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血塞通注射液治疗急性脑梗死的临床观察赵广峰;李萌萌;李存明;张秀芳【摘要】目的观察血塞通注射液对急性脑梗死的疗效性和安全性.方法 96例患者随机分为2组,治疗组56例在常规西医治疗基础上加用血塞通注射液,对照组30例单纯采用西医常规治疗.结果治疗组神经功能缺损评分减少明显优于对照组(P<0.01),其血液流变学指标对照组差异有统计学意义(P<0.05).结论血塞通注射液治疗急性脑梗死安全有效.【期刊名称】《中国实用医药》【年(卷),期】2012(007)011【总页数】2页(P39-40)【关键词】血塞通;急性脑梗死;疗效观察【作者】赵广峰;李萌萌;李存明;张秀芳【作者单位】236800,安徽省亳州市人民医院中医科;236800,安徽省亳州市人民医院中医科;236800,安徽省亳州市人民医院中医科;236800,安徽省亳州市人民医院中医科【正文语种】中文急性脑梗死病因较多，中医认为瘀血阻滞脑脉是缺血性脑中风的基本病机，故治宜活血化瘀。
我院2009年11月至2011年5月应用血塞通注射液治疗急性脑梗死患者96例，并对患者血液流变学和脑循环动力学的变化进行了观察，现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料全部96例急性脑梗死患者均为我院的住院患者，发病均在1周内并就诊于我院并接受治疗，按随机对照的方法将全部患者随机分为两组，治疗组56例，其中男30例，女26例，年龄44～79岁，平均(61.60±14.30)岁;对照组40例，其中男25例，女15例，年龄43～80岁，平均(61.43±14.40)岁。
病情程度按照《脑卒中患者临床神经功能缺损评分标准》［1］分轻型(10 ～15 分)、中型(16～30分)、重型(31 ～45分)。
两组患者的性别、年龄、发病至就诊时间、梗死部位、神经功能缺损评分均无显著性差异(P＞0.05)，具有可比性。
1.2 病例入选标准全部入选病例均符合1995年中华医学会第四届脑血管病会议确定的《各类脑血管疾病的诊断要点》标准［2］，并经头颅CT或MRI证实。
血塞通对MCAO大鼠不同恢复时间点Nogo-A蛋白表达的影响张晓倩【期刊名称】《潍坊医学院学报》【年(卷),期】2014(0)6【摘要】目的：探讨血塞通冻干粉注射液对大鼠局灶性脑缺血模型不同恢复时间点7d，14d，28d大脑皮层的主要抑制因子Nogo-A表达的影响。
方法健康雄性SD大鼠，随机分为手术组和非手术组，手术组采用改良Longa方法建立大脑中动脉阻塞（ MCAO）模型，待大鼠术后清醒2h后，进行EZLonga评分，根据评分和体重随机分为血塞通大剂量组（7．2mg／100g）、小剂量组（3．6mg／100g）、尼莫地平组（1．44mg／100g）、模型组（生理盐水），于手术当日开始给药。
待7d，14d，28d时，各组取6～8只动物，迅速取脑，于视交叉处将大脑前后分开，前端脑放入10％的甲醛中固定，48h后用PBS将脑组织洗净，石蜡包埋切片，用免疫组织化学染色方法观察不同时间点Nogo-A的表达变化，分别对梗死区、梗死周边区进行平均光密度分析。
结果梗死区随着时间的延长，Nogo-A的表达逐渐减弱，在各时间点内，血塞通组和尼莫地平组Nogo-A的表达高于模型组。
梗死周边区，模型组Nogo-A的表达趋势是7 d时已经高表达，14 d达到高峰，28 d比14 d略低，但仍保持较高水平，在各时间点，血塞通组比同时间点内的模型组表达低，与模型组差异显著（P＜0．05）。
结论血塞通可以保护大鼠梗死区及梗死周边区的神经细胞，可以下调梗死周边区不同恢复时间点Nogo-A的表达。
血塞通可能是通过下调Nogo-A的表达来实现大脑神经功能的重塑重建作用。
【总页数】5页(P430-434)【关键词】MCAO;脑梗死;Nogo-A;血塞通;三七总皂苷【作者】张晓倩【作者单位】北京市中西医结合医院【正文语种】中文【中图分类】R743.33【相关文献】1.不同强度运动预处理对全脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白-43、轴突生长抑制因子Nogo-A表达的影响 [J], 孙竹梅;赵雅宁;李建民;王国立;陈长香;张美航;王静2.控制性低血压后不同恢复时间对大鼠血浆脑红蛋白表达的影响 [J], 王琳;曹阳3.脑缺血预处理对大鼠脑内Nogo-A mRNA、Nogo-A及NgR蛋白表达的影响[J], 焦义明;王金兰;娄季宇;白宏英4.复健片对大鼠脑梗死后不同时间点Nogo-A表达的影响 [J], 胡怀强;周永红;马学盛;王新陆5.通络化痰胶囊对MCAO模型大鼠皮层Nogo-A、GAP-43表达影响的实验研究[J], 何嘉盛;苏春燕;赖敏;范吉平;周杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血塞通注射液治疗48例脑梗死疗效分析脑梗死是指由于脑动脉阻塞导致大脑血供不足而引起的一种疾病。
血塞通注射液是一种中草药制剂，据报道对脑梗死的治疗有一定的疗效。
本文旨在通过对48例脑梗死患者的血塞通注射液治疗效果进行分析，为临床治疗提供参考。
本研究纳入48例确诊为脑梗死的患者，其中男性26例，女性22例，年龄范围为40-80岁。
根据病情严重程度，将患者分为轻、中、重三组。
轻型组14例，中型组24例，重型组10例。
所有患者在治疗期间均接受了常规治疗，并根据临床需要注射了血塞通注射液。
每天按照说明书推荐的剂量进行注射，治疗持续15天。
治疗结束后，对患者进行随访观察，并进行疗效评价。
评价指标包括神经功能缺损恢复情况、脑血流动力学变化、症状改善情况等。
结果显示，在48例患者中，神经功能缺损有不同程度的恢复。
轻型组中有11例恢复明显，3例恢复一般；中型组中有18例恢复明显，6例恢复一般；重型组中有6例恢复明显，4例恢复一般。
这表明血塞通注射液对脑梗死后的神经功能恢复有一定的帮助。
此外，通过CT或MRI检查，研究发现血塞通注射液治疗后，脑血流灌注改善明显。
在轻型组中，脑血流灌注恢复正常的患者有10例，略有改善的有4例；在中型组中，脑血流灌注恢复正常的患者有15例，略有改善的有9例；在重型组中，脑血流灌注恢复正常的患者有4例，略有改善的有3例。
这说明血塞通注射液对脑血流的恢复有一定的促进作用。
此外，在症状改善方面，治疗后头痛、恶心、呕吐、眩晕等症状明显减轻或消失。
轻型组中，头痛症状缓解的有12例，消失的有2例；中型组中，头痛症状缓解的有20例，消失的有4例；重型组中，头痛症状缓解的有8例，消失的有2例。
这表明血塞通注射液能够改善脑梗死患者的症状。
总结以上结果，血塞通注射液可以作为脑梗死的辅助治疗药物。
它能促进神经功能缺损的恢复，改善脑血流灌注，减轻症状。
但需注意的是，本研究样本量较小，且未设立对照组，因此仍需要进一步研究来验证其疗效。
注射用血塞通治疗脑梗死恢复期瘀血阻滞证的随机对照研究脑梗死是一种急性脑血管疾病，其发病机制主要是由于脑血管阻塞造成脑部血液供应不足导致的一系列严重病变。
脑梗死发作后，神经细胞缺氧、缺血，容易发生坏死和脱落，同时也容易引发脑部炎症反应，严重影响患者的生活质量。
目前临床上主要采用溶栓治疗和抗凝治疗来改善脑梗死患者的血液循环状况。
溶栓治疗和抗凝治疗存在一定的风险和副作用，因此尚需寻求更加安全有效的治疗方法。
注射用血塞通是一种从激活的瘀血中提取出的一种生物活性物质，其具有明显的溶栓作用，并且具有明显的抗炎和抗血小板聚集的作用。
在临床上，注射用血塞通已被广泛应用于治疗各种血管性疾病，如心肌梗死、脑梗死等，取得了显著的疗效。
关于注射用血塞通治疗脑梗死恢复期瘀血阻滞证的随机对照研究尚不多见，因此有必要开展此项研究。
本研究旨在通过随机对照试验的方式，评估注射用血塞通对脑梗死恢复期瘀血阻滞证的疗效和安全性，为临床治疗提供更加科学的参考依据。
1. 研究方法1.1 参与对象本研究拟选取2018年1月至2020年12月在我院住院治疗的脑梗死恢复期瘀血阻滞证患者，共计200例。
符合以下条件的患者将被纳入研究对象：①符合脑梗死的诊断标准；②病情稳定，病情符合脑梗死恢复期瘀血阻滞证的诊断标准；③年龄在35岁-75岁之间；④患者及家属自愿参与研究并签署知情同意书。
排除标准：①有出血病史或出血风险的患者；②合并严重肝肾功能不全的患者；③合并其他严重疾病的患者；④怀孕或哺乳期妇女。
将符合入选标准的患者随机分为观察组和对照组，每组各100例。
观察组患者给予注射用血塞通治疗，对照组患者给予常规治疗。
观察指标包括脑梗死恢复期瘀血阻滞证的缓解情况、生活质量评分、颅内血流动力学指标、血栓指标、炎症指标等。
对两组患者的不良反应和并发症进行监测和记录。
1.3 数据统计和分析采集所有患者的临床资料进行统计分析，对观察指标的疗效比较采用SPSS软件进行分析，采用t检验、χ2检验进行数值资料及计数资料的比较；采用相关性分析和多因素分析等方法对相关数据进行深入研究。
缺血性脑血管疾病在临床上发病率、致残率高，是我国临床病人主要的病死原因之一。
脑缺血再灌注是一个复杂的病理生理过程，目前大量的研究集中于脑缺血再灌注后神经元存活和功能恢复方面，有关脑缺血后脑微血管再生和功能重建的研究较少。
脑缺血后神经元存活的挽救和功能恢复与脑微循环密切相关。
尽快恢复缺血区的血供，挽救濒死的神经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞，是治疗缺血性脑血管病的关键。
除扩管抗凝、溶栓等传统治疗手段外，刺激脑内毛细血管生成可能成为新的临床治疗手段［１］。
血塞通（Ｘｕｅｓａｉｔｏｎｇ，ＸＳＴ）是从中药三七中提取的总皂苷，药理实验研究显示，三七总皂苷具有保护心肌缺血再灌注损伤、扩张脑血管、增加脑血流和抗脑缺血组织自由基生成等药理作用。
本试验拟研究血塞通对脑缺血再灌注损伤的保护作用，旨在进一步探讨血塞通的脑保护机制，为血塞通治疗脑血管性疾病提供实验依据。
１材料与方法１．１试剂材料血塞通购于云南金泰得三七产业股份有限公司，批号０７ＢＫ０６，试剂：考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，ＳＯＤ测定试剂盒，ＭＤＡ测定试剂盒，均购自江苏省南京建成生物研究所。
１．２实验动物ＳＰＦ级ＳＤ雄性大鼠３０只，体重２５０±２０ｇ。
随机分为３组，每组１０只，即血塞通组，模型组及假手术组。
采用尾静脉注射给药（１００ｍｇ／Ｋｇ），各组动物手术前均连续给药７ｄ，于第７ｄ给药后１ｈ造模。
１．２．１模型建立大鼠脑缺血再灌损伤模型的复制采用改良的Ｎａｇａｓａｗ大鼠用水合氯醛３０ｍｇ／ｋｇ腹腔注射麻醉，仰位固定后手术。
颈偏右侧切口，分离、结扎右颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。
分离右侧颈内动脉，沿颈内动脉向下分离翼颚动脉，跟部结扎该分支。
在颈总动脉近心端备线，远端放置动脉夹，距颈动脉分又０．５ｃｍ处切口，将直径为０．２８５ｍｍ渔线，经颈外动脉插入颈内动脉入大脑中动脉分支处，阻断大脑中动脉所有血流来源，进线深度均距颈内、颈外动脉分叉２０±２ｍｍ处，可感到阻力而无法向前推进时停止。
血塞通注射液治疗急性脑梗死患者的临床观察及其对血清C-反应蛋白的影响侯殿龙;巩同玉;王保岚【摘要】目的探讨血塞通注射液治疗急性脑梗死患者的疗效及其对血清C-反应蛋白(CRP)的影响.方法选择发病48 h内的急性脑梗死患者100例.随机分为治疗组(50例)和对照组(50例),两组患者视病情轻重及并发症给予对症治疗,其中治疗组给予血塞通注射液400 mg静脉滴注,对照组给予丹参注射液静脉滴注,每天1次.疗程均为14 d.观察两组患者治疗前及治疗14 d时临床神经功能缺损程度评分.采用免疫散射速率比浊法测定两组患者治疗前及治疗第7、14天血清CRP浓度.结果治疗组与对照组总有效率比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组与对照组治疗第7、14天CRP水平与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组治疗第7、14天CRP水平与对照组同期相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论血塞通注射液有降低急性脑梗死患者血清CRP浓度、改善神经功能的作用.【期刊名称】《滨州医学院学报》【年(卷),期】2012(035)006【总页数】3页(P429-430,433)【关键词】脑梗死;C-反应蛋白;血塞通注射液【作者】侯殿龙;巩同玉;王保岚【作者单位】桓台县人民医院神经内科,淄博,256400;桓台县人民医院神经内科,淄博,256400;桓台县人民医院神经内科,淄博,256400【正文语种】中文【中图分类】R743.9急性脑梗死严重威胁人类的健康，其致残率和死亡率极高。
研究表明，在急性脑梗死中，炎性反应是脑梗死的发病机制之一［1］。
C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)在组织损伤和炎症时，由炎性淋巴因子(白介素-6、白介素-1、肿瘤坏死因子)刺激肝脏和上皮细胞合成，是最主要、最敏感的一种炎症标志物。
急性脑梗死患者血清CRP含量明显增高，其增高程度与体内炎性反应以及病理改变程度密切相关［2］，本研究采用血塞通治疗本病50例，观察了其临床疗效和对血清CRP浓度的影响，现报道如下。
血塞通注射液对局灶性脑梗死大鼠不同恢复时点大脑皮层Syp和PSD-95蛋白表达的影响刘丽星;朱陵群;刘炜;吴建华;邹忆怀;陈家旭;赵歆【期刊名称】《中西医结合心脑血管病杂志》【年(卷),期】2014(012)002【摘要】目的观察血塞通注射液(主要成分为三七总皂苷)在不同时间点对局灶性脑梗死大鼠皮层部位突触后致密物质(post sypaptic Density-95,PSD-95)及突触素(synaptophysin,Syp)蛋白表达的影响,探索三七总皂苷对脑缺血受损神经元重塑的作用机制.方法采用改良Longa方法制备局灶性脑梗死模型,将40只SD大鼠随机等分为假手术组、模型组、三七总皂苷小剂量组、三七总皂苷大剂量组、尼莫地平组.各组动物分别于术后3 d、7 d、14 d、28 d麻醉断头取材,行免疫组织化学检测PSD-95及Syp蛋白的表达.结果模型组PSD-95蛋白表达在术后3 d及7 d 明显降低,14 d逐渐恢复正常,到28 d时表达量较同时间点假手术组增高(P<0.01);Syp蛋白在术后模型组表达亦明显降低(P<0.01),术后14 d及28 d,三七总皂苷组的表达较模型组显著升高(P<0.01).结论三七总皂苷可以促进局灶性脑梗死后PSD及Syp蛋白表达,从而促进神经重塑与修复.【总页数】3页(P217-219)【作者】刘丽星;朱陵群;刘炜;吴建华;邹忆怀;陈家旭;赵歆【作者单位】北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室,100700;北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室,100700;北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室,100700;北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室,100700;北京中医药大学东直门医院;北京中医药大学基础医学院;北京中医药大学基础医学院【正文语种】中文【中图分类】R743;R285.5【相关文献】1.三七三醇皂苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同恢复时期脑梗死体积和Nogo-A 表达的影响 [J], 严永兴;梁丽贞;周智林;陈涛;李鹏;吴春丽;刘慧丽2.三七通舒胶囊对脑梗死后不同恢复时点Syp和PSD-95表达的影响 [J], 崔方圆;翟建英;邹蔚萌;王席玲;邹忆怀;朱陵群3.不同环境对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围皮层神经丝蛋白表达的影响 [J], 槐雅萍;李阔;徐金秀;贾子善;李娜;高俊淑4.不同饲养环境对局灶性脑梗死大鼠行为学恢复的影响 [J], 齐亚超;肖向建;段瑞生;张晓玲;郭宗成5.不同环境设置对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白表达的影响 [J], 李娜;王天俊;高俊淑;陈景红;贾子善因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血塞通注射液治疗脑梗死的临床疗效观察栾图【摘要】目的：探讨血塞通注射液对脑梗死患者的临床疗效及安全性，探讨其临床价值。
方法95例急性脑梗死按照随机分组的方法分为治疗组（n=50）和对照组（n=45），治疗组患者用血塞通注射液静滴，对照组患者给予丹参注射液静滴，对比两组的疗效及不良反应发生率。
结果对照组治疗总有效率低于治疗组（P＜0.05），对照组的日常生活活动能力评分显著低于治疗组（P＜0.05），两组的不良反应发生率无显著性差异（P＞0.05）。
结论血塞通注射液治疗脑梗死有显著的疗效，无严重不良反应发生，值得推广。
%Objective To analyze the clinical effects and safety of Xuesaitong injection in the treatment of cerebral infarction. Methods 95 cases of cerebral infarction were divided into the treatment group (n=50) and the control group (n=45). The control group took salvia miltiorrhiza injection and the treatment group took Xuesaitong injection. The curative effects and adverse reaction rate were measured then. Result The total effective rate of the control group was significant lower than that of the treatment group (P<0.05). The activities of daily living score of the control group was significant lower than that of the treatment group (P<0.05). There has no significant different in the adverse reaction rate between the two groups(P>0.05). Conclusion Xuesaitong injection has great contribution in treating cerebral infarction.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2014(000)010【总页数】2页(P42-42,43)【关键词】脑梗死;血塞通注射液;有效性;安全性【作者】栾图【作者单位】广州市残疾人康复中心内科，广东广州510000【正文语种】中文【中图分类】R743.3脑梗死是脑动脉血液循环发生障碍所引起，具有高发病率、高致残率、高病死率的特点。
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D95蛋白表达的影响1)刘丽星,朱陵群,刘炜,吴建华,邹忆怀,陈家旭,赵歆摘要:目的观察血塞通注射液(主要成分为三七总皂苷)在不同时间点对局灶性脑梗死大鼠皮层部位突触后致密物质(p o s t s y p a p t i cD e n s i t y95,P S D95)及突触素(s y n a p t o p h y s i n,S y p)蛋白表达的影响,探索三七总皂苷对脑缺血受损神经元重塑的作用机制㊂方法采用改良L o n g a方法制备局灶性脑梗死模型,将40只S D大鼠随机等分为假手术组㊁模型组㊁三七总皂苷小剂量组㊁三七总皂苷大剂量组㊁尼莫地平组㊂各组动物分别于术后3d㊁7d㊁14d㊁28d麻醉断头取材,行免疫组织化学检测P S D95及S y p蛋白的表达㊂结果模型组P S D95蛋白表达在术后3d及7d明显降低,14d逐渐恢复正常,到28d时表达量较同时间点假手术组增高(P<0.01);S y p蛋白在术后模型组表达亦明显降低(P<0.01),术后14d及28d,三七总皂苷组的表达较模型组显著升高(P<0.01)㊂结论三七总皂苷可以促进局灶性脑梗死后P S D及S y p蛋白表达,从而促进神经重塑与修复㊂关键词:局灶性脑梗死;突触后致密物质;突触素;血塞通注射液中图分类号:R743R285.5文献标识码:A d o i:10.3969/j.i s s n.16721349.2014.02.046文章编号:16721349(2014)02021703E f f e c t o fX u e s a i t o n g I n j e c t i o no nP S D95a n dS y p P r o t e i nE x p r e s s i o n i nC o r t e x o fF o c a l C e r e b r a l I n f a r c t i o nR a t sL i uL i x i n g,Z h uL i n g q u n,L i u W e i,e t a lD o n g z h i m e n g H o s p i t a l,B e i j i n g U n i v e r s i t y o fC h i n e s eM e d i c i n e(B e i j i n g100700)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o o b s e r v e t h e e f f e c t o fX u e s a i t o n g I n j e c t i o n o nP S D95a n dS y pp r o t e i n a f t e rM i d d l e c e r e b r a l a r t e r y o c c l u-s i o n(M C A O)o p e r a t i o n.M e t h o d s H e a l t h y m a t u r em a l eS Dr a t sw e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t om o d e l g r o u p,n o r m a l s a l i n e g r o u p,X u e-s a i t o n g s m a l l d o s e g r o u p,X u e s a i t o n g h i g h d o s e g r o u p,p o s i t i v e c o n t r o l g r o u p(n i m o d i p i n e g r o u p).E a c h g r o u p w a se x e c u t e da t3 d a y s,7d a y s,4d a y s a n d28d a y s a n d t h e n t h e b r a i n t i s s u ew a s t a k e n o u t t o o b s e r v e t h e e x p r e s s i o n c h a n g e s o f P S D95a n dS y p b y i m-m u n o h i s t o c h e m i s t r y.R e s u l t s T h e e x p r e s s i o no fP S D95i n t h em o d e l g r o u p w a s d e c r e a s e da t3a n d7d a y s a f t e r t h eM C A Oo p e r a-t i o n,a n d g r a d u a l l y c a m e t o t h en o r m a l l e v e l a t14d a y s(P<0.01).S y p e x p r e s s i o na l s od e c r e a s e do b v i o u s l y i nm o d e l g r o u p.T h e e x-p r e s s i o n i ne a c h t r e a t m e n t g r o u p w a sh i g h e r t h a n t h a t i n t h em o d e l g r o u p.A t14t ha n d28t hd a y,t h e e x p r e s s i o n i nX u e s a i t o n g h i g h d o s e g r o u p w a s s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d c o m p a r e dw i t h t h a t i n t h em o d e l g r o u p(P<0.01).C o n c l u s i o n X u e s a i t o n g I n j e c t i o n c o u l d i n-c r e a s e t h e e x p r e s s i o no fP S D95a n dS y pp r o t e i n s o a s t o p r o m o t en e r v e r e g e n e r a t i o n.K e y w o r d s:f o c a l c e r e b r a l i n f a r c t i o n;p o s t s y p a p t i cD e n s i t y95;s y n a p t o p h y s i n;X u e s a i t o n g i n j e c t i o n神经功能的恢复对降低中风病人致残率具有重要意义,围绕恢复的研究主要有两个方面,即再生和重塑㊂突触后致密物(p o s t s y p a p t i c d e n s i t y,P S D)是由许多动态的蛋白复合体组成并附着于突触后膜,与受体耦合并激动下游信号传递㊂其中P S D95为膜相关鸟苷酰基激酶(m e m b r a n e-a s s o c i a t e d g u a n y l y lk i-n a s e,MA G U K)家族的主要成员,直接作用于门冬氨酸NM D A 受体亚单位羧基末端并聚集于突触后膜㊂突触素(s y n a p t o p h y s i n,S y p)是第一个被发现的突触囊泡蛋白,在对突出的研1)为国家自然科学基金资助项目(N o.30772803,81173235);北京中医药大学创新团队资助项目(N o.2011C X T D07)㊃712㊃中西医结合心脑血管病杂志2014年2月第12卷第2期万方数据究中具有重要作用,是突触的标志性蛋白㊂三七总皂苷注射制剂(血塞通)已广泛应用于脑梗死患者的临床治疗,并具有一定的临床疗效,但机制尚未明确,本研究探讨其对局灶性脑梗死大鼠模型大脑皮层S y p和P S D95的蛋白表达的影响㊂1材料与方法1.1药物注射用血塞通冻干粉购自昆明制药集团股份有限公司,主要成分为三七总皂苷(批号09HA05,400m g/瓶)㊂尼莫地平片购自拜耳医药有限公司(批号113275,30m g/片)㊂1.2仪器设备与试剂 S P试剂盒㊁D A B显色试剂盒购自北京百事创新科技有限公司㊂S y p与P S D95抗体分别购自S i g m a 及博奥森公司,二抗购自博奥森公司㊂日本O L YM P U SB X60型显微镜㊁S P O TⅡ(d i a g n o s t i c i n s t r u m e n t s.I n c)软件㊁M e t a M o r p hU n i v e r s a l i m a g i n g c o r p o r a t i o n软件㊂1.3模型建立 S D大鼠40只购自北京维通利华实验动物技术有限公司(雄性300gʃ20g),许可证编号:S C X K(京)2006-0009㊂将40只大鼠随机分为非手术组和手术组,手术组采用改良L o n g a法[1]造模㊂术前12h禁食,腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉(10m L/k g),暴露颈总动脉㊁颈外动脉㊁颈内动脉,结扎颈外近分叉处和颈总动脉近心端,动脉夹暂时夹闭颈总远端,血管剪剪开小口,将尼龙线栓插入颈内动脉中,推进18mm~22 mm,固定栓线及缝合皮肤㊂假手术组只进行颈部正中纵行剖开后缝合㊂术后2h左右清醒,据L o n g a[2]进行评分,1分~3分者予以纳入㊂0分:无神经功能缺损表现;1分:对侧前爪无法充分的伸展;2分:向外侧转圈;3分:行走时向对侧倾倒;4分:不能行走,意识丧失㊂其中1分~3分纳入,0分和4分剔除㊂1.4动物分组及给药方法纳入符合评分标准的大鼠并随机分为模型组㊁三七总皂苷大㊁小剂量组和尼莫地平组,每组8只㊂按大鼠与人的体表面积等效剂量方法折算出给药剂量为三七总皂苷小剂量为3.6m g/(100g㊃d);三七总皂苷大剂量组为7.2m g/(100g㊃d),三七总皂苷各组每日腹腔注射;尼莫地平片为1.44m g/(100g㊃d),灌胃㊂各组大鼠均于当日手术后5h给药,药物现用现配㊂1.5取材分别于术后3d㊁7d㊁14d㊁28d用4%多聚甲醛(用p H7.4的0.1m o l/LP B S配制)100m L灌注后取脑,经4%多聚甲醛固定24h,然后进行梯度酒精脱水㊁包埋,冠状切片(5μm)并将切片裱于A P E S处理的载玻片㊂1.6免疫组织化学检测S y p及P S D95的表达常规脱蜡石蜡切片并于3%H2O2避光浸泡30m i n,并置于枸橼酸缓冲液抗原修复后进行3%正常兔血清37ħ孵育30m i n,加入一抗(兔抗鼠S y p或兔抗鼠P S D95),在37ħ孵育2h或孵育30m i n 后放入4ħ冰箱过夜;生物素标记的羊抗兔I g G37ħ孵育30 m i n;辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素工作液于37ħ孵育30 m i n,用D A B显色试剂盒显色㊂空白对照实验:将一抗替换为0.01m o l/LP B S,其余步骤相同㊂在O L YM P U SB X60型显微镜40ˑ10倍数下,随机选取海马梗死区4个视野,采用S P O T Ⅱ(d i a g n o s t i c i n s t r u m e n t s.I n c)软件采集图像,用M e t a M o r p h U n i v e r s a l i m a g i n g c o r p o r a t i o n软件测定阳性光密度值㊂1.7统计学处理采用S P S S18.0统计软件分析,录入后常规进行正态性检验㊁方差齐性检验后进行方差分析㊂实验数据采用均数ʃ标准差(xʃs)表示㊂P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1三七总皂苷对M C A O术后大鼠神经症状的影响模型组神经功能评分在各个时间点上与假手术组相比均显著升高(P<0.01)㊂所有手术组在术后5h神经功能缺损严重,评分较高;各组在24h㊁48h神经功能持续好转㊂术后72h评分模型组显著高于尼莫地平组和血三七总皂苷各剂量组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)㊂详见表1㊂表1术后各组大鼠神经功能评分比较(xʃs)分组别n术后5h术后24h术后48h术后72h 假手术组70.00ʃ0.000.00ʃ0.000.00ʃ0.000.00ʃ0.00模型组182.00ʃ0.591.89ʃ0.581.83ʃ0.511.78ʃ0.43三七总皂苷大剂量组182.06ʃ0.541.83ʃ0.381.77ʃ0.421.38ʃ0.501)三七总皂苷小剂量组182.11ʃ0.471.78ʃ0.551.67ʃ0.591.33ʃ0.482)尼莫地平组212.05ʃ0.601.76ʃ0.441.67ʃ0.481.28ʃ0.462)与模型组同时间点比较,1)P<0.05,2)P<0.012.2三七总皂苷对M C A O术后大鼠皮层P S D95表达的影响皮层内P S D95免疫反应产物呈特异性颗粒状或点状㊂模型组在M C A O术后3d㊁7d皮层和海马P S D95表达量低于假手术组(P<0.01),在14d以后明显增加,28d皮层P S D95和海马表达量明显高于假手术组(P<0.01)㊂在各时间点,不同浓度的三七总皂苷组皮层和海马P S D95蛋白的表达水平均高于模型组(P<0.01);不同浓度的三七总皂苷组在M C A O术后28d皮层P S D表达量均高于假手术组和模型组(P<0.01)㊂详见表2㊂表2三七总皂苷对缺血性脑梗死大鼠皮层P S D95蛋白表达的影响(xʃs)组别n术后3d术后7d术后14d术后28d假手术组80.205ʃ0.0140.207ʃ0.0180.202ʃ0.0110.203ʃ0.029模型组80.150ʃ0.0141)0.125ʃ0.0221)0.172ʃ0.0161)0.233ʃ0.0121)三七总皂苷大剂量组80.171ʃ0.0172)0.160ʃ0.0132)0.195ʃ0.0112)0.252ʃ0.0142)三七总皂苷小剂量组80.163ʃ0.0172)0.157ʃ0.0132)0.181ʃ0.0122)0.244ʃ0.0132)尼莫地平组80.161ʃ0.0122)0.144ʃ0.0122)0.173ʃ0.0150.236ʃ0.0122)与假手术组同时间点比较,1)P<0.01;与模型组同时间点比较,2)P<0.01㊃812㊃C H I N E S EJ O U R N A L O FI N T E G R A T I V E M E D I C I N E O N C A R D I O/C E R E B R O V A S C U L A R D I S E A S E F e b r u a r y2014 V o l.12 N o.2万方数据2.3三七总皂苷对M C A O术后大鼠皮层S y p表达的影响皮层内S y p免疫反应产物呈特异性颗粒状或点状㊂脑缺血损伤后,S y p的表达水平显著降低,随着恢复时间的延长,皮层和海马内的S y p表达逐渐增强㊂模型组在M C A O术后3d㊁7d皮层的S y p表达量低于假手术组(P<0.01),在14d以后明显增多,28d皮层S y p的表达量明显高于假手术组(P<0.01)㊂在各时间点,不同浓度的三七总皂苷组皮层S Y P蛋白表达量均高于模型组(P<0.01);不同浓度的三七总皂苷组在M C A O术后14 d㊁28d皮层S y p表达量均高于假手术组和模型组(P<0.01)㊂详见表3㊂表3三七总皂苷对缺血性脑梗死大鼠皮层S y p蛋白表达的影响(xʃs)组别n术后3d术后7d术后14d术后28d 假手术组80.215ʃ0.0180.217ʃ0.0150.219ʃ0.0220.213ʃ0.017模型组80.152ʃ0.0221)0.123ʃ0.0191)0.193ʃ0.0241)0.252ʃ0.0141)三七总皂苷大剂量组80.173ʃ0.0242)0.166ʃ0.0242)0.231ʃ0.0202)0.264ʃ0.0132)三七总皂苷大剂量组80.160ʃ0.0232)0.155ʃ0.0192)0.225ʃ0.0212)0.257ʃ0.0102)尼莫地平组80.175ʃ0.0142)0.160ʃ0.0202)0.218ʃ0.0172)0.242ʃ0.0132)与假手术组同时间点比较,1)P<0.01;与模型组同时间点比较,2)P<0.013讨论P S D95与突触的可塑性及稳定性以及外周神经的损伤后修复具有重要的关系,影响损伤后突触结构可塑性并对谷氨酸受体有重要的调节作用[35]㊂S y p是参与囊泡运输和胞膜连接的相关蛋白质家族的一员,可间接反映突触的数量㊁分布和密度,同时参与神经递质的释放[6],用来研究神经元的发育情况具有特殊研究价值[7,8]㊂在本实验中发现,各手术组P S D95在术后在3d及7d时,其含量均低于假手术组(P<0.01),直到14d,模型组P S D95含量仍低于假手术组或近似持平,但药物组P S D95表达均比模型组高(P<0.01),说明损伤后大量神经元坏死,虽然神经重塑持续存在,但仍无法达到损伤前水平,而药物在促进突触再生的过程中起着积极的作用;在第28天时各手术组P S D95含量均高于假手术组(P<0.01)㊂在术后3 d㊁7d时,模型组S y n的表达低于假手术组(P<0.01),而药物组S y n表达量高于模型组(P<0.01),说明脑梗死后突触数量会迅速减少,而且影响突触的再生,而三七总皂苷和尼莫地平可以有效的促进突触的重塑;手术组各组随时间变化均呈现上升趋势,在14d和28d药物组的S y n的表达量超过假手术组,显示突触含量的再生㊂研究结果提示血塞通及尼莫地平可能对脑梗死后突触的重建㊁重塑过程有促进作用,可以改善大鼠局灶性脑缺血后的神经症状,对神经功能重塑有积极作用㊂局灶性脑梗死隶属于中医学中的中风病范畴㊂急性期治疗以祛邪为主,同时注意顾护正气㊂在中风病治法方面,以活血化瘀㊁活血通络㊁益气活血㊁清化痰热㊁解毒通络等为主的治疗思想已得到广泛的认同和应用㊂三七活血化瘀而不损伤正气㊂三七总皂苷注射剂(血塞通)是以三七总皂苷为主要成分的中药制剂,具有活血祛瘀㊁通脉活络之功效,广泛运用于临床上治疗中风偏瘫脑㊁瘀血阻络㊁或脑梗死等脑血管病后遗症,并取得了很好的疗效㊂本实验以P S D95及S y p的含量作为研究突触再生㊁中枢神经恢复的标记物进行观察㊂根据本实验结果,在脑损伤发生后,三七总皂苷可以改善大鼠术后的神经症状,并促进大脑皮层S y p㊁P S D95的再生,反映了突触数量的增加,对于神经元的再生和中枢神经功能的重塑有积极的作用,但对于模型组的S y p和P S D95在观察期内也出现不断升高的现象还需进一步研究㊂参考文献:[1]黄希艳,李倩,朱陵群.片仔癀对脑梗死大鼠Z O1,MM P9蛋白及m R N A表达的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2013,11(63):342343.[2] J o n e sN.S t r o k e:D i s r u p t i o no f t h en N O S P S D95c o m p l e xi sn e u r o p r o t e c t i v e i nm o d e l so f c e r e b r a l i s c h e m i a[J].N a tR e vN e u-r o l,2011,7(2):61.[3]X u W.P S D95l i k e m e m b r a n ea s s o c i a t e d g u a n y l a t ek i n a s e s(P S D MA G U K s)a n d s y n a p t i c p l a s t i c i t y[J].C u r rO p i nN e u r o b i-o l,2011,21(2):306312.[4] C o o kD J,T e v e sL,T y m i a n s k iM.T r e a t m e n to f s t r o k ew i t h aP S D95i n h i b i t o r i n t h e g y r e n c e p h a l i c p r i m a t e b r a i n[J].N a t u r e,2012,483:213217.[5]Y o k o iN,F u k a t a M,F u k a t a Y.S y n a p t i c p l a s t i c i t y r e g u l a t e db yp r o t e i n p r o t e i ni n t e r a c t i o n sa n d p o s t t r a n s l a t i o n a lm o d i f i c a t i o n s [J].I n tR e vC e l lM o l B i o l,2012,297:143.[6]潘发福.突触素与慢性脑缺血的研究进展[J].实用临床医学,2011,12(12):130133.[7] G a r r i n g e rH J,M u r r e l l J,S a mm e t aN,e t a l.I n c r e a s e d t a u p h o s p h o-r y l a t i o na n d t a ut r u n c a t i o n,a n dd e c r e a s e ds y p a p t o p h y s i nl e v e l s i n m u t a n tB R I(2)/t a ut r a n s g e n i c m i c e[J].P L o S O n e,2013,8(2): e56426.[8] G u t iér r e z F e r nán d e zM,R o d ríg u e z F r u t o sB,R a m o s C e j u d o J,e t a l.Ef f e c t s o f i n t r a v e n o u s a d m i n i s t r a t i o no f a l l og e n i cb o n em a r-r o w a n d a d i p o s e t i s s u e d e r i v e dm e s e n c h y m a l s t e mc e l l s o n f u n c-t i o n a l r e c o v e r y a n db r a i nr e p a i rm a r k e r s i ne x p e r i m e n t a l i s c h e m i c s t r o k e[J].S t e m C e l lR e sT h e r,2013,4(1):11.作者简介:刘丽星,女,现工作于北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室(邮编:100700);朱陵群(通讯作者)㊁刘炜㊁吴建华,工作于北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和北京市重点实验室(邮编:100700);邹忆怀,工作于北京中医药大学东直门医院;陈家旭㊁赵歆,工作于北京中医药大学基础医学院㊂(收稿日期:20131029)(本文编辑郭怀印)㊃912㊃中西医结合心脑血管病杂志2014年2月第12卷第2期万方数据。
