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肉鸡与蛋鸡H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体水平调查作者：李家凯郭康康刘丽娜来源：《湖北农业科学》2020年第11期摘要：为了解养殖场家禽中H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体水平，通过血清学调查，应用血凝抑制试验（HI）的方法，对四川内江、山东济南、河南鹤壁、江苏扬州4个定点实验观测站负责的养殖场的鸡血液样本进行禽流感病毒抗体分析，其中包含2个肉鸡场和3个蛋鸡场。
研究发现蛋鸡场通常免疫了H5、H7、H9（或H5与H9）亚型禽流感疫苗，而肉鸡场只免疫了H9亚型禽流感疫苗;蛋鸡场和肉鸡场都存在免疫禽流感疫苗后抗体水平低和无抗体产生的情况，从而导致免疫不合格或免疫失败。
以上结果表明，应加强家禽养殖场对不同亚型禽流感疫苗的免疫以及免疫后的禽流感病毒抗体水平监测，以防免疫失败，从而预防禽流感的发生和流行。
关键词：肉鸡与蛋鸡;H5、H7、H9亚型禽流感疫苗;抗体水平;免疫合格率Abstract： In order to understand the immune antibody level of H5， H7 and H9 subtypes avian influenza virus in poultry， the blood samples of four experimental observation stations in Neijiang city of Sichuan province， Jinan city of Shandong province， Hebi city of Henan province and Yangzhou city of Jiangsu province were analyzed by serological investigation and hemagglutination inhibition test（HI），including two broiler farms and three layer farms. The research found that layers were immunized with H5， H7， H9（or H5 and H9） subtypes avian influenza vaccines，while broilers were only immunized with H9 subtype avian influenza vaccine. The layer farms and broilers farms had low antibody production after the immunization of avian influenza vaccine，leading to unqualified or immune failure. It is suggested that the immunization different subtypes of avian influenza vaccine and the monitoring of avian influenza antibody levels after immunization should be strengthened to prevent the occurence and prevalence of avian influenza.Key words： broilers and laying hens; H5， H7， H9 subtypes of avian influenza vaccine; antibody level; qualified rate of immunity1994年，张泽纪等[1]首次从中国广东某鸡场发病鸡体内分离到H9N2亚型病毒。
禽流感H5、H7和H9亚型多重PCR方法的建立胡凌; 张鹏; 陈有才; 张军; 戴悦涵; 胡卫杰【期刊名称】《《中国兽医杂志》》【年(卷),期】2019(055)004【总页数】4页(P40-43)【关键词】多重PCR; 禽流感; H5; H7; H9【作者】胡凌; 张鹏; 陈有才; 张军; 戴悦涵; 胡卫杰【作者单位】四川省自贡市动物疫病预防控制中心四川自贡643000【正文语种】中文【中图分类】Q939.47禽流感(AI)病是由正粘病毒科A 型流感病毒引起的一种急性人兽共患的传染病,根据其HA 基因的抗原性差异可分为16 个HA 亚型,被世界动物卫生组织(OIE)规定为A 类传染病[1-2]。
此外,高致病性禽流感(HPAI)主要是由H5 或H7 两种亚型引起的,潜伏期极短,且常不见任何临床症状而突然死亡的传染病。
HPAI的发病率和病死率高达100%,并可感染人导致人的死亡[3,4]。
H9 亚型的禽流感病毒为低致病力的毒株,分布范围十分广泛,使鸡群产生免疫抑制,如果与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等其他的病原体同时感染则对家禽的产蛋率、死亡淘汰率和料肉比等生产性能有严重影响。
且近十几年来,我国的H9 亚型禽流感在呈上升趋势,严重的危害了我国的养禽业发展,威胁着人类的健康,同时还影响着畜产品的国际贸易,给我国带来严重的经济损失[5]。
禽流感H5、H7、H9 是我国当前主要流行的禽流感病毒亚型,其致病性极强,威胁着养禽业的健康发展,所以已在全国范围内引起各界学者的关注。
而早期快速确诊是预防和控制禽流感发生的先决条件,尤其是针对H5、H7 和H9 亚型的检测。
通过往年研究来看,对AI 的诊断和对AIV 的定型常用的方法仍是病毒的分离和血清学试验。
但这些方法操作繁琐复杂,效率低下,很难及时对AI 的防治提供理论支持。
聚合酶链式反应(PCR)是敏感性高、特异性强,且已成为分子生物学领域最重要也是最基本的技术手段之一[6],而多重PCR 是一种特殊的PCR 形式,即可以在一个反应中于短时间内同时鉴别出多种病原体[7],该方法缩短了AIV 的检出时间,提高了检测效率,为AIV 的早期快速诊断提供了敏感、快速、实用的方法。
何娅，钱林，邓位喜，等.贵州省正安县不同养殖模式下鸡H5、H7和H9亚型禽流感血清学调查［J ］.中南农业科技，2023，44（7）：247-249．禽流行性感冒（Avian influenza ，AI ）俗称禽流感，病原为正黏病毒科的禽流感病毒，其毒力因子除HA 和NA 外，还包括NP 基因及聚合酶基因等表达产物的综合作用［1］。
未裂解的HA 无感染性，只有在靶器官呼吸道及肠道组织相应的蛋白酶作用下，HA 裂解为HA1和HA2，暴露融合肽段，通过融合进人宿主细胞。
已知高致病力毒株与低致病力毒株的H 裂解位点的氨基酸序列有差异，前者为－X －X －精氨酸－X －精氨酸/赖氨酸－精氨酸－（X 为非碱性氨基酸），而低致病力毒株仅有单个精氨酸，切割率极低，不易裂解。
能否裂解和融合不仅取决于毒株和组织，也与宿主种类有关。
分离的H5亚型高致病性毒株对家养鸭、鹅及野生雁和天鹅等也具有强致病性［2］。
除HA 富含碱性氨基酸之外，NA 茎部26个氨基酸缺失变短及PB2蛋白第627位氨基酸由谷氨酸突变为赖氨酸也可使病毒的毒力变强［3］。
禽流感病毒的多数强毒株感染鸡或火鸡可出现病毒血症，导致胰腺炎、心肌炎、肌炎及脑炎等。
在发病后3~7d 可检出中和抗体，在第2周达到高峰，可持续18个月以上。
大量病毒可通过粪便排出，在环境中长期存活，尤其是在低温水中。
病毒通过野禽传播，尤其是野鸭。
尚不清楚病毒如何在野禽群体中长年存在，有可能以低的水平维持，即使在迁徙及越冬时也是如此。
加拿大20%野鸭在向南迁飞前已轻度感染病毒，中国多种野鸭也有较高的病毒检出率［4］。
禽流感病毒可感染不同品种和日龄的禽类，且冬、春季节多发，四季可发。
其中H5和H7亚型禽流感病毒引起高致病性禽流感被世界卫生组织（OIE ）确定为A 类烈性传染病，中国也将其列为一类疫病［5］。
其主要特征为突然发病，传播速度快，病死率高达100%，且禽流感病毒能感染人，某些毒株甚至可不经过混合重配再传染的过程直接感染人并致死。
吉林农业大学硕士学位论文禽流感病毒H<,5>、H<,9>亚型多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用姓名：***申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：***20030601吉林农业大学硕士学位论文禽流感病毒Ｈ，、Ｈ９亚型多重ＲＴ－ＰＣＲ检测方法的建立及初步应用中文摘要本研究根据ＧＥＮＢＡＮＫ中查出的禽流感病毒Ｈ５亚型，禽流感病毒Ｈ９亚型的ＨＡ片段基因组序列，利用ＤＮＡＳＩＳ软件分别对ＡＩＶ的Ｈ５、Ｈ９亚型ＨＡ基因区域进行同源·胜比较，设计筛选出两对联合ＰＣＲ反应的特异性引物，其中一对是Ｈ９亚型通用引物，扩增出ＨＡ片段６９５ｂＰ，Ｎ一对引物为Ｈ５亚型的通用引物，扩增出的ＨＡ区域部分目的片段约为４４８ｂＰ。
建立各自的单项ＲＴ－ＰＣＲ，并用电泳鉴定ＰＣＲ扩增产物，结果证明为各自的特异性核酸片段。
在单项ＲＴ－ＰＣＲ基础上．优化引物浓度，Ｍｇｃｌ２浓度，Ｔａｇ酶、ｄＮＴＰ浓度，循环次数等反应条件后，建立了Ｈ５、Ｈ９亚型的多重ＲＴ．ＰＣＲ，同时扩增出禽流感病毒Ｈ５、Ｈ９两种亚型不同大小的特异性片段．并进行了反应条件的优化。
建立的多重ＲＴ．ＰＣＲ扩增其它相关病毒未见阳性结果。
两个亚型的单项ＲＴ—ＰＣＲ可以检测鸡胚尿囊液培养物１０。
３稀释物，多重ＰＣＲ可以检测到１０。
稀释物。
初步应用四４ｆｆ－Ｉ－鸡胚尿囊液培养物，六份临床病料的检测，并与电镜负染、琼扩及病毒分离的结果进行比较，此诊断方法与病毒分离的结果一致，比琼扩和电镜负染检出率高，可用５－·１１，床和试验室诊断。
关键词：多重ＲＴ—ｐｃＰ，禽流感病毒ＲＩｇＡ的提取禽流感病毒Ｈ５亚型禽流感病毒Ｈ，亚型ＡＩＶ的ＨＡ基因吉林农业大学硕士学位论文禽流感病毒Ｈ５、Ｈ９亚型多重ＲＴ—ＰＣＲ检测方法的建立及初步应用ＡｂｓｔｒａｃｔＡｍｕｌｔｉｐｌｅｘｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｗａｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｔＯＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙｄｅｔｅｃｔＨ５Ｉ－１９ｓｕｂｔｙｐｅｆｏｒＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａｖｉｒｕｓ．Ｔｈｅｈｅｍａｇｌｕｔｉｎｉｎ（ＨＡ）ｏｆＡＩＶｐｌａｙｓｔｈｅｋｅｙｒｏｌｅｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎｇｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ，ｃｅｌｌｒｅｃｅｐｔｏｒｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｙａｎｄｈｏｓｔｒａｎｇｅｏｆｔｈｅｖｉｒｕｓ．ＴｈｅｈｏｍｏｌｏｇｙｏｆＴｈｅＨＡｓｅｑｕｅｎｃｅｓｒｅｐｏｒｔｅｄａｎｄｒｅｇｉｓｔｅｒｅｄｉｎＧｅｎｂａｎｋｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔｒａｉｎｓｏｆＨ５．１－１９ｓｕｂｔｙｐｅｗａｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｅａｃｈｏｔｈｅｒ．ＴｈｅｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅｄｏｍｉｎｏｆＨＡｓｅｑｅｎｃｅｏｆＨ５、Ｈ９ｓｕｂｔｙｐｅｗａｓｓｅｌｅｃｔｅｄｆｏｒＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ．ＴｗｏｓｅｔｓｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃＣａｎｂｅａｍｐｌｉｆｉｅｄ４４８ｂｐ，Ｈ９ｓｕｂｔｙｐｅＣａｎｂｅｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｄｅｓｉｇｎｅｄ．Ｈ５ｓｕｂｔｙｐｅａｍｐｌｉｆｉｅｄ６９５ｂｐ．ＴｈｅｄｅｓｉｇｎｅｄｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｕｓｅｔＯＰＣＲｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｗａｓ啦ｈｔ．ＴｈｅｎｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆＰＣＲｆｏｒｄｅｓｉｇｎｏｆｔｈｅｔｗｏｓｅｔｓｏｆｐｒｉｍｅｒｓｅａｃｈｖｉｒｕｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｏｒｔｈｏｎｇｏｎａｌａｓｓａｙ，ｔｗｏｓｅｔｓｏｆｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄａｎｄｕｓｅｄｆｏｒａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｒｉａｌｓ．ＴｈｅｒｕｄｉｍｅｎｔａｒｙａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｕｌｔｉｐｅｘＲＴ—ＰＣＲｈａｓｔｈｅｓａｍｅｒｅｓｕｌｔｓｗｉｔｈＳｅｐｒａｔｅＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｖｉｒｕｓ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓａｃｑｉｒｅｄｉｓｈｉｇｈｅｒｔｈｅｎＡＧａｎｄＥＭＴｈｅｍｅｔｈｏｄｄｅｓｃｒｉｂｅｄｉｓｖｅｒｙｐｒａｃｔａｂｌｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ｓｐｅｃｉｆｉｃ，ｓｉｍｐｌｅ．ＩｔｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＨ５、Ｈ９ｓｕｂｔｙｐｅｏｆＡＩＶＫｅｙｗｏｒｄ：ＡＩＶｍｕｌｔｉｐｌｅｘ—ＰＣＲＨ，ｓｕｂｔｙｐｅ地ｓｕｂｔｙｐｅＨＡ独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
H5N1Re-5株和H9亚型SS株对土三黄鸡的免疫效果对比路彩霞;李军成;何殷娥【摘要】[目的]探究HSN1 Re -5株和H9亚型SS株对土三黄鸡不同的免疫效果.[方法]选用广西桂林市某种鸡场土三黄鸡180只,试验组注射禽流感H5和H9疫苗,对照组不注射疫苗,检测145日龄注射H5和H9疫苗后的抗体水平.[结果]禽流感H5疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异达0.01极显著水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异不显著.[结论]禽流感H5疫苗145日龄注射后能显著地提高抗体水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后不能显著地提高抗体水平.%[Objective] To compare immune efficacy of avian influenza virus (AIV) Re-5 strain (H5N1 subtype) and SS strain (H9 subtype) in Guangxi Sanhuang chickens. [ Method] Oa total of 180 Sanhuang chickens were selected from a breeding chicken farm in Guilin City of Guangxi and assigned into four groups (n =45). At 145 days old, the chickens in the group I and II were inoculated with AIV Re-5 strain and AIV SS strain, but they were kept in cages separately. The two control groups were not inoculated. Antibody levels were determined at 170 days old. [ Result ] The level of antibodies against AIV Re-5 strain was significantly higher in the chickens of the group 1 and group II than in the corresponding control groups, respectively (P <0.01). The level of antibodies against AIV SS strain was not significantly different between the group I and its control group or between the group II and its controlgroup. [ Conclusion] The antibody level of chickens can be increased bythe AIV Re-5 strain but not by the AIV SS strain.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)021【总页数】3页(P12871-12873)【关键词】土三黄鸡;H5疫苗;H9疫苗;免疫效果【作者】路彩霞;李军成;何殷娥【作者单位】广西农业职业技术学院,广西南宁530007;广西农业职业技术学院,广西南宁530007;广西农业职业技术学院,广西南宁530007【正文语种】中文【中图分类】S858.31高致病性禽流感是一种世界范围的禽类疫病，给养禽生产造成了巨大的经济损失，是目前严重危害养鸡业的疾病之一。
当下H9禽流感的流行特点禽流感症状治疗措施一、当下H9流感流行特点1、根据国家有关实验室统计数据，2012年商品肉鸡感疫病染率最高的依然是H9。
如果将H9与H5加起来，总的感染率是82.21%。
这说明每只鸡死亡的原因，有82.21%来源于禽流感。
而由其他疾病导致的只占17.79%。
在商品肉鸡、肉杂鸡、青年鸡群中，根据国家有关机构资料证明，H9流感病毒（AIV）隐性感染率1%。
2、从去年冬天到今年春天，河北工程大学的专家教授化验室检测发现，普遍发生H9与IB、H9与ND及细菌病、H9与IBD及细菌引起的混合感染，甚至在临床上没有出现H9的症状，化验室化验也是H9阳性。
而且比去年比例增大。
吴延功以H9作为重点分析了近几年来疾病的流行特点：季节不同表现形式不一。
寒冷的秋冬季节主要以呼吸道疾病流行为主；炎热的夏季主要表现为病毒性肠炎和腹泻。
3、单独感染H9之后并没有固定的临床表现症状。
通过病毒接种实验，看不到H9的任何病变和症状，曾采取肌注等多种方式攻毒后，未发现H9有任何的临床表现症状。
这说明H9并不单独感染，也不致病，只有继发或并发了其他的疾病之后才会表现出一些临床症状。
4、因此，在防控H9型禽流感时应将治疗与它一起作怪的疾病同步进行。
从国家动物卫生、疫病研究中心得到的数据，我们可以得出以下结论。
二、H9流感与常见的其它病毒混感分析1.新城疫与H9型禽流感混合感染发病率最高，在临床上也是最常见的。
突出的表现是新城疫疫苗免疫后的2~3d就出现呼吸道症状或者新城疫症状，这是H9、新城疫及细菌混合感染的结果。
在我们检测到感染新城疫的有85例病例中，单独感染新城疫的仅有4例。
应在鸡免疫前和免疫时要加强保健。
首先是增强鸡的抵抗力，可以选用增强免疫的中药方剂进行保健。
一般免疫都是选在前三周进行，这三周至少要进行1个~2个疗程的保健，如果不保健的话，鸡就极有可能发病。
其次针对不同的鸡群合理应用抗生素；此外，在免疫时须再次增强抵抗力。
温和型流感H9的经典分析那么H9到底有些啥特点，我们只有掌握其特点，其弱点，才能一击致命，那么请听东东分解。
1，H9本身没有致病性，也就是你用H9的病毒去对SPF的鸡群攻毒，鸡毫无反应，说俗点，就是你拿这病毒注射到好的鸡身上，鸡压根就没事，鸡的感染率只有1%，死亡率呢---为0，也就是压根都不死。
2，但是，如果H9和大肠杆菌搞到一起，那么死亡率又是多少呢？-----80%，大家看看，多可怕的数据，也就是你鸡得H9没事，压根都不死，可是你的鸡得了H9，再得大肠杆菌的话，能死到80%，这就是很多鸡场得了流感，却没有控制好大肠杆菌，最终死亡不断，无法控制的真正原因。
3，那么H9,最喜欢和哪几种疾病混在一起玩呢，当然就是我前面所举例的，ND，IB，大肠杆菌，在这几种病的死鸡中都能分离到H9，那么这条信息又提示着我们底下的技术人员什么呢？也就是现在单纯的传支，单纯的新城疫不多，单纯的大肠杆菌也不多，我们在治疗了这些疾病都不明显的情况下，你问一下自己你考虑H9了吗，你开的药方当中有针对H9的吗？4，那么H9平时不发病，只是潜伏，潜伏好的话，一直到卖鸡，也于鸡群相安无事，要是潜伏暴露，那就是一场于现代医药水平的一场恶战，最终鹿死谁手还不一定，不过有一点是可以肯定的，损失的，疼痛的肯定是我们养殖户，那么H9的发病，暴露和什么条件有直接的关系呢？5，太多的实验表明，H9的激发和鸡场的温度，通风，湿度，密度，疾病，应激，有直接的关系，而这些条件在现代化的鸡场靠现代化的设备和鸡场的管理员的素质能够减到最低，而我们普普通通的养殖户在养殖过程中很多就是靠天吃饭了，因为可能一次寒流，一次大风，一次高温，就会让你鸡群潜伏的H9爆发，和其余的疾病一起混合感染。
6，H9在冬天表现为呼吸道，夏天表现在病毒性肠炎，因为流感就是感冒的一种，夏天的连续腹泻，肠道感染，增厚，就是H9在肠道的经典表现在，H9没有自己的独自病变，也就是解剖也只是看到的和其余疾病的继发感染，H9和上呼吸的细菌混合感染就直接导致支气管栓塞7，H9还有一个经典的表现就是肾脏充血，记住是充血红肿，而不是花斑，这种充血在实验室分离出H9 的高达80%和90%，所以在很多地方，解剖的鸡。
鸡群接种疫苗的几种接种方法及具体操作方法-养鸡技术随着人们生活水平的提高，鸡的需求量也越来越多。
养鸡的农户也越来越多，要想获得养鸡的成功，必须做好鸡疫病的防治。
下面教大家：鸡群接种疫苗的几种接种方法及具体操作方法。
一起来了解一下：1、滴鼻、点眼免疫滴鼻、点眼免疫用于5~7日龄雏鸡免疫，疫苗用鸡新城疫、传染性支气管炎二联冻干疫苗，用于预防鸡新城疫和传染性支气管炎。
鸡新城疫、传支二联苗分两种，一种是新支H120适用于7日龄雏鸡，另一种是新支H52，适用于19~20日龄中鸡免疫。
右手持滴瓶，滴头朝下，倾斜角度大概为45度角，不要随意晃动、也不要频繁的把滴瓶拿起又放下，以免影响液滴大小。
左手拇指、食指拿住雏鸡头部，中指、无名指、小指把雏鸡固定住。
让雏鸡右侧脸朝上，雏鸡眼睁开时滴入疫苗水，等雏鸡将疫苗水吸入眼睛后再放开。
2、滴口免疫滴口免疫用于13日龄雏鸡免疫，免疫1.5羽份，疫苗是法氏囊三价冻干疫苗，用于预防鸡传染性法氏囊病。
每家公司的法氏囊疫苗都可分为分为弱毒苗、中毒苗，弱毒苗的毒力较弱适用于13日龄雏鸡，中毒苗毒力比弱毒强，适用于24~25日龄的法氏囊二免。
疫苗加水计算方法和接种新支H120疫苗一样。
右手持滴瓶，滴头朝下，倾斜角度大概为45度角，不要随意晃动、也不要频繁的把滴瓶拿起又放下，以免影响液滴大小。
左手拇指、食指拿起小鸡，左手拇指、食指拿住雏鸡鄂部（嘴角），中指、无名指、小指把雏鸡固定住。
然后用拇指、食指搓开雏鸡鸡嘴，让雏鸡嘴朝上滴入疫苗水。
3、颈部皮下注射颈部皮下注射免疫用于19~20日龄中鸡免疫，用鸡新城疫、禽流感H9二联灭活苗0.4mL/只，用于预防鸡新城疫和禽流感。
灭活苗也叫油苗、油乳苗，鸡常用的有鸡新城疫、禽流感H9二联灭活苗（新流H9二联油苗）和禽流感H5。
两种油苗的区别是新流H9二联预防鸡新城疫和H9毒株引发的禽流感，禽流感H5预防的是H5毒株引起的禽流感，只注射H9或者H5不能同时预防两种禽流感。
现在流行的禽流感H9亚型毒株种类
1.SS株。
于1994年在广东分离，并作出灭活疫苗
2.F株于1998年在上海分离并作出灭活疫苗。
3.地方毒株和变异毒株
山东的H9亚型SD696。
齐鲁动保的H9亚型LG1株。
哈兽研的H9亚型H9N2(re-2)株
07年河南的普莱柯H9亚型HL株。
10年保定瑞普的H9亚型HP株
10年优帮，哈药的H9亚型JY株
北京兽医生物H9亚型HN106株。
上海海利。
乾元浩的H9亚型WD株
南京天邦。
江苏的H9亚型NJ02株
青岛易邦的H9亚型YBF003株
青岛奥兰百特的H9亚型L株
另外还在分离的病毒毒株还很多。
这就是为什么今年的疾病特别多的原因。
疫苗那么多我们不可能都去防疫，
主要看当地流行的什么毒株的，和另一种毒株同源性是不是很高的。
至于那个疫苗效果最好，那就是商业机密了。
呵呵
还有一点就是禽流感毒株变异也很快，当两种低致病的毒株同时感染鸡体，就会发生变异重组，
例如H6N1（无毒）+H9N2（弱毒）===H5N1（强毒）说以当机体先感染无毒毒株的时候，养殖户是根本看不出来的
然后感染H9亚型以后（大家也看到了H9亚型如此之多），才有临床症状。
如不及时治疗。
就会重组成为强毒的H5N1。
给治疗和恢复带来很大的麻烦。
说以大家给鸡防疫禽流感疫苗的时候，一定要把H5(RE-4+RE-5)和H9做好。
做精。
开产前最低3遍。
现在网上还流传着H5N1RE-6也出现了。
当前H9亚型禽流感毒株最新最全统计。
鸡患禽流感的症状，鸡禽流感怎么预防，鸡禽流感如何防治一、禽流感 H9病毒属于低致病力，低致死率的亚型流感病毒。
鸡群发病后，其死亡率和损失程度与继发大肠杆菌病的程度相关。
近两年流行比较严重。
二、临床症状初期眼脸变形，出现结膜炎，流泪现象，继而肿头，呼吸道症状，畏喊寒聚堆，脚趾鳞片出血，排水样便，采食量往往在发病后2-3天有所下降。
三、剖检变化褪肌内侧脂肪出血，胸，腿肌条纹状出血，心脏脂肪出血，心肌出血，肾脏肿大出血，腺胃出血，肌胃脂肪出血，肌胃角质层下出血，肠道黏膜出血，肺脏出血，严重时呈青铜色坏死，气管黏膜出血，有大量黏液渗出。
如继发大肠杆菌病，剖检可见肝周炎和心包炎，腹膜炎等变化。
鉴别诊断1、和慢性呼吸道病的区别。
慢呼是由于败血霉形体引起的，剖检时气囊内有黄色干酪物，使用泰乐和强力霉素后，可以得到很好的疗效。
而流感用以上药物效果不明显。
2、和环境不良引起的大肠杆菌病相区别。
当鸡舍环境不良时，会给鸡群造成较大的应激，使机体抵抗能力下降，导致慢呼和肠炎的发生，并因此继发大肠杆菌病。
当鸡群一但感染禽流感H9病毒后，病毒在呼吸道黏膜上复制，造成黏膜的损伤，大肠杆菌就会乘虚而入，因此继发大肠杆菌病。
3、和高致病性禽流感相区别；高致病性禽流感表现在短时间内出现食欲废绝，体温骤升，精神高度沉郁，鸡冠发绀，头脸部水肿，伴随大批死亡，出现此临床症状时，不可给药治疗，应立即扑杀。
综合防控措施1、三日龄颈部皮下注射0.3ml禽流感H5H9双价灭活疫苗，以获得特异性免疫力。
用中药抗病毒药物和抗菌素加强免疫空白期的鸡群保健工作，当鸡群中发现有眼睛变形，流眼泪时，应对病鸡剖检，当确诊后，要立即采取治疗措施。
实践证明诊断越及时给药越早，治疗效果越好，损失越小，治疗和预防家禽流感等病毒性疾病推荐用东方禽益健，拌料：每吨饲料添加禽益健一到两公斤；饮水：每一公斤禽益健兑水一到两吨水。
2、加强饲养管理，提高机体抵抗能力，保持好鸡舍的内环境，提高舍温，加强通风换气，3、加强带鸡消毒制度，（免疫前后三天除外）每天带鸡消毒，首选碘制剂，过氧乙酸等。
畜 牧 兽 医2020年第11期新农民鸡禽流感H5、H7和H9抗体水平合格率检测熊 鑫（安徽省宁国市农业农村局，安徽 宁国 242300）摘要：本试验为了检测宁国市某养殖场屠宰环节中经疫苗免疫后的鸡祖代及父母代禽流感H5、H7和H9抗体水平合格率。
通过血凝试验分别对H5、H7和H9抗原进行倍比稀释，测得四倍抗原，根据稀释倍数制备抗原稀释液。
通过血凝抑制试通过验将血清从第1孔倍比稀释到第5孔，第6孔倍比稀释到第10孔，其中每排第11孔为阳性对照，第12孔为阴性对照。
先加入抗原稀释液振荡混匀后置于在37℃充分反应，再加入1%红细胞悬液振荡混匀后置于在37℃充分反应，进行读数。
关键词：禽流感；抗体水平；血凝试验；血凝抑制试验1 试验方法1.1 样本制备①于屠宰环节随机选取某养殖场鸡祖代（80周龄）及父母代（48周龄）各50只；②通过翅静脉采集血液，于37℃放置2h；③取上清液在1800r/min条件下离心2～3min，用移液器吸取上层清液（即为血清）于新的离心管中；④进行编号标记后于-20℃保存。
1.2 制备1%鸡红细胞悬液①注射器吸取适量阿氏液，通过翅静脉采集健康公鸡血液；②于1500r/min条件下离心8～10分钟，用移液器尽可能吸净上层清液弃去；③加入生理盐水通过称量配平后，用移液器重复吹打使悬液充分混匀；④重复②③步骤3～5次；⑤离心后将上层清液弃掉，用生理盐水配成1%红细胞悬液，置于4℃保存备用。
1.3 HA试验①取1块96孔V型微量反应板水平放置于实验台，进行标记；②分别选取6排，其中每2排为重复操作，第1～12孔分别加入25μL生理盐水；③分别于相应标记的第1孔加入H5、H7和H9抗原25μL，倍比稀释至第11孔，弃去枪头内液体；④6排的每孔加入25μL生理盐水；⑤6排的每孔加入配制好的25μL 1%红细胞悬液，振荡混匀后于37℃恒温箱内反应15～20分钟；⑥观察结果，获得抗原血凝效价，制备抗原稀释液。
H7、H5禽流感的流行动态及防控作者：田国彬来源：《兽医导刊》 2014年第5期田国彬/ 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家禽流感参考实验室一、我国禽流感流行病学调查简况国家禽流感参考实验室从2008 年开始每年进行大量的禽流感流行病学调查工作，主要是在活禽交易市场、屠宰场和养殖场等采集鸡、鸭和鹅等各种禽类喉头与泄殖腔棉拭子以及血清样品。
2013 年从24 个省份采集了30 109 份病原学检测样品和12 877 份血清学检测样品。
监测结果表明，我国存在的禽流感病毒亚型较多，分到的禽流感病毒有H5、H9、H7、H6、H3、H4、H10、H11、H1、H2、H8 等多种亚型。
其中，几乎所有的H5 亚型和H7 亚型禽流感病毒均分自活禽交易市场或屠宰场；从禽品种来看，水禽中存在的禽流感病毒亚型更为复杂。
除禽流感病毒外，还从样品中检测出新城疫病毒900多株。
从抗体检测来看, 总体上我国家禽免疫抗体水平较以前有所提高，免疫抗体良好，但市场家禽的平均HI 抗体水平仍较低。
鸡的免疫抗体远高于水禽的免疫抗体水平，但抗体高低差异较大，部分禽尤其是肉鸡检测不到抗体。
水禽的免疫抗体也存在较大的差异，有的群体平均HI 抗体可在8log2 以上，而有的抗体为0，说明水禽免疫当前的禽流感疫苗可以达到较高的水平，但我们也同时看到水离禽流感疫苗的免疫覆盖率还是比较低的。
从禽品种来看，肉鸡和肉鸭绝大部分均未进行免疫。
通过对我国分离到的H5 亚型禽流感病毒进行HA 基因序列分析，可以看出我国H5 亚型禽流感病毒主要以抗原群2.3.2 分支（Clade 2.3.2）为主，该分支的病毒在我国南方和北方均有存在，但在南方分离的数量较多。
本年度在我国北方地区多个省份分离到7.2 分支（Clade 7.2）病毒，该分支病毒已经成为危害我国北方养禽业的主要疾病，从抗原性分析来看，新分离到的病毒抗原性与疫苗株存在一定的差异。
此外，我们还从几个省份分离到少量的2.3.4 分支的H5 亚型禽流感病毒。
禽流感（avian influenza ，AI ）是由正粘病毒科、流感病毒属A 型流感病毒引起的禽类（家禽或野禽，以及部分哺乳动物）传染病[1]。
禽流感病毒血清亚型众多，抗原变异性强，宿主范围广泛，亚型间无交叉保护性，使得禽流感频繁暴发，成为养禽业的一大毁灭性疫病。
尤其是高致病性禽流感，是OIE 规定的法定报告A 类动物疫病[2]。
禽流感病毒在流行的过程中不断变异，跨越宿主屏障，H5N1亚型禽流感病毒和H7N9亚型禽流感病毒屡次暴发疫情，给养禽业和人类的生命安全带来巨大的威胁。
H9亚型禽流感病毒并未被规定为高致病性禽流感，往往被人们所忽视，从而造成了以H9亚型为主的低致病性禽流感的大范围流行和对养禽业产生持续危害。
此外，有研究显示H9N2亚型禽流感病毒在全世界范围内广泛传播的同时也以重配的方式产生新型禽流感病毒[3,4]。
目前国内外检测禽流感病毒最常用和经典的方法是鸡胚病毒分离，并且是国际贸易中指定的检测方法，但该方法技术要求高、耗费时间长，在疫情暴发时不利于病原的快速诊断和疫情控制。
以分子生物学技术为基础的荧光PCR 方法已成为病原核酸检测的主要方法，目前市场的禽流感病毒检测手段多以单重RT-PCR 为主，不能区分具体亚型，但在平时疫情检测和实施扑灭措施时对这些病毒亚型进行快速检测和定型非常重要。
本研究基于Taq-Man-MGB 荧光RT-PCR 技术建立一种禽流感病毒H5、H7、H9亚型多重荧光RT-PCR 检测方法，能够在一次反应中对样本中的病毒进行快速定型，满足准确、快速的检测需求。
1材料与方法1.1质粒样品携带禽流感病毒H5亚型、H7亚型、H9亚型HA2靶基因序列片段重组质粒pUC57-AIV-H579，浓度为104copies/μL 。
1.2禽流感病毒核酸样品禽流感病毒H5亚型核酸样品15份、禽流感病毒H7亚型核酸样品15份、禽流感病毒H9亚型核酸样品15份，禽流感病毒阴性核酸样本30份，由扬州大学禽流感病毒专业实验室分离、鉴定、保存和提供。
