生化检验的一般知识与技能
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授课对象： 06级检验 1-5 班 课 时：2 学时
生化检验的一般知识与技能
目 标： 1.掌握生化实验室规则，注意事项及应急处理
2. 掌握常用容量玻璃仪器的规格和使用规则
3. 了解常用清洗液的种类和应用
4. 学会使用可调微量加样器
实验用品：刻度吸管（1、2 ml、5 ml、10 ml）、容量瓶（各种规格）、微量加样器、 洗耳球、试管架、试管（5ml ）等
内 容：
一、 实验室规则
预习实验、明确目标、准备实验充分有序 遵守纪律、听从指导、认真操作、深入思考 爱护公物、厉行节约、注意安全、杜绝事故 清理环境、保持整洁、及时上交实验报告
二、 实验室的安全及意外事故的处理 实验室的安全，除要求实验人员严格遵守安全制度外，还应该在认真重视安全的
基础上，养成一种安全工作的作风，必须具备预防事故发生的措施和对事故的现场处 理等方面的基础知识及自救能力。
（一） 实验室的安全：防火防爆 防化学性危害
防生物源性的危害 废物的处理
（二） 事故的应急处理 玻璃割伤的处理： （略） 药品灼伤的处理：
酸灼伤：皮肤 ---立即用大量自来水冲洗，然后用 0.6mol/LNaHCO3 液洗涤 眼睛---立即用蒸馏水和洗眼杯冲洗，然后用 0.12mol/LNaHCO3液洗涤 碱灼伤：皮肤 ---立即用大量自来水冲洗，然后用饱和硼酸溶液洗涤 眼睛---立即用蒸馏水和洗眼杯冲洗，再用
0.16mol/L 硼酸溶液洗涤
溴灼伤：应立即用乙醇洗涤，再涂上甘油，用力按摩，使甘油渗入毛孔 中毒处理：
溅入口中尚未咽下的应立即吐出来，用大量请水漱口。如吞下时，应根据毒物的 性质给予解毒剂。
触电处理 一旦发生触电事故，首先应立即切断电源，若一时找不到电闸，可用干木棍等绝 缘物把导电物与触电者分开，然后进行抢救。如触电者已停止呼吸，应立即施行人工 呼吸。
以上仅是实验室的应急处理，对于重者症应及时送医院急诊处理。
三、用玻璃仪器的清洗
（一）几种洗涤液的配制及应用
1. 合成洗涤剂：市售，使用方便，去污力强，应用范围广，是常用的洗涤剂。使 用时配成 1%-2%的水溶液，用毛刷蘸取刷洗。
2. 铬酸洗液（清洁液）：由重铬酸钾和浓硫酸配置而成，具强氧化性和强酸性，凡 能溶于酸和被氧化的物质，均可被其除去。
配方：
重铬酸钾 500g（200g）
蒸馏水 500ml（400ml）
浓 H2SO4 500ml（1600ml）
3. EDTA-Na 溶液：用 0.2mol/L 的 EDTA-Na 溶液加热煮沸可洗脱附着于玻璃仪器 内壁的白色沉淀物（ Ca+2,Mg +2 盐类）和不易溶解的重金属盐类。
4. 7.5mol/L 尿素洗液：尿素洗液对蛋白质有较强的清洗能力。
（二）洗涤方法
1. 新购置的玻璃器皿：
合成洗涤剂刷洗-0.2mol/LHCI浸泡（2-6h，去除游离碱）-自来水冲洗一蒸馏水 漱洗 2-3
次。
2. 日常使用的玻璃器皿：
用自来水冲洗 -合成洗涤剂刷洗 -自来水冲洗-蒸馏水漱洗 2-3次。
3. 凡是不能用毛上毛刷刷洗的玻璃器皿：
用自来水冲洗，沥干 f铬酸洗液浸泡过夜f去清洁液f自来水冲洗f蒸馏水漱洗
2-3 次。
※ 使用清洁液注意事项： （1） 金属器材或带有金属部件的玻璃器皿决不可放入浸泡；
（2） 切不可用手直接接触浸泡物；
（3） 用水冲洗过的器皿要尽可能沥干，才能浸入清洁液中；
（4） 铬酸洗液为棕黄色，若变为绿色则已失效。
4. 凡被石蜡、凡士林或其他油脂类沾污的器皿： 要求单独洗涤，防止油脂污染其他器皿，增加洗涤困难。洗涤时可置合成洗涤剂
中煮沸，趁热刷洗，即可去除油脂，然后用自来水冲洗和蒸馏水漱洗。
（三）干燥方法
1. 自然干燥
2. 烘拷干燥
四、常用容量玻璃仪器的规格和使用规则 临床生物化学实验主要是定量分析。实验中所用的各种玻璃计量仪器都有固定的 规格和一定的技术标准。
（一） 烧杯 ：用于加热、助溶等
（二） 量筒 ：常用于量取要求不甚精确的液体体积
（三） 容量瓶 ：是一种较准确的容量仪器。用容量瓶配制溶液时，应先将固体试 剂在烧杯中用溶剂溶解，再转入容量瓶中，然后加溶剂定容至标线。
（四） 刻度吸管 ：是生物化学实验中使用最广泛的一种小量吸量管，其准确度较
高，使用灵活方便，选用不同的规格可以任意取用 0.01ml至10ml的溶液。使用 刻 度
吸管的方法（示教） ——左手拿吸耳球，右手拿吸管，吸管的刻度面向自己，管尖插 入液面下的深度一般为1cm为宜。当液体吸至所需量时，只需稍过标线，然后将管尖 移开液面，垂直将多余的液体放出，同时观察管内液体弯月面最低点恰与所需量之标 线相切。此外，还应根据所需量正确地选用不同容量规格的吸管，否则会人为地扩大 误差范围，影响实验结果。
（五） 定量可调加液器 （简称加液器）：使用方法示教。
（六） 课后小结
