薄膜过滤法

无菌快检药典方法
无菌快检药典方法主要包括薄膜过滤法和直接接种法。

薄膜过滤法是将供试品按规定用量加入稀释液或冲洗液中，按薄膜过滤法过滤，冲洗。

在最后一次的冲洗液中加入小于100cfu的试验菌，过滤。

取出滤膜接种至硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基至滤筒内。

另取一装有同体积培养基的容器，加入等量试验菌，作为对照。

置规定温度培养3～5天，各试验菌同法操作。

直接接种法是取符合直接接种法培养基用量要求的硫乙醇酸盐流体培养基6管，分别接入小于100cfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、生孢梭菌各2管，取符合直接接种法培养基用量要求的胰酪大豆胨液体培养基6管，分别接入小于100cfu的白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉各2管。

其中1管接入每支培养基规定量的供试品量，另1管作为对照，按置规定的温度培养3～5天，各试验菌同法操作。

此外，还有螺旋霉素胪法、萨博罗培养法和豪斯托试验等无菌检验方法。

以上信息仅供参考，如有需要，建议查阅药典或咨询专业人士。

薄膜过滤法
采用薄膜过滤法，滤膜孔径不大于0.45um，直径约为50mm。

选择滤膜材质时候应保证供试品及其溶剂不影响微生物的充分被截留。

滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。

使用后，应保证滤膜在过滤前后的完整性。

水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润洗滤膜，供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为100ml。

每片滤膜的总过滤量不宜过大，以避免滤膜上的微生物受损伤。

取相当于每张滤膜含1克或1ml供试品的供试液，加至适宜的稀释剂中，混匀过滤。

若供试品每1克或1ml所含的菌数比较多时，可取适宜稀释级的供试液1ml，过滤。

用PH无菌氯化钠——蛋白胨缓冲液或其它适宜的冲洗液冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。

每种培养基至少制备一张滤膜。

阴性对照实验
取实验用的稀释液1ml，照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。

阴性对照不得有菌生长。

培养和记数：
培养条件和记数方法同平皿法，每片滤膜上的菌数不应超过100个
菌数报告规则
以相当于1克或1ml供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌生长以<1报告菌数（每张滤膜过滤1g或1ml供试品），或以<1
乘于稀释倍数的值报告菌数。

无菌检查SOP（薄膜过滤法）1.目的为规范无菌检查方法及无菌检查全过程的操作，最大限度防止试验操作过程造成的污染，确保结果准确。

2.范围本SOP适用于生物制品的中间产品（包括原液、纯化产物、半成品、生产中的液体、辅料等）、成品的无菌检查。

只要供试品性状允许，应采用薄膜过滤法。

3.定义无菌检查法系用于检查药典要求无菌的生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。

若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。

4.职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行；4.2.QA、QC组长、质量管理部经理负责本规程的审核；4.3.质量总监负责批准本规程；4.4.QA负责本规程执行的监督。

5.引用标准《中华人民共和国药典》2020年版三部6.材料6.1.无菌检查用物品、物料要求：所有物品、物料进入无菌室前，均应经过高压蒸汽灭菌（121℃40分钟，放灭菌指示卡）或180℃干烤2小时或其它经过验证的方法消毒后传入无菌室；如不能用前者消毒方式消毒的物品，须经消毒液浸泡、擦拭后传入无菌室。

6.2.无菌检查环境要求：应在环境洁净度万级下的局部洁净度百级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。

6.3.仪器、设备与设施集菌仪、显微镜、台式灭菌器、无菌试验室（万级）、超净工作台（万级背景下的局部百级）：每月环境检测（沉降菌、浮游菌、尘埃粒子）合格后，方可使用。

20-25℃培养房或培养箱、30-35℃培养房或培养箱。

6.4.试验用具：洁净工作服（洁净底服、十万级工作服、万级工作服、鞋套）、工作鞋、口罩及帽子；无菌医用手套或一次性乳胶医用手套：试验前及试验过程中用消毒液浸泡消毒；封闭式集菌培养器（双针头、三联及单针头、三联）：薄膜孔径不大于0.45μm，直径约为 50mm。

根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。

2015版药典薄膜过滤法
【实用版】
目录
1.薄膜过滤法的定义和作用
2.2015 版药典对薄膜过滤法的要求
3.薄膜过滤法的具体操作步骤
4.薄膜过滤法的应用范围和优势
5.2015 版药典薄膜过滤法的意义和影响
正文
薄膜过滤法是一种在药学领域中广泛应用的过滤技术，其主要作用是去除药液中的微小颗粒和细菌，保证药物的纯净度和安全性。

在我国，药典是对药物质量的最权威的规定，而 2015 版药典对薄膜过滤法的要求进行了详细的规定，这无疑对药物生产过程中的质量控制提供了重要的参考。

根据 2015 版药典，薄膜过滤法的具体操作步骤主要包括以下几个步骤：首先是选择合适的过滤膜，这需要根据药物的特性和过滤的要求来决定；其次是准备过滤设备，包括安装过滤膜、调试设备等；然后是进行过滤操作，要注意控制过滤速度和压力，避免对药物产生不良影响；最后是清洗和消毒过滤设备，防止污染。

薄膜过滤法在药物生产中的应用范围非常广泛，几乎涵盖了所有的液体药物，其优势在于过滤效果好，不仅能去除颗粒，还能有效去除细菌，而且操作简便，设备投入少，因此受到药物生产企业的欢迎。

2015 版药典对薄膜过滤法的规定，无疑对提高药物质量，保证药物
安全性，推动药物生产技术进步具有重要意义。

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2015版药典薄膜过滤法
2015版药典中的薄膜过滤法是一种常用的药物检测和净化方法。

该方法使用薄膜过滤器来分离和去除药物中的固体杂质或微生物。

它通常适用于水溶性药物，在药物制备或生产过程中用于提高药物的纯度和无菌性。

薄膜过滤法的操作步骤通常包括以下几个步骤：
1. 准备薄膜过滤器：选用合适的薄膜过滤器，根据需要的过滤尺寸和材料进行选择。

常用的薄膜过滤器材料包括聚酯薄膜、聚醚薄膜、聚碳酸酯薄膜等。

2. 预处理：对药物样品进行预处理，如稀释、调整pH值，以
便更好地进行过滤。

预处理的具体方法会根据具体药物的特性而有所不同。

3. 过滤：将预处理后的药物样品通过薄膜过滤器进行过滤。

可以使用手动或自动的过滤器设备来进行操作。

过滤时要注意，要保证过滤器不会被堵塞，并且要注意防止空气进入过滤系统，以避免污染样品。

4. 清洗：过滤完毕后，对过滤器进行清洗，以便去除残留物和杂质。

常用的清洗液包括水、酒精和有机溶剂等。

清洗方法可以根据具体的过滤器材料和药物特性而有所不同。

薄膜过滤法在药物制备和生产中有广泛的应用，可以有效地去除固体杂质和微生物，提高药物的质量和纯度。

但是在实际操
作中，需要注意选择合适的薄膜过滤器和操作条件，以确保过滤的效果和结果的准确性。

2015版药典薄膜过滤法摘要：一、概述二、薄膜过滤法的原理三、2015版药典薄膜过滤法操作步骤四、注意事项五、对照试验与验证正文：一、概述2015版药典薄膜过滤法是一种用于药品微生物限度检测的方法，该方法操作简便、准确度高，能够有效保障药品的安全性和质量。

本文将详细介绍薄膜过滤法的原理、操作步骤、注意事项以及对照试验与验证。

二、薄膜过滤法的原理薄膜过滤法是利用微孔膜对微生物进行筛选和捕捉，将样品中的微生物分离出来，然后进行培养、计数和鉴定。

微孔膜的孔径大小可以选择，以筛选出所需大小的微生物。

三、2015版药典薄膜过滤法操作步骤1.准备样品：按照药典规定，将待检测的药品制备成适当的溶液或悬浮液。

2.薄膜过滤：将制备好的样品过滤至微孔膜上，利用真空泵或其他方法将溶液中的微生物过滤出来。

3.冲洗：用无菌水冲洗过滤后的微孔膜，去除残留的样品。

4.培养：将冲洗后的微孔膜放入培养基中，进行培养。

培养条件可根据微生物的特性进行调整。

5.计数：培养后，对产生的菌落进行计数，计算微生物限度。

四、注意事项1.操作过程中应严格遵循无菌操作规程，避免微生物污染。

2.选择合适的微孔膜孔径，以保证筛选出目标微生物。

3.冲洗时要充分，避免微孔膜上的微生物残留。

4.培养条件要根据微生物的特性进行调整，以保证菌落的准确计数。

五、对照试验与验证对照试验是验证薄膜过滤法准确性的重要步骤。

通过与公认的微生物检测方法进行对照，评估薄膜过滤法的准确性和重复性。

对照试验可以参照相关标准进行操作。

总之，2015版药典薄膜过滤法是一种有效的微生物检测方法。

通过掌握操作原理和注意事项，可以确保检测结果的准确性。

薄膜过滤法的操作流程：分步指南薄膜过滤法一直是化学、生命科学等领域中非常常见且广泛应用
的方法之一。

它可以用于分离固体与液体或者分离两种不同的液体，
通常适用于大分子体积的物质。

以下是实施薄膜过滤法的详细操作流程：
1. 准备工作
在实施薄膜过滤法前，要做好充足的准备工作。

首先，要准备所
需的薄膜过滤器和其他相关的设备，如硫酸玻璃瓶、注射器等。

其次，检查所有仪器设备是否干净和无污染，特别是薄膜过滤器，为了避免
污染，这些过滤器在使用前必须彻底清洗。

此外，确保您已经穿戴好
所需的个人防护装备。

2. 准备样品
样品的准备是薄膜过滤法的一个关键步骤。

按照您的需要，精确
称量样品，或者使用适当的方法将需要处理的样品加入到玻璃瓶或其
他容器中。

3. 过滤
将准备好的样品倒入薄膜过滤器，在样品中加入过滤剂，使用注
射器对过滤器进行吸力，让样品逐渐地过滤到不锈钢过滤器架中的容
器中。

在过滤过程中，处理好设备和仪器的卫生问题并定期检查是否
间断和是否顺利工作。

4. 清洗和回收
样品经过薄膜过滤器过滤后，将过滤器中残留的物质用亲水纯水充分清洗干净，以确保下一次使用时不会污染样品。

对于收集的新液体，必须在适当的温度和密闭条件下保存，准备进一步处理。

薄膜过滤法是实施样品净化及浓缩的有效途径。

依据上述流程每一步进行实施，您可以高效地完成样品过滤的过程。

即使您是新手，也可以轻松地完成操作，同时获得所需的样品。

无菌检查方法（薄膜过滤法）中常见问题按照2020年版《中华人民共和国药典》规定，只要供试品性状允许，包括能直接过滤或者经过处理后能过滤的供试品，应采用薄膜过滤法进行无菌检查。

采用薄膜过滤法，可将药物抗菌成分去除，细菌等其他微生物则会遗留在过滤器，对其培养促使生长和繁殖，以此定性或定量检测微生物。

1常见问题及分析1.1供试品溶解不彻底固体注射剂（如密封瓶粉针剂）无菌检查时需要溶解、转移、稀释后再采用薄膜过滤法过渡，在溶解稀释的过程中，溶剂和稀释液的种类、比例和振荡器的使用等因素都会直接影响到供试品的溶解过滤效果。

2020年版中国药典四部无菌检查法中收载的稀释液有0.1%无菌蛋白陈水溶液、pH7.0无菌氯化钠-蛋白腺缓冲液、0.9%的无菌氯化钠溶液，试验研究结果表明，用前两种溶液做稀释剂，其微生物的回收率远高于0∙9%的无菌氯化钠溶液。

如果供试品溶解不彻底，过滤时滤膜会吸附大量供试品，被滤膜吸附的供试品虽经反复冲洗仍不能去除干净，残留在滤膜上的供试品会导致阳性菌不能在规定的条件下生长。

1.2集菌培养器选择不当为了避免操作过程带来的人为污染和人为偏差，大部分实验室会优先选择用一次性全封闭集菌培养器对供试品溶液进行过滤。

全封闭集菌培养器的滤膜材质、孔径及其与检品的相容性是影响试验结果的关键因素。

选择滤膜材质时应保证供试品及其溶剂不影响微生物的充分截留效果，即部分注射剂具有抑菌性，在过滤时易被滤膜吸附，须采用疏水性边缘及低吸附的滤膜，如可选用尼龙膜材质的集菌器。

无菌检查用的薄膜过滤器的淀膜孔径应不大于0.45 μm,该孔径流膜能有效截留微生物。

每片淀膜的总过滤量不宜过大，以避免淀膜上的微生物受损。

目前市面上销售的一次性全封闭集菌培养器的品牌、型号、规格众多，适用的产品类型也不相同。

如某企业生产的集菌培养器：安甑瓶装药液可选用加长型取样针，无需将样品额外转移，可快速转移检品；西林瓶装粉剂可选用双针座设计，提供全封闭溶解方案，实现溶解、过滤、冲洗一体化操作，避免转移操作；需稀释的西林瓶装抑菌性粉剂可选用三针座设计，溶解、稀释、过滤、冲洗一体化操作，降低抑菌成分浓度，减少吸附。

微生物限度（薄膜过滤法）
1、用到的设备和仪器：
微生物限度仪，一次性过滤杯，无菌滤膜（0.45um，Φ50mm）酒精灯，电子打火消毒喷枪，不锈钢镊子、无菌均质袋(无菌锥形瓶）、不锈钢剪刀、电子天平
2、环境要求：C+A检验前先开紫外灯和空调净化系统半小时。

3、样品外包装在准备室用75%乙醇或0.1%的新洁尔灭溶液浸泡10秒钟，然后通过传递窗传到检测室超净工作台内
4、供试液制备:在超净工作台内，用无菌剪刀打开外包装，根据样品稀释要求，称取适量供试品，加入稀释液。

（一般称取10g样品，加入90ml胰酪大豆胨液体培养基中）
5、过滤：先用消毒枪对过滤头消毒，然后用无菌镊子把无菌滤膜贴这绿色面朝上贴在过滤头上，在把一次性滤杯放在上面，先用稀释液20ml润湿滤膜，取样品1ml过滤，用适量冲洗液冲洗滤膜。

取下一次性滤杯，用无菌镊子小心取下滤膜，菌面朝上贴在放有胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基上。

6、培养：培养皿倒置于培养箱内，胰酪大豆胨琼脂培养基，33℃培养5天。

沙氏葡萄糖琼脂培养基，23℃培养7天。

注：1、操作过程中一定要有无菌意识，防止对样品和环境造成污染。

2、此操作没有具体到品种，如果要具体到品种，冲洗量要在符合药典和法规要求的同时通过方法验证来得到。

3、稀释倍数根据样品污染程度进行，次稀释倍数也要经过验证来得到。

薄膜过滤法在药品检验中的应用摘要：药品是直接影响人体健康的物品，如果质量不合格或者存在安全隐患，可能会对人体造成不良影响甚至危害生命。

药品检验通过对药品的物理、化学、生物学等方面进行检测，可以确保药品的成分、含量、纯度等符合标准要求。

同时，药品检验还可以检测出药品中是否存在有害物质或者微生物污染，确保药品的安全性。

因此，药品检验对于保障患者用药安全和提高药品质量具有重要意义。

薄膜过滤法是一种常用的药品检验方法，可以用于检测药品中的微生物污染和悬浮物。

本文就薄膜过滤法在药品检验中的应用进行探讨。

关键词：薄膜过滤法；药品检验；应用一、薄膜过滤法的原理和步骤（一）薄膜过滤法的原理薄膜过滤法是一种常用的分离技术，主要通过薄膜的孔径大小来实现对溶液中颗粒或杂质的分离。

薄膜过滤法的原理基于物质在薄膜孔径大小范围内的截留作用，使得溶液中的大分子、颗粒或杂质无法通过薄膜的孔径，从而实现了分离。

1.孔径选择根据需要分离的颗粒或杂质的大小，选择合适的薄膜孔径。

薄膜的孔径通常以纳米或亚微米为单位，可以通过调整薄膜材料的制备方法或添加孔径调控剂来控制孔径大小。

1.截留效应薄膜过滤法主要依靠薄膜的孔径来截留溶液中的颗粒或杂质。

当溶液通过薄膜时，颗粒或杂质会受到孔径的限制而无法通过，而溶剂分子则可以通过孔径进入下游。

1.选择适当的压力为了提高过滤效率，通常需要在过滤过程中施加一定的压力。

适当增加压力可以促使溶液更快地通过薄膜的孔径，加快分离速度。

1.薄膜选择根据需要分离的溶液性质，选择合适的薄膜材料。

不同材料的薄膜具有不同的化学性质和孔径大小，可以根据需求选择合适的薄膜材料。

（二）薄膜过滤法的步骤1. 准备过滤膜和滤器根据需要分离的溶液性质和颗粒或杂质的大小，选择合适的薄膜材料和滤器。

确保薄膜和滤器的清洁和完整性。

1.准备样品将需要过滤的样品准备好。

可以根据需要进行预处理，如去除悬浮物、调整pH值等。

1.进行过滤将准备好的样品通过滤器进行过滤。