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同型半胱氨酸速率法检测说明书I. 介绍同型半胱氨酸（Homocysteine，简称Hcy）是体内一种重要的氨基酸，它在蛋氨酸代谢过程中形成。
近年来，研究发现Hcy与多种心血管疾病、神经系统疾病以及某些遗传代谢病的发生发展密切相关。
因此，准确、快速地检测Hcy的水平对于疾病诊断与治疗具有重要意义。
II. 检测原理同型半胱氨酸速率法检测基于同型半胱氨酸在特定条件下与酶的催化作用，通过测定反应体系中底物和产物的生成速率来间接测定Hcy的浓度。
该方法的原理简单，操作方便，能够准确地测定Hcy的水平。
III. 检测设备与试剂1. 检测设备：同型半胱氨酸速率法检测仪2. 试剂：- 试剂A：同型半胱氨酸标准品- 试剂B：底物溶液- 试剂C：酶溶液IV. 检测步骤1. 样本处理：- 取适量样本，加入适量去蛋白液混匀，沉淀离心，取上清液作为待测样本。
2. 准备工作：- 分别将试剂A、试剂B和试剂C室温静置至室温。
- 预热同型半胱氨酸速率法检测仪至37°C。
3. 检测步骤：a. 取一定体积的底物溶液加入反应池中。
b. 加入一定体积的试剂A并混匀。
c. 加入一定体积的待测样本混匀。
d. 加入一定体积的试剂C并立即混匀。
e. 将反应池放入预热好的同型半胱氨酸速率法检测仪中进行反应。
f. 按照仪器指示记录一定时间内反应速率的变化。
g. 通过与同型半胱氨酸标准品的比对，计算出待测样本中Hcy的浓度。
V. 结果解读根据检测结果得出的Hcy浓度，可以用作评估患者的心血管疾病和神经系统疾病的风险。
一般来说，Hcy的浓度越高，表示患相应疾病的风险越大。
但具体的标准值要根据医生的指导和临床实际情况来确定。
VI. 注意事项1. 检测前应严格按照说明书的要求储存试剂及设备，避免高温、湿度等不利因素。
2. 操作过程中应注意实验室内无任何污染物干扰，避免误差。
3. 操作时需穿戴个人防护装备，做好安全防护工作。
4. 检测结果仅供医生参考，不能用于自我诊断和自我治疗。
同型半胱氨酸的检测及临床意义一、同型半胱氨酸同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物，部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。
大量对Hcy的研究表明Hcy是心脑血管疾病的独立危险因素，危险度随着浓度的升高而增加。
Boushey等的研究结果显示，血浆总Hcy水平每升高5umol/L，相当于胆固醇升高500umol/L。
伴有血浆Hcy升高(>10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。
二、影响血液Hcy水平的因素1、遗传因素：C667T点突变可引起Hcy升高。
CBS基因多态性。
蛋氨酸合成酶基因多态性。
2、性别与年龄：国内外不少研究发现，Hcy随年龄增长而升高，而且男性>女性。
女性在绝经前的水平较低，绝经后显著升高，认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。
3、营养因素：①VitB6、VitB12、叶酸等Hcy代谢辅酶摄入不足时，则Hcy升高。
②饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降，从而造成Hcy血症。
③饮食中蛋氨酸过高：有报道认为高动物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。
三、同型半胱氨酸致病机理1、内皮毒性作用。
2、刺激血管平滑肌细胞增生。
3、致血栓作用：Hcy可促进血栓调节因子的表达，激活C蛋白和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板内前列腺素合成增加，从而促进血小板粘附和聚集。
4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱：Hcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。
5、干扰谷胱甘肽的合成：谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管产生保护作用。
Hcy干扰谷胱甘肽的合成，从而对机体造成危害。
6、影响体内的转甲基化反应：Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程，甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化，这可能是Hcy致病的关键因素。
同型半胱氨酸的检测及临床意义一、同型半胱氨酸同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物，部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。
大量对Hcy的研究表明Hcy是心脑血管疾病的独立危险因素，危险度随着浓度的升高而增加。
Boushey等的研究结果显示，血浆总Hcy水平每升高5umol/L，相当于胆固醇升高500umol/L。
伴有血浆Hcy升高(>10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。
二、影响血液Hcy水平的因素1、遗传因素：C667T点突变可引起Hcy升高。
CBS基因多态性。
蛋氨酸合成酶基因多态性。
2、性别与年龄：国内外不少研究发现，Hcy随年龄增长而升高，而且男性>女性。
女性在绝经前的水平较低，绝经后显著升高，认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。
3、营养因素：①VitB6、VitB12、叶酸等Hcy代谢辅酶摄入不足时，则Hcy升高。
②饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降，从而造成Hcy血症。
③饮食中蛋氨酸过高：有报道认为高动物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。
三、同型半胱氨酸致病机理1、内皮毒性作用。
2、刺激血管平滑肌细胞增生。
3、致血栓作用：Hcy可促进血栓调节因子的表达，激活C蛋白和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板内前列腺素合成增加，从而促进血小板粘附和聚集。
4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱：Hcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。
5、干扰谷胱甘肽的合成：谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管产生保护作用。
Hcy干扰谷胱甘肽的合成，从而对机体造成危害。
6、影响体内的转甲基化反应：Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程，甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化，这可能是Hcy致病的关键因素。
同型半胱氨酸概述同型半胱氨酸（Hcy）是一种含巯基的氨基酸，是人体内蛋氨酸和半胱氨酸代谢的重要中间产物，是心脑血管疾病的独立危险因子，常用于心脑血管疾病的诊断、鉴别诊断和监测。
临床上通常检测的是总Hcy。
血清中Hcy 的正常参考范围为5~15 μｍo/Ｌ。
《中国高血压防治指南（2018 年修订版）》指出，人体空腹血浆Hcy > 15 μmol/L，则可诊断高同型半胱氨酸血症（HHcy）。
根据血清总同型半胱氨酸的浓度不同，可分为轻度(15~30 μmol/L)、中度(30~100 μmol/L) 和重度(> 100 μmol/L)。
01、同型半胱氨酸的代谢Hcy 在体内的代谢主要通过再甲基化途径与转硫化途径两条途径。
如下图所示。
两条途径互相补充，当一个途径活性下降时，另一条途径可以部分代偿Hcy 的代谢，从而维持Hcy 的稳态。
这两条途径各自依赖不同的辅酶和酶类参与催化反应，所以两者不能完全相互替代，如果一条途径发生严重阻滞，仅依靠另一途径很难完全满足Hcy 的代谢需求。
只有两条途径保持协调平衡，才能保证体内Hcy 浓度在正常范围。
图：同型半胱氨酸代谢图02、Hcy 异常有何临床意义血液中积累的Hcy 可以通过各种方式诱发疾病，Hcy 积累会引起内皮细胞损伤，破坏血管壁的弹力层和胶原纤维。
Hcy 还可诱导动脉壁平滑肌细胞增殖、动脉内皮细胞脱落，加速粥样硬化。
Hcy 升高可促进血栓调节因子的表达，使血小板存活期缩短，粘附性与聚集性增高，破坏正常凝血机制，从而促进血栓形成。
Hcy 促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。
此外，体内Hcy 可干扰谷胱甘肽的合成，造成氧化损伤等。
1. 心脑血管疾病高同型半胱氨酸血症已被证实是动脉粥样硬化和冠心病发生的独立危险因素。
研究发现同型半胱氨酸与早期动脉粥样硬化启动子有关，冠心病患者空腹血清同型半胱氨酸水平显著高于无冠心病患者。
同型半胱氨酸HCY检测1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢产生的一种含硫氨基酸，80%在血中通过二硫键与蛋白结合，只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。
同型半胱氨酸经过一系列的反应后，生成340nm波长检测吸收光度值变化与HCY浓度呈线性关系。
3 标本：3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.3.2 类型：新鲜不溶血的血清3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。
在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。
3.4 标本运输室温条件下运输3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。
4 实验材料4.1 试剂:北京万泰德瑞诊断技术有限公司HCY测定试剂盒（京械注准20152401106）4.1.1 试剂组成乳酸脱氢酶 >35KU/L 丝氨酸 0.76mmol/lNADH 0.47mmol/l 胱硫醚合成酶>20KU/L胱硫醚裂解酶>10KU/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃密闭保存，效期为12个月；开盖2～8℃保存，可稳定28天。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.2 校准品：使用北京万泰德瑞诊断技术有限公司提供的HCY标准品血清进行校准操作。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
同型半胱氨酸HCY检测
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理
同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢产生的一种含硫氨基酸，80%在血中通过二硫键与蛋白结合，只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。
同型半胱氨酸经过一系列的反应后，生成340nm波长检测吸收光度值变化与HCY浓度呈线性关系。
3 标本：
3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.
3.2 类型：新鲜不溶血的血清
3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。
在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。
3.4 标本运输室温条件下运输
3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。
4 实验材料
4.1 试剂:北京万泰德瑞诊断技术有限公司HCY测定试剂盒（京械注准20152401106）
4.1.1 试剂组成
乳酸脱氢酶 >35KU/L 丝氨酸 0.76mmol/l
NADH 0.47mmol/l 胱硫醚合成酶>20KU/L
胱硫醚裂解酶>10KU/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃密闭保存，效期为12个月；开盖2～8℃保存，可稳定28天。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.2 校准品：使用北京万泰德瑞诊断技术有限公司提供的HCY标准品血清进行校准操作。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
8 计算方法
以HCY校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以umol/L报告
9 参考值范围
4.0～1
5.4umol/L
我室的参考值:4.0-15.0 umol/L
10 临床意义
HCY是心脑血管病的危险因数。
用于与心血管疾病、糖尿病、肾病、中风、老年痴呆症及妊娠疾病的体外诊断。
目前国内外HCY检测作为心脑血管疾病临床常规检查指标。
用于预知动脉粥样硬化的危险性。
11 操作性能
11.1 线性范围：1-50umol/l；
11.2 重复性：重复测定高、中、低三个水平浓度的血清样品或质控品，其结果的变异系数CV应不超过10%。
11.3 准确度：测试溯源参考物质SRM1955，测试结果的均值与参考物质表示值的偏差应不超过±15%。
11.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.002g/L。
12 超出范围结果处理
本法的检测范围为1-50umol/L。
当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：1稀释后，重新测定，结果乘以2。
13 病危报警值的处理
无。
14 方法局限性
14.1 该方法试剂仅能检测线性范围内样品。
14.2专业人员负责检验结果的审核。
检查结果如出现与临床不相符的情况，应分析并查找原因。
15 补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
16 参考文献
16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编·全国临床检验操作规程·中华人民共和国卫生部医政司编·(第四版)
16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版
16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版
16.4试剂说明书。
