。按Wyrobeks 的分类标准，主要类型有：无钩、香蕉形、无定形、胖头、尾折叠、双头及双尾。无尾精子、头部重叠的或整个与另一个重叠的精子均不计数。判断双头、双尾精子时，要注意与两条精子的部分重叠相区别。 12 数据处理和结果判断 每只动物应按精子畸形类型分别记录，以便计算各实验组的精子畸形发生率和精子畸形类型的构成比。 利用Wilcoxon秩和检验法和其他适当的统计学方法。将受试物各剂量组精子畸形发生率分别与阴性对照组进行比较。 精子畸形试验阳性的判断标准是畸形发生率至少为阴性对照组的倍量或经统计学处理有显著性差异，并存在剂量-反应关系者。 一般正常小鼠的精子畸形率为0.8%~3.4%，但每个实验室应有自己稳定的精子自发畸形率。 13 试验报告 试验报告应包括以下内容： （1）受试物名称、理化性状、配制方法、所用溶剂； （2）动物种属和品系、体重、数量、来源（注明合格证号和动物级别）； （3）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物室合格证号； （4）剂量分组，染毒途径和方式； （5）试验方法：简述操作步骤，所用统计学方法； （6）结果：以列表方式报告受试物对动物精子畸形发生率和精子畸形类型分析的结果（表1和表2）； （7）结论。
精子形态对宫腔内人工授精妊娠率的影响 目的探讨正常形态精子比率对宫腔内人工授精（IUI）临床妊娠率的影响。方法回顾分析328个周期宫腔内人工授精临床资料，根据男方精子形态学检查结果分为三组：正常形态精子百分率≥4%、2%～0.05），处理后精子浓度、活力、前向运动精子总数各组间比较有显著性差异（P＜0.05），≥4%、2%～1年；女方无全身性疾病及传染病；子宫输卵管造影或者宫腔及腹腔镜检查至少一侧输卵管通畅；所有患者均符合卫生部颁布的人工授精适应证的指征。其中，女方平均年龄为（32.7±3.9）岁，男方平均年龄为（34.4±5.6）岁。 按照第5版《WHO人类精液检查与处理实验室手册》[5]（以下简称第5版《WHO》）的标准对男方精液进行检查，根据男方精液形态学检查的结果分为三组：正常形态精子百分率≥4%、2%～<4%、<2%。 1.2 方法 1.2.1 精子形态学检验待精液液化后，将精液滴于洁净载玻片上，推片，自然风干后采用Diff-Quik快速染色法染色。在光学显微镜油镜1000倍下每片读取200个精子，按第5版《WHO》严格标 准法进行判别，计数正常形态及畸形精子，只有头和尾都正常的精子才认为是正常的，精子缺陷的类型包括：头部缺陷、颈部和中段缺陷、主段缺陷、过量残留胞浆。 1.2.2 根据不同病因利用自然周期或促排卵周期进行IUI B超监测卵泡直径结合血E2、尿LH测定确定诱发排卵时机，肌注HCG 5000～10000IU后24～36h 行IUI。 1.2.3 精液收集及处理方法男方禁欲3～7d，手淫法采集精液于广口无菌无毒容器中，采用密度梯度离心法分离精子，将液化后充分混匀的精液加于平衡好的90%、45% SpermGrad（瑞典Vitrolife公司）上层，300g离心20min，移去上层的精浆和分离液，将锥形管底层的精子团混匀，移至平衡好的SpermRinse中，混匀后300g离心5min，弃上清，视底层精子的多少留取0.3～0.6mL培养液，将精子混匀，记录处理前后精子浓度、活力、前向运动精子比例。精子活力分级参照《WHO》第5版实验室标准。 1.2.4 IUI方法将精子悬液注入宫腔，抬高臀部休息30min，术后用黄体酮支持黄体。 1.3 临床妊娠的判定 IUI后17d，通过尿妊娠试验或血β-HCG检测确定是否妊娠。IUI后5周复查B超，检测到孕囊、卵黄囊及心脏搏动者确定为临床妊娠。
精子畸形指数 导致男性不孕不育的情况有很多，其中精子畸形就是一种。畸形精子，顾名思义，就是指精子发育出现异常，发育不好。而精子畸形指数就是判断精子是否正常的标准之一啦！下面我们一起来了解一下精子畸形指数是什么吧！ 畸形精子是什么 一般畸形精子表现为头、体、尾的形态变异，头部畸形有巨大头、无定形、双头等；体部畸形有体部粗大、折裂、不完整等；尾部畸形有卷尾、双尾、缺尾等。畸形精子过多症是指在生育年龄的男性畸形精子症使男性不育的常见原因之一。 精子形态大小的正常范围 1、头部 头长3.5-5.0微米，宽2.0-3.0微米；精子头呈规则椭圆形。当精子头的长宽分别超过5和3微米时，称为大头；分别小于3和2微米时，称为小头。具有临床意义的精子头部异常，包括圆椎形（长宽分别小于5和2微米）、不规则形、双头、和梨形头。朽迈型精子头部则出现空泡。 2、体部（中段） 体部长5-7.0微米，宽1.0微米。宽超过2微米多反映胞桨小滴末完全退化，其对不育的影响尚待探讨。假如泡桨小滴大于精子头的一半，意味着精子不成熟，属于异常。 3、尾部 精子尾长45微米。尾部卷曲常与支原体感染有关。也有人报告，精子尾部出现卷曲与锌元素有关。双尾、尾断裂等畸形可能与无症状生殖系统感染有关。因此，出现这一现象可作精液微生物学检查。 畸形精子指数 畸形精子指数（teratozoospermia index，TZI）和精子畸形指数（spenn deformity index，SDI）与不育症男性患者精子密度、活动率、精子形态的关系。畸形精子指数（teratozoospermia index，TZI）的数值介于1.00（每个异常精子只有一种缺陷）和3.00（每个异常精子都有头、中段和尾部缺陷）。有报道提示，TZI 1.6与未经治疗不育夫妻的低生育率有关，而精子畸形指数（spenn deformity index，SDI）1.6是体外受精失败的阈值。因此，畸形精子指数TZI或精子畸形指数SDI小于1.6就属于正常，它代表的是精子在体内积体外受精的能力。 当然，男性朋友们如果发现自己出现了精子畸形的情况，也不用羞于见人，要及时到医院治疗，才能得到尽早有效的帮助。
小鼠精子畸形试验 一、目的与要求 1、熟悉精子畸形的概念及类型、精子畸形试验的实验设计、试验检测的遗传学终点。 2、学习与掌握小鼠精子畸形试验的基本方法步骤,正常精子及畸形精子的镜下观察。 3、了解精子畸形试验数据整理、分析方法及结果的评价。 二、实验原理 精子的畸形主要就是指精子形态的异常改变,大、小鼠精子畸形受基因控制,具有高度遗传性,许多常染色体及X、Y性染色体基因直接或间接地决定精子形态。因此精子形态的改变提示有关基因及其蛋白质产物的改变。大、小鼠精子畸形试验可检测受试物对于精子生成、发育的影响,而且对已知的生殖细胞致突变物有高度敏感性,故精子畸形试验可用作检测受试物在体内对生殖细胞的致突变 作用。 三、实验设计 1、动物选择:一般采用小鼠,因为小鼠比较经济,且有大量的实验结果证实小鼠在该实验系统中对受试物最为敏感。6~8周龄(体重25~35g),雄性。每组应保证至少有5只存活小鼠。 2、染毒途径:多用腹腔注射,也可采用与人体实际接触化学毒物相同的途径,如经口、吸入及皮肤接触等。 3、染毒次数及取样时间:可采用1次或每天1次连续5天的方法进行染毒。 各种化学毒物作用于精子的不同发育阶段,可在接触某种化学毒物后不同时间出 现精子畸形,故有条件时,可于给受试物后第1、4、10周处死动物,检查精子形态。因为大部分化学毒物对精原细胞后期或初级精母细胞早期的生殖细胞较为敏感,故一般均就是于首次给受试物后的第35天处死。 4、剂量选择:至少设置3个剂量组。最高剂量组5天总剂量应能使部分动物死亡,一般可取1/2 LD50为高剂量组,然后以1/2~1/4递减作为中、低剂量组。另设溶剂对照组(阴性对照组)与阳性对照组。阳性对照组可用环磷酰胺(20 mg/kg)或甲基磺酸甲酯(75 mg/kg)或甲基磺酸乙酯(60 mg/kg)进行腹腔注射,每天1次,连续5
率最有效的药物。 受体阻滞剂及钙拮抗剂主要用于运动状态下心室率的控制,首选用于永久性房颤伴有高血压、缺血性心脏病。对于无器质性心脏病的房颤或不伴心衰时可选用钙拮抗剂。洋地黄主要控制休息状态下的心室率,对于有心力衰竭伴快速性房颤首选。胺碘酮也有降低心室率作用,在其他药物控制无效或禁忌时可以考虑,一般作为二线用药。房颤心室率控制过程中值得注意的是,阵发性房颤不应该以洋地黄为唯一的心室率控制药物;对于尚未充分药物尝试控制心室率的患者不能进行房室结射频消融;对于伴心衰的患者不能使用非二氢吡啶类钙拮抗剂;有预激的患者不能使用洋地黄和非二氢吡啶类钙拮抗剂以免使心室率加快。 虽然有研究显示,控制心室率效果并不比药物维持窦性心律差,甚至在改善生活质量方面优于心律控制。但心室率的满意控制并不完全改善预后,对高危患者还需终生抗凝治疗。 2 2 恢复并维持窦律 药物复律适用于那些时间不超过半年、心房不大、无结构性心脏异常、触发因素已经去除的阵发性或持续性房颤。 转复药物包括Ia类、Ic类和III类抗心律失常药,这些药物主要作用于心房,延长心房肌的动作电位时程和有效不应期。选用复律药物时需考虑房颤持续的时间,对于新发房颤选用Ic类药物效果较好;因为I类药物可能增加室性心律失常,Ic类药物具有负性肌力作用,故这类药物不宜用于器质性心脏病和左心功能不全者。对于发作7天以内的房颤适合转复的药物主要有伊布利特和普罗帕酮。胺碘酮则为IIa类选择。选用普罗帕酮时需注意是否房扑,对于房扑患者首先需要使用药物控制心室率,否则普罗帕酮可能导致过快心室反应而使临床加重。对于7天以上房颤国内目前能选择的药物主要为胺碘酮和伊布利特。伊布利特使用过程中患者可能出现一过性(多形)室性心律失常,一般不需要特殊处理可自行消失。该药尤以对于房扑的高转复率为临床青睐。 房颤转复后的窦律维持需要综合治疗。而抗心律失常药物方面目前可选用的有胺碘酮、普罗帕酮和施太可。胺碘酮因其较少心脏副作用而适合那些器质性心脏患者。普罗帕酮则对心脏结构正常的患者有价值。施太可归类为III类抗心律失常药物,但具有很强的 受体阻滞作用。使用过程中需注意对心功能和对气道阻力影响而产生的不良临床反应。此外,部分患者使用施太可可能发生尖端扭转型室性心律失常,这一不良反应与药物剂量有关,尤其当启用和加量时需要注意。 总之,药物治疗仍然是房颤处理过程中必不可少的选择。心室率控制是房颤处理的第一步,不但有利于稳定血流动力学,而且留给临床更多时间分辨、鉴别和思考能否立刻转复窦律?是否需要抗凝?有无特殊因素需要去除等等。 参 考 文 献 [1] 王钧.药物治疗房颤的几点思考 中国社区医师:综合版 , 2006,8(20):13. [2] 费伟华.350例心房颤动临床分析.浙江大学,2003年. [3] 刘红明.抗房颤起搏器治疗阵发房颤的应用研究.昆明医学院, 2003年. 西洋参治疗弱精子症62例疗效观察 廖敦 刘志刚 摘要 目的 观察西洋参治疗男性不育弱精子症的临床疗效。方法 将62例弱精子症患者随机分为治疗组31例和对照组31例,治疗组口服六味地黄丸+西洋参,对照组口服六味地黄丸,治疗3~ 6个月后评定疗效。结果 治疗后治疗组临床疗效、精子活力与对照组比较有显著性差异(P<0 05)。结论 西洋参有较明显提高精子活力作用,对治疗弱精子症有较显著的临床疗效。 我国不育症的发病率在10%左右,而男性生育能力缺陷所致不育者,不少于不育夫妇的50%。男性不育症中,弱精子症约占52 7%,并有不断增加趋势[1]。由于弱精子症的确切病因大多难以肯定,缺乏有效、针对性治疗手段。传统医学多从复方出发探索治疗弱精子症的临床经验。本文从专病专药思路出发,总结发现西洋参有较明显提高精子活力作用。通过临床应用观察,取得满意的疗效,现报告如下。 1 资料与方法 1 1 一般资料 本研究纳入病例62例,病例收集时间2007年8月至2008年10月。均为本院中医男科门诊就诊患者,按就诊先后顺序随机分成两组。治疗组31例,年龄24~40 (29 56 5 32)岁,婚龄1~5(1 7 2 0 48)年;对照组31例,年龄22~42(28 98 5 02)岁,婚龄1~5(1 8 3 0 39)年。治疗前两组精子活力比较见表2。两组患者在年龄、婚龄及病情方面均无显著性差异(P>0 05),具有可比性。1 2 纳入标准 不育是指经过至少12个月没有避孕的性生活而没使配偶怀孕[2]; 弱精子症[2]:精子密度 20 106 m,l A级活动精子<25%或A+B活动精子<50%。所有病例均经两次以上精液分析检查; 年龄在22~45岁的男性已婚患者。 1 3 排除标准 参照文献制定[3]: 性生活不正常,有勃起障碍、逆行射精或不射精等; 患有严重慢性全身性疾病和生殖系统感染者; 有先天畸形、精道梗阻、睾丸发育不良等; 服用抗癫痫、抗肿瘤等有碍精子活力的药物; 不符合纳入标准、资料不全或无法判断疗效者。 2 方法 2 1 治疗方法 治疗组口服西洋参(规格:4号粒)5g/d,研粉,温开水吞服+六味地黄丸(国药准字号:Z11021283;生产厂家:北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂)6g/次,2次/d;对照组口服六味地黄丸(同上)6g/次,2次/d。两组均
男性停止长途骑车运动 长途骑车运动会影响男性生殖系统的健康，目前尚无明确的研究可证明这一说法，但从男性的生理解剖结构来说，由于男性生殖器官及前列腺靠近会阴部位，如果车座不合适造成骑车姿势不当，可刺激男性生殖器官以及前列腺，使其肿胀、充血或损伤。如车座过高时，骑车人只能勉强上下左右摇摆蹬踏，使得会阴部与车座不断摩擦，尤其是车座前部较高而使骑车人重心靠后，或道路崎岖不平时，更容易刺激会阴部。 准爸爸骑自行车时车座高矮要适中，车座最好选用软垫。长途骑车后，可进行热水坐浴(水温40℃左右)，以促进局部血液循环。如前列腺有早期轻度炎症表现，最好暂停骑车。 如何治疗男性不育症 根据男性不育的不同发病因素，临床对病因、发病机制以及病理过程明确的男性不育症进行特异、半特异性治疗，对病因无法明确的特发性不育进行非特异性治疗(经验治疗)。目前尽管已发现一些男性不育病因，但缺乏对生精缺陷和提高精子质量有效的治疗药物。 治疗男性不育的药物有： 激素类药：属治疗男性不育经典药物。用于治疗下丘脑性低促性腺激素血症性腺功能低下，如Kallmann 综合征，性腺功能低下所致少精子症。 抗雌激素类药：抗雌激素药常用药为非甾体类雄激素拮抗剂克罗米芬、他莫昔芬，用以治疗不明原因男性不育症，如特发性少精子症、放射性少精子症和精索静脉曲张术后少精子症，尤适用精子活力较好的单纯性少精子症。 多巴胺激动剂：短效及长效多巴胺激动剂用于高催乳素血症不育，常用药溴隐停。 维生素及微量元素：抗氧化剂及营养药常用维生素C、维生素E，一般认为是畸形精子增多症和精液液化不良治疗的重要药物。 碱性成纤维细胞因子(BFGF) ：是治疗特发性少精子症的有效药物。 中药治疗：中药治疗大部分属于非特异性治疗。 采用男性不育症药物治疗，患者易接收，依从性好，但应用较局限，对严重男性不育症疗效尚未尽人意。除药物治疗外，男性应纠正不良生活习惯，避免药物滥用、接触化学物质或放射线等措施也很重要。随着医疗技术的发展，辅助生殖技术(ART) 如卵胞、浆内单精子注射(ICSI) 技术已能部分解决药物不能解决的问题。