冷冻胚胎移植技术原理

冷冻胚胎移植流程
冷冻胚胎移植是一种辅助生殖技术，主要用于治疗不育症或提高受孕成功率。

以下是冷冻胚胎移植的一般流程：
1. 选取胚胎：首先需要通过体外受精或其他辅助生殖技术获得多个胚胎。

其中，能发育为健康胚胎的一部分会被选中进行移植。

2. 准备子宫内膜：移植前，女性需要进行荷尔蒙治疗来调整子宫内膜的厚度和质量，以提高胚胎着床的成功率。

3. 解冻胚胎：将选中的冷冻胚胎从冷冻状态解冻，并恢复至生长状态。

解冻过程可能需要一些时间。

4. 胚胎移植：医生会在合适的时间将胚胎通过一根细管插入到女性的子宫内。

这个过程通常是无痛的，不需要麻醉。

5. 休息和观察：在术后，女性一般需要休息一段时间，通常是几小时。

然后，她需要在医院内观察一段时间，以确保没有并发症发生。

6. 固定注意事项：在休息期间，女性可能会被要求避免剧烈运动和性行为，以提高胚胎着床的成功率。

7. 随访和结果确认：通常在移植后一段时间内，通常是几周，女性需要返回医院接受随访。

医生会进行相关检查，确认是否成功着床。

需要注意的是，具体的流程可能因医院和个人情况而有所不同。

与医生合作，遵循医生的指导和建议是非常重要的。

胚胎冷冻保存技术摘要; 胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。

研究和优化胚胎冷冻保存技术对胚胎工程的发展有重要的意义。

关键词：胚胎冷冻保存为便于长途运输和随时供移植使用，将那些６～７日龄已有２０～３０个细胞的新鲜活胚胎（或分割后的半胚胎、１／４胎）在－１９６℃的超低温下冷冻贮存就是胚胎冷冻保存技术。

这是在冷冻精子的技术基础上进一步发展起来的一项新技术。

目前用冷冻胚胎移植的成功率约为鲜胚胎的７０％～８０％，胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。

现有的胚胎冷冻保存方法有四种：一、常规冷冻法常规冷冻法：也叫慢速冷冻法、逐步降温法。

将采集到的胚胎用培养液洗涤后置入有不同冷冻保护剂(甘油或二甲亚枫(DMSO)等)浓度的三种冷冻液中(冷冻液浓度由低到高，最终浓度1．4M)，每种冷冻液中平衡5分钟，然后将胚胎和冷冻液装入细管中封口、标记，放入冷冻仪中进行冷冻。

冷冻速率先以1～3~C／分下降至-6～-7℃，在此温度诱发结晶，平衡10分钟，然后，以0．3℃／分的速率降温至-35～_38℃，之后投入液氮中保存。

胚胎解冻后，需按胚胎进入冷冻液时的相反浓度，即从高到低浓度脱除冷冻保护剂，每步5分钟，最后置入含20％血清的PBS保护液中洗涤3次，彻底脱除冷冻保护剂。

或者将解冻后的胚胎放入0．5M(或1．0M)的蔗糖溶液中平衡10分钟，再用上述PBS液洗涤3次。

二、一步冷冻法一步冷冻法：也叫一步细管法。

该方法是由慢速冷冻法改进而来，细管内的冷冻液和蔗糖液是分开的，因此，在细管内用蔗糖液可一步脱除甘油抗冻剂，从而利于在生产中推广应用。

三、程序冷冻法程序冷冻法主要采用低浓度冻结保存剂梯度脱水,经程序冷冻仪缓慢降温。

主要操作步骤包括:将细胞顺序放入一系列逐渐增加保存剂浓度的溶液中梯度脱水,置入程序冷冻仪快速降温至-6℃植冰(人工诱导冰晶形成),然后程序冷冻仪缓慢降温至-30℃~-80℃后液氮贮存。

胚胎移植的原理胚胎移植是一种辅助生殖技术，它的原理是将受精卵或胚胎移植到女性子宫内，以实现妊娠和生育的目的。

胚胎移植技术的成功与否，取决于多个因素的综合作用，包括胚胎的质量、子宫内膜的状态、患者的年龄和身体状况等。

下面将从胚胎的获取、培养和移植过程中的关键环节，来详细介绍胚胎移植的原理。

首先，胚胎的获取是胚胎移植成功的关键。

通常情况下，胚胎可以通过体外受精（IVF）或者其他辅助生殖技术获得。

在体外受精过程中，女性的卵子和男性的精子在体外受精后形成受精卵，经过培养和发育，形成胚胎。

在这个过程中，医生会根据患者的情况，选择最具发育潜力的胚胎进行移植。

而在其他辅助生殖技术中，也会有相应的胚胎获取方式，比如卵子或精子的捐赠等。

其次，胚胎的培养是胚胎移植成功的重要环节。

在体外受精后，受精卵会在培养皿中进行培养和发育。

在这个过程中，医生会根据受精卵的发育情况和胚胎的质量，选择最适合移植的胚胎。

同时，医生也会根据患者的子宫内膜状态和激素水平，选择最佳的移植时机。

因此，胚胎的培养过程需要严格控制各项指标，以确保胚胎的质量和移植的成功率。

最后，胚胎的移植是胚胎移植成功的决定性环节。

在移植过程中，医生会利用专业的设备将胚胎移植到女性子宫内。

在这个过程中，医生需要准确把握移植的位置和时间，以确保胚胎能够成功着床并发育。

同时，医生也需要根据患者的情况，选择合适的移植方案，比如单胚胎移植或多胚胎移植等。

因此，胚胎的移植过程需要医生具备丰富的经验和精湛的技术，以确保移植的成功率和患者的安全性。

综上所述，胚胎移植的原理是通过获取、培养和移植胚胎，实现妊娠和生育的目的。

在整个过程中，医生需要严格控制各项指标，确保胚胎的质量和移植的成功率。

同时，患者也需要积极配合医生的治疗，以提高移植的成功率和妊娠的健康性。

希望通过本文的介绍，能够让更多的人了解胚胎移植的原理，以及胚胎移植技术对于不孕不育患者的重要意义。

冻融胚胎移植技术的发展是由于在促超排卵药物刺激下，一个周期一次采卵可获得多个卵子，体外受精成功后可获得多个早期胚胎，而胚胎移植一次不宜超过4个以避免多胎妊娠，剩下一些好的胚胎就不得不丢掉了。

如果多余胚胎可以冷冻储存，对于在刺激周期未获妊娠者，可于自然周期复温后再次移植，从而增加妊娠机会。

另外，为避免卵巢过度刺激综合征(OHSS )，本刺激周期不移植，冷冻储存胚胎备自然周期再移植。

冷冻和解冻需要特殊的方法和试剂，是科学家经过多次的科学实验总结出来的。

1972年科学家报道小鼠冻融胚胎妊娠成功，产出鼠仔。

1983年澳大利亚冻融入胚胎移植妊娠成功。

1985年英国用胚泡期胚胎冷冻后解冻移植妊娠成功并分娩。

目前，胚胎冻融技术已在世界各地展开，已诞生的冻融胚胎试管婴儿已有数百例。

人类胚胎冷冻保存技术的研究进展与应用前景延安大学生命科学学院(延安716000)　孙志宏　马　莉　周茂林　综述　李延清　审校 1983年Tr ounso n等首先将胚胎的冷冻-解冻技术用于人胚,并成功妊娠[1]。

目前,世界上已普遍开展了胚胎的冷冻和复融技术。

本文就胚胎冷冻技术基本原理、研究进展与应用前景做一综述。

1　胚胎冷冻保存原理及其损伤机制1.1　胚胎冷冻保存原理　冷冻保存(cr yo peserv ation),是将体外培养物悬浮在加有或不加冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速度降至零下某一温度,对其长期保存的过程[2]。

此时细胞的代谢活动被完全抑制,使细胞的生命在静止状态下保存下来,从而达到长期保存的目的。

胚胎冷冻技术是在精子冷冻保存的基础上发展起来的。

冷冻胚胎存活率是渗透压和低温损害积累结果的反映。

冷冻保护液的浓度和植冰温度之间确定最适宜的关系是保证冷冻胚胎存活的关键因素[1]。

1.2　胚胎冻存的损伤机制　胚胎的冷冻实际上是一个脱水过程,冷冻保存的关键是设法减少细胞内冰晶对胚胎造成的损伤。

正常胚胎细胞内水分含量达80%以上,在冷冻过程中,胚胎细胞中的水分将从细胞中游离出来冷冻成冰晶,一方面对胚胎细胞造成机械性损伤即冰晶损伤(ice damag e),另一方面导致未结冰的细胞内溶液渗透压急剧增高,造成蛋白质变性即溶液损伤(solutio n damag e),二者最后都导致胚胎不可逆性变化而死亡。

但是,如果在胚胎冷冻保存液中加入一定浓度的冷冻保护剂如甘油、DM SO、乙二醇等,则可大幅度减小冷冻对胚胎的损伤[3-4]。

冷冻保护剂的成分通过细胞膜进入细胞内,细胞内外冷冻保护剂和其它溶质达到平衡,同时细胞脱水形成玻璃化的凝固状态,该过程是胚胎冷冻最重要的保护机制。

解冻时,冷冻保护剂渗出细胞外,同时细胞膜必须防止水过多过快渗人细胞内,以免发生渗透性膨胀。

2　冷冻保护剂的种类极其作用机制　在胚胎冷冻和解冻过程中的适当阶段添加适当浓度的冷冻保护剂能有效地降低对细胞的损伤,科学选用冷冻保护剂在胚胎冷冻保存过程中非常重要[5]。

冷冻胚胎移植技术操作规范“以冷冻胚胎移植为核心的IVF策略”不同于传统超排卵周期因卵泡多为防止OHSS或因孕酮高不适合新鲜胚胎移植不得已而采用全胚冷冻。

“以冷冻胚胎移植为核心的IVF策略”是主动的全胚冷冻，包含四个基本要素：简单的促排卵方案、全胚冷冻、主要在自然排卵周期进行冷冻胚胎移植、简单的黄体支持。

冷冻胚胎移植涉及以下关键问题：内膜准备、胚胎内膜同步、黄体支持。

第一节、冷冻胚胎移植的内膜准备冷冻胚胎移植可以在自然周期、微刺激周期和激素替代周期进行，前两种称为有排卵周期。

排卵后有黄体形成，移植后黄体支持简单，应该尽量在有排卵周期进行冷冻胚胎移植。

一、自然排卵周期内膜准备适用于排卵正常，周期23-30天的妇女。

月经周期第10天前排卵的妇女不适合自然周期冷冻胚胎移植，可以用来曲咏推迟排卵2天。

周期超过30天的妇女监测时间较长，也可以用来曲嗖促排卵，缩短监测次数。

准备自然周期冷冻胚胎移植的患者，根据月经周期长短从月经周期第10天-12天开始用尿1H试纸监测，每天一次,用晨尿测定。

若1H开始显示，来院抽血查性激素：FSH,1H,E2,P4,同时超声监测，注意内膜厚度、形态、卵泡大小、有无输卵管积水。

注意少数妇女1H峰不典型，尿1H测定一直阴性，若1H一直阴性，月经周期第14-15天来院查性激素和超声监测。

1、若血1H水平超过10miu∕m1,E2超过200pg∕m1,且内膜超过8mm,形态正常，卵泡平均直径大于16mm,标志着1H峰已经出现。

2、若血1H超过10miu∕m1,但小于20miu∕1,E2、P4仍低，卵泡平均经线小于15mm,应该第二天复查,判断1H峰是否真正发生。

3、若血1H水平低于20m1U∕m1,且P4低于1ng∕m1,即1H处于上升期，当日夜晚9点注射H CGIOOOOU,+5天上午9-io点解冻D3胚胎，+7天上午9-10点解冻D5-7囊胚4、1H水平等于或大于20m1U∕m1,或P4大于等于1ng∕m1,即1H峰处于下降期，当日下午2-5点注射H CGIOOOOU,+4天上午9-io点解冻D3胚胎，+6天上午9-10点解冻D5-7D囊胚。