实验一细菌的形态学检查

实验一普通光学显微镜的使用和细菌形态观察一、实验目的1．了解普通光学显微镜的构造和原理。

2．学习并掌握普通光学显微镜——油镜的使用方法。

3．利用油镜观察细菌的形态和构造。

二、实验原理微生物学研究用的普通光学显微镜通常有低倍物镜（16mm，10×）高倍物镜（4mm，40-45×）和油镜（1.8mm，95-100×）三种。

油镜常标有黑圈或红圈（或白圈），它是三者中放大倍数最大的。

使用油镜时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间，不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。

这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n＝1.52，与玻璃基本相同。

当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。

如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系；当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样视野的照明度就减低了（图Ⅰ-1）。

图Ⅰ-1油镜的原理图Ⅰ-2 镜口角利用油镜不但能增加照明度；更主要的是能增加数值口径。

因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。

所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积，可用下列公式表示：NA=nsinθ数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据；分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。

可分辨两点之间的最小距离=λ/2NA＝λ/2nsinθ式中λ：所用光源波长；θ：为物镜镜口角的半数，取决于物镜的直径和工作距离。

n：玻片与物镜间介质的折射率，空气（n=1.0）、水（n=1.33）、香柏油（n=1.52）、玻璃（n=1.52）等。

nSinθ：数值孔径（NA），是决定物镜性能的最重要指标。

由上述可知若n值和α角越大则NA越大或光波波长越短，则显微镜的分辨力越大（图Ⅰ-2）。

三、实验器材1．仪器：显微镜。

2．材料：标本片（大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、八叠球菌、炭菌杆菌的芽孢和荚膜、细菌三形涂片），香柏油，二甲苯，擦镜纸等。

实验一 细菌形态和结构观察，涂片制作及染色法 课程名称：兽医微生物学 实验学时： 2学时一、目的要求1．了解、熟悉油镜的使用和使用原理。

2．掌握细菌抹片的制备及美蓝和革兰氏染色方法。

3．能够识别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的染色特征。

4．熟悉细菌的基本形态学特征和特殊构造。

二、知识背景细菌个体微小，无色透明，在一般显微镜下不易识别，必须用适当的染料使其着色后，才能看到其形态、排列和结构。

某些细菌因有特殊的染色性，更可借特殊的染色方法加以鉴别。

因此染色技术是细菌鉴定中的基本技术之一。

检查微生物标本，需要使用显微镜。

比较多用的是普通光学显微镜。

根据不同要求，可使用暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜。

前几种显微镜用可见光线或紫外光线作照明光源，它们都属于光学显微镜；电子显微镜则是用电子流代替照明光源，与光学显微镜不同。

［普通光学显微镜的构造和使用］普通光学显微镜（或称生物显微镜）的构造，使用与保护方法，已在《组织学与胚胎学》教材中讲过，这里概述油镜的原理和使用要点：检查细菌标本，多用油镜进行，油镜是一种高倍放大（95-100倍）的物镜，一般都标有放大倍数（如95×；100×等）和特别标记，以便识别。

国产镜多用“油”字表示，国外产品则常用“Oil 或“HI”作记号。

油镜上还常漆有黑环或红环，而且油镜镜身比高倍镜和低倍镜长，镜片最小，这也是识别的另一个标志。

油镜头的晶片细小，进入镜中的光量也较少，其视野比用高倍镜时为暗。

当油镜头和载玻片之间为空气层所隔时，因为空气的折光指数与玻璃的不同，故有一部分光线被折射而不能进入镜头之内，使视野更暗；若在镜头与载玻片之间放上与玻璃的折光指数相似的油类，如香柏油等，使光线不致于因折射而大为损失，则可使视野充分照明，并能使操作者清楚地进行观察和检查（图l ）。

实验室中几种常用物质的折光指数 品名 玻璃 檀香油香柏油 加拿大树胶二甲苯 液体石蜡松节油甘油 水 折光指数 1.52-1.59 1.52 1.51 1.52 1.49 1.48 1.47 1.47 1.33进行油镜检查时，应先对好光线，但不可直对阳光，采取最强亮度（升高集光器，开大光圈，调好反光镜等）。

1实验内容：2显微镜油镜的使用与保护。

3细菌的形态与结构的观察。

4实验目的：5学会显微镜的使用，重点掌握油镜的使用与保护。

6进一步认识细菌的形态，明确细菌的大小与测量单位。

7熟悉细菌的特殊结构。

8实验材料：显微镜、擦镜纸、液体石蜡、消毒液、细菌的基本形态标本、细菌的特殊结构标本。

4实验方法：(1)显微镜油镜的使用与保护显微镜是一种贵重的光学仪器，而油镜又是显微镜的最精密部分，是观察细菌最重要的工具。

因此，要求大家必须熟练地掌握显微镜的使用和保护，尤其是油镜，避免损坏。

1识别油镜：95╳、100╳、HI、OeL。

2对光：自然光用平面反光镜，人工光用凹面反光镜；先用低倍镜对光，次用高倍镜。

对好光源后，染色标本将聚光器升高，光圈放开。

3、调节焦距：选一张细菌染色标本置于载物台上，用推进器固定，用低倍镜先找准物象，再用高倍镜看清物体，于标本上加镜油一滴。

⑴用眼从侧面观察，转动粗螺旋调节器，将油镜头徐徐下降浸入其中，切不可用力过猛，以免损坏油镜。

⑵用左眼从接目镜观察，徐徐向上转动粗螺旋调节器，见模糊物象后，再用细螺旋调节器，直到物象完全清晰为止。

4、显微镜的保护：⑴所有的光学部分结构都不能用手指、普通布擦拭，用过的油镜头应立即先用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭，再用干擦镜纸擦去二甲苯，以防二甲苯镜头上的固定胶，致使镜片脱落。

⑵显微镜的光学部分应避免日光直射。

避免接触强酸、强硷、氯仿、酒精。

⑶显微镜用毕，将物镜转成品字形并下降集光器和镜筒，用软布擦拭各部件后覆盖于接目镜上，双手端平送入镜箱内。

置于干燥处，以防受潮。

(二)细菌形态观察1、细菌的基本形态；球菌：肺炎球菌、脑膜炎球菌、葡萄球菌、链球菌杆菌：大肠杆菌、炭疽杆菌、结核杆菌、白喉杆菌弧菌：霍乱弧菌2、细菌的特殊结构：荚膜：肺炎球菌、产气荚膜杆菌鞭毛：水弧菌（周毛菌）一、实验内容：3细菌标本片的制备（操作）4革兰染色法（操作）二、实验目的：1进一步了解细菌特殊结构在鉴别细菌过程中的实用意义。

细菌的形态检查实验报告细菌的形态检查实验报告引言：细菌是一类微小而广泛存在于自然界中的生物体，它们在生态系统中扮演着重要的角色。

为了更好地了解细菌的形态特征，我们进行了一项细菌形态检查实验。

本报告将详细介绍实验的目的、方法、结果和讨论，希望能对细菌的形态学研究提供一定的参考。

实验目的：1. 了解细菌的形态特征，包括形状、大小和结构等；2. 掌握细菌形态检查的基本方法和技巧；3. 分析不同形态的细菌在环境适应和病原性方面的差异。

实验方法：1. 样本收集：从不同环境中采集细菌样本，包括土壤、水体和人体等；2. 样本处理：将采集到的细菌样本进行培养和纯化，获得单一细菌种类的纯培养物；3. 镜检观察：将纯培养物取一滴放在玻璃片上，加一滴透明油滴于其上，用显微镜进行观察；4. 形态测量：通过显微镜观察，测量细菌的长度、宽度和形状等参数；5. 形态分类：根据细菌形态特征，将其分为球菌、杆菌、螺旋菌等不同形态类型。

实验结果：经过实验，我们观察到了多种不同形态的细菌。

其中，球菌呈圆形或卵圆形，直径在0.5-2微米之间；杆菌呈长条状，长度在1-10微米之间；螺旋菌呈螺旋状，长度和宽度均在2-20微米之间。

此外，我们还观察到了一些特殊形态的细菌，如分枝杆菌和链球菌等。

讨论：细菌的形态特征与其在环境适应和病原性方面密切相关。

球菌通常具有较强的耐受力和适应性，能够在不同环境中生存和繁殖。

链球菌则常常是人体感染的致病菌之一，其球状结构有助于其在宿主细胞表面附着和侵袭。

杆菌则具有较高的代谢活性和生长速度，常见于土壤和水体等环境中。

螺旋菌则多分布于水体中，其螺旋形状有助于其在水中的游动。

细菌的形态特征还与其生长环境和营养需求密切相关。

例如，分枝杆菌的分枝结构有助于其吸收营养和释放代谢产物，使其能够在养分较为匮乏的环境中生存。

此外，细菌的形态特征还可用于分类和鉴定。

通过观察细菌的形态特征，可以初步确定其属于哪一类细菌，进而进行进一步的分类和鉴定。

细菌的形态学检查常用的方法
细菌的形态学检查是指通过观察细菌的形态、结构和大小来进
行分类和鉴定的方法。

常用的方法包括：
1. 显微镜观察，使用光学显微镜或电子显微镜观察细菌的形态
和结构。

通过放大细菌的形态特征，如形状、大小、细胞壁结构等
来进行分类和鉴定。

2. 染色法，常用的染色方法包括革兰氏染色、折射率染色、吉
姆萨染色等，这些染色方法可以使细菌在显微镜下更清晰地显示出
形态特征，有助于鉴定。

3. 形态培养特性，利用不同的培养基和培养条件，观察细菌在
不同环境下的生长特性和形态变化，如菌落形态、生长速度等。

4. 生化反应，通过观察细菌对不同生化试剂的反应，如碘试验、氧化酶试验等，来鉴定细菌的形态学特征。

5. 分子生物学方法，包括PCR、序列分析等技术，通过对细菌
的基因组进行分析，可以更准确地鉴定细菌的形态学特征。

综上所述，细菌的形态学检查常用的方法包括显微镜观察、染色法、形态培养特性、生化反应和分子生物学方法，这些方法可以从不同角度全面地观察和鉴定细菌的形态学特征。

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------细菌形态学检查法(一)细菌形态学检查法(一) 细菌形态学检查法（一）细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，不仅可以为后续的进一步检验提供参考依据，更重要的是可以通过细菌形态学检查迅速了解标本中有无细菌及菌量的大致情况；对少数具有典型形态特征的细菌可以作出初步诊断，为临床选用抗菌药物治疗起到重要的提示作用。

临床标本的细菌形态学检查方法主要包括染色标本和不染色标本的检查。

一、显微镜细菌体积微小，必须借助显微镜放大后才能观察。

细菌的一般形态结构可用光学显微镜观察，而细菌内部的超微结构则需用电子显微镜观察。

1．普通光学显微镜普通光学显微镜以可见光作为光源，波长 0.4～0.7m，最大分辨率 0．2m，约为波长的一半。

人肉眼能分辨的最小距离是 0．2mm，因此用油镜放大 1000 倍，0．2m 的微粒即被放大到肉眼可见的 0．2mm。

一般细菌都大于 0．m，故可用普通光学显微镜进行观察。

2．暗视野显微镜暗视野显微镜是在普通光学显微镜上装暗视野聚光器，使照明光线不直接进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，背景视野变暗，菌体发亮。

观察时黑暗的背景中可见到发亮的菌体，明暗反差提高了观察效1 / 3果，常用于不染色标本的动力及运动状况检查。

3．荧光显微镜荧光显微镜以高压汞灯作为光源，能发出280～600nm波长的光线，主要在 365～435nm 之间。

根据使用荧光素的不同选择不同波长的光线作为激发光。

因其波长比可见光短，故分辨率高于普通光学显微镜。

细菌预先经相应的荧光素处理，然后置荧光显微镜下激发荧光，在暗色背景中可见到发荧光的菌体。

用于观察细菌的结构及鉴别细菌。

细菌的形态检查实验报告
《细菌的形态检查实验报告》
在生物学实验室中，细菌的形态检查是一项重要的实验，它可以帮助科学家们
更好地了解细菌的结构和特征，从而为疾病的预防和治疗提供重要的参考依据。

在这个实验中，我们对不同类型的细菌进行了形态检查，并取得了一些有趣的
发现。

首先，我们从不同的环境样本中分离出了一些细菌，并在琼脂平板上进行了培养。

经过一段时间的培养，我们观察到了不同形态的细菌，有的呈现出球状，
有的呈现出杆状，还有的呈现出螺旋状。

这些不同形态的细菌为我们提供了很
多有价值的信息。

接下来，我们对这些细菌进行了染色处理，使用了革兰氏染色和折射染色两种
方法。

通过这些染色方法，我们可以更清晰地观察到细菌的细胞壁结构和形态
特征。

我们发现，一些细菌在革兰氏染色后呈现出紫色或蓝色，而在折射染色
后呈现出粉红色或红色。

这些染色结果为我们提供了更多的信息，帮助我们进
一步了解细菌的特性。

最后，我们利用显微镜对这些细菌进行了观察。

通过放大镜头，我们可以清晰
地看到细菌的形态特征，包括细胞壁、细胞质和细胞核等。

我们发现，不同形
态的细菌在显微镜下呈现出不同的特征，这些特征有助于我们对细菌进行分类
和鉴定。

通过这次形态检查实验，我们对细菌的形态特征有了更深入的了解。

这些了解
为我们进一步研究细菌的生物学特性和病原机制提供了重要的基础，也为我们
今后的科研工作提供了宝贵的参考。

希望通过我们的努力，能够为人类健康和
医学科研做出更大的贡献。