第11章临床免疫知识扩充
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第一章微生物基本概念、细菌的形态与结构第一节微生物基本概念【知识点】1、微生物:存在于自然界当中的一类体形微小,结构简单,人类肉眼无法直接看见,必须用光学或电子显微镜放大数百直数万倍才能看到的微小生物。
2、微生物的种类:细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体、放线菌、真菌、病毒3、三型微生物的特征:1)原核细胞型微生物:有细胞膜;细胞器不完善,仅有核糖体;无核膜及核仁;无性二分裂方式繁殖;属于该型微生物的有细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌。
2)真核细胞型微生物:有细胞膜;细胞器完善;有核膜及核仁;以有丝分裂方式繁殖;属于该型微生物的有真菌。
3)非细胞型微生物:无细胞膜;无细胞器;无核膜核仁;以复制方式增殖;属于该型微生物的有病毒。
第二节细菌的形态与结构【知识点】1.细菌的三种形态及测量单位2.细菌基本结构的组成及意义:细胞壁、细胞膜、细胞质(胞浆重要颗粒性物质:质粒、核糖体、胞质颗粒)、核质毛包括性菌毛、普通菌毛,性菌毛为F+菌才有的特殊结构,用于传递质粒,间接不良后果是导致耐药性的传递,普通菌毛介导粘附,寄生于黏膜处的细菌大多有菌毛,避免被分泌液冲刷走;荚膜是某些细菌在营养丰富或侵入机体后为避免被吞噬或杀菌物质破坏而产生的粘液性物质将自己包裹起来;芽孢,某些革兰阳性菌的休眠形(不繁殖),当缺乏营养时(体外),细菌为减少代谢消耗而形成的一种结构,抵抗力强,一般消毒灭菌方法无法将其杀死,杀死芽孢最可靠的方法是高压蒸汽灭菌,消毒灭菌时应以芽孢是否被杀死作为判断灭菌效果的指标。
5.细菌革兰染色的步骤:龙胆紫-碘液-脱色液-稀释复红第二章细菌生理【知识点】1.细菌生长繁殖的基本条件:营养物质、温度(37℃)、pH值(7.2-7.6)、气体(专性需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微需氧菌)2.细菌生长繁殖的方式:无性二分裂3.细菌繁殖的速度:大多数20-30min分裂一次,结核分枝杆菌18-24h分裂一次。
第十一单元黏膜免疫系统一、基本概念1.黏膜免疫在肠道、呼吸道及泌尿生殖道黏膜构成了一道免疫屏障,是参与局部特异性免疫应答的主要部位,在黏膜局部抗感染免疫防御中发挥关键作用。
2.黏膜相关淋巴组织黏膜免疫系统也称为粘膜相关淋巴组织(MALT),主要指呼吸道、肠道及泌尿生殖道黏膜固有层和上皮细胞下散在的无被膜淋巴组织,以及某些带有生发中心的器官化的淋巴组织,如扁桃体、小肠的派氏集合淋巴结及阑尾等。
二、黏膜免疫系统的细胞和分子1.细胞黏膜免疫系统的细胞主要包括肠集合淋巴滤泡内的M细胞和黏膜上皮细胞间淋巴细胞(如γδT细胞等),具有较强的细胞毒作用,并能分泌多种细胞因子,在免疫监视和细胞介导的黏膜免疫中具有重要作用。
2.分子粘膜免疫的主要分子是大量分泌型IgA(sIgA),执行黏膜免疫应答功能。
三、黏膜免疫的功能1.诱导免疫耐受黏膜免疫系统接触抗原后,可在局部引起黏膜免疫应答,但在全身往往引起免疫耐受,称为耐受分离的现象,因此口服抗原是最容易引起免疫耐受的途径之一。
2.抗感染MALT在肠道、呼吸道及泌尿生殖道黏膜构成了一道免疫屏障,是参与局部特异性免疫应答的主要部位,在黏膜局部抗感染免疫防御中发挥关键作用。
B细胞在黏膜局部受抗原刺激后所产生的大量SIgA,经黏膜上皮细胞分泌至黏膜表面,成为黏膜局部抵御病原微生物感染的主要机制。
第十二单元免疫耐受一、基本概念1.免疫耐受在生理条件下,机体免疫系统对外来抗原进行“免疫正应答”,以清除病原,对体内组织细胞表达的自身抗原,却表现为“免疫不应答”或“免疫负应答”。
这种对抗原特异应答的T与B细胞,在抗原刺激下,不能被激活产生特异免疫效应细胞,从而不能执行正免疫应答效应的现象,称为免疫耐受。
2.中枢免疫耐受T细胞在胸腺微环境中发育过程中,TCR与微环境基质细胞表面表达的自身抗原肽-MHC分子复合物呈高亲合力结合时,可引发阴性选择,启动细胞程序性死亡,致克隆消除。
B细胞在骨髓及末梢中与自身抗原呈高亲合力结合时,亦被克隆消除,形成中枢免疫耐受。
临床免疫学知识点
免疫学是研究生物体对抗病原体(包括细菌、病毒、真菌等)以及保护机体不受损伤的科学,而临床免疫学则是将免疫学的知识应用到临床实践中,帮助医生诊断和治疗免疫相关疾病。
下面将介绍一些临床免疫学的重要知识点。
1. 免疫系统的组成
免疫系统主要由两大部分组成:先天免疫系统和获得性免疫系统。
先天免疫系统是生物体天生具备的免疫功能,包括皮肤、粘膜、巨噬细胞等;获得性免疫系统是在生物体遇到外界病原体后通过学习和记忆产生的免疫功能,包括淋巴细胞、抗体等。
2. 免疫系统的功能
免疫系统的主要功能包括:识别和清除病原体、识别和清除异常细胞、维持机体内稳态等。
当机体受到感染或异常细胞增殖时,免疫系统会发挥作用,保护机体不受损伤。
3. 免疫系统的失调与疾病
当免疫系统失调时,会导致各种免疫相关疾病的发生。
比如免疫系统功能过低可能导致反复感染、免疫系统功能过高可能导致自身免疫性疾病等。
4. 免疫检测
临床上常用的免疫检测手段包括:免疫荧光、酶联免疫吸附试验、
流式细胞术等。
这些检测手段可以帮助医生了解患者的免疫状态,指
导临床诊断和治疗。
5. 免疫相关疾病的诊断和治疗
根据患者的免疫状态和病因,医生可以选择合适的诊断和治疗方案。
比如对于自身免疫性疾病,可以采用免疫抑制治疗等方式。
通过对临床免疫学知识点的了解,可以帮助医生更好地理解和处理
免疫相关疾病,提高患者的生存率和生活质量。
希望本文对读者有所
帮助。
第十一章生物素-亲和素放大技术第一节生物素的理化性质与标记生物素(biotin)、亲和素(avidin)是一对具有高度亲和力的物质,它们的结合迅速、专一、稳定并具有多级放大效应。
生物素-亲和素系统(BAS)是一种以生物素和亲和素具有的多级放大结合特性为基础的实验技术,它既能偶联抗原抗体等大分子生物活性物质,又可被荧光素、酶、放射性核素等材料标记。
生物素(biotin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取。
一、活化生物素利用生物素的羧基加以化学修饰可制成各种活性基团的衍生物,称为活化生物素。
生物素活化后,可容易地与各种抗原、抗体、酶及核酸分子中相应基团偶联形成生物素化标志物。
(一)标记蛋白质氨基的活化生物素此种活化生物素的制备方法是将生物素与N-羟基丁二酰胺在碳二亚胺的作用下进行缩和,生成生物素N-羟基丁二酰亚胺醣(BLAHS)。
BLAHS分子酯键中的—C-=0基团可与蛋白质分子中赖氨酸的氨基形成肽键。
从而使蛋白质标记上生物素。
(二)标记蛋白质醛基的活化生物素用于此类标记的活化生物素有两种:生物素酰肼(BHZ)和肼化生物胞素(BGHZ)。
BHZ是水合肼与生物素的合成物,主要用于偏酸性糖蛋白的生物素标记。
(三)标记蛋白质巯基的活化生物素3-(N-马来酰亚胺-丙酰)-生物胞素(MPB)是能特异地与蛋白质巯基结合的活化生物素试剂。
(四)标记核酸的活化生物素活化生物素可通过缺口移位法、化学偶联法、光化学法及末端标记法等技术使生物素的戊酸侧链通过酰胺键与核酸分子相连,构成生物素标记的核酸探针。
二、生物素标记蛋白质(一)生物素化蛋白质衍生物的特性生物素化蛋白质衍生物有两类:1.生物素化的大分子活性物质,如抗原、抗体。
2.标记材料(如酶)结合生物素后制成的标志物。
(二)标记方法1.标记抗体、抗原选用第二抗体进行生物素标记,制备的标志物具有通用性。
2.标记酶生物素标记辣根过氧化物酶第二节亲和素、链霉亲和素的理化性质与标记亲和素和链霉亲和素是生物亲和素的天然特异性结合物。
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第十一章生物素-亲和素放大技术(附答案解析)一、A1型题1、每个亲和素能结合生物素分子的数目是()A、4B、2C、1D、3E、82、以下关于生物素-亲和素系统(BAS)的说法错误的是()A、1个亲和素分子可结合4个生物素分子B、1个生物素分子可以结合多个亲和素分子C、生物素易与抗体、酶、多聚核苷酸结合D、亲和素易与酶、铁蛋白、荧光素、核素结合E、亲和素和生物素.有极强的亲和力3、免疫组化技术的优点不包括()A、高特异性B、高敏感性C、形态学的直观性D、精确定量分析E、能对抗原表达情况进行分析4、BAS在ELISA技术中应用最广泛的反应模式是()A、ABAB、ABCC、BRABD、BAE、LAB5、免疫组化染色前,对标本进行固定的目的是()A、保存组织细胞的抗原性B、防止细胞脱落C、防止细胞自溶D、终止胞内酶的活性E、使细胞内蛋白质凝固6、ABC-ELISA将酶标记在()A、亲和素B、生物素C、抗体D、补体E、抗原7、关于亲和素-生物素系统的错误描述是()A、用于间接包被B、用于终反应放大C、用于酶免疫测定D、用于胶体金测定E、不用于荧光免疫测定8、ABC-ELISA将酶标记在()A、亲和素B、生物素C、抗体D、补体E、抗原9、关于生物素标记蛋白质的注意事项,下列说法错误的是()A、根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质,选择相应的活化生物素和反应条件B、活化生物素与待标记抗原或抗体可以为任意比例C、在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构可减少空间位阻影响D、生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后,不影响后者的免疫活性E、生物素标记酶时会影响其免疫活性10、亲和素和生物素结合的特点是()A、免疫反应B、不属于免疫反应C、特异性弱D、亲和力小E、不够稳定二、B型题1、 A.ABCBC.BABD.直接法BASE.间接法BAS<1> 、标记亲和素-生物素的方法为();<2> 、亲和素-生物素化酶复合物技术为();<3> 、生物素化第二抗体为();<4> 、生物素化第一抗体为()。
医学免疫学必备知识整理免疫学是研究生物体对外界各种抗原侵入进行识别和应答的学科。
了解免疫学的基本知识对于医学领域的从业人员至关重要。
本文将就医学免疫学的必备知识进行整理,以帮助读者更好地理解和掌握这一领域的基础知识。
免疫系统的作用和组成免疫系统是人体内的一组器官、细胞和分子,用于识别、消除外来的抗原并保护机体免受疾病的侵害。
免疫系统由以下几部分组成:1. 免疫器官:包括骨髓、胸腺和淋巴组织等,是免疫细胞形成和分化的场所。
2. 免疫细胞:包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞等,各具不同的功能和作用。
3. 免疫分子:包括抗体、细胞因子、补体等,参与免疫反应的调控和效应。
免疫应答的类型和机制免疫应答可分为细胞免疫和体液免疫两种类型。
细胞免疫主要由T 淋巴细胞介导,通过识别和消灭抗原来源细胞来保护机体。
体液免疫主要由B淋巴细胞和抗体介导,通过分泌抗体来中和和清除抗原。
免疫应答的机制包括:1. 抗原识别与呈递:由树突状细胞和B淋巴细胞等细胞完成,将抗原信息传递给其他免疫细胞。
2. 淋巴细胞活化:细胞免疫的关键步骤,包括T细胞受体与抗原肽结合、共刺激分子的作用和细胞因子的介导。
3. 效应反应:根据不同类型的免疫细胞和分子的参与,产生细胞毒性作用、细胞增殖、抗体分泌等效应。
免疫耐受和免疫调节免疫系统在正常情况下应对外界抗原的应答,但有时也会出现过度应答造成免疫性疾病。
为了维持免疫系统的平衡,机体发展出了免疫耐受和免疫调节机制。
1. 免疫耐受:指机体不对自身组织产生免疫应答,防止自身免疫病的发生。
包括中枢性耐受、外周性耐受和免疫抑制等机制。
2. 免疫调节:指机体在免疫应答过程中通过抑制或增强免疫反应来维持免疫平衡。
调节性T细胞和免疫抑制性细胞因子等参与其中。
免疫系统与疾病免疫系统异常功能与多种疾病的发生和发展密切相关。
常见的免疫系统相关疾病包括:1. 免疫缺陷病:指机体先天或后天免疫系统功能异常,易受感染,如先天性免疫不全综合征、艾滋病等。
临床免疫知识点总结一、免疫系统的基本概念1. 免疫系统的组成免疫系统是由多种细胞和分子组成的复杂系统,包括淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞、血清免疫球蛋白等。
淋巴细胞包括T细胞、B细胞和NK细胞,它们在免疫应答中起着不同的作用。
巨噬细胞和树突状细胞则是通过吞噬和呈递抗原来激活淋巴细胞。
血清免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和IgD,它们可以与抗原结合,并触发免疫反应。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能是保护机体免受外界病原微生物的侵害。
它通过识别和清除病原微生物,维持机体内部的稳态。
免疫系统还能够识别和清除异常细胞,包括肿瘤细胞。
此外,免疫系统还参与到体内异物和抗原的清除,保持机体内部的稳态。
3. 免疫系统的免疫应答当机体受到感染或其他外界侵害时,免疫系统会启动免疫应答,包括先天免疫应答和获得性免疫应答。
先天免疫应答通过巨噬细胞和自然杀伤细胞来清除病原微生物,而获得性免疫应答则是通过B细胞和T细胞来识别和清除特定抗原。
免疫应答的过程包括抗原识别、T细胞和B细胞的激活、抗原清除和记忆应答。
二、免疫系统的疾病1. 免疫系统的过敏性疾病过敏性疾病是由于机体异常的免疫应答导致的疾病,包括变态反应、过敏性鼻炎、哮喘、食物过敏等。
这些疾病通常由特定抗原引起,机体对抗原产生异常的免疫应答,导致炎症和组织损伤。
2. 免疫系统的自身免疫性疾病自身免疫性疾病是由于机体免疫系统对自身组织产生异常的免疫应答,导致组织损伤和功能障碍,包括类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺疾病等。
这些疾病通常由遗传和环境因素共同导致,临床表现各异。
3. 免疫系统的恶性肿瘤免疫系统的恶性肿瘤包括淋巴瘤和骨髓瘤等,这些肿瘤通常由淋巴细胞或浆细胞恶性增生导致。
临床表现包括淋巴结肿大、骨髓增生异常、免疫功能低下等。
三、临床免疫学的诊断和治疗1. 免疫系统疾病的诊断免疫系统疾病的诊断主要依靠病史、临床表现、实验室检查和免疫学检查。
第十一章临床免疫检验仪器一、名词解释1.酶免疫分析技术:利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合而建立的一种标记免疫技术。
2.均相酶免疫分析法:检测过程中抗原抗体反应后,无需分离结合和游离的酶标记物,直接根据反应前后酶活性的改变进行待检物质测定的分析方法。
3.非均相酶免疫分析法:在酶免疫测定中,抗原抗体反应达到平衡后,需分离游离的和与抗原(或抗体)结合形成复合物的酶标记物,然后对经酶催化的底物显色程度进行测定,再推算出样品中待测抗原(或抗体)含量的分析方法。
4.发光免疫分析技术:利用化学发光现象,根据物质发光的不同特征,即辐射光波长、发光的光子数,与产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关,通过受激分子发射的光谱、发光衰减常数、发光方向等来判断分子的属性及发光强度进而判断物质的量的免疫分析技术。
5.免疫浊度检测:将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。
6.放射免疫分析技术:以放射性核素为标记物的标记免疫分析技术。
7.非均相荧光免疫测定法:抗原抗体反应后,先把Ab*Ag 与Ab*分离,然后测定Ab*Ag 或A b*中的标记物的量,从而推算出标本中的A g 量的方法。
8.均相荧光免疫测定法:抗原抗体反应后,Ab*Ag 中的标记物失去荧光特性,不需进行A b*Ag 与A b*的分离直接测定游离的A b*量,从而推算出标本中的A g 量的方法。
9.闪烁体:是将核辐射能激发分子转化成可探测闪光的荧光物质。
常用的有有机闪烁体、无机闪烁体和特殊闪烁体等。
10.时间分辨荧光免疫分析:时间分辨荧光免疫测定是用镧系稀土元素及其螯合物(如 Eu3+螯合物) 作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质,检测标本中的相应抗原或抗体的荧光免疫测定技术。
11.化学发光免疫技术:在检测化学反应中,某些化学基团被氧化后形成激发态,并在返回基态的同时发射一定波长的光子。
仪器利用这种化学基团标记在免疫分析的抗原或抗体上所建立起来的免疫分析为化学发光免疫分析。
第十一章临床免疫检测仪器首页→第十一章临床免疫检测仪器免疫分析和测定的对象是抗原或抗体,不论是经典的凝集反应还是现代免疫标记技术,其基础都是抗原抗体反应。
很显然,在免疫分析技术中,获得优质、专一、高效价和高灵敏的抗体是任何免疫分析技术的物质基础。
抗体研究领域的进展大致可分为3个阶段:(1)以1890年Behring发现白喉抗毒素--第一代多克隆抗体为代表,其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体;(2)以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表;(3)以1994年Winter以基因工程方法制备抗体为代表,这是抗体研究领域出现的又一次技术革命。
随着抗体技术制备的日趋进步和抗体载体/(标记物)的不断发现,可以预见,免疫学检测的内容将会越来越多,检测方法和设备也将不断推出,更新,由此对基础和临床免疫研究将起到极大的促进作用。
本部分内容重点介绍目前国内外有关免疫分析仪特别是酶免自动分析技术的应用发展、抗体制备研究概况,免疫检测技术和新型抗体的研究进展。
一、临床免疫分析仪目前,在实验室采用的免疫测定分析测定的技术主要有酶免疫、免疫比浊、化学发光、电子发光、荧光偏振以及时间分辨荧光免疫测定及相关自动免疫分析测定仪。
各种不同原理的自动免疫测定分析仪在临床实验室中应用越来越广,大大减轻了实验室人员的劳动强度,也极大地提高了测定的准确性和重复性。
国内自20世纪80年代生化自动分析仪即取得实际应用。
而免疫测定因方法学的特殊性,自动化发展较迟,20世纪80年代后才有自动化分析系统问世。
目前除放射免疫测定外,几乎所有的免疫测定方法均可进行全自动分析。
除酶免疫测定外,基于其他原理的全自动免疫分析仪必须使用与仪器配套的测定试剂,而有些全自动酶免疫分析系统则属于开放式的,符合标准的各种品牌的ELISA试剂盒均可应用,这样的全自动免疫分析仪灵活性较好,也比较经济。
而配套进口试剂一般都较为昂贵,从而限制了相应设备在基层实验室的应用。
(一)全自动酶免分析系统酶联免疫吸附试验(ELISA,简称酶免试验)是一项现代医学检验基本的、常规的检测技术。
酶免试验具有操作简便、技术可靠,特别是90年代末期抗体提纯和制备技术的高速发展,其灵敏度和特异性以及检测过程的自动化得到了不断提高与完善,酶免试验成为感染性疾病标志物(如肝炎、艾滋、致畸病原Torch)、肿瘤标志物及内分泌等各种临床免疫指标检测的重要技术。
微孔板式酶标板检测仪器既酶标仪,在各类实验室已广为应用,而目前则向酶免自动操作系统发展;随着多任务软件,如O/S2,Unix及Windows NT等操作平台的完善,满足现代实验室GMP/GLP要求的全自动酶标分析系统,正在世界各种实验室普及。
目前,由于全面实验室自动化具有标准化、高效率、高质量的自动化与网络化特征,正成为临床实验室发展的新趋势。
全自动酶免分析系统包括1.自动化样本处理酶免试验的样本处理必须基于批量化操作——96孔酶标板。
为保障板内各孔标本孵育时间最小差异,一般采用8通道或12通道快速加样。
因此全自动样本处理机是提高实验精度、提高实验效率和避免人为误差和差错的关键。
第一代多功能样本处理机,开发于1985年上市的Microlab 2200。
这是一台基于机械臂运动和具有管路系统的稀释分配器(Diluter),采用8或12根固定距离的特弗隆探针,由单任务的BASIC程序控制的样本处理机。
随着酶免试验的普及,基于管路稀释分配器原理的样本处理机得到快速发展,先后有数家厂商开发了十余种样本处理机,以满足实验室液体处理需要。
如瑞士Microlab 4000等。
1989年又开发上市了以专利技术的可抛弃塑料活塞注射器(Micro-syringe)为原理的,无管路批量样本处理机Microlab AT,试图满足更快的加样(12针)、无污染地加样、主动抛弃可能失去精度的加样针、摒弃不可预测的管路污染与稀释等实验室需求。
1997年,AT系列增加改进为Microlab AT plus 2型。
这种原理的样本处理机,具有全面的标本质量系统、加样质量保障系统。
样本处理自动化的最新技术进步,是于2000年8月推出的,第五代斯达尔全自动随机式批量样本工作站(Microlab STARTM,Sequential Transfer Aliquoting Robot)。
其主要技术特征是:采用专利的压缩导入-O形环扩张(CO-RE)核心技术,实现标准加样的智能化、自动化;理想的加样体系——气动置换加样原理ADP的实现;实现任意加样动作编程同时使用不同的加样头(抛弃型加样尖和永久型探针);实时实现液体双传感(△C-△P)技术;全方位液面传感应用,特别是解决了酶标板的液面监测世界难题;活性洗涤工作站(Active Wash Station)进行平行洗涤加样针,是提高加样速度的关键;模块化、无管路、独立加样通道系统4——16通道,用户可以根据工作量进行升级;智能增强的容错纠错系统(Sophisticated Error Handling);实现全过程控制(TPC),全部步骤都在监控下运行,每个步骤都形成记录文件(TRACE),甚至对加样体积质量进行校验、备份,实现全自动GMP/GLP。
目前,酶免试验样本处理设备已开始在全国血站系统普及,其中哈美顿AT 数量最多。
样本处理机还是酶免自动化所需主动标本识别(Positive Sample ID)条码阅读的基本设备系统。
此外,样本处理机还有下列重要意义。
*提高加标本速度与效率*减少操作人员劳动强度*使标本传染操作人员机会最小化*通过减少人为失误和改善加样精确度与准确性来改善检测分析质量*采用批量(batch)或随机(random access)进行多种组合与多种模式检测全自动酶免分析系统的发展,经历了三个阶段:第一阶段:全自动酶免分析系统基本特征是单/双针加样系统与酶标板处理系统一体化,多数孵育位置少于4块板。
由于加标本将占用较长时间(单针每板需15分钟,三块板通常需45分钟完成加标本工作),因此,第一代全自动酶免分析系统,被认为是“节约劳动力而不提高效率”。
第二阶段:不含标本加样装置的自动酶免分析系统,通常也俗称“后处理系统”。
全自动酶免分析系统的基本技术特征为非常任务和单一轨道。
由于不能同时地处理二种过程(如洗板的同时,不能加试剂等),因此,其工作任务表(或时间管理器TMS)“堵车”现象仍无法避免,而造成处理过程不能严格执行,试验完成时间延长,或单纯执行试验时间表完成实验动作而不论试验效率。
第三阶段:全自动酶免分析系统的基本特征是采用多任务、多通道,完全实现平行过程处理。
典型产品为FAME(费米)全自动酶免分析系统。
费米系统表现在:硬件上采用了综合模块化设计,广泛采用液体水平检测(LLD)技术、体积与重量传感、光学位置传感等实现了全过程控制(TPC),特别是专利的洗板液体传感器,确保了最佳洗板效果,是保障试验特异性的关键。
在软件与功能上,目前仍是唯一的全自动GMP/GLP规范符合系统,如全面的系统跟踪记录(Traceability)与系统追溯(Trackability),标本/试剂加样校验(Sampleverification)及“自由任务管理”实现随时增加检测板。
2.全自动酶免分析连体机全自动酶免分析仪器与生化分析自动化不同,酶联免疫反应是在预先包被了试剂的96孔酶标板上进行,加样速度越快,每个标本的孵育时间一致性越高,孔间差异越小。
因此,医疗器械厂商不得不开发独立的、8——12通道的全自动样本处理机来满足这一技术要求。
这就是“前处理设备”概念的由来。
对比生化分析仪的试验反应过程,酶联免疫试验是十分复杂的。
这就要求全自动酶免分析仪具备多任务平行处理能力,特别是要具备自由任务——资源管理系统,以保证随时增加任务菜单和急诊插入,并且要求酶免实验过程不受加样处理的影响。
也就是说“后处理设备”必须相对独立于“前处理”,以实现最优反应过程(实验质量)和最大化分析生产力(throughput)。
根据全自动酶免分析系统的处理模式,人们通常将全自动酶免分析系统的处理模式,人们通常将全自动酶免分析仪分成二类,即一体机,如Biro、AMP、Alisei、变色龙等;分体机,如AT和费米;斯达尔和费米;RSP和MPP3000;VIVICE和DIAS;RSP和BEP-lll等。
2003年,瑞士采用最新的信息技术和实验工程技术,成功地实现了“前处理”全自动样本处理工作站,与“后处理”全自动酶标分析仪——即全自动酶免分析连体机,其保持了原来的前处理设备和后处理设备的特点同时,使用一台微机、一套操作系统实现了一人操作,实现由自标本加样、稀释到酶标孵育、洗板、加试剂、读数和结果打印全自动。
同时,原来的前处理和后处理也可以独立工作。
展望酶免实验室的自动化与标准化,是全面实验室自动化系统(LAS)的一部分。
实现酶免试验自动化网络化,是涉及酶免加样(前处理)设备、酶免分析(后处理)设备与医学信息技术、实验室管理科学综合的崭新系统集成高技术,是迈向全面实验室自动化的重要基石。
高分析生产力的酶免分析系统,快速发报告意味着快速诊断、快速治疗、将给患者与医院带来双重利益。
实验室自动化的目标就是提高检验的质量,增收节支。
可以预测,作为一项医疗服务竞争策略,酶免实验室自动化网络化将给中国新医疗服务体制下的医院酶免实验室带来新的优势与利益。
二、基于制备技术的抗体类型免疫分析和测定的对象是抗原或抗体,不论是经典的凝集反应还是现代免疫标记技术,其基础都是抗原抗体反应。
很显然,在免疫分析技术中,获得优质、专一、高效价和高灵敏的抗体是任何免疫分析技术的物质基础。
以下介绍抗体制备和相关技术的进展。
1.多克隆抗体在早期,传统的抗体制备的方法是将天然抗原经过各种途径免疫动物,因为抗原性物质具有多种抗原决定簇,所以其可刺激产生多种抗体形成细胞克隆,合成和分泌抗各种决定簇的抗体分子,故在血清中实际上是含有多种抗体的混合物,称这种用体内免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体,也是第一代抗体。
此技术经过长期的实践,已发展相当的成熟,在免疫学诊断中,例如,其对血型和组织抗原的鉴定有着非常重要意义,其现在仍然在基础研究和体外诊断方面进行广泛应用。
多克隆抗体也可研究与开发成抗体药物,例如,Thymoglobulin是美国Sangstat公司的产品,1999年,美国FDA批准了Thymoglobulin用于治疗肾移植手术的急性排异反应,2002年,加拿大也批准了Thymoglobulin。
2000年9月,FDA还批准了Thymoglobulin作为Myelody-splastic Syndrome(MDS)的罕见病用药,其是用人的胸腺细胞免疫家兔后纯化其中的免疫球蛋白得到的多抗药物。