短波紫外线对日本三角涡虫的

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图ｌ ｕＶ－ｃ照射时涡虫死亡率的影响
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圉２照射前涡虫形态和２０ ｍｉｎ照射组涡虫的解体过程
ｌ材料与方法
１．１实验材料 日本三角涡虫采自安徽省芜湖市汀棠公园，暂
养在实验室培养箱（温度为１６℃），每隔４天喂１次 新鲜猪肝。在实验前ｌ周停止喂食；随机挑取体长 约为１．Ｏ ｃｍ的无损伤成体涡虫。总蛋白定量试剂 盒、ＬＤＨ、Ｎａ＋－Ｋ＋·ＡＴＰ酶、ｃａ¨一Ｍｇｚ＋一ＡＴＰ酶、ｓＯＤ、 ｃＡＴ和ＧｓＨ—Ｐｘ活力测定试剂盒均由南京建成生物 工程研究所提供。 １．２实验方法 １．２．１ ｕＶ－ｃ照射时间的摸索在功率２０ｗ、波 长２５７．３ ｎｍ的紫外灯管正下方３０ ｃｍ处照射涡虫。 从Ｏ ｍｉｎ一６０ ｍｉｎ以５ ｍｉｎ为间隔，设置不同照射时 间的实验组，每组２０只涡虫，预实验发现３５血ｎ照 射组照射完毕就有部分涡虫解体，而３０ ｍｉｎ照射组 照射完毕后１０ ｍｉｎ左右开始出现死亡解体现象。 １．２．２ ｕＶ－ｃ照射后涡虫损伤情况的观察将 ３９２只涡虫分成７组（每组５６只），置于１２孔比色板 上（每孔１只），每组分别照射Ｏ ｍｉｎ、５ ｍｉｎ、１０ ｍｉｎ、 １５ ｎｌｉｎ、２０ ｌＩｌｉｎ、２５ ｍｉｎ和３０ ｍｉｎ。照射后每组取出 ２０只用于损伤观察，定时观察并记录其死亡解体的 个体数，持续观察２４ ｈ。 １．２．３ 总蛋白含量及酶活力的测定在随机取出 ２０只涡虫观察损伤情况的同时，每组剩下的３６只涡 虫迅速用去离子水清洗两遍并分组研磨，加去离子 水至ｌ ５００止制成组织匀浆，再以３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心 １０ ｍｉｎ提取上清液，测定总蛋白含量及几种酶的活 力，测定方法按试剂盒说明书进行。
第１６卷第５期 ２００７年１０月
·基础研究－
激光生物学报
ＡＣＴＡ ＬＡＳＥＲ Ｂ１０ＬＯＧＹ ＳＩＮｌＣＡ
短波紫外线对日本三角涡虫的 损伤及六种酶活力的影响
Ｖ０１．１６ Ｎｏ．５ ０吐．２００７
潘红春‘，王芳芳，吴宝山，孙祯，朱国萍 （安徽师范太学生命科学学院分子进化与生物多样性实验室，安徽芜湖２４１０００）
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２结果
２．１ ｕＶ．ｃ对涡虫生存的影响 紫外线照射３０ ｍｉｎ的实验组在停止照射后的
１．５ ｈ内全部死亡解体，照射２５ １Ｉｌｉｎ的实验组在停止 照射后的２．５ ｈ内全部解体，照射２０ ｍｉｎ的实验组 在停止照射后的７ ｈ内全部解体，照射１５ ｍｉⅡ的实 验组在停止照射后的１６ ｈ内全部解体，照射ｌＯ ｍｉｎ 的实验组在停止照射后观察的“ｈ内部分涡虫解 体，而照射５ ｍｉｎ的实验组无涡虫解体。随着照射时
分子生物学方面研究。（电话）０５５３＿３８７７９７４；（手机）１３９６５１５４３９９；（电子信箱）ｐ明ｈ仰ｇｃｈｕｎ＠１２６．ｃｏｍ ·通讯作者
万方数据
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第１６卷
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紫外线对陆生动物如小鼠、昆虫的影响研究较 多”…，另外还有相当数量的研究集中在紫外线辐射 对体外培养细胞的生物学效应”…。紫外线不仅对 陆生生物有影响、对水生生物也同样有影响”““ｊ，但 紫外线对水生生物影响方面的研究非常少见。日本
三角涡虫（Ｄ咿谊却ｏｎ缸口）属于扁形动物门（Ｐ】ａ印－
ｈｅｌｍｉｎｔｈｅｓ）涡虫纲（Ｔｕｒｂｅｌｌ“ａ），是广泛分布于各类 淡水水体中常见的涡虫种类之一，具有取材方便、在 实验室易培养以及无性繁殖速度快等优点，是一种 常用的实验动物，在动物再生、干细胞和生殖生物学 等研究领域具有较高的科研价值。虽然如重金属等 负面环境因子对涡虫再生部位细胞分裂和染色体形 态的影响“２３及对涡虫体内酶的影响“列已有少量报 道，但紫外线辐射对涡虫的损伤以及对其体内代谢 酶和抗氧化酶的影响国内外至今尚未见报道。本文 旨在探讨日本三角涡虫对紫外线辐射产生反应的敏 感程度。
收稿日期：２００６—０９－２９；修回日期：２００７＿０３．０５ 基金项目：安徽省高校“生物环境与生态安全”省级重点实验室资助项目（２００７旬１）；安徽省“重要生物资源保护与
利用研究”重点实验室资助项目（２００６．０５） 作者简介：潘红春（１９６９一），男，曾用名潘鸿春，安徽省怀宁县人，教授，理学博士，硕士研究生导师，主要从事动物
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２．２ ｕＶ－ｃ对涡虫体内ＬＤＨ，Ｎａ＋－Ｋ＋－Ａ７ｒＰ酶， ｃａ“一Ｍ９２＋一Ａ１Ｐ酶的影响 ２．２．１ ｕＶ－ｃ对ＬＤＨ的影响在开始照射１０ ｍｉｎ 内其ＬＤＨ活力呈现上升趋势，但照射１０ ｌＩｌｉｎ之后 ＬＤＨ的活力开始降低。随着紫外线照射时间的增 加，ＬＤＨ的活力总体呈下降趋势（图３）。 ２．２．２ ＵＶ·Ｃ对ＡＴＰ酶的影响 Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶 括力随着紫外线照射的时间的增加整体呈上升趋势 （图４），而ｃａ“一Ｍ９２＋一ＡＴＰ酶的活力呈下降趋势（图 ５）。
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２．３．２ ＵＶ－Ｃ对ＣＡＴ活力的影响照射５ ｍｉｎ实 验组涡虫ｃＡＴ活力要高于照射Ｏ ｍｉｎ对照组。从照 射１０ ｍｉｎ组到照射２５ ｍｉｎ组，涡虫ｃＡＴ活力虽然与 照射５“ｎ组相比有所降低，但是仍然高于对照组，照 射３０“ｎ组涡虫酶活力达到最高。从趋势线可以看 出随着照射时间的增加ｃＡＴ活力呈现增加趋势（图 ７）。
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图３ ＵＶ—Ｃ照射对涡虫ＬＤＨ活力的韶响
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近几十年来，由于人类大量使用破坏大气臭氧 层的制冷剂氟利昂．导致地面紫外线辐射量增加，紫 外线辐射对人类的损伤逐渐受到重视。许多研究表 明，紫外线可诱发皮肤红斑和老化、白内障、光敏性 疾病、异常的ＤＮＡ合成、ＤＮＡ损伤以及皮肤肿瘤等。 日光浴或紫外线浴健身．健美在世界许多地区成为 时尚，但过度紫外线辐射也同时是全世界每年约１３０ 万皮肤肿瘤病例的主要原因…。自１９７３年以来。皮 肤肿瘤的发病率以大约每年４％的速度增长。另有 研究表明，过度地照射紫外线还会抑制人体的免疫 力”１。随着地球环境中的紫外线辐射量增加趋势以 及过度紫外线辐射对地球生物可能造成的严重后 果，研究紫外线对生物的损伤显得非常迫切。根据 波长将紫外线分为长波紫外线（ｕＶ－Ａ，波长４００ ｎｍ 一３２０ ｎｍ），中波紫外线（ｕＶ．Ｂ，波长３２０ ｎｍ一２８０ ｎｍ）和短波紫外线（ｕＶ－ｃ，波长２８０ ｎｍ～１００ ｎｍ）。 ｕＶ·Ａ易引起色素沉着；ｕＶ－Ｂ的生物学作用很明显； ｕＶ－ｃ能引起蛋白质和脂质结构的改变，破坏核酸代 谢。尽管到达地面的太阳辐射中ｕＶ－Ａ和ＵＶ－Ｂ所 占比例较大而ｕＶ－ｃ所占比例小，但与ｕＶ·Ａ和ｕＶ— Ｂ相比ｕＶ—ｃ对生物的影响和杀伤力却最明显，所以 开展ｕｖ．ｃ生物学效应的研究是必要的。