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细菌鞭毛染色及运动性观察摘要：实验包括用压滴法制片对细菌的运动性观察；用硝酸银染色法对细菌鞭毛进行染色及观察。
学习用压滴法观察细菌的运动性，掌握鞭毛染色法，观察细菌鞭毛的形态特征关键词：压滴法运动性硝酸银染色法鞭毛前言：鞭毛是细菌的纤细丝状运动“器官”。
鞭毛的有无，数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
它是原核生物实现其趋性的最有效方式，具鞭毛的细菌在液体中借助鞭毛的旋转，使菌体能定向的泳动。
鞭毛的直径一般20—30nm，只有用电镜才能直接观察到。
若用普通光学显微镜观察，必须使用鞭毛染色法。
首先用媒染剂（如单宁酸或明矾钾）处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用适合的方法进行染色。
1材料和方法1.1材料1.1.1菌种枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌1.1.2 溶液和试剂无菌水稀释美兰95%乙醇硝酸银鞭毛染液香柏油二甲苯1.1.3 仪器和其他用品普通光学显微镜擦镜纸载玻片酒精灯双层瓶接种环滴管试管夹1.2方法1.2.1压滴法（1）制片：取一个干净的载玻片，中央滴加一滴无菌水，无菌条件下取适量菌种进行涂片。
加一滴稀释美兰与之混合均匀，将盖玻片一边与菌液接触，慢慢放下盖玻片。
（2）镜检：迅速用油镜镜检。
1.2.2鞭毛染色（1）载玻片的准备：将干净的载玻片置于95 ％乙醇中，用时取出在火焰上烧去酒精及可能残留的油迹。
（2）制片：在载玻片的一端滴一滴蒸馏水,用接种环挑取少许备用的菌种（注意不要挑上培养基）,在载玻片的水滴中轻沾几下。
将载玻片稍倾斜,使菌液随水滴缓慢流到另一端,然后平放在空气中自然干燥。
（3）染色：涂片干燥后滴加A液染5分钟,用蒸馏水冲洗,用B液冲去残水。
洗净A液滴加B液覆盖1min （其间可将玻片在酒精灯上稍加热）然后用蒸馏水冲洗,自然干燥。
（4）镜检：油镜镜检。
2结果与分析2.1 实验结果压滴法观察细菌运动性时可以看到菌体不规则快速运动，有些为转动。
鞭毛染色的两个片子油镜镜检时，找到一处菌体聚集的地方。
实验四细菌运动性的观察姓名：贾晓霖学号：201000140032班级：生科10.1同组成员：李江湲程子修洪钧烨一、实验目的1、学习压滴法观察细菌运动性。
2、学习鞭毛染色法，观察鞭毛的形态特征。
二、实验原理鞭毛是细菌的纤细丝状“运动”器官。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm，只有用电镜才能直接观察到。
但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色方法很多，但其基本原理相同，即在染色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。
鞭毛的着生方式多样，有一端单生，如铜绿假单胞菌；两端单生；一端丛生，如荧光假单胞菌；两端丛生，如蔓延螺菌以及周生，如大肠杆菌等。
三、实验器材1、所需菌种枯草芽孢杆菌（周生）铜绿假单胞菌（端生）2、溶液和试剂0.01%美蓝染液，95%乙醇溶液，鞭毛染色液A，鞭毛染色液B。
3、仪器和其他用品酒精灯，载玻片，盖玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，烧杯，试管架，镊子等。
四、实验内容a)压滴法（说明一下我做的是铜绿假单胞菌）1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净，自然晾干。
2、涂片在载玻片中央滴一小滴蒸馏水，点燃酒精灯，在火焰旁边从菌种斜面挑取少量菌体与水滴充分混匀。
3、染色、镜检加0.01%美蓝染液染色，之后加盖玻片放于油镜下观察。
附：实验照片b)鞭毛染色（说明一下我做的是铜绿假单胞菌）1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净，自然晾干。
2、浸泡将适量95%乙醇倒入烧杯，将洗净晾干的载玻片放入有乙醇的烧杯中，浸泡5min。
3、干燥将载玻片用镊子夹出，点燃酒精灯，将载玻片在酒精灯上小心过火干燥。
4、涂片将一小滴蒸馏水滴在载玻片一端，点燃酒精灯，在火焰旁边从菌种斜面挑取少量菌体与水滴充分混匀，将载玻片有水滴的一端微微竖起，使有菌种的水滴自然从载玻片一端流到另一端，在载玻片上形成一条菌带。
5、干燥自然干燥。
实验四鞭毛染色法及活细菌运动性的观察摘要本实验采用硝酸银染色法对枯草芽孢杆菌与铜绿假单胞菌进行鞭毛染色，在油镜下观察其菌体形态和鞭毛的形态、数量、着生位置。
并采用压滴法观察细菌的运动性。
关键词鞭毛、硝酸银染色法、压滴法、运动性一、实验目的1．学习并掌握细菌鞭毛染色的基本方法及观察细菌鞭毛的着生情况。
2．学习用压滴法观察细菌的运动性。
二、基本原理鞭毛是细菌的运动“器官”，一般细菌的鞭毛都非常纤细。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
根据鞭毛的特征，可将有动力细菌分为单端极鞭毛菌、单端丛鞭毛菌、周鞭毛菌、侧鞭毛菌。
鞭毛直径一般为10~30nm，只有用电镜才能直接观察到。
在普通光学显微镜的分辨力限度以外，故需要用特殊的鞭毛染色法，才能看到。
首先用媒染剂（如单宁酸或明矾钾）处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用碱性复红（Gray氏染色法）、碱性复品红（Leifson氏染色法）、硝酸银（West氏染色法）或结晶紫（Difco氏染色法）进行染色。
在显微镜下观察细菌的运动性，也可以初步判断细菌是否有鞭毛。
通常使用压滴法或悬滴法观察细菌的运动性。
观察时，要适当减弱光线，增加反差，如果光线很强，细菌和周围的液体就难以辨别。
三、实验器材1、菌种枯草芽孢杆菌活菌、铜绿假单胞菌活菌2、溶液和试剂硝酸银鞭毛染液A液和B液、0.01﹪美蓝水溶液3、仪器和其他用品酒精灯、载玻片、盖玻片、显微镜、双层瓶（内装香柏油和二甲苯）、擦镜纸、接种环、烧杯、载玻片夹子、蒸馏水、吸水纸四、实验操作1、活菌运动型性观察（压滴法）（1）菌液制备无菌操作，用接种环分别在枯草芽孢杆菌斜面培养基和铜绿假单胞菌斜面培养基上挑取菌落边缘菌体，接种环接触提前滴在载玻片上的水滴上，制成轻度混浊的菌液，注意不要剧烈震荡。
（2）制片用镊子夹一洁净的盖玻片，先使其一边接触菌液，然后慢慢地放下盖玻片，防止产生气泡。
（3）镜检将光线适当调暗，先用低倍镜找到观察部位，再用高倍镜观察。
一、实验目的1. 掌握细菌鞭毛的观察方法。
2. 了解细菌鞭毛变异的现象及原因。
3. 探讨不同因素对细菌鞭毛变异的影响。
二、实验原理细菌鞭毛是细菌的运动器官，由鞭毛蛋白、基体和构型鞘三部分组成。
鞭毛蛋白是鞭毛的主要成分，具有推动细菌运动的功能。
细菌鞭毛变异是指细菌鞭毛数量、形态、结构等方面的变化。
三、实验材料1. 实验菌株：变形杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌等。
2. 培养基：营养肉汤、营养琼脂、石炭酸琼脂等。
3. 实验工具：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、酒精灯、火焰、消毒液等。
四、实验方法1. 细菌培养：将实验菌株接种于营养肉汤，37℃恒温培养18小时。
2. 鞭毛染色：取培养好的实验菌株，涂布于载玻片上，干燥后用鞭毛染色剂染色，置于显微镜下观察。
3. 鞭毛变异观察：观察不同菌株的鞭毛数量、形态、结构等方面的变化。
4. 石炭酸处理：将实验菌株接种于石炭酸琼脂平板，37℃恒温培养24小时，观察鞭毛变异现象。
5. 无石炭酸培养基恢复实验：将石炭酸处理的实验菌株接种于不含石炭酸的琼脂平板，37℃恒温培养24小时，观察鞭毛恢复情况。
五、实验结果与分析1. 细菌鞭毛观察结果（1）变形杆菌：变形杆菌具有明显的鞭毛，呈单鞭毛状，运动速度较快。
（2）霍乱弧菌：霍乱弧菌具有明显的鞭毛，呈单鞭毛状，运动速度较快。
（3）大肠杆菌：大肠杆菌具有明显的鞭毛，呈单鞭毛状，运动速度较快。
2. 鞭毛变异观察结果（1）变形杆菌在石炭酸琼脂平板上培养24小时后，鞭毛数量明显减少，部分菌株鞭毛完全消失。
（2）霍乱弧菌在石炭酸琼脂平板上培养24小时后，鞭毛数量明显减少，部分菌株鞭毛完全消失。
（3）大肠杆菌在石炭酸琼脂平板上培养24小时后，鞭毛数量明显减少，部分菌株鞭毛完全消失。
3. 无石炭酸培养基恢复实验结果将石炭酸处理的实验菌株接种于不含石炭酸的琼脂平板，37℃恒温培养24小时后，部分菌株的鞭毛数量逐渐恢复，但仍低于正常水平。
六、实验结论1. 细菌鞭毛变异现象确实存在，石炭酸可以引起细菌鞭毛的变异。
