VITEK全自动微生物检测系统原理及其应用
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全自动微生物鉴定/药敏系统VITEK 2 COMPACT 301、设备的主要用途、功能及特点该系统为完整的全自动细菌鉴定和药敏分析系统,细菌鉴定采用生化反应数码鉴定原理。
可以以最少的实验人员及最短的准备和处理时间,提供最准确的测定结果。
数据库应涵盖革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、芽胞菌、酵母菌、奈瑟氏菌及嗜血杆菌、厌氧菌;必需有生物反恐菌的鉴定能力(鼠疫杆菌、霍乱弧菌、吐拉菌等)2、技术参数及指标①系统组成:电脑主机为国际知名品牌原装PC;另有比浊仪、充填系统、读数孵育系统、数据处理系统、废弃物收集系统、打印机等;②检测原理:采用生化反应数码鉴定原理,结合终点法、阈值法、特别是动态分析法的检测原理,24小时连续自动检测,并时时出报告;③充填处理量:每批可同时填充10个试剂卡。
④充填方式::利用真空原理进行试剂卡的填充。
⑤菌液用量:3ml。
⑥试卡密封方式:自动热切割掉试剂卡上的菌液传送小管,进行密封。
⑦鉴定速度:每15分钟对同一卡片进行1次光学检测。
细菌5小时内鉴定率达95%,一般3-5小时,酵母菌≤18小时,芽孢菌≤14小时。
⑧鉴定准确率:90% 的试验将报告单一的鉴定结果。
⑨鉴定范围:鉴定细菌种类齐全,含概革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、酵母菌、芽孢菌、奈瑟氏菌嗜血菌弯曲菌、厌氧菌,要求≥550种菌。
⑩药敏功能:平均药敏检测时间7小时,专家规则同时符合美国CLSI、德国DIN、法国AFNOR标准。
⑪自动化程序:自动接种、全封闭实验板、自动培养及判读、打印结果、自动收集废弃物。
⑫试卡设计:试卡上有64微孔,内含有鉴定或药敏所用的生化或抗生素干燥底物;实验过程中除需要从厂家购买鉴定卡和药敏卡之外无其他专用附加试剂和耗材,可上机一次性完成鉴定和药敏工作,无需附加试验和补充实验。
⑬光学系统:应用至少三种波长系统和透光度光学系统进行试剂卡样本孔中细菌生长的分析。
透光度检测系统可装载3个透光单元,由电子发光二级管(660nm和568nm)和硅光电探测器组成,用于浊度检测。
全自动细菌鉴定仪设备名称:梅里埃vitek2全自动细菌鉴定仪规格型号:梅里埃vitek2使用科室:检验科安装时间:2009*能特点●患者优先抗生素的耐**提高预示着可用的抗生素不断减少。
vitek2pact可以在更短时间内完成所有常规工作。
并将注意力集中在那些要求更高*技能的棘手任务上,这个高度自动化的系统可以同一天内提供鉴定和*敏结果。
●同一天出结果vitek2测试卡-细菌鉴定/*敏当日报告的领先理念5-8小时提供*敏分析结果减少手工*作时间,无需添加其它试剂密闭处理,系统最大程度优化生物安全*测试卡上的条形码,提供最大可追溯*重量轻,降低了处理成本●简单*作,3步完成标准化初步分离后,简单、标准化地制备、稀释菌悬液后,将标准化的菌悬液置于载卡架槽内,并通过扫描条形码将标本编号输入电脑软件中。
可追溯*从从测试卡上的条形码读出vitek2测试卡类型,由此将测试卡与标本和患者信息联系起来。
载入和运行装载仓将载卡架放入装载仓中。
当卡片填充后,将载卡架转移到读卡器/孵育仓。
所有后续步骤均通过仪器自动进行。
●瞬间出结果直观、易懂、熟悉的windows界面利用导览过滤功能,方便查询鉴定和*敏结果通过快速结果搜索,可按患者、工作台、检测日期、细菌种类、技术员和登录号码检索与lis系统实现简便的数据交换自动验*和传输初期结果抗生素选择简便为便于选择最合适的抗生素,生物梅里埃公司开发了高级专家系统以提供快速、准确的指纹识别细菌耐*机制绿*指示符:完全一致的结果黄*指示符:不一致的结果,要求审查红*指示符:未知表型,核查结果紫*标识符:表型不在数据库中设计灵活提供15、30及60个卡位几种选择系统包括电脑、读卡器/孵育仓能够进行革兰**菌、革兰阳*菌、酵母菌、厌氧菌的鉴定和*敏试验2个读卡器/孵育仓可连接在一起,增加工作容量。
VITEK2 COMPACT全自动鉴定药敏分析标准操作规程1.目的规范VITEK2 COMPACT全自动鉴定药敏分析仪的操作规程,确保微生物鉴定药敏分析的准确性。
2.授权操作人经培训并通过考核的检验科微生物检验实验室工作人员。
3.工作原理细菌理化性质不同,分解底物导致PH改变而产生不同颜色。
经光电比色法测定来判断反应结果,不同种类的鉴定卡上有不同数量和类别的生化反应,采用连续检测法,每隔一段时间仪器会自动判读结果,最后结合仪器内部微生物数据库得出鉴定及药敏结果。
4.工作环境相对湿度:20%-80%无凝集水;室温:15-30度,避免日光直射。
5.操作程序5.1卡片选择5.1.1鉴定卡GN 革兰阴性杆菌鉴定卡GP 革兰阳性菌鉴定卡NH 奈瑟菌嗜血杆菌鉴定卡YST 酵母菌鉴定卡ANC 厌氧菌鉴定卡5.1.2 药敏卡AST-GN 革兰阴性菌药敏卡AST-GP 革兰阳性菌药敏卡AST-YST 真菌药敏卡5.2菌悬液配置及稀释5.2.1悬浮液:0.45% NaCL液,PH 4.5-7.25.2.2.菌悬液浓度:鉴定卡GN 0.5 - 0.63 麦氏单位GP 0.5 - 0.63 麦氏单位NH 2.7 - 3.3 麦氏单位YST 1.8 - 2.2 麦氏单位ANC 2.7-3.3 麦氏单位药敏卡AST-GN 3.0ml 盐水+ 145µl 0.5 –0.63 麦氏单位菌悬液AST-GP 3.0ml 盐水+ 280µl 0.5 –0.63 麦氏单位菌悬液AST-YST 3.0ml 盐水+ 280µl 1.8 –2.2 麦氏单位菌悬液5.2.3药敏卡稀释方法-按上述浓度手工进行稀释VITEK 2 COMPACT上机前的细菌培养要求(表一) 菌种卡片注:TSA:胰酶大豆琼脂TSAB:胰酶大豆琼脂+5%羊血CBA:哥伦比亚羊血琼脂CHBA:哥伦比亚马血琼脂MAC:麦康凯琼脂CPS ID 3:尿标本产色鉴定平板SDA:沙保弱葡萄糖琼脂CAN: 哥伦比亚CAN琼脂+5%羊血CDC: CDC厌氧琼脂+5%羊血BRU: Brucella布氏琼脂+5%羊血,血红素,维生素K5.3操作流程5.3.1 18-24小时分纯细菌(新鲜菌);5.3.2根据细菌选卡片(参照表一);5.3.3使用前将卡片和盐水瓶从冰箱取出,放室温15-20分钟,充分复温;5.3.4在载卡架上放一次性塑料试管(注意:必须使用厂家配套提供的塑料管),每管中加入3ml 0.45% NaCl溶液;5.3.5用比浊仪校正管(Ref 93059)校正比浊仪,测定的数值应在规定范围内;5.3.6按表一建议配制菌悬液,并用比浊仪测定菌液浓度;如同时做药敏试验时,应按二(2)建议进行稀释并混匀;5.3.7将卡片按顺序放在载卡架上,输样管插入到菌液管中。
微生物自动化鉴定系统的工作原理微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。
数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。
目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界范围内临床实验室中广泛应用。
一、微生物数码鉴定法早在七十年代中期,一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。
这些技术的应用,为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序,大大提高了细菌鉴定的准确性。
目前,微生物编码鉴定技术已经得到普遍应用,并早已商品化和形成独特的不同细菌鉴定系统。
如API、Micro-ID、RapID、Enterotube和Minitek 等系统。
这种鉴定系统是自动化鉴定系统的基础。
(一)数码鉴定法基本原理数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码,建立数据库或编成检索本。
通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。
其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。
随着电脑技术的进步,这一过程已变得非常容易。
1.简要介绍计算步骤:(1)出现频率(概率)的计算:将记录成阳性或阴性结果转换成出现频率:①对阳性特征,则除以100即得。
②对阴性特征,除以100的商被1减去即可。
③说明:对“0”和“100”,因这2个数太超量,为了使结果不出现过小或过大,而用相似值0.01或0.99值代替。
(2)在每一个分类单位中,将所有测定项目的出现频率相乘,得出总出现频率。
(3)在每个分类菌群中的所有菌的总出现频率相加,除以一个分类单位的总出现频率,乘100,即得鉴定%(%id)(4)在每个菌群中,再按%id值大小顺序重新排列。
将未知菌单次总发生频率除以最典型反应模式单次总发生频率,得到模式频率T值,代表个体与总体的近似值。
VITEK全自动微生物检测系统原理及其应用近年来,微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化,并力求简便、快速、准确。
由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK是目前世界上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。
近年来,微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化,并力求简便、快速、准确。
由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK是目前世界上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。
VITEK已被许多国家定为细菌最终鉴定设备,并获美国药品食品管理局(FDA)认可。
该系统有高度的特异性、敏感性和重复性,还具有操作简便、检测速度快的特点,绝大多数细菌的鉴定在2~18 h内可得出结果。
现将该系统的工作原理、主要结构、功能并结合我们使用后的一些体会介绍如下。
1工作原理VITEK对细菌的鉴定是以每种细菌的微量生化反应为基础,不同种类的VITEK试卡(检测卡)含有多种的生化反应孔,可达30种。
将手工分离的待检菌的纯菌落制成符合一定浊度要求的菌悬液,经充填机将菌悬液注入试卡内,封口后放入读数器/恒温培养箱,根据试卡各生化反应孔中的生长变化情况,由读数器按光学扫描原理,定时测定各生化介质中指示剂的显色(或浊度反应,然后把读出信息输入电脑储存并进行分析,再和预定的阈值进行比较,判定反应,再通过数值编码技术与数据库中反应文件进行比较,最后鉴定报告将在显示器上自动显示)并在打印机上自动打印。
2VITEK系统的结构组成2.1检测卡目前VITEK系统的检测卡有14种,微生物常用的有7种,即:革兰氏阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰氏阴性菌卡(GNI+)、非发酵菌卡(NFC)、酵母菌卡(YBC)、厌氧菌卡(ANI)、芽胞杆菌卡(BAC)、奈瑟氏菌嗜血杆菌卡(NHI),以及药敏检测卡等。
每张检测卡对应接种1份标本,检测卡为一次性消耗品。
2.2充填机将待测菌的菌悬液注入试卡内。
vitekgn鉴定卡原理VitekGN是一种常用的鉴定卡,它采用特殊的原理来进行鉴定工作。
本文将介绍VitekGN鉴定卡的原理及其应用。
一、VitekGN鉴定卡的原理VitekGN鉴定卡是一种基于生物化学反应的鉴定方法,主要用于快速检测微生物的菌落形态和生化特性。
其原理是利用菌株在特定培养基上生长产生的代谢产物和酶活性差异,通过观察鉴定卡上的反应结果,可以快速确定菌株的种属和鉴定结果。
二、VitekGN鉴定卡的应用VitekGN鉴定卡广泛应用于医疗、食品安全、环境监测等领域。
下面将分别介绍其在这些领域的应用。
1.医疗领域在临床医学中,快速准确地鉴定病原微生物对于治疗和预防感染病非常重要。
VitekGN鉴定卡可以用于快速鉴定细菌和真菌的种属和抗药性,有助于医生选择合适的抗生素和治疗方案。
2.食品安全领域食品中微生物的污染会对人体健康产生严重影响,因此食品安全监测非常重要。
VitekGN鉴定卡可以用于食品中细菌的快速鉴定和菌群分析,有助于及时发现食品中的污染源并采取相应措施。
3.环境监测领域环境中的微生物对于生态平衡和环境健康具有重要作用。
VitekGN 鉴定卡可以用于环境样品中微生物的鉴定和分析,有助于了解环境中微生物的种类和数量,为环境保护提供科学依据。
三、VitekGN鉴定卡的优势VitekGN鉴定卡相比传统的鉴定方法具有以下优势:1.快速:VitekGN鉴定卡可以在短时间内完成鉴定工作,比传统方法节省时间。
2.准确:VitekGN鉴定卡基于生物化学反应原理,能够准确判断菌株的种属和鉴定结果。
3.自动化:VitekGN鉴定卡可以与自动化鉴定系统配套使用,实现鉴定过程的自动化,提高工作效率和准确性。
4.多样性:VitekGN鉴定卡可用于鉴定多种不同类型的微生物,具有广泛的适用性。
总结:VitekGN鉴定卡是一种基于生物化学反应的鉴定方法,可以快速准确地鉴定微生物的菌落形态和生化特性。
它在医疗、食品安全和环境监测等领域都有重要应用,能够为相关领域的工作提供科学支持。
VITEK全自动微生物检测系统原理及其应用
近年来,微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化,并力求简便、快速、准确。
由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK是目前世界上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。
近年来,微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化,并力求简便、快速、准确。
由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK是目前世界上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。
VITEK已被许多国家定为细菌最终鉴定设备,并获美国药品食品管理局(FDA)认可。
该系统有高度的特异性、敏感性和重复性,还具有操作简便、检测速度快的特点,绝大多数细菌的鉴定在2~18 h内可得出结果。
现将该系统的工作原理、主要结构、功能并结合我们使用后的一些体会介绍如下。
1工作原理
VITEK对细菌的鉴定是以每种细菌的微量生化反应为基础,不同种类的VITEK试卡(检测卡)含有多种的生化反应孔,可达30种。
将手工分离的待检菌的纯菌落制成符合一定浊度要求的菌悬液,经充填机将菌悬液注入试卡内,封口后放入读数器/恒温培养箱,根据试卡各生化反应孔中的生长变化情况,由读数器按光学扫描原理,定时测定各生化介质中指示剂的显色(或浊度反应,然后把读出信息输入电脑储存并进行分析,再和预定的阈值进行比较,判定反应,再通过数值编码技术与数据库中反应文件进行比较,最后鉴定报告将在显示器上自动显示)并在打印机上自动打印。
2VITEK系统的结构组成
2.1检测卡
目前VITEK系统的检测卡有14种,微生物常用的有7种,即:革兰氏阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰氏阴性菌卡(GNI+)、非发酵菌卡(NFC)、酵母菌卡(YBC)、厌氧菌卡(ANI)、芽胞杆菌卡(BAC)、奈瑟氏菌嗜血杆菌卡(NHI),以及药敏检测卡等。
每张检测卡对应接种1份标本,检测卡为一次性消耗品。
2.2充填机将待测菌的菌悬液注入试卡内。
2.3读数器/恒温箱可在培养过程中定时读出细菌在试卡内培养基中的生长变化值。
2.4电脑主机/显示器/键盘/打印机用于储存和分析资料、系统的操作和结果分析鉴定,实验结果的自动显示报告和打印。
2.5电源稳压器和UPS在外围断电的情况下提供电脑主机约10 min持续电源。
3VITEK系统的功能
3.1可鉴定405种细菌
其中:GPI卡可鉴定凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌、肠球菌、草绿色和β溶血链球菌、棒状杆菌属以及李斯特氏菌属和丹毒丝菌等51种;GNI+卡可鉴定肠杆菌科、弧菌科和非发酵菌等116种;NFC卡可鉴定不动杆菌、气单胞菌、产碱杆菌、假单胞菌、弧菌等42种;YBC卡可鉴定假丝酵母(念珠菌)、隐球菌、地霉、丝孢酵母、红酵母等34种;ANI卡可鉴定放线菌、拟杆菌、梭杆菌、乳杆菌、真杆菌、梭菌、消化链球菌等94种;BAC卡可鉴定芽胞杆菌21种;NHI卡可鉴定奈瑟氏菌、嗜血杆菌、金氏菌、摩拉氏菌、布兰汉氏菌等47种。
3.2可对澄清液体中的微生物进行计数。
3.3检测细菌生长曲线。
3.4药敏试验有70多种药物约50多种药物组合的药敏卡。
4实际应用讨论
实验室自引进VITEK系统后,用已知的金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、李斯特氏菌、O157∶H7、沙门氏菌、志贺氏菌、绿脓杆菌、副溶血弧菌共8株标准菌株进行检测,结果与已知的完全相符。
而且鉴定沙门氏菌属只需4 h,志贺氏菌属6 h,缩短了肠道致病菌生化鉴定的时间,操作也简便。
如1999年7月13日晚某市一大厦中心餐厅发生食物中毒,发病49人。
将可疑菌株用VITEK仪器进行鉴定,仅用13 h就得出鉴定结果,而常规鉴定则需24 h。
又如1999年6月从一胖听的进口烤鳗酱油中分离出可疑酵母菌株,VITEK系统的YBC 卡鉴定为丛生丝孢酵母。
而常规法鉴定酵母菌需配制各种培养基,一般实验室试剂多不齐全,且鉴定者要有相当的工作经验。
然而在未知菌的鉴定中,VITEK系统有时会因种种因素不能顺利获得鉴定报告,或由一些特殊的报告信息代替了正常的鉴定结果。
最常见的有“unidentified organism”(不能鉴定的细菌)。
产生这一报告的原因有:①待检细菌不是单一菌株;②试卡生化小孔有气泡严重干扰比色;③菌龄太老;④所配制的待检菌菌悬液浊度过高或过低;⑤待检菌不能均匀悬浮于0.45%~0.5%盐水中;⑥罕见生物新种或不典型菌株,数据库缺乏资料。
在VITEK的最后鉴定报告上,有时也会出现一些限定信息,这些限定信息是与鉴定结果同时存在的,它阐述了合格鉴定的标准。
最常见的有“good confidence marginal separation”(好的可信性但难于区分),即生化反应结果同时相似于数据库中两个菌,且产生可接受的绝对相似值,使两种菌间难于区分,需加一些试验方可确定其最后鉴定。
例如:副溶血弧菌
与嗜水气单胞菌在NFC卡上的生化特征是相似的,当鉴定结果出现首选菌为副溶血弧菌、次选菌为嗜水气单胞菌时,鉴定结果同时还会提示参看技术资料,技术资料则阐明通过外加VP试验、0%NaCl生长试验、七叶苷试验来加以区别并鉴定到种。
副溶血弧菌阳性百分率均为0,嗜水气单胞菌分别为98%、100%和96%。
有些菌的最后鉴定仪器不能完成,需要血清学方法证实。
例如:当GNI+卡中最后鉴定报告首选菌是沙门氏菌属、志贺氏菌属、霍乱弧菌、O157∶H7等,应用相应特异性抗血清进行证实。
常规的微生物学诊断也要求对上述菌的最后鉴定作特异血清凝集试验。
目前VITEK系统在对李斯特氏菌的最终鉴定上只能达到属的水平,对李斯特氏菌种的分类可用生物梅里埃的API LISTERIA系列鉴定试剂条来完成。
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