实验三 果蔬中维生素C的定量测定

果蔬维生素C含量测定原理：还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。

还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸，在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。

试剂配制：(1)2％草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000ml(2)0.2 mg/ml抗坏血酸标准溶液：准确称取10 mg抗坏血酸，溶于2％草酸溶液中，定容到50 ml容量瓶中，置冰箱中保存。

(3)2，6-二氯靛酚溶液：称取50 mg2，6-二氯靛酚钠盐，溶于50 ml热水中，冷却后用蒸馏水定容至250 ml容量瓶中。

过滤后，置于棕色药瓶中保存在冰箱内。

步骤1.标准抗坏血酸溶液的标定吸取标准抗坏血酸溶液2 ml，加入5 ml20 g/L的草酸溶液，以2，6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色即为终点。

用同时刚配好的V C标准溶液标定，记录每ml 2，6-二氯靛酚溶液相当于V C的毫克数（mg/ml）。

2.样品的准备及滴定取样品匀浆10.0 g，加入90 ml 2％草酸溶液，定容至100 ml，过滤备用。

用标定过的2，6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色为止，记下染料的用量，重复三遍。

3.维生素C含量计算W=（V0-V1）A*100/MW为100g鲜样样品中含抗坏血酸的毫克数V0为滴定样品所用的染料的ml数。

V1为空白样品所用的染料的ml数。

A为1ml染料溶液相当于维生素C的毫克数（mg/ml）。

M为取样量即样品克数。

第三法2,6-二氯靛酚滴定法17 原理用蓝色的碱性染料2,6-二氯靛酚标准溶液对含L(+)-抗坏血酸的试样酸性浸出液进行氧化还原滴定,2,6-二氯靛酚被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的2,6-二氯靛酚在酸性介质中显浅红色,由2,6-二氯靛酚的消耗量计算样品中L(+)-抗坏血酸的含量。

果蔬中维生素C的测定
维生素C（抗坏血酸）是一种重要的水溶性维生素，可以在多种果蔬中找到。

以下是一种常见的方法来测定果蔬中的维生素
C含量：
1. 准备样品：将所需的果蔬样品洗净，去除外皮、种子和纤维，然后将其切碎成小块。

2. 提取维生素C：将切碎的果蔬样品加入足够的去离子水中，使用搅拌器将其搅拌均匀。

然后使用滤纸或离心机将提取液分离出来。

3. 准备标准曲线：制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液，可以使用市售的维生素C标准品。

标准溶液的浓度应该涵盖
预期测定样品中的维生素C范围。

4. 进行反应：将提取液和维生素C标准溶液分别加入试剂中，常见的试剂是重铬酸钾溶液。

经过一段时间的反应，产生颜色变化。

5. 反应色彩测定：使用分光光度计或相关仪器，对样品和标准溶液中的颜色进行测定。

维生素C的浓度与测定的吸光度或
测得的颜色深浅有关。

6. 计算维生素C含量：使用标准曲线得出的吸光度与维生素
C标准溶液的浓度的关系，计算样品中的维生素C含量。

实验果蔬中维生素C含量的测定
学院/专业/班级：______________________________ 姓名：
合作者：________________ 实验日期______年__月__日教师评定：______________ 【实验目的】
【实验原理】
【仪器及试剂】
【简单实验步骤】
【数据记录及处理】
Vc质量： g ；西红柿质量： g ；橙子质量： g
实验中你与合作者配制的公用试液有（详细记录称取量及配制过程）：
（1）分光光度法：标准曲线及待测样品吸光度的测定
表1. 标准系列及待测果蔬吸光度的测定
以Vc含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线：
图1. 标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）
计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg/100g表示）
（2）荧光法：标准曲线及待测样品荧光光度的测定
表2. 标准系列及待测果蔬荧光强度的测定
图2. 标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）
计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg/100g表示）
【实验评价及问题讨论】。

水果和蔬菜中维生素C含量的测定实验18 水果和蔬菜中维生素C含量的测定一、目的学会测定果蔬中Vitc含量的方法。

二、材料、用具及仪器药品1(材料，各种蔬菜或水果2(用具及仪器、研钵或捣碎机。

100ml锥形瓶、50ml容量瓶，10ml移液管，5ml移液管，100ml量筒，微量滴定管，漏斗、滤纸，电子天平3(试剂(1)2%草酸溶液:草酸2g，溶于100ml蒸馏水(2)1%草酸溶液:溶1g草酸于100ml蒸馏水。

(3)标准抗坏血酸溶液:准确称取50.mg纯抗坏血酸，溶于是1%草酸溶液，并稀释至500ml。

贮棕色瓶，冷藏，最好临用时配制。

(4)2.6-二氯酚靛酚钠溶液:溶31mg2.6-二氯酚靛酚在300ml热水中，冷却后加水稀释至500ml，滤去不溶物，贮在棕色瓶内，冷藏(大约可保存一星期)。

每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。

三、原理果蔬中含有维生素C(又称抗坏血酸)，维生素C能还原染料2.6-二氯酚靛酚钠(蓝色)为还原型2.6-二氯酚靛酚钠(无色)。

因此，可用2.6-二氯酚靛酚钠滴定样品中的维生素C，根据滴定时所用去染料数，计算出样品中的维生素C含量。

滴定终点的判定是以被滴定溶液在一定时间范围内显现的粉红色不褪色为准，这是由于2 .6——二氯酚靛酚钠具有在酸性溶液中显粉红色，而在中性或碱性溶液中呈蓝色的特性。

四、方法步骤1、提取:用水洗净新鲜白菜叶柄，用纱面或吸水纸吸干表面水份，然后称取10.0g，加2%草酸20ml，置于组织搅碎机中打成浆状或用研钵研匀浆。

倒入100ml 容量瓶中以2%草酸溶液稀释至刻度，静置10分钟，过滤滤液备用。

2、滴定(1)(标准液滴定:准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml(含0.1抗坏血酸)置100ml 锥形瓶中，加9ml%草酸，微量滴定管以2.6-二氯酚靛酚钠滴定至淡红色，并保持15秒即为终点。

由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸。

(最好做两份)2(样液滴定:准确吸取滤液两份10.0ml分别放入100ml锥形瓶内，滴定方法同前。

实验三维生素C的定量测定一、研究背景维生素C的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。

另外，坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。

富含维生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素C含量都不少。

美国专家认为，每人每天维生素C的最佳用量应为200～300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大约一百毫升）新鲜橙汁便可满足这个最低量。

而中国营养学会建议的膳食参考摄入量（RNI），成年人为100mg/日，可耐受最高摄入量（UL）为1000mg/日。

维生素C 在维持身体健康方面很重要，因此有必要建立合理的定量测量维生素C的方法，本实验所采用的2,6-二氯酚靛酚钠滴定法就是其中一种。

二、实验原理维生素C具有很强的还原性，在中性和微酸性环境中能将染料2,6-二氯酚靛酚还原为无色的还原型2,6-二氯酚靛酚，同时自身氧化为脱氢抗坏血酸。

由于氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中显红色，在中性或碱性溶液中成蓝色，所以用2,6-二氯酚靛酚滴定维生素C的酸性溶液，滴下的2,6-二氯酚靛酚与维生素C迅速反应呈无色，当维生素C全部反应，滴下的染料使溶液呈现粉红色，此时即为滴定终点。

于是可以依据标准2,6-二氯酚靛酚的消耗量求出维生素C的含量。

三、仪器与试剂1、仪器（1）离心机：上海安亭科学仪器厂飞鸽牌系列，Anke 7DL-40B（2）架盘天平：北京天平物华医疗器械有限公司（3）平衡天平2、试剂（1）2%草酸溶液（2）0.2mg/ml的标准抗坏血酸溶液（3）2,6-二氯酚靛酚钠溶液3、实验材料2g桔皮和10g桔肉四、实验步骤1.样品的处理和提取2.空白测定取2%草酸10ml ，放入50ml 三角瓶中，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至三角瓶内溶液呈粉红色，15秒内不褪色为终点，记录所用滴定液体积，重复三次取平均值。

3.标定2,6-二氯酚靛酚钠溶液取2ml 标准抗坏血酸溶液加8ml2%草酸溶液，置于50ml 三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至终点，记录所消耗2,6-二氯酚靛酚钠溶液的量，重复三次取平均值。

果蔬中维生素c含量的测定方法探究一、实验目的1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。

2.了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。

二、实验原理维生素c又名抗坏血酸( ascorbic acid), 是一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物, 具有很强的还原性。

它影响胶元蛋白的形成，并且有解毒作用,它参与体内的氧化还原反应, 多种羟化反应, 有防止贫血的作用, 可改善变态反应, 刺激免疫系统, 是人体不可缺少的物质。

它广泛存在与水果和蔬菜中。

人体不能自身制造Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。

缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。

因此, 了解各种果蔬中维生素c含量是很有必要的。

维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。

分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基，因而可用I2标准溶液直接测定。

C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI使用淀粉作为指示剂，用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、蔬菜、水果中维生素C的含量。

由于Vc的还原性很强，较容易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。

考虑到I -在强酸性中也易被氧化，故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。

三、实验仪器及药品材料：新鲜苹果、西瓜、西红柿。

仪器：烧杯多个、量筒、玻璃棒、布氏漏斗、真空泵、台秤、滴管、容量瓶多个（250mL）、酸式滴定管、酒精灯研钵，离心机，滤纸，锥形瓶等药品：碘液滴定法溶液配制( 1) 0.02mol /L碘溶液: K I10g溶于蒸馏水中, 配成K I溶液, 取1.27 ~ 1.30g 碘, 加入到K I溶液中, 待碘完全溶解后, 加水定容到250m ,l 置于棕色瓶中。

( 2) V c溶液: V c片剂( 100mg /片) 研碎, 加水10~ 15m,l 置与锥形瓶中, 现配现用。

( 3) 2% 可溶性淀粉溶液: 可溶性淀粉2g 加水100m,l 煮沸, 冷却待用。

实验名称：蔬菜水果中Vc含量的测定实验报告撰写人：Tang Chen注：本实验报告仅供参考，不得抄袭。

非作者允许禁止私自转载，违者将追究法律责任。

一、实验目的1、进一步学习样品的预处理方法2、学会碘量法测定物质含量的方法及其应用3、熟练掌握滴定基本操作技能和查阅资料的能力二、实验原理Vc具有很强还原性，能将碘还原成碘离子。

碘与淀粉变蓝色，而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色；因此，在含有Vc的溶液中，加入淀粉溶液，就可以用碘溶液来滴定被检测样品中的维生素C。

记录滴定用去的碘溶液量，再根据已知的每毫升碘溶液可以与多少毫克的Vc发生反应，就可以计算出被检测样品的维生素C含量。

由于Vc的强还原性，在空气的易被氧化，特别是在碱性介质中更易被氧化，故测定时须加入少量稀HCl或稀CH3COOH使溶液呈弱酸性，以减少副反应的发生。

三、仪器与药品桔子、酸式滴定管（50mL）、锥形瓶、量筒、食物粉碎机、烧杯、0.02mol/L碘溶液、盐酸（质量分数2%）、可溶性淀粉溶液（质量分数2%）、蒸馏水、Vc药片（100mg/片）四、实验步骤1、制备果蔬提取液①制取50g水果，放入食物粉碎机中，再加入50mL蒸馏水，然后进行粉碎。

②向锥形瓶中加入2mL淀粉溶液，然后滴加盐酸，将pH调至32、滴定果蔬组织提取液①将一片维生素C药片溶解在25mL蒸馏水中②用碘溶液滴定维生素C药片溶液与果蔬组织提取液，滴定过程中，边滴定边晃动锥形瓶，直到提取液呈现蓝色，并在0.5min内不褪色。

重复滴定两次，记录每次滴定的初读数和末读数。

最后，计算出两次滴定所用去碘溶液的平均值五、实验结果数据处理果蔬组织中的维生素C含量计算公式：Vc含量=（V2/V）·aa=100mg1 2 3 平均值桔子/30g 2.90 3.40 3.35 3.22Vc片29.12 28.96 29.21 29.10Vc的含量mg/50g桔子/30g 18.45。

果蔬中维生素C含量的测定维生素C 又名抗坏血酸, 是维持机体正常生理功能的重要维生素之一, 而人体不能自身合成, 只能从食物和药物中摄取, 因此, 食品、药物中维生素C的分析具有重要意义。

蔬菜水果中维生素C（抗坏血酸）含量的测定方法有很多，常用的方法有荧光比色法、光度比色法、电化学法、滴定法、酶法、色谱法等。

辣椒中的维生素C的含量较高，有些品种理论值可高达198mg/100g，橙子中维生素C的含量也达70 mg/100g，西红柿中维生素C的含量也约20 mg/100g，但品种不同差别较大。

本实验利用荧光法和固蓝盐B比色法分别测定西红柿和橙子中维生素C的含量。

固蓝盐B比色法是利用在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物，可在其最大吸收波长（420nm）处测定吸光度，与标准系列比较定量。

荧光比色法是基于维生素C 被氧化剂如活性炭或Cu2+氧化为脱氢抗坏血酸（DHAA），DHAA 进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用, 通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。

本实验选取Cu2+做氧化剂，该法样品处理简单、快速, 体系的稳定性好。

2% 乙酸的配制：量取20.0mL冰醋酸，加水稀释至1000mL。

西红柿样品处理：准确称取80g 左右西红柿，剪碎放入榨汁机中（榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸），搅成匀浆，用布氏漏斗抽滤，滤液转移到250mL棕色容量瓶，用蒸馏水定容。

橙子样品处理：将橙子去皮和籽后，准确称取50g左右，剪碎放入榨汁机中（榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸），搅成匀浆，匀浆液转移到250mL棕色容量瓶定容。

定容液用漏斗过滤，干滤法（漏斗、滤纸承接烧杯干燥）,注意每次过滤前摇匀容量瓶溶液再过滤，过滤滤液约60mL左右备用。

Vc储备液配制：准确称取0.2g左右维生素C溶解于蒸馏水中，并转移到100mL棕色容量瓶里，定容，放在暗处保存。