尿沉渣分析仪发展简史
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尿液分析及尿液分析仪的发展史1 尿液分析化学检查的发展史2 尿液有形成分分析仪的发展史1 尿液分析化学检查的发展史早在远古时期,人们就了解到尿液的颜色、黏稠度和尿量的变化与疾病有关。
古印度的医生曾将尿液倒在地上,如果这种尿液能够招来蚂蚁,就说明它是患痈的患者排出的“蜜尿”,这可能是人们所知道的最早的尿糖测定方法。
希波克拉底(约公元前460-377年),出生于小亚细亚科斯岛的一个医生世家,祖父、父亲都是医生,母亲是接生婆。
公元前400年,古希腊名医希波克拉底(Hippocrates)在其著作中就指出了尿液检查对健康人和患者的重要性,他注意到儿童和成年人发热时尿液的变化,并提到气味的不同和颜色的变化。
公元1000年,波斯名医依新梅尔(Ismail)总结了他对尿液的研究,并描述了7种针对尿液的观察和实验,即颜色、黏稠度、尿量、透明度、沉淀物、臭味和泡沫。
英国物理学家罗伯特·玻意耳(Robert Boyle)尿试纸的起源,可追溯到16世纪,英国物理学家罗伯特·玻意耳(Robert Boyle)发明石蕊试纸。
或者更早,可追溯到罗马学者普林尼(Plinius)通过浸泡于没食子酸的莎草纸测定铁试验的时代。
1660年,德国炼金学者奥托·塔切里斯(Otto Tachenius)使用这种技术用于尿液的测定。
1673年,弗雷德里克·德克斯(Frederick Dekkers)用加热醋酸酸化尿液方法测定尿液中的蛋白。
1674年,托马斯·威利斯(Tomas Wilis)发现糖尿病患者的尿中有甜味。
1787年,法兰西斯克·莫拉伯利(Francesco Marabelli)用硝酸法检测尿中的胆红素。
1790年,弗兰西斯·贺姆(Francis Home)用硝酸法检测水肿患者尿液中的蛋白。
1827年,理查德·伯瑞特(Richard Bright)用加热的方法检测肾病患者尿液中的蛋白。
中国尿液有形成分分析仪现状及发展趋势点击上方“CAIVD”关注我们1630年,Nicolas Claude等最早使用显微镜观察尿沉渣。
1948年,苏格兰医师Addis介绍了尿液的收集和计数池的使用方法,即著名的“爱迪(Addis)计数”。
从此使尿液显微镜检查成为评估患者相关疾病的检测项目之一。
迄今为止尿沉渣分析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分折,得出相应的技术资料与实验结果;另一类是流式细胞术分析。
1983年,美国国际遥控影像系统有限公司(InternationalRemote imaging systems Co., Ltd)研制生产了世界上第一台“Yollow IRIS”高速摄影机式的尿沉渣自动分析仪。
简称Y一1尿自动分析仪。
这种仪器是将标本的粒子影像展示在计算机的屏幕上,由检验人员加以鉴别。
1989年,日本东亚医疗电子有限公司(TOA MedicalElectronics Co., Ltd)引进Y-1尿自动分析仪,发现此仪器不能满足临床要求。
1990年,美国国际遥控影象系统有限公司与日本东亚医疗电子有限公司合作,对原有的尿沉渣分析仪进行改进,生产出影象流式细胞术的UA-1000型尿沉渣自动分析仪,随之又生产了UA-2000型尿沉渣自动分析仪。
这种仪器主要由连续高速流动位点摄影系统组成,包括闪光放电管、放大接物镜、平面流动池、CCD摄影系统、影像信息处理机和阴极射线示波器等。
虽然该仪器对原来的尿液分析仪进行改革,但由于此类尿沉渣自动分析仪对图象粒子测绘不十分满意,处理能力低,重复性差,管型分辨不清,价格较昂贵等原因,而不能普及。
该公司在2000年推出了改进型大型939UDX全自动尿液有形成分分析仪后,于2002年通过美国食品药品管理局(FDA)的论证建立新的IQ-200系统,并推出了小型的尿沉渣检测工作站。
近年来Iris集团又推出第五代全自动尿液粒子分析仪(iQTM200全自动尿液显微镜分析仪)。
尿液分析仪发展简史一、尿液分析仪发展简史公元前400年, Hippocrates注意到发热时.尿液颜色和气味的变化。
18-19世纪-开始显微镜下尿液检查及尿液化学分析。
1827年,Bright,最早把尿液检验用于患者的诊断和护理。
1930-首先在滤纸上进行尿液斑点试验。
1956-美国Ames和Lilly公司几乎同时创建了尿糖试剂带。
1960-80-多项参数尿试剂带开始应用于临床。
70年代,第一台尿液化学分析仪问世。
80年代后,半自动---全自动尿液干化学分析仪开始逐渐应用于临床。
80年代中后期,韩国光电转换元件CCD(电荷耦合器件)生产出Uriscan-S300型11项尿液分析仪。
1985年国内从日本引进MA-4210型尿液分析仪和专用试剂带的生产技术及设备。
1990年尿液分析仪达到全部国产化。
1992年,尿10项分析仪及专用试剂带。
1994年推出了Uritest—100型10项尿液分析仪及专用试剂带。
1997年上半年又推出了Uritest-200型11项尿液分析仪及专用试剂带。
二、尿液分析仪分类1.按工作方式分类(1)液式尿液分析仪(2)干式尿液分析仪2.按测试项目分类(1)8项尿液分析仪:MA-4210型(日本和国产)PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT;(2)9项尿液分析仪:RL-9型(德国)PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU;(3)10项尿液分析仪:MIDITRON型(德国)、CLINITEK 200型(美国)、Uritest-100型(国产) PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG;(4)11项尿液分析仪:CLINITEK Atlas型(美国)、URISCAN-S300型(韩国)、Uritest-200型(国产)PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG、颜色或维生素C;(5)12项尿液分析仪:CLINITEK 500型(美国)、Aution MaxTM AX-4280型(日本)、宝灵曼/罗氏公司Urysis 2400型,PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG、颜色和浊度。
全自动尿沉渣分析仪研究背景现状与意义全自动尿沉渣分析仪研究背景现状与意义 1研究背景2全自动尿沉渣分析仪的发展现状3全自动尿沉渣分析仪的意义1研究背景尿沉渣检验在临床医学中是一项非常重要的项目,它是临床最为常用且信息最为丰富的项目之一,它不仅在治疗泌尿系疾病乃至对全身各系疾病的诊治都有重大价值。
近年来,随着检验医学的迅猛发展,各类尿沉渣自动化、标准化仪器不断问世,使尿沉渣标准化方面有所突破,尿沉渣自动化分析技术正在逐步推广。
自动聚焦技术被广泛应用于各个领域,如医学诊断、制造业、检验、文档分析和军事等。
自动聚焦技术具有很高的自动化和智能化,在聚焦过程中,通过计算机来识别和控制,只需要很少的人工干预,这就极大的避免了人为因素带来的影响,且效率比人工聚焦要高得多。
自动聚焦技术具有高效率,高精度,自动化程度高等优点,非常适合现代社会各行各业高度自动化的发展要求。
2全自动尿沉渣分析仪的发展现状尿沉渣就是尿液中的有形状成分。
是原尿经过离心后,形成的沉渣。
是尿液有形成分质和量的组合。
包括细胞。
管形、结晶、细菌、精子等各[8]种病理成分。
1千年前,波斯名医Ismail,已对尿液的颜色、粘稠度、透明度、尿量、臭味、泡沫及沉淀物作了观察。
显微镜发明后,Bright于1827年首次发现肾炎患者蛋白尿中出现管型,此后Bird于1854年,Purdy于1900年,进一步证明尿沉渣检查的临床价值。
Addis建立的尿沉渣物定量检查法,1948年用于肾脏疾病的病程观察。
近年来,Brody采用相差显微镜鉴别红细胞与脂肪滴等。
Haber用干涉显微镜从三个方位仔细观察沉渣成分。
Rutecki等用免疫荧光技术测定颗粒管型中的血浆蛋白。
认为部分管型的颗粒是血浆多种蛋白的聚集。
有些学者用偏光显微镜鉴别尿中结晶。
Linder等结合免疫荧光技术,酸性磷酸酶染色及扫描电镜对颗粒管型进行分型。
不少学者应用巴氏染色或Sternheimer-Malbin(SM)等染色观察尿管型、脱落细胞等。
公元前 400 年, Hippocrates 注意到发热时.尿液颜色温和味的变化。
18-19 世纪-开始显微镜下尿液检查及尿液化学分析。
1827 年, Bright,最早把尿液检验用于患者的诊断和护理。
1930-首先在滤纸上进行尿液斑点试验。
1956-美国 Ames 和 Lilly 公司几乎同时创建了尿糖试剂带。
1960-80-多项参数尿试剂带开始应用于临床。
70 年代,第一台尿液化学分析仪问世。
80 年代后,半自动---全自动尿液干化学分析仪开始逐渐应用于临床。
80 年代中后期,韩国光电转换元件 CCD(电荷耦合器件)生产出Uriscan-S300 型 11 项尿液分析仪。
1985 年国内从日本引进 MA-4210 型尿液分析仪和专用试剂带的生产技术及设备。
1990 年尿液分析仪达到全部国产化。
1992 年,尿 10 项分析仪及专用试剂带。
1994 年推出了Uritest—100 型 10 项尿液分析仪及专用试剂带。
1997 年上半年又推出了Uritest-200 型 11 项尿液分析仪及专用试剂带。
1 .按工作方式分类(1)液式尿液分析仪(2)干式尿液分析仪2 .按测试项目分类(1) 8 项尿液分析仪: MA-4210 型 (日本和国产) PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT;(2) 9 项尿液分析仪: RL-9 型(德国) PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU;(3) 10 项尿液分析仪: MIDITRON 型(德国)、 CLINITEK 200 型(美国)、 Uritest-100型(国产) PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG;(4) 11 项尿液分析仪: CLINITEK Atlas 型 (美国) 、URISCAN-S300 型 (韩国) 、Uritest-200型(国产) PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG、颜色或者维生素 C;(5) 12 项尿液分析仪: CLINITEK 500 型(美国)、 Aution MaxTM AX-4280 型(日本)、宝灵曼/罗氏公司 Urysis 2400 型, PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG、颜色和浊度。
尿沉渣分析仪发展简史一、尿沉渣分析仪发展简史1988年,美国研制生产了世界上第一台“Yollow IRlS”高速摄影机式的尿沉渣自动分析仪,简称Y—1尿自动分析仪。
这种仪器是将标本的粒子影像展示在计算机的屏幕上,由检验人员加以鉴别。
1990年,日本与美国合作,生产出影像流式细胞术的UA-1000型、UA-2000型尿沉渣自动分析仪,主要由连续高速流动位点摄影系统组成,包括闪光放电管、放大物镜、平面流动池、CCD摄影系统、影像信息处理机和阴极射线示波器等。
但由于此类尿沉渣自动分析仪对图像粒子测绘不十分满意,处理能力低、重复性差、管型分辨不清、价格较昂贵等原因而未能普及。
1995年,日本将流式细胞术和电阻抗技术结合,UF-100型全自动尿沉渣分析仪。
1996年,德国生产出SEDTRON以影像系统配合计算机技术的尿沉渣自动分析仪。
2003年,美国DiaSys R/S Corporation尿液分析系统工作站。
尿沉渣分析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析,得出相应的技术资料与实验结果;另一类是流式细胞术分析。
二、流式细胞术尿沉渣分析仪1995年,日本将流式细胞术和电阻抗技术结合,UF-100型全自动尿沉渣分析仪。
1. 工作原理应用流式细胞和电阻抗的原理。
当一个尿液标本被稀释并经染色液染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。
当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光光束照射。
每个细胞有不同程度的荧光强度(fluorescent light intensity,FI,从染色尿液细胞发出的荧光,主要反映细胞的定量特性,如细胞膜、核膜、线粒体和核酸)、前向散射光强度(forward scattered linght intensity,Fsc,它成比例反映细胞的大小)和电阻抗的大小(电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比)。
UF—500i全自动尿沉渣分析仪在尿液有形成分检测中的应用目的观察全自动尿沉渣分析仪在尿液有形成分检测中的应用效果。
方法尿液标本来自本院2009年1月~2011年12月的400例门诊患者,将收集的每一位患者的尿液标本平均分为2份,分别通过UF-500i全自动尿沉渣分析仪与显微镜进行有形成分检测,定义为全自动组与显微镜组。
选择主管检验师以上的操作人员进行操作,分别通过UF-500i全自动尿沉渣分析仪与显微镜进行标本检测,记录WBC、RBC、结晶、黏液丝、管型、类酵母菌的阳性符合率。
结果UF-500i 全自动尿沉渣分析仪检测阳性符合率与显微镜检测阳性符合率对比,差异无统计学意义(P > 0.05)。
结论全自动尿沉渣分析法具有简单、便捷、标准率高、敏感度高等优点,检测视野相当于显微镜的10倍以上,在尿沉渣的检测中具有高效性与可用性。
标签:全自动尿沉渣分析仪;尿样本检测;尿液有形成分;应用常规尿液分析是临床工作中最常用的检查项目之一,对全身特别是泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的参考价值,检查内容包括理学、化学、有形成分检查。
其中有形成分检查是核心,具有重要的临床意义。
没有尿液有形成分的检查,不能称之为完整的尿常规检查。
因此尿液有形成分的检查可作为肾脏疾病及尿路疾病的诊断依据,尤其是肾脏病变[1]。
UF-500i全自动尿沉渣分析仪由于速度快、重复性好,省去了繁琐的离心镜检工作,故被广泛应用于检验科中。
UF-500i尿沉渣分析仪采用的是流式细胞术和电阻抗的原理,对尿液中的有形成分进行自动计数。
临床上检测准确率高,标准化的尿液有形成分检查方法为显微镜有形成分检测法。
目前,医院检验科尿常规工作量不断增长,各种自动化仪器方法越来越多地被采用。
本院也引进了全自动尿沉渣分析仪进行尿样本检测[2-3],其检测准确率与显微镜差异不明显。
具有明显的可用性与高效性。
现报道如下:1 资料与方法1.1 一般资料尿液标本来自本院2009年1月~2011年12月的400例门诊患者。
一、尿液分析仪发展简史公元前400年, Hippocrates注意到发热时.尿液颜色和气味的变化.18-19世纪-开始显微镜下尿液检查及尿液化学分析.1827年,Bright,最早把尿液检验用于患者的诊断和护理.1930-首先在滤纸上进行尿液斑点试验.1956-美国Ames和Lilly公司几乎同时创建了尿糖试剂带.1960-80-多项参数尿试剂带开始应用于临床.70年代,第一台尿液化学分析仪问世.80年代后,半自动---全自动尿液干化学分析仪开始逐渐应用于临床.80年代中后期,韩国光电转换元件CCD(电荷耦合器件)生产出Uriscan-S300型11项尿液分析仪.1985年国内从日本引进MA-4210型尿液分析仪和专用试剂带的生产技术及设备.1990年尿液分析仪达到全部国产化.1992年,尿10项分析仪及专用试剂带.1994年推出了Uritest—100型10项尿液分析仪及专用试剂带.1997年上半年又推出了Uritest-200型11项尿液分析仪及专用试剂带.二、尿液分析仪分类1.按工作方式分类(1)液式尿液分析仪(2)干式尿液分析仪2.按测试项目分类(1)8项尿液分析仪:MA-4210型(日本和国产)PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT;(2)9项尿液分析仪:RL-9型(德国)PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU;(3)10项尿液分析仪:MIDITRON型(德国)、CLINITEK 200型(美国)、Uritest-100型(国产) PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG;(4)11项尿液分析仪:CLINITEK Atlas型(美国)、URISCAN-S300型(韩国)、Uritest-200型(国产)PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG、颜色或维生素C;(5)12项尿液分析仪:CLINITEK 500型(美国)、Aution MaxTM AX-4280型(日本)、宝灵曼/罗氏公司Urysis 2400型,PRO、GLU、PH、KET、BIL、UBG、ERY、NIT、LEU、BG、颜色和浊度.3.按自动化程度分类(1)半自动尿液分析仪:MIDITRON型(德国)、CLINITEK 200型(美国)、URISCAN-S300型(韩国)、Uritest-200型(国产)、Uritest-100型(国产)包括尿8项、尿9项、尿10项、尿11项.(2)全自动尿液分析仪:SUPERTRON型(德国)、CLINITEK Atlas型、(美国)、Aution MaxTM AX-4280型(日本)、宝灵曼/罗氏公司Urysis 2400型,包括尿10项、尿11项、尿12项.三、工作原理1.试剂带(1)结构:第一层尼龙膜:起保护作用,防止大分子物质对反应的污染.第二层绒制层:它包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏维生素C等干扰物质,试剂层含有试剂成分,主要与尿液中所测定物质发生化学反应,产生颜色变化.第三层吸水层:可使尿液均匀快速地浸入,并能抑制尿液流到相临反应区.第四层:尿液不浸润的塑料片作为支持体.(2)试剂带的反应原理1)pH测定:采用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂,pH4.5- pH 9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色.2)尿蛋白质测定:利用pH指示剂蛋白质误差的原理.参比方法:磺基水杨酸法.3)尿葡萄糖测定:A葡萄糖氧化酶法.B铜还原法4)尿酮体测定:亚硝基铁氰化钠法5)尿隐血测定:利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用,能催化过氧化氢释放出新生态氧,使色原氧化而显色、其颜色深浅与血红蛋白含量有关.6)尿胆红素测定:采用重氮反应法原理.7)尿胆原测定:采用Ehrlich重氮反应法原理.8)尿亚硝酸盐测定:是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐的特性.颜色变化与细菌数量成比例,阳性结果表明尿中细菌数量在105/ml.9)尿白细胞测定:利用中性粒细胞的脂酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸,吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理;或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色,颜色深浅与粒细胞量的多少有关.10)尿比密测定:基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa测定比密.参比方法:折射仪法.11)尿维生素C测定:采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维生素C反应,形成钼蓝,颜色深浅与尿中维生素C含量有关.(3)试剂带的应用不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带.另外多一个空白块和一个参考块.2.测量原理把试剂带浸入尿液后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色变化.试剂块的颜色深浅与光的反射率成比例关系,而颜色的深浅又与尿液中个种成分的浓度成比例关系.只要测得光的反射率即可求得尿液中各种成分的浓度.一般采用微电脑控制,采用球面积分仪接受双波长反射光的方式测定试剂带上的颜色变化进行半定量测定.测定波长是被测试剂块的敏感特征波长,另一种为参比波长,被测试剂块的不敏感波长,用于消除背景光和其他杂散光的影响.R试纸= Tm(试纸块对测量波长的反射强度)/Ts(试纸块对参考波长的反射强度)×100%R空白= Cm(空白块对测量波长的反射强度)/Cs(空白块对参考波长的反射强度)×100%R总= R试纸/ R空白= Tm Cs/ Ts Cm×100%四、仪器的结构与组成1.机械系统传送装置、采样装置、加样装置、测量测试装置.2.光学系统光源、单色处理、光电转换.光线照射到反应区表面产生反射光,反射光的强度与各个项目的反应颜色成正比.不同强度的反射光再经光电转换器件转换为电信号进行处理.MA-4210型(日本)和Uritest-100/200(国产)尿液分析仪,采用光源灯(卤灯)发出的白光通过球面积分仪的通光筒照射到试剂带上,试剂带把光反射到球面积分仪中透过滤色片,得到特定波长的单色光,照射到光电二极管上,实现光电转换.MIDITRON型尿液分析仪,采用了可发射特定波长的发光二极管(LED)作为检测光源,各检测头上都有三个不同波长的光电二极管,对应于试剂带上特定的检测项目分别为红、橙、绿单色(660nm、620nm、555nm),它们相对于检测面以60°照射在反应区上.作为光电转换器件的光电二极管垂直安装在反应区的上方,在检测光照射的同时接收反射光.由于距反应区近,不需要光路进行传导,所以无信号衰减,这使得光强度较小的光电二极管照射也能得到较强的光信号.CLINTEK200型尿液分析仪,以高亮度的卤钨灯为光源,经光导纤维传导到两个检测头.每个检测头有11个检测位置,入射光以45°角照射在反应区上.在反应区的正上方也固定有一组光纤,反射光被传导至滤光片分光(510~690nm分为10波长),单色化之后的光信号再经光电二极管转换为电信号.URISCAN—S300型尿液分析仪,采用了目前比较尖端的光学元件CCD技术进行光电转换.它是把反射光分解为红绿蓝(RGB:610nm、540nm、460 nm)三原色,又将三原色中的每一种,颜色分为2592色素,这样整个反射光分为7776色素,可精确分辨颜色由浅到深的各种微小变化.CCD器件具有良好的光电转换特性,从可见光到近红外光.通常采用高压氙灯作光源,特点是发光光谱接近日光;放电通路窄,可形成线状光源或点光源;发光效率高.3.电路系统光电检测器将试剂带所反射的光信号的强弱转换成电信号的大小,送往前置放大器进行放大, 然后将电信号送往电压/频率变换器,将送来的模拟信号的大小转换成数字信号的多少后,送往计数电路予以计数.计数后的信号送给CPU单元.CPU将信号运算、处理后送往仪器的内置热敏打印机,由打印机将测试结果打印出来.五、使用方法参照仪器说明书.六、维护保养1.调校:新仪器安装后,或每次大维修之后:①首先应该对尿液分析仪进行校正,校正的目的是让仪器进入厂商规定的状态.尿液分析只有在校正通过时才能进行实验,否则要停机.②应该对尿液分析仪及试剂带的准确度进行评价.③用传统的方法与尿液分析仪测定作对比分析,对尿液分析仪的敏感性和特异性进行评价.④了解该仪器对每项测试指标的测试范围,并建立该仪器的正常人的参考值范围.2.注意事项(1)保持仪器的清洁,才能维持良好的运行.(2)保证使用干净的取样杯.(3)使用新鲜的混匀尿液,标本留取后,一般检查不超过2h.(4)不同类型的尿液分析仪使用不同的尿试带,在试带从冷藏温度变成室温时,不要打开盛装试剂带的瓶盖.每次取用后应立即盖上瓶盖,防止试剂带受潮变质.(5)试剂带浸入尿样的时间为2s,试剂带过多的尿液标本应用滤纸吸走,所有试剂块包括空白块在内都要全部浸入尿液中.(6)仪器使用最佳温度应在20℃一25℃室温,尿液标本和试剂带最好也维持在这个温度范围内.(7)在观看仪器测试结果时,由于各类尿液分析仪设计的结果档次差异较大,不能单独以符号代码结果来解释,要结合半定量值进行分析,以免因定性结果的报告方式不够妥当给临床解释带来混乱.3.维护与保养(1)尿液分析仪日常维护在常规工作中必须严格按一定的操作规程进行操作,否则会因使用不当影响实验结果.①操作尿液分析仪之前,应仔细阅读分析仪说明书及尿试剂带说明书;每台尿液分析仪应建立操作程序,并按其进行操作.②对尿液分析仪要有专人负责,建立专用的仪器登记本,对每天仪器操作的情况、出现的问题,以及维护、维修情况逐项登记.③每天测定开机前,要对仪器进行全面检查(各种装置及废液装置、打印纸情况,以及仪器是否需要校正等),确认无误时才能开机.测定完毕,要对仪器进行全面清理、保养.④开瓶但未使用的尿试剂带,应立即收入瓶内盖好瓶盖.(2)尿液分析仪的保养①每日保养:每日用完应清除干净,并用水清洗干净.②每周或每月保养:各类尿液分析仪的每周或每月保养,要根据仪器的具体情况而定.4.尿液分析仪的常见故障仪器的故障分为必然性故障和偶然性故障.必然性故障是各种元器件、零部件经长期使用后,性能和结构发生老化,导致仪器无法进行正常的工作;偶然性故障是指各种元器件、结构等因受外界条件的影响,出现突发性质变,而使仪器不能进行正常的工作.尿液分析仪出现故障的原因分为以下几类.(1)人为引起的故障这类故障是由于操作不当引起的,一般多由操作人员对使用程序不熟练或不注意所造成的.故障轻者导致仪器不能正常工作,重者可能损害仪器.因此在操作使用前,必须熟读用户使用说明书,了解正确的使用操作步骤,慎重行事才能减少这类故障的产生.(2)器设备质量缺陷引起的故障这类故障是指仪器元器件质量不好、设计不合理、装配工艺上因疏忽造成的故障.(3)长期使用后的故障这类故障与元器件使用寿命有关,因各种元器件衰老所致,所以是必然性故障,如光电器件、显示器的老化,传送机械系统的逐渐磨损,等等.(4)外因所致的故障这类故障是由仪器设备的使用环境条件不符合要求所引起的,常常是造成仪器故障的主要原因.一般指的是电压、温度、电场、磁场及振动等.。
尿沉渣分析仪发展简史发布时间:2007-11-1 浏览次数:865 次一、尿沉渣分析仪发展简史1988年,美国研制生产了世界上第一台“Yollow IRlS”高速摄影机式的尿沉渣自动分析仪,简称Y—1尿自动分析仪。
这种仪器是将标本的粒子影像展示在计算机的屏幕上,由检验人员加以鉴别。
1990年,日本与美国合作,生产出影像流式细胞术的UA-1000型、UA-2000型尿沉渣自动分析仪,主要由连续高速流动位点摄影系统组成,包括闪光放电管、放大物镜、平面流动池、CCD摄影系统、影像信息处理机和阴极射线示波器等。
但由于此类尿沉渣自动分析仪对图像粒子测绘不十分满意,处理能力低、重复性差、管型分辨不清、价格较昂贵等原因而未能普及。
1995年,日本将流式细胞术和电阻抗技术结合,UF-100型全自动尿沉渣分析仪。
1996年,德国生产出SEDTRON以影像系统配合计算机技术的尿沉渣自动分析仪。
2003年,美国DiaSys R/S Corporation尿液分析系统工作站。
尿沉渣分析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析,得出相应的技术资料与实验结果;另一类是流式细胞术分析。
二、流式细胞术尿沉渣分析仪1995年,日本将流式细胞术和电阻抗技术结合,UF-100型全自动尿沉渣分析仪。
1. 工作原理应用流式细胞和电阻抗的原理。
当一个尿液标本被稀释并经染色液染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。
当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光光束照射。
每个细胞有不同程度的荧光强度(fluorescent light intensity,FI,从染色尿液细胞发出的荧光,主要反映细胞的定量特性,如细胞膜、核膜、线粒体和核酸)、前向散射光强度(forward scattered linght intensity,Fsc,它成比例反映细胞的大小)和电阻抗的大小(电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比)。
仪器正是将这种荧光、散射光等光信号转变成电信号,并对各种信号进行分析,最后得到每个尿液标本产生出的直方图(histogram)和散射图(scattergram)。
通过分析这些图形,即可区分每个细胞并得出有关细胞的形态。
仪器通过对前向散射光波形、前向荧光波形和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的信息并绘出直方图和散射图。
仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其进行分类。
前向散射光信号主要反映细胞体积的大小,前向荧光信号主要反映细胞核的大小。
2. 仪器结构包括光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统和电子系统。
(1)光学系统:光学系统由氩激光(波长488nm)、激光反射系统、流动池、前向光采集器和前向光检测器组成。
样品流到流动池,每个细胞被激光光束照射,产生前向散射光和前向荧光的光信号。
散射光信号被光电二极管转变成电信号,被输送给微处理器。
仪器可以从散射光的强度得出测定细胞大小的资料。
荧光通过滤光片滤过一定波长的荧光后,输送到光电倍增管,将光信号放大再转变成电信号,然后输送到微处理器。
UF—100型全自动尿沉渣分析仪使用两种荧光染料。
一种为菲啶染料,主要染细胞的核酸成分(DNA),用于区别有核的细胞和无核的细胞(如白细胞与红细胞、病理管型与透明管型的区别)。
另一种为羧花氰染料,主要用于区别细胞的大小(如上皮细胞与白细胞的区别)。
(2)液压(鞘液流动)系统:反应池染色标本随着真空作用吸入到鞘液流动池。
为了使尿液细胞进入流动池不凝固成团,而是一个一个地通过加压的鞘液输送到流动池。
鞘液形成一股液涡流,使染色的样品通过流动池的中央排成单个的纵列。
这两种液体不相混合,这就保证尿液细胞永远在鞘液中心通过。
鞘液流动机制提高了细胞计数的准确性和重复性。
(3)电阻抗检测系统:电阻抗检测系统包括测定细胞体积的电阻抗系统和测定尿液导电率的传导系统。
电阻抗测定的方法是,当尿液细胞通过流动池(流动池前后有两个电极维持恒定的电流)小孔时,在电极之间产生的阻抗使电压发生变化。
尿液细胞通过小孔时,细胞和稀释液之间存在着较大的传导性或阻抗的差异,阻抗的增加引起电压之间的变化,它与阻抗改变成正比例。
如果在电极之间输出固定电流I,则电压V和电阻R同时变化。
即当细胞有较大阻抗通过小孔时,电压也增大。
由于电压的不同主要依赖细胞的体积,所以细胞体积和细胞数量资料可从以电压这个脉冲信号中获得。
部分尿液标本可在低温时含有某些结晶,影响电阻抗测定的敏感性,引起不准确的分析结果。
为了保证尿液标本传导性稳定,采用下列措施:①用URINOPACK 稀释液稀释尿液标本,由于稀释液中含有EDTA盐化合物,可除去尿中所含的非晶型磷酸盐结晶;②尿液标本在染色过程中仪器将尿液和稀释液混合液加热到35℃,加热可以溶解尿标本中的尿酸盐结晶,除去尿中结晶在电阻抗测定时引起的误差。
电阻抗检测系统的另一功能是测量尿液的导电率:测定导电率采用电极法。
样品进入流动池之前,在样品两侧各个传导性感受器接收尿液样品中的导电率电信号,并将电信号放大直接送到微处理器。
这种传导性与临床使用的尿渗量密切相关。
(4)电子系统:从样品细胞中获得的前向散射光较强,光电二极管能够直接将光信号转变电信号。
从样品细胞中得到的前向荧光很弱,需要使用极敏感的光电倍增管。
将放大的前向荧光转变成电信号。
从样品中得到的电阻抗信号和传导性信号,被感受器接收后直接放大输送给微处理器。
所有这些电信号通过波形处理器整理,再输给微处理器汇总,得出每种细胞的直方图和散射图,通过计算得出每微升各种细胞数量和细胞形态。
3. 性能特点UF-100型全自动尿沉渣分析仪采集标本体积大约9ml,自动进样模式所需最少,标本体积为4ml,实际吸取标本体积为0.8ml,检测标本体积为9.0l,相当于显微镜检测50个高倍视野。
每小时可检测100个尿液标本,检测总粒子范围为0.0~40,000个。
(1)红细胞(RBC)红细胞出现在第一和第二个散射图的左角。
由于红细胞在尿液中直径大约是8.0m,没有细胞核和线粒体,所以荧光强度(FI)很弱。
红细胞在尿液标本中大小不均,且部分溶解成小红细胞碎片,因此红细胞前向散射光强度(Fsc)差异较大。
一般来看,F1几乎极低和Fsc大小不等都可为红细胞。
红细胞的分析指标如下:①每微升尿的红细胞数;②每高倍视野的平均红细胞数;③均一性红细胞(1somorphic RBC)的百分比;④非均一性红细胞(Dysmorphic RBC)的百分比;⑤非溶血性红细胞的数量(Non-Lysed RBC#)和百分比(Non-Lysed RBC%);⑥平均红细胞前向荧光强度(RBC-MFl);⑦平均红细胞前向散射光强度(RBC-MFsc);⑧红细胞荧光强度分布宽度(RBC-FI-DWSD)。
(2)白细胞白细胞比红细胞稍大,前向散射光强度也比红细胞稍大一些,但白细胞含有细胞核而红细胞无细胞核,因此它有高强度的前向荧光,能将白细胞与红细胞区别开来,白细胞出现在散射图的正中央。
当白细胞存活时,白细胞会呈现前向散射光强和前向荧光弱;当白细胞受损害或死亡时,会呈现前向散射光弱和前向荧光强的变化。
①每微升的白细胞;②每高倍视野的平均细胞数;③白细胞的平均白细胞前向散射光强度(WBC-MFL)。
(3)上皮细胞(EC)上皮细胞体积大,散射光强,且都含有细胞核、线粒体等,荧光强度也比较强。
大的鳞状上皮细胞和移行上皮细胞分布在第二个散射图的右角。
①上皮细胞数量;②每微升小圆上皮细胞数。
它包括肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞。
这类细胞的细胞数到达一定浓度时,还须通过离心染色镜检才能得出准确的结果。
(4)管型只能检测出透明管型和标出有病理管型的存在。
透明管型由于管型体积大和无内含物,有极高的前向散射光脉冲宽度和微弱的荧光脉冲宽度,出现在第二个散射图的中下区域。
而病理性管型(包括细胞管型)有极高的前向散射光脉冲宽度和荧光脉冲宽度,出现在第二个散射图的中上区域。
当仪器标明有病理性管型时,只有通过离心镜检,才能确认是哪一类管型。
(5)细菌细菌由于体积小并含有DNA和RNA,所以前向散射光强度要比红、白细胞弱,但荧光强度要比红细胞强,又比白细胞弱,因此细菌分布在第一个散射图红细胞和白细胞之间的下方区域。
(6)其他检测标记出酵母细胞(YLC)、精子细胞(SPERM)、结晶(X’TAL),并能够给出定量值。
酵母细胞和精子细胞由于含有RNA和DNA,荧光强度很高,繁殖过程中的酵母细胞和精原细胞荧光强度更强,这些细胞散射光强度与红、白细胞差不多,所以酵母细胞散射图分布在红、白细胞之间的区域。
由于酵母细胞的前向散射光脉冲宽度小于精子细胞的前向散射光脉冲宽度,根据前向散射光脉冲宽度,可将酵母细胞和精子细胞区别开来。
但在低浓度时,精子细胞与酵母细胞区分有一定的难度。
在高浓度时,部分酵母细胞对红细胞计数有交叉作用。
结晶出现在散射图红细胞区域,由于结晶的多样性,所以其散射光强度分布很宽,尿酸盐依靠自己的荧光,其分布区域和红细胞重叠在一起,因结晶的中心分布不稳定,所以它和红细胞能够被区分开。
当尿酸盐浓度增多时,部分结晶会对红细胞计数产生影响。
因此,当仪器对酵母细胞、精子细胞和结晶有标记时,都应离心镜检,才能真正区分。
(7)导电率的测定导电率与渗量有密切的关系。
导电率代表溶液中溶质的质点电荷,与质点的种类、大小无关;而渗量代表溶液中溶质的质点(渗透活力粒子)数量,与质点的种类、大小及所带的电荷无关,所以导电率与渗量又有差异。
如溶液中含有葡萄糖时,由于葡萄糖是无机物,没有电荷,与导电无关,但与渗量有关。