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pLenti-RPS27L-sgRNA产品简介：pLenti-RPS27L-sgRNA (RPS27L 基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA 和puromycin 抗性基因的质粒。
用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。
本质粒中sgRNA 的有效性已经通过T7EI 法的验证。
本质粒在细菌中为Amp 抗性，全长约13,000bp 。
本质粒的关键图谱信息请参考图1。
本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin 筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg 、Rev 及VSV-g 共转HEK293T 细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA 、Cas9和puromycin 抗性的pLenti-sgRNA 质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA 基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA 快速筛选和验证体系获得，sgRNA 的有效性已经通过T7EI 法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP 的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的RPS27L 基因敲除的质粒(L30590 pLenti-RPS27L-sgRNA)、慢病毒(L30591 RPS27L Knockout Lentivirus)、HEK293T 细胞(L30592 RPS27L Knockout HEK293T Cells)、HEK293T 敲除细胞的RIPA 裂解液(L30593 RPS27L Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T 敲除细胞的Trizol 裂解液(L30594 RPS27L Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
《丝胶靶向Akt1调控糖酵解及氧化应激保护STZ致损伤INS-1细胞》篇一一、引言糖尿病是一种全球性的慢性疾病，其发病机制复杂，与糖酵解异常和氧化应激密切相关。
INS-1细胞作为研究糖尿病的重要细胞模型，常被用于模拟胰岛β细胞的功能。
近年来，丝胶作为一种天然的生物活性物质，其抗氧化、抗炎等特性备受关注。
本研究旨在探讨丝胶靶向Akt1调控糖酵解及氧化应激保护STZ致损伤INS-1细胞的机制，为糖尿病的治疗提供新的思路。
二、材料与方法1. 材料INS-1细胞、链脲佐菌素（STZ）、丝胶、相关试剂与仪器等。
2. 方法（1）INS-1细胞培养与处理：培养INS-1细胞，用不同浓度的STZ处理细胞以建立损伤模型。
（2）丝胶处理：将丝胶加入损伤模型中，观察其对细胞的保护作用。
（3）Western blot、RT-PCR等技术检测：检测Akt1、糖酵解相关蛋白、氧化应激相关指标等表达水平。
（4）数据分析：采用GraphPad Prism软件进行数据分析，P<0.05表示差异有统计学意义。
1. 丝胶对STZ致损伤INS-1细胞的保护作用STZ处理后，INS-1细胞出现明显的损伤，表现为细胞活力降低、凋亡增加。
丝胶处理后，细胞活力得到显著恢复，凋亡率降低，表明丝胶对STZ致损伤的INS-1细胞具有保护作用。
2. 丝胶靶向Akt1调控糖酵解丝胶处理后，Akt1的磷酸化水平升高，糖酵解相关蛋白的表达也得到上调。
这表明丝胶可能通过靶向Akt1调控糖酵解过程。
3. 丝胶抑制氧化应激STZ处理导致INS-1细胞内活性氧（ROS）水平升高，而丝胶处理后ROS水平得到显著降低。
此外，丝胶还能上调抗氧化酶的表达，进一步证实了其抑制氧化应激的作用。
4. 丝胶对INS-1细胞功能的影响丝胶处理后，INS-1细胞的胰岛素分泌功能得到恢复，表明丝胶可能对糖尿病的治疗具有潜在的应用价值。
四、讨论本研究表明，丝胶对STZ致损伤的INS-1细胞具有保护作用，其机制可能与丝胶靶向Akt1调控糖酵解及抑制氧化应激有关。
实体肿瘤的疗效评价标准1.1 版( Response Evaluation Criteria in Solid Tumors RECIST Version 1.1)1肿瘤在基线水平的可测量性1.1 定义在基线水平上，肿瘤病灶/淋巴结将按以下定义分为可测量和不可测量两种：1.1.1 可测量病灶肿瘤病灶：至少有一条可以精确测量的径线（记录为最大径），其最小长度如下：●CT扫描10 mm（CT扫描层厚不大于5mm）●临床常规检查仪器10 mm（肿瘤病灶不能用测径仪器准确测量的应记录为不可测量）●胸部X-射线20 mm●恶性淋巴结：病理学增大且可测量，单个淋巴结CT扫描短径须≥15 mm（CT扫描层厚推荐不超过5 mm）。
基线和随访中，仅测量和随访短径。
1.1.2 不可测量病灶所有其他病灶，包括小病灶（最长径＜10 mm或者病理淋巴结短径≥10 mm至＜15 mm）和无法测量的病灶。
无法测量的病灶包括：脑膜疾病、腹水、胸膜或者心包积液、炎性乳腺癌、皮肤/肺的癌性淋巴管炎、影像学不能确诊和随诊的腹部包块，以及囊性病变。
1.1.3 关于病灶测量的特殊考虑骨病灶、囊性病灶和先前接受过局部治疗的病灶需要特别注明：骨病灶：●骨扫描，PET扫描或者平片不适合于测量骨病灶，但是可用于确认骨病灶的存在或者消失；●溶骨性病灶或者混合性溶骨/成骨病灶有确定的软组织成分，且软组织成分符合上述可测量性定义时，如果这些病灶可用断层影像技术如CT或者MRI进行评价，那么这些病灶可以作为可测量病灶；●成骨病灶属不可测量病灶。
囊性病灶：●符合放射影像学单纯囊肿定义标准的病灶，不应因其为定义上的单纯性囊肿，而认为是恶性病灶，既不属于可测量病灶，也不属于不可测量病灶；●若为囊性转移病灶，且符合上述可测量性定义的，可以作为是可测量病灶。
但如果在同一病人中存在非囊性病灶，应优先选择非囊性病灶作为靶病灶。
局部治疗过的病灶：●位于曾放疗过或经其他局部区域性治疗的部位的病灶，一般作为不可测量病灶，除非该病灶出现明确进展。
莫西沙星联合卷曲霉素治疗耐多药肺结核患者的效果罗兰裕① 【摘要】 目的：观察莫西沙星联合卷曲霉素对耐多药肺结核患者的效果。
方法：选取2020年3月—2023年1月龙岩市第二医院收治的80例耐多药肺结核患者，按照随机数表法分为研究组和对照组，各40例。
对照组采用卷曲霉素治疗，研究组在对照组的基础上联用莫西沙星。
比较两组的临床疗效、肺功能指标、免疫功能指标、炎症指标及临床症状改善情况。
结果：研究组病灶总吸收率高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
研究组病灶空洞总闭合率高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
治疗前，两组降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）、白细胞计数（WBC）水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后3 d，两组PCT、CRP和WBC水平均低于治疗前，且研究组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
治疗前，两组第1秒用力呼气容积（FEV1）、FEV1占用力肺活量（FVC）的百分比（FEV1/FVC%）比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后3 d，两组FEV1、FEV1/FVC%均高于治疗前，且研究组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
治疗前，两组γ干扰素（IFN-γ）、miRNA-99b、腺苷脱氨酶（ADA）水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后3 d，两组IFN-γ水平高于治疗前，miRNA-99b、ADA水平低于治疗前，且研究组IFN-γ水平高于对照组，miRNA-99b、ADA 水平低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
治疗前，两组日咯血量与日排痰量比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后3 d，两组日咯血量与日排痰量低于治疗前，且研究组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论：莫西沙星联合卷曲霉素治疗耐多药肺结核效果较好，可有效缓解患者临床症状，抑制炎症反应，改善其肺功能和免疫功能。
在药剂学领域，靶向制剂（Targeted Drug Delivery）是指通过特定的传递系统将药物定向释放到靶标组织或靶标细胞的药物制剂。
其目的是提高药物的治疗效果，减少副作用，并增加患者的生活质量。
以下是一些与靶向制剂相关的名词解释：
药物载体（Drug Carrier）：药物载体是指用于携带和传递药物的载体系统，其可以保护药物并提供靶向传递的功能。
药物载体可以是纳米颗粒、脂质体、聚合物微球等。
靶向药物递送系统（Targeted Drug Delivery System）：靶向药物递送系统是指将药物载体与靶向分子或标记物结合，以实现针对特定靶标的药物释放。
这样可以提高药物在靶标组织或细胞中的富集度，并减少对健康组织的影响。
靶向分子（Targeting Ligand）：靶向分子是药物载体表面上的分子结构，可以与特定的受体、蛋白质或细胞表面分子相互作用。
通过与靶向分子的结合，药物载体可以实现对特定细胞或组织的识别和靶向递送。
控释系统（Controlled Release System）：控释系统是指可以控制药物释放速率和时间的技术或装置。
这样可以确保药物在目标组织或细胞中持续或缓慢释放，以延长药物的疗效，并减少药物频繁给药的需要。
靶向制剂的研究和开发是药剂学领域的重要研究方向，它可以提高药物的疗效性和安全性，为个体化治疗和精准医学提供了新的可能性。
靶向制剂的设计和制备需要综合考虑药物特性、药物载体的选择和功能化，以及适当的控释策略，以实现药物在靶标组织中的精确递送和治疗效果。
kinase-glo -回复KinaseGlo是一种生物荧光探针产品，主要用于检测和研究激酶活性。
激酶是一类关键的酶，它们在细胞信号转导途径中起着重要的调控作用。
本文将一步一步回答您对KinaseGlo的一些常见问题，从了解其原理、应用领域到实验操作和结果分析。
第一步：原理KinaseGlo是由Promega公司推出的一种生物荧光探针产品，旨在用于定量测定和研究激酶活性。
它基于酶促荧光化学反应的原理，利用ATP磷酸化荧光底物（ATP-Glo）对激酶的活性进行检测。
第二步：工作流程1. 准备样品和试剂：将要测定的激酶样品及其底物、ATP-Glo底物、冷冻保存的KinaseGlo底物等准备好。
2. 混合反应液：根据实验要求，在反应孔中将激酶样品、底物、ATP-Glo 底物和KinaseGlo底物混合均匀。
选择适当的样品和底物浓度，保证反应最佳效果。
3. 孵育反应：将混合后的反应孔在恒温环境下孵育一段时间，通常是30分钟到2小时，以充分反应。
4. 加入ATP检测体系：加入ATP检测缓冲液，该缓冲液中包含ATP酶和底物，用于将未用ATP转化为荧光产物。
5. 检测荧光：将孵育后的反应孔放入荧光检测仪中，读取荧光信号。
第三步：应用领域KinaseGlo可应用于多个研究领域，如肿瘤学、病毒学、免疫学等。
以下是几个常见的应用领域：1. 信号转导研究：通过检测激酶活性，可以深入了解细胞内信号转导途径的调控机制，探究细胞活动和疾病发生的机理。
2. 药物筛选：激酶作为一类关键的调控分子，在药物研发中具有重要的作用。
KinaseGlo可用于高通量筛选潜在药物分子对激酶的作用效果。
3. 癌症治疗研究：癌症发生和发展往往与细胞内信号转导途径的异常调控有关。
通过检测肿瘤细胞的激酶活性，可以探索癌症治疗的新靶点和新药物。
第四步：结果解读KinaseGlo的结果可通过测定荧光信号强度来解读。
荧光信号的强度与激酶活性相关，通常更强的荧光信号表示更高的激酶活性。
