雨生红球藻质体球滴结构蛋白基因的克隆与原核表达

雨生红球藻农杆菌转化体系的建立侯善茹;冯兴标;李光伟;陈丹阳;袁浏欢;刘永胜【摘要】文章以植物表达载体pBI121、农杆菌EHA105为体系，建立了农杆菌介导的雨生红球藻转化方法，通过筛选羧苄青霉素、G418等抗生素对雨生红球藻生长的影响，确定了以200μg／L G418和500 mg／L羧苄青霉素为筛选体系。

转化的雨生红球藻以CaM V 35S和来源于番茄的八氢番茄红素脱氢酶基因的启动子（PDS启动子）成功表达了报告基因 G FP和Y FP ，拓宽了pBI121载体的应用范围，为雨生红球藻的转化提供了一个新的遗传转化途径。

番茄来源的PDS启动子能够启动报告基因的表达，表明植物源的启动子能够在雨生红球藻中表达，为植物源的启动子验证及基因瞬时表达提供了一个新的方法。

%The Agrobacterium‐mediated transformation method of Haematococcus pluvialis(H .pluvialis) was established by using plant expression vector pBI 121 and A grobacterium tume f aciens EHA105 .The optimum concentration of G418 and carbenicillin was 200μg/L and 500mg/L ,respectively ,by screening for the effect of carbenicillin and G418 on alge H .pluvialis growth .Reporter gene GFP or YFP driven by CaMV 35S or tomato PDS promoter ,respectively ,was successfully expressed inH .pluvialis ,suggesting that the applica‐tion of pBI121 vector was broadened ,and thereby providing a new way for the genetic transformation of H . p luv ialis .Tomato‐derived PDS promoter is able to activate reporter gene expression ,indicating that botanical promoter can be expressed in H .pluvialis ,which provides a new method for the verification of promoters from plants and transient gene expression .【期刊名称】《合肥工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(039)009【总页数】7页(P1271-1277)【关键词】雨生红球藻;农杆菌;遗传转化;PDS启动子【作者】侯善茹;冯兴标;李光伟;陈丹阳;袁浏欢;刘永胜【作者单位】合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 230009;合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 230009;合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 230009;合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 230009;合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 230009;合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 230009【正文语种】中文【中图分类】Q78雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)属于绿藻门、绿藻纲、团藻目、红球藻科、红球藻属。

山西农业科学2020，48（5）：677-682雨生红球藻植物类型隐花色素基因克隆与序列分析杭伟,张宏江,马浩天,王晓丹,许文鑫,赵春超,李润植,崔红利（山西农业大学分子农业与生物能源研究所，山西太谷030801）摘要:为了从雨生红球藻中获得感知蓝光信号的植物类型隐花色素（CRY ）序列，采用同源克隆和RACE 相结合的方法获得了雨生红球藻编码植物类型Hae-P-CRY 的cDNA 全长，并对其序列进行生物信息学分析。

结果表明，Hae-P-CRY 基因的cDNA 全长为3608bp ，包含开放阅读框全长2988bp ，编码995个氨基酸，预测等电点6.19，理论分子质量为107.7ku 。

经Blast P 分析发现，Hae-P-CRY 氨基酸序列与莱茵衣藻来源植物类型CreCRY 氨基酸序列的相似性达到66.6%，与拟南芥CRY 氨基酸序列相似性为46.94%。

系统进化分析表明，Hae-P-CRY 与其他真核绿藻来源的植物型CRY 聚在一支，属于植物类型CRY 。

结构域分析表明，Hae-P-CRY 基因含有光感知PHR 结构域和信号转导CCT 结构域，暗示具有感知和转导光信号功能。

试验从雨生红球藻得到植物类型Hae-P-CRY 基因序列，可为其表达、功能及互作蛋白研究奠定基础，同时为进一步解析雨生红球藻在蓝光响应中的分子机制奠定基础。

关键词:雨生红球藻；隐花色素；基因克隆；生物信息学分析中图分类号:S917.3文献标识码:A文章编号:1002-2481（2020）05-0677-06Cloning and Sequence Analysis of Plant Type CryptochromeGene fromHANG Wei ，ZHANG Hongjiang ，MA Haotian ，WANG Xiaodan ，XU Wenxin ，ZHAO Chunchao ，LI Runzhi ，CUI Hongli（Institute of Molecular Agriculture and Bioenergy ，Shanxi Agricultural University ，Taigu 030801，China ）Abstract ：In this article,a full-length complementary DNA （cDNA ）sequence of plant type CRY （designated Hae-P-CRY ）was cloned from the green alga Haematococcus pluvialis .The homology cloning and rapid-amplification of cDNA ends （RACEs ）methods were applied to get the sequence of Hae-P-CRY .The result showed that the cDNA sequence length of Hae-P-CRY gene was 3608bp,which contained 2988bp open reading frame,294bp 5′-untranslated region （UTR ）,and 198bp 3′-UTR with the characteristic of the poly （A ）tail.The deduced protein （995amino acids ）had a calculated molecular mass of 107.7ku with an estimated isoelectric point （pI ）of 6.19.According to Blast P analysis,the similarity between Hae-P-CRY amino acid sequence and CreCRY amino acid sequence of Chlamydomonas reinhardtii was 66.6%,and that between Hae-P-CRY and CRY amino acid sequence of Arabidopsis was 46.94%.Phylogenetic analysis showed that Hae-P-CRY was a plant type CRY,which was clustered together with other eukaryotic green algae derived CRY.The results of domain analysis showed that Hae-P-CRY gene contained light sensing PHR domain and signal transduction CCT domain,suggesting that Hae-P-CRY gene had the function of sensing and transmitting light signals.The gene sequence of Hae-P-CRY from Haematococcus pluvialis can lay a foundation for the study of its expression,function and interaction protein,as well as for the further analysis of the molecular mechanism of Haematococcus pluvialis in blue-light response.Key words ：Haematococcus pluvialis ;cryptochrome;gene cloning;bioinformatics analysis收稿日期:2020-01-06基金项目:国家自然科学基金项目（31902394）；山西省应用基础研究项目（201801D22125）；辽宁省科学技术计划项目（20170540047）；山西省煤基重大科技专项（FT-2014-01）；山西省重点研发重点项目（201603D312005）；山西农业大学科技创新基金项目（2018YJ16）；山西省研究生教育创新项目（2019SY226）作者简介:杭伟（1991-），男，山西应县人，在读硕士，研究方向：基因工程与分子遗传。

雨生红球藻中蛋白质的研究进展及开发利用现状邱月，赵晓燕，刘红开，张桂香，张晓伟，朱海涛【摘要】雨生红球藻作为新资源食品，不仅是天然虾青素的“浓缩品”，还是一种潜在的蛋白资源。

藻蛋白具有抗氧化、降血压、抗肿瘤、抗血栓、免疫调节活性等作用，将在食品、保健品、医药学、染料等领域有广阔的发展前景。

目前，雨生红球藻多用于虾青素的研究，蛋白资源开发利用较少。

综述了雨生红球藻中蛋白质的分类、组成、制备方法、生物活性以及应用，旨在为雨生红球藻蛋白相关产品的开发提供参考。

【期刊名称】粮油食品科技【年(卷),期】2018(026)005【总页数】6【关键词】雨生红球藻蛋白；制备；组成；活性；应用雨生红球藻是一种淡水单细胞绿藻，于2010年被我国批准为新资源食品，是科学界目前发现的继螺旋藻、小球藻之后，又一富含营养价值和药用价值的经济微藻。

藻类是蛋白质的一个重要来源。

有研究表明，蓝藻中蛋白质含量能达到71%，绿海藻或红海藻次之，为10%~47%，棕海藻的蛋白质含量略低，为干物质的3%~15%[1-2]。

在欧洲，藻类已被开发成一种新型的功能性食品，藻蛋白所具备的抗氧化、降血压、抗肿瘤、抗血栓等一系列营养保健功能，推动其成为食品、保健品、医药等领域的研究热点。

迄今为止，国内外学者对雨生红球藻成分的研究大多集中在虾青素以及多糖，而忽略了藻蛋白的研究。

雨生红球藻中粗蛋白含量约为26%[3]，必需氨基酸模式与联合国粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）提出的理想模式相接近，是一种潜在的蛋白质来源。

红球藻中的藻蛋白可从提取完虾青素后废弃的藻渣中提取，提高其附加价值和综合利用程度。

本文就目前雨生红球藻中藻蛋白的分类、组成、制备方法、生物活性及藻蛋白的应用现状进行综述，以期为雨生红球藻蛋白相关产品的研发提供有力支持。

1 雨生红球藻中藻蛋白的种类根据吸收波长，将藻蛋白分为四类：藻红蛋白（PE，λmax490~570 nm）、藻红蓝蛋白（PEC，λmax560~600 nm）、藻蓝蛋白（PC，λmax610~ 625 nm）和别藻蓝蛋白（APC，λmax650~660 nm），统称为藻胆蛋白（PBP）。

雨生红球藻和小球藻间的原生质体融合与糖异养融合子筛选徐晓莹;史文凯;袁冠华;张文蕾;张维;崔玉琳;刘天中【摘要】为了增强雨生红球藻的异养生长能力,提高规模化培养效率,本研究基于PEG介导的原生质体融合技术,在雨生红球藻SCCAP K-0084和小球藻SAG211.11a间开展了细胞融合以及糖异养融合子筛选研究,筛选中通过限制性糖异养条件和添加潮霉素分别抑制野生型的雨生红球藻和小球藻的生长,提高筛选效率.结果表明,小球藻SAG211.11a具有极强的异养生长能力,能够利用葡萄糖、果糖、乙酸钠、甘油、苹果酸以及琥珀酸进行异养生长,而雨生红球藻则仅能够利用乙酸盐进行异养生长,此外雨生红球藻SCCAP K-0084还具有极强的潮霉素耐受能力,可以被应用于融合子筛选中.研究中,雨生红球藻和小球藻的原生质体制备效率分别达到72.11％±3.94％和42.07％±3.73％,满足细胞融合需要,融合过程中观察到雨生红球藻和小球藻间的典型融合现象,并且在限制性糖异养筛选下获得了雨生红球藻形态的融合子克隆,融合子的生长速率相比于野生型雨生红球藻有明显的增强,三个融合子在10d培养后细胞密度分别达到6.7×104、8.7×104、6.5×104个/mL,明显高于野生型的2.45×104个/mL,但是相比于小球藻10d后1.4×106个/mL的细胞密度而言,异养生长能力仍然有限,而且在连续传代过程中融合子经常会出现表型分化的现象.这一研究证明,通过细胞融合杂交的方式能够使雨生红球藻获得糖异养的生长能力,但是异源基因组间重组效率有待进一步提高.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2019(040)009【总页数】8页(P153-159,177)【关键词】雨生红球藻;小球藻;原生质体融合;融合子;糖异养【作者】徐晓莹;史文凯;袁冠华;张文蕾;张维;崔玉琳;刘天中【作者单位】中国科学院青岛生物能源与过程研究所,山东省能源生物遗传资源重点实验室,山东青岛266101;中国科学院大学,北京100049;烟台市水产研究所,山东烟台264003;烟台市水产研究所,山东烟台264003;中国科学院青岛生物能源与过程研究所,山东省能源生物遗传资源重点实验室,山东青岛266101;中国科学院大学,北京100049;中国科学院青岛生物能源与过程研究所,山东省能源生物遗传资源重点实验室,山东青岛266101;中国科学院青岛生物能源与过程研究所,山东省能源生物遗传资源重点实验室,山东青岛266101;中国科学院海岸带研究所,海岸带生物学与生物资源利用所重点实验室,山东烟台264003;中国科学院青岛生物能源与过程研究所,山东省能源生物遗传资源重点实验室,山东青岛266101【正文语种】中文【中图分类】TS201.3天然虾青素是世界上最强的天然抗氧化剂[1],广泛应用于医药健康、水产养殖等行业。

激光生物学报ACTA　LASER　BIOLOGY　SINICA Vol. 29 No. 6 Dec. 2020第29卷第6期2020年12月雨生红球藻caleosin基因的克隆、序列分析及表达特性朱　琴，张宏江，张春辉，崔红利，薛金爱*，李润植*（山西农业大学农学院分子农业与生物能源研究所，太谷 030801）摘　要：雨生红球藻钙蛋白（caleosin）有稳定油体的功能，为了研究该蛋白的理化特征及功能,利用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术（RACE）相结合的方法获得雨生红球藻caleosin基因的cDNA全长序列，并进行生物信息学分析和HaeClo基因的表达分析。

分析表明，HaeClo全长为1088 bp，共编码262个氨基酸，理论等电点为7.73。

BLAST同源比对表明HaeClo的氨基酸序列与盘藻（Gonium pectoral）和莱茵衣藻（Chlamydomonas rein-hardtii）来源的caleosin的相似性分别达到66%和61%，是一个典型的caleosin家族成员。

多序列比对及系统进化也表明HaeClo与其他高等植物和低等植物来源的caleosin有共同的祖先。

不同胁迫条件下，HaeClo基因在培养第3天时表达量均达到最高值，此时高蓝光+1/4氮处理组表达量达峰值，高白光+1/4氮处理组表达量次之，且目的蛋白在大肠杆菌中成功表达。

本文首次从雨生红球藻中克隆获得编码caleosin的基因序列，并进行了生物信息学分析，对高光和缺氮不同胁迫条件下的雨生红球藻进行了表达分析，进一步研究了HaeClo基因在雨生红球藻中的表达，为雨生红球藻中caleosin的表达和功能研究奠定了基础。

关键词：雨生红球藻；钙蛋白；基因克隆；系统进化；表达分析中图分类号：Q785；Q786 文献标志码：A DOI:10.3969/j.issn.1007-7146.2020.06.008 Molecular Cloning, Sequencing Analysis and Expression Characteristicsof Caleosin from Haematococcus pluvialisZHU Qin, ZHANG Hongjiang, ZHANG Chunhui, CUI Hongli, XUE Jinai*, LI Runzhi* (Institute of Molecular Agriculture & Bioenergy, College of Agriculture, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, China) Abstract:Haematococcus pluvialis caleosin has the function of stabilizing oil bodies. In order to investigate its physical and chemical characteristics and functions, the full-length cDNA sequence of cleosin gene of H. pluvialis was obtained by the method of combining homologous cloning and RACE amplification technology, and by the bioinformatics analysis, HaeClo gene expression analysis was conducted. The analysis showed that HaeClo was 1088 bp in length, encoding a total of 262 amino acids, and the theoretical isoelectric point of 7.73. BLAST homology comparison revealed that the amino acid sequenceof HaeClo had 66% and 61% similarity to caleosin derived from Gonium pectorale and Chlamydomonas reinhardtii, re-spectively, which was a typical caleosin family member. The analysis of multiple alignment and phylogenetic tree showed that caleosin derived from higher plants and lower plants may come from a common ancestor. Under different stress conditions, the收稿日期：2020-06-23；修回日期：2020-07-17。

雨生红球藻钙依赖蛋白激酶(CDPK)家族鉴定与表达分析李亚男;张豪杰;梁梦静;罗涛;李旺宁;张春辉;季春丽;李润植;薛金爱;崔红利【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2024(40)2【摘要】【目的】钙依赖蛋白激酶(CDPK或CPK)广泛参与植物生长发育和环境胁迫响应。

为探究CDPK基因在雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)生长发育及虾青素积累中的功能,对HpCDPK基因家族进行鉴定和表达分析。

【方法】利用生物信息学方法鉴定雨生红球藻HpCDPK基因家族成员,分析其编码蛋白的理化特性、系统进化、保守基序和功能结构域,以及缺氮等胁迫条件下HpCDPK成员基因的表达谱。

【结果】结果表明,共鉴定7个HpCDPK基因家族成员,所有HpCDPK 蛋白都含有典型EF-hand基序和蛋白激酶结构域。

系统发育分析表明,这些HpCDPK与来自莱茵衣藻的CrCDPK聚为一类,与高等植物拟南芥的AtCDPK分开,暗示在进化过程中发生了种属特异性的基因复制事件。

转录组数据分析表明,HpCDPK基因表达受到多种胁迫诱导,其中HpCDPK7基因转录水平在缺氮条件下上调最为明显。

此外,HpCDPK与类胡萝卜素合成相关基因的表达相关性分析结果显示,HpCDPK与多个类胡萝卜素合成相关基因表达密切关联,特别是HpCDPK2与虾青素合成关键基因(BKT和BCH)的表达显著正相关(P<0.05)。

【结论】本研究鉴定了7个HpCDPK基因,HpCDPK7基因在缺氮条件下的表达上调最为明显,HpCDPK2可能在类胡萝卜素及虾青素合成积累中发挥重要调控作用。

研究结果为后续深入解析HpCDPK介导雨生红球藻胁迫响应和类胡萝卜素合成积累的功能及分子机制提供参考依据。

【总页数】13页(P300-312)【作者】李亚男;张豪杰;梁梦静;罗涛;李旺宁;张春辉;季春丽;李润植;薛金爱;崔红利【作者单位】山西农业大学农学院分子农业与生物能源研究所;中国科学院烟台海岸带研究所海岸带生物学与生物资源利用重点实验室【正文语种】中文【中图分类】Q94【相关文献】1.曼氏迭宫绦虫钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅰ(SmCaMK Ⅰ)基因的生物信息学分析与表达鉴定2.茶树钙依赖性蛋白激酶基因CsCDPK17的鉴定及表达分析3.雨生红球藻转录因子Whirly1的获得及其表达分析4.雨生红球藻磷脂-二酰甘油酰基转移酶基因的鉴定与表达分析5.玉米钙依赖蛋白激酶全基因组鉴定及抗旱表达分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

雨生红球藻cDNA表达文库的构建与初步分析
雨生红球藻cDNA表达文库的构建与初步分析
为了筛选雨生红球藻虾青素合成过程中的胞为材料,提取了高质量的总RNA,并分离纯化了mRNA,经过反转录后的得到cDNA,构建了以λ-ZAP Express为载体的表达型cDNA文库.经检测,所构建的文库的滴度为5.1×10,重组率为100%.用PCR方法对文库的质量进行了鉴定,文库的平均插入片断的大小为1.7kb.雨生红球藻cDNA表达文库的构建为研究虾青素的代谢工程奠定了基础.
作者：梁成伟李友训孟春晓赵方庆杨庆利秦松作者单位：梁成伟,李友训,孟春晓,赵方庆,杨庆利(中国科学院海洋研究所,山东,青岛,266071;中国科学院研究生院,北京,100039)
秦松(中国科学院海洋研究所,山东,青岛,266071)
刊名：海洋通报ISTIC PKU英文刊名：MARINE SCIENCE BULLETIN 年，卷(期)：2006 25(2) 分类号：Q178.53 关键词：雨生红球藻 cDNA表达文库构建。

山西农业科学2022，50（3）：319-326Journal of Shanxi Agricultural Sciences doi:10.3969/j.issn.1002-2481.2022.03.06doi雨生红球藻磷脂-二酰甘油酰基转移酶基因的鉴定与表达分析赵春超，张宏江，臧敦秀，崔红利，李润植（山西农业大学农学院/分子农业与生物能源研究所，山西太谷030801）摘要：单细胞光自养雨生红球藻富集虾青素（AST）和三酰甘油（TAG）的合成调控机制目前还未得到解析。

以雨生红球藻-797株系为试验材料，克隆编码磷脂-二酰甘油酰基转移酶（HpPDAT）的基因、鉴定酶蛋白理化特征和分析不同光质下的表达谱。

结果显示，基于雨生红球藻转录组数据，鉴定获得一条编码HpPDAT的cDNA序列，全长3138bp，编码978个氨基酸，蛋白的分子式为C4437H6997O1396N1289S38，分子质量为101.95ku，理论等电点为6.15。

多序列比对结果显示，HpPDAT具有LCAT家族典型保守域。

系统发育分析显示，HpPDAT与微藻中的PDATs亲缘关系较近，而与高等植物的PDATs亲缘关系较远。

不同光质（白光、高白光、高蓝光、紫外和白光+紫外）条件下HpPDAT基因的表达谱分析揭示，与黑暗条件下的藻细胞相比，所测光质条件下藻细胞HpPDAT基因的表达均上调，特别是高蓝光（10000lx）显著促进了HpPDAT基因的表达，表达量达到黑暗条件下的9.6倍；不同光质条件下的细胞脂质合成发现，光照处理的总脂积累量要明显高于黑暗处理。

HpPDAT的表达量与总脂的积累量呈现出一致性，在高蓝光处理下获得了最高的总脂积累量（27%），是黑暗处理的1.9倍。

关键词：磷脂-二酰甘油酰基转移酶；基因鉴定；表达；光诱导；雨生红球藻中图分类号：S949.29文献标识码：A文章编号：1002-2481（2022）03-0319-08Identification and Expression Analysis of Phospholipid-DiacylglycerolAcyltransferase Gene（HpPDAT）from Haematococcus pluvialisZHAO Chunchao，ZHANG Hongjiang，ZANG Dunxiu，CUI Hongli，LI Runzhi（Institute of Molecular Agriculture and Bioenergy，College of Agriculture，Shanxi Agricultural University，Taigu030801，China）Abstract：Single-celled photoautotrophic green algal Haematococcus pluvialis enriches astaxanthin（AST）and triacylglycerol （TAG）.However,its synthesis regulation mechanism has not yet been resolved.In this paper,the gene encoding phospholipid-diacylglycerol acyltransferase（HpPDAT）was cloned from the H.pluvialis-797strain.Meanwhile,the protein physicochemical characteristics of the enzyme was identified.In addition,the transcription expression profiles of HpPDAT under different light quality conditions were also determined.A full-length cDNA encoding HpPDAT was identified based on the transcriptome data of H.pluvialis.It contained3138bp and encoded978amino acids residues.The molecular formula,molecular weight,and theoretical isoelectric point were C4437H6997O1396N1289S38,101.95ku,and6.15,respectively.Multiple sequence alignment showed that HpPDAT had typical conserved domains of the LCAT family.Phylogenetic analysis indicated that HpPDAT was closely related to PDATs from microalgae,but was relatively distantly related to PDATs from higher plants.Analysis the HpPDAT gene expression profiles under different light quality conditions（white light,high white light,high blue light,ultraviolet and white light+ultraviolet）revealed that compared with algae cells under dark conditions,the expressions of HpPDAT gene in algae cells under the measured light quality conditions were all up-regulated.In particular,high blue light（10000lx）significantly promoted the expression of HpPDAT gene,the expression quantity under the light reached9.6times of that under dark conditions.Meanwhile,analysis lipid synthesis under different light quality conditions found that the accumulation of total lipids under light treatment was significantly higher than that under dark treatment.The expression quantity of PDAT is consistent with the accumulation of total lipids.The highest accumulation of total lipids（27%）was obtained under high blue light treatment,the accumulation was1.9times of that under dark treatment.收稿日期：2021-08-18基金项目：国家自然科学基金项目（31902394）；山西农谷建设科研专项项目（SXNGISKYZX201906）；山西农业大学博士启动基金项目（2018YJ16）作者简介：赵春超（1996-），男，山西太原人，在读硕士，研究方向：微藻生物技术。

雨生红球藻质体球滴结构蛋白基因的克隆与原核表达范勇;于广欣;汪乐霓;曲芳兵;冷鹂;兰利琼;卿人韦【期刊名称】《水生生物学报》【年(卷),期】2012(036)004【摘要】叶绿体或者有色体中的质体球滴结构(Plastoglobules)是多数植物的类胡萝卜素等次生代谢产物积累的场所,但在能大量积累虾青素的雨生红球藻中,这个结构一直没有得到确认.通过透射电子显微镜观察发现雨生红球藻的质体内确切存在plastoglobules结构;并通过RT-PCR结合RACE技术,从雨生红球藻cDNA文库中克隆到了与编码plastoglobules的结构蛋白(Plastoglobulin)具有高度同源性的基因序列全长,称做Hpgp基因;该基因的表达产物称之为雨生红球藻质体球滴蛋白(HPGP; Haematococcus plastoglobules protein);并进一步利用原核表达系统将该编码基因进行原核诱导表达,用His-Tag蛋白分离纯化系统纯化到了目标蛋白,并用该His-Tag融合蛋白为抗原免疫实验兔,制备到了相应的一抗抗体,为下一步对该蛋白的功能阐明以及雨生红球藻的虾青素积累机制研究提供重要的基础.%Carotenoids were organized in plastoglobules located in the interthylakoid space of the chloroplast for many plants. However, the plastoglobule, a carotenoid deposit structure in chromoplast, was not clear in Haematococcus pluvialis yet up to date. In the present study, many osmiophilic globuli appeared in both the chromoplast and cytoplasm ofH, pluvialis under electron microscopy with a modified method. Those revealed clearly the presence of plastoglobules in the chloroplast of H. pluvialis. A full-length cDNA was isolated from H. pluvialis through a RT-PCR and RACE (rapid amplification of cDNA ends) method. And the completing cDNA encoded a protein which had high homology with the major component proteins of plastoglobules in many plants and was termed as HPGP (Haematococcus plastoglobules protein). Furthermore, this cDNA was expressed in the prokaryotic expression system, and the resultant fusion proteins with His-Tags were purified by immobilized metal affinity chromatography (IMAC). The polyclonal antibodies against the protein were raised in rabbits and the raw serum was collected without further purification. Those might provide an important basis for unraveling the function of the protein in the future.【总页数】6页(P640-645)【作者】范勇;于广欣;汪乐霓;曲芳兵;冷鹂;兰利琼;卿人韦【作者单位】四川大学生命科学学院,成都610065;中海油新能源投资有限责任公司,北京 100016;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065【正文语种】中文【中图分类】Q781【相关文献】1.雨生红球藻和小球藻间的原生质体融合与糖异养融合子筛选 [J], 徐晓莹;史文凯;袁冠华;张文蕾;张维;崔玉琳;刘天中2.雨生红球藻HaeDGAT2-3的分子克隆和生物信息学分析 [J], 张宏江; 赵春超;许文鑫; 杭伟; 崔红利; 李润植3.雨生红球藻己糖激酶基因的克隆和生物信息学分析 [J], 石颖;宋亚楠;张宏江;季春丽;张春辉;李润植;崔红利4.雨生红球藻sir基因克隆及在硫代谢中的功能分析 [J], 卫雪红;臧晓南;石佳伟;丛晓梅;昝佳伟5.雨生红球藻原生质体制备与再生育种 [J], 叶涛;王明兹;黄建忠;陈必链因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。