医药学院临床免疫学检验期末复习重点
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概论+抗原抗体反应1 免疫学基本概念及其生物学功能;免疫:机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能免疫三大功能:免疫防御、免疫自稳、免疫监视中枢免疫器官(骨髓和胸腺)外周免疫器官(淋巴结、脾脏、扁桃体)免疫细胞:淋巴细胞(T,B,NK)、单核巨噬细胞、其他免疫应答细胞(中性粒、嗜酸性、嗜碱性和肥大细胞)免疫分子:免疫球蛋白(IgM,IgG,IgA,IgE,IgD),补体,细胞因子,细胞黏附分子,人类白细胞分化抗原免疫应答:机体免疫系统接受抗原刺激发生的一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
过程:抗原的识别、处理、信息传递(识别阶段),免疫细胞的激活、增殖、分化(活化阶段)以及产生一系列的免疫效应因子(效应阶段)。
临床免疫学检验:研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫疾病发病机制、免疫诊断、及防治的一门医学领域的应用学科。
免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应,免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。
免疫检验:1)利用免疫检测原理和技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;2)体液中的微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素。
临床免疫学:利用免疫学理论和技术研究疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、疗效评价、预后判断和预防的多个分支学科的总称。
免疫性疾病:各种原因引起的机体免疫应答异常所致的疾病,包括超敏反应性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病和免疫增生病。
感染免疫学:研究病原微生物与宿主相互关系从而控制感染的学科,传统免疫学核心。
肿瘤免疫学:研究肿瘤免疫原性、机体抗肿瘤的免疫效应及机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系以及肿瘤免疫诊断与防治的学科。
移植免疫学:研究移植物与宿主相互关系从而选择移植物和延长移植物存活的学科。
2 血清学反应的概念;抗体主要存在于血清中,体外的抗原抗体反应称为血清学反应。
抗原抗体反应:抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应,特异性取决于抗原表位和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,并通过静电引力、范德华引力、氢键结合力和疏水作用力等非共价键结合在一起。
免疫应答主要分为哪几个阶段?1〕辨别阶段 2 〕活化和增值阶段 3 〕免疫效应中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官构成?各有什么功能?1〕中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟的场所,如骨髓,胸腺 2) 外周免疫器官:免疫细胞产生应答的场所。
如脾脏,淋奉承,黏膜,扁桃体等。
T 细胞、 B 细胞和 NK细胞的主要功能分别是什么?1〕 T 细胞:介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2〕 B 细胞:产生体液免疫 3〕 NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
依据作用方式及其特色的不一样,机体存在两类免疫简述各自的观点和特色?1)先本性免疫或固有性免疫,是个体出生是就拥有的天然免疫,可经过遗传获取,是机体在长久进化过程中渐渐成立起来的主要针对入侵病原体的天然防守功能。
其主要特色是反应快速,针对外来异物的范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2) 适应性免疫,是个体出生后,接触到生活环境中的多种异物抗原,并在不停刺激中渐渐成立起来的后天免疫,也称获取性免疫。
其主要特色是针对某个特定的异物抗原而产生免疫应答,开始的应答过程比较迟缓,一旦成立去除该抗原的效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应的原理。
答:抗原与抗体能够特异性联合是鉴于抗原表位与抗体超变划分子间的构造互补性与亲和性,这类特征是由抗原、抗体分子空间构型所决定的,它们之间的联合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的联合简述抗原抗体反应的种类。
答:抗原抗体反应分为五种种类:①颗粒性抗原与相应抗体联合所产生的凝聚反应;②可溶性抗原与相应抗体联合所产生的积淀反应;③抗原抗体联合后激活补体所致的细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体联合所致的中和反应;⑤免疫标记的抗原抗体反应等。
什么是带现象 ?答:在抗原抗体反应等价带前后,因为抗体或抗原过度 ( 形成前带或后带 ) ,上清液中可测出游离的抗体或抗原,形成的积淀物少,不出现可见反应,这类现象在做血清学试验时称为带现象。
免疫学检验1、免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
2、免疫应答分为识别阶段、活化阶段和效应阶段。
3、识别阶段,是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。
4、活化阶段,是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增殖,分化的阶段。
5、效应阶段,是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
7、免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
8、中枢免疫器官是免疫细胞发育为成熟免疫细胞的场所,它包括骨髓和胸腺。
9、成年人和动物所有血细胞及淋巴细胞的发源地是骨髓。
10、T细胞发育的重要中枢器官是胸腺。
11、外周免疫器官及组织包括淋巴结、脾、黏膜伴随的淋巴组织。
富含血管的最大外周淋巴器官是脾。
12、自然杀伤细胞来源于骨髓造血干细胞,其发育成熟依赖于骨髓及胸腺微环境。
13、免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后产生的、执行体液免疫功能的一组球蛋白。
14、抗体是机体在抗原刺激下,由浆细胞合成分泌产生的具有免疫功能的球蛋白。
15、所有抗体是球蛋白,但不是所有的球蛋白都是抗体。
16、Igg是血清中含量最高的免疫球蛋白,是再次免疫应答的主要抗体,也是唯一能通过胎盘的抗体。
17、补体的激活途径有经典途径、替代途径、MBL途径。
18、正常血清中,含量最高的补体成分是C3、C419、细胞因子:由免疫细胞分泌具有生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称,生物活性常表现为多效性、重叠性、拮抗效应和协同效应。
20、抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定族(表位)和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。
21、抗原抗体结合力:1. 静电引力;2. 范德华力(最小);3. 氢键结合力;4. 疏水作用力(最强)22、抗原与抗体结合的特异性,是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。
23、抗原抗体比例合适时,沉淀物形成快而多,称为等价带。
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识:了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官(如脾脏、淋巴结、骨髓等)和免疫细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等)组成,其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法:常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞,免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法:免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分,其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法:免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法:自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物,其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法:免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用:临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如,检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测;自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断;细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述,临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点,包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答免疫应答过程:抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以及产生一系列的免疫效应分子免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段1、识别阶段:是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报及相关淋巴细胞的阶段2、活化阶段:是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增值、分化的阶段。
B细胞接受抗原信息分化为浆细胞,T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞3、效应阶段:是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子,T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另外有少量T、B细胞在增值分化后,不直接执行效应功能,而成为记忆细胞免疫应答效应多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所,由骨髓和胸腺组成;外周免疫器官是免疫应答的场所,有淋巴结、脾及扁桃体等组成。
单核细胞核淋巴细胞经血液循环及淋巴循环进出于外周淋巴组织及淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
(一)中枢免疫器官1、骨髓2、胸腺:是一级淋巴上皮组织,是T细胞发育的重要中枢器官,胸腺由胸腺基质细胞(TSC)和胸腺细胞组成。
(二)外周免疫器官及组织1、淋巴结:分为皮质区及髓质区。
皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。
淋巴结的中心是髓质区,由淋巴索和淋巴窦组成,淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞,包括B 细胞、浆细胞、T细胞及巨噬细胞淋巴结主要功能:是共淋巴细胞栖息和增值的场所;是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地;是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站2、脾:是富含血管的最大外周淋巴器官。
3、黏膜伴随的淋巴组织:有B细胞、T细胞、浆细胞及巨噬细胞,受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答,使B淋巴细胞活化分化为浆细胞,产多种Ig类别的看那个题,其中最主要的是IgA及分泌型IgA,执行体液免疫及局部特异免疫作用(三)淋巴细胞再循环与归巢三、免疫细胞(一)淋巴细胞:是免疫系统的主要细胞,包括T细胞、B细胞核NK细胞1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。
免疫学考试重点归纳(全面)1抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
6免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
11单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
12多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~13基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
填空1.免疫防御功能异常可导致(感染、免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有(特异性、比例性、可逆性、阶段性)3•抗原抗体反应的温度一般以(15〜40 C)为宜,最适温度为(37 C)4•影响抗原抗体反应的环境因素主要有(电解质、pH、温度)5•某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求,如冷凝集素在(4C)左右与红细胞结合最好,(20 C)以上反而解离。
6•抗原抗体的结合分子间的引力包括(静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力),其中作用最强的是(疏水作用力)1•间接凝集反应的类型包括(正向间接凝集、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应)四种类型。
2•参与凝集反应中的抗原称为(凝集原),抗体称为(凝集素),常用的直接凝集试验有(玻片法、试管法、玻片法)3•在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体),而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)4•间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体),可用于输血前的(交叉配血)试验。
1.免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)的特异性结合2.棋盘格法(抗原)和(抗体)同时稀释,可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定3.单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成(沉淀环)。
4.Maneini 曲线适用于(大分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,抗原浓度与(扩散环直径的平方)呈线性关系,常用(普通)坐标纸作图。
5.Fahey 曲线适用于(小分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,沉淀环直径与(抗原浓度的对数)呈线性关系,常用(半对数)坐标纸作图。
6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析,沉淀线靠近抗原孔指示(抗体含量较高);靠近抗体孔则指示(抗原含量较高);不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗体)。
医学免疫学复习重点及考试重点医学免疫学复习重点及考试重点免疫学复习重点第一章免疫器官和组织名词解释粘膜相关淋巴组织(非常十分以及及其重要):或黏膜免疫系统(MIS),存在于呼吸道、消化道、泌尿道生殖道黏膜下的淋巴组织,它们在免疫防御中发挥重要作用。
是机体内部与外部的第一道防线,主要分泌SIgA(分泌型IgA)完成其免疫效应。
:问答题:免疫系统的组成第二章免疫球蛋白名词解释1、CDR: (互补决定区)(非常十分以及及其重要):在免疫球蛋白的重链和轻链V区,各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度可变,这个区域称为高变区。
高变区实际上是Ig与抗原表位特异性结合的位置,这些高变区序列在空间结构上与抗原表位互补,故称为CDR.2、单克隆抗体(非常十分以及及其重要):用杂交瘤和细胞融合技术使B淋巴细胞产生识别同一抗原表位的同源抗体,称为单克隆抗体,其有高度均一性、特异性与高效性.3、多克隆抗体(抗血清)(非常十分以及及其重要):用人工方法以相应天然抗原免疫动物,由于该抗原的高度异质性,含有不同抗原表位、且未经纯化,造成接种动物获得的免疫血清为多种抗体的混合物,称为多克隆抗体,含多克隆抗体的血清称为抗血清。
4、免疫球蛋白超家族问答题1、试述免疫球蛋白的生物学功能及各类Ig的作用(非常十分以及及其重要)(阐述题):免疫球蛋白的生物学功能免疫球蛋白的指具有抗体活性或化学结构上与抗体相似的球蛋白。
由2条轻链与重链组织,分为可变区(V区)和恒定区(C区),其V区的功能主要是靠其互补决定区(CDR)特异性识别、结合特异性抗原。
发挥免疫效应,如中和毒素、阻断病原侵入。
C区的功能主要是(1)激活补体:通过IgG1-3和IgM的CH2/CH3通过补体途径激活补体达到溶解细胞或细菌的作用。
(2)结合细胞表面的FC受体:Ig的Fc段与巨噬细胞、中性粒细胞的Fc受体(FcR)结合,增强其吞噬作用。
也称为调理作用。
IgE的FC段与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的FcεR高亲和力结合。
湖北文理学院------临床免疫学总复习第一篇免疫基础学1.免疫学的三大功能:(大题)①免疫防御:指机体排斥外源性异物的能力,即抗感染能力。
②免疫自稳:指机体识别和清除自身衰变残损的组织细胞的能力,以维持正常内环境稳定。
③免疫监视:指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。
2.免疫细胞的发育:T细胞和B细胞。
T细胞的发育:来自骨髓的祖T细胞在胸腺微环境中发育成熟——表达Pre-TCR的双阴性细胞(CD4、CD8)——“面临生死考验”的双阳性细胞——发育成熟的CD4和CD8单阳性细胞——胸腺细胞的阳性选择,获得MHC限制性——胸腺细胞的阴性选择,获得自身免疫耐受性——T细胞受抗原刺激在外周淋巴器官的进一步分化——TCR、CD4、CD8分子的表达是T细胞不同发育阶段的主要标志。
TCR识别抗原的特性:①只识别表达于APC表面并与MHC分子结合成复合物的多肽。
②只识别氨基酸一级序列的多肽线性决定簇。
③TCR识别抗原受到MHC的限制:CD4+Th只识别与MHC-Ⅱ分子结合的肽段,CD8+Tc只识别与MHC-Ⅰ分子结合的肽段。
3.T细胞的分类:①根据TCR异二聚体的组成不同,分为:TCRab细胞、TCRrg细胞②根据T细胞是否表达CD4或CD8分类:CD4+T细胞、CD8+T细胞。
CD4+T细胞:只表达TCR ;CD2+、CD3+、CD4+、CD8+;TCR识别抗原是MHC-Ⅱ类分子限制性,Th0、Th1、Th2行驶Tc、Ts功能。
CD8+T细胞:CD2+、CD3+、CD4+、CD8+;TCR识别抗原是MHC-Ⅰ类分子限制性,行驶Tc、Ts功能。
③功能性亚群:Th、Tc、Tdth、Ts。
④初始T细胞(表达CD45RS)和记忆性T细胞(表达CD45RO)。
(1) B细胞对T依赖抗原的应答;(了解)当大量抗原进入机体诱发初次免疫应答时,其抗原呈递多由巨噬细胞完成。
经MΦ活化TH细胞后再由活化的TH细胞辅助B细胞产生抗体和形成记忆B细胞。
【名词解释】1.抗原抗体反应:抗原抗体反应是指抗原与相应抗体在体内和体外发生的特异性结合反应2.亲和性;抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度,3.亲和力;一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度4.带现象;由于抗原或抗体过量,形成免疫复合物少,沉淀物少,上清液中可测出游离的抗原或抗体6.抗血清:将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物,一定时间后,采集动物血液,分离得到含有抗体的血清。
7凝集反应;细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,它们与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象8.直接凝集反应:颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象(这个名解删除)9.间接凝集反应:将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面(加到了反应面积),然后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象这个名解删除)10.沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。
11.比放射活性:单位质量标记物中所含的放射性强度(每分子被标记物平均所结合放射性原子的数目)单位: Ci/g12.发射光谱:指固定激发波长,在不同波长下记录的样品发射荧光的强度。
13.激发光谱:指固定检测波长,用不同波长的激发光激发样品,记录相应的荧光发射强度。
14.荧光效率:荧光物质将光能转变成荧光的百分率,一定范围内与激发光强度呈正相关。
15.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。
16.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发射荧光减弱甚至消退,称为荧光淬灭。
17.包被;将抗原或抗体结合于固相载体的过程18.封闭:抗原或抗体包被后,为防止固相载体没有完全包被,可能在后续实验中非特异性吸附蛋白,因此用1%~5%的牛血清白蛋白重新包被,覆盖所有蛋白结合位点,消除非特异性吸附19.固相膜免疫分析技术:以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性,以酶标记或各种有色粒子(胶体金,胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应或抗体检测的快速检验方法20.免疫金;指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合,习惯称金探针21.免疫组织化学技术:又称免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。
第一章免疫学概论❖免疫术语免疫(immunity):机体免疫系统识别“自己”和“非己”,对自身成分产生天然免疫耐受,对非己异物产生排除作用的一种生理反应。
免疫防御:防止外界病原体的入侵及清除已入侵病原体及其他有害物质。
免疫监视:随时发现和清除体内出现的“非己”成分,如肿瘤细胞、衰老凋亡细胞和病毒感染细胞。
免疫自身稳定:通过自身免疫耐受和免疫调节两种主要的机制来达到免疫系统内环境的稳定。
❖免疫应答的种类及其特点固有免疫(先天性免疫/非特异性免疫)分类适应性免疫(获得性免疫/特异性免疫)固有免疫(innate immunity):概念:固有免疫是生物在长期进化中逐渐形成的,是机体抵御病原体入侵的第一道防线物质基础:组织屏障:皮肤粘膜屏障、血脑屏障、血胎屏障固有免疫细胞:吞噬细胞、DC、NK细胞、NKT细胞、B1细胞、δγT 细胞固有免疫效应分子:补体系统、细胞因子、溶菌酶、抗菌肽、乙型溶素作用特点:♦先天性(无需抗原激发)♦作用在先(0~96小时)♦非特异性(模式识别受体)♦无记忆性适应性免疫(acquired immunity):概念:适应性免疫应答是指体内T、B淋巴细胞接受“非己”的物质(主要指抗原)刺激后,自身活化、增殖、分化为效应细胞,产生一系列生物学效应(包括清除抗原等)的全过程。
物质基础:T淋巴细胞、B淋巴细胞、抗原提呈细胞(APC)作用特点:♦获得性(需抗原激发)♦作用在后(96小时后启动)♦特异性(TCR/BCR)♦记忆性♦耐受性第二章免疫器官和组织❖免疫术语黏膜相关淋巴组织(MALT,mucosal-associated lymphoid tissue):概念:亦称黏膜免疫系统,主要指呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道黏膜固有层和上皮细胞下散在的淋巴组织,以及含有生发中心的淋巴组织,如扁桃体、小肠派尔集合淋巴结及阑尾等,是发生黏膜免疫应答的主要部位。
MALT的组成:肠相关淋巴组织、鼻相关淋巴组织、支气管相关淋巴组织MALT的功能及特点:♦行使黏膜局部免疫应答♦产生分泌型IgA❖免疫器官的组成和功能中枢免疫器官(初级淋巴器官)♦免疫细胞发生、分化、发育和成熟的场所♦包括骨髓和胸腺外周免疫器官(次级淋巴器官)♦成熟淋巴细胞定居的场所,免疫应答的主要场所♦包括淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织骨髓的功能:♦各类血细胞和免疫细胞发生的场所♦B细胞和NK细胞分化成熟的场所♦体液免疫应答发生的场所胸腺的功能:♦T细胞分化、成熟的场所♦免疫调节♦自身耐受的建立与维持淋巴结的功能:♦T细胞和B细胞定居的场所(T占75%,B占25%)♦免疫应答发生的场所♦参与淋巴细胞再循环♦过滤作用脾的功能:♦T细胞和B细胞定居的场所(T占 40%,B 占60%)♦免疫应答发生的场所♦合成生物活性物质♦过滤作用黏膜相关淋巴组织的功能:♦行使黏膜局部免疫应答♦产生分泌型IgA淋巴细胞再循环:指定居在外周免疫器官的淋巴细胞由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环,经血液循环到达外周免疫器官后,穿越HEV,重新分布于全身淋巴器官和组织的反复循环过程。
临床免疫学检验1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验)CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。
增殖试验有:形态法、核素法。
T细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。
(表达MHCⅡ类分子)8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
《临床免疫学检验技术》复习笔记一、绪论临床免疫学检验技术作为医学检验技术专业的核心课程,在医学领域中占据着至关重要的地位。
它主要阐述了基础免疫学和临床免疫学的基本理论、技术,以及常见免疫相关性疾病的免疫学特征和诊断方法。
二、抗原与抗体1. 抗原(Ag)是指能启动、激发和诱导免疫应答的物质,可被T、B 细胞表面特异性抗原受体识别及结合,激活细胞产生应答产物。
抗原是所有能启动、激发和诱导免疫应答的物质,其可被T、B 细胞表面特异性抗原受体(TCR 或BCR)识别并结合,激活T/B 细胞产生免疫应答,并与之发生特异性反应。
抗原可来自外界或自身,机体免疫细胞通常识别的抗原多数是蛋白质,少数是多糖、脂类和核酸等。
例如,2018 年长春长生疫苗事件中提到的疫苗就属于免疫学上所说的抗原范畴。
抗原的特性包括免疫原性、免疫反应性和特异性。
免疫原性是指抗原被T、B 细胞表面特异性抗原受体(TCR 或BCR)识别及结合,诱导机体产生适应性免疫应答的能力;免疫反应性,又称抗原性,是指抗原与其所诱导产生的免疫应答效应物质特异性结合的能力。
所有的抗原都有免疫反应性,但不一定有免疫原性。
同时具有免疫原性和免疫反应性的物质称为完全抗原;只有免疫反应性而无免疫原性的物质称为半抗原。
抗原的免疫原性主要取决于抗原的异物性和理化特性,也与机体的遗传、性别、生理状态以及抗原进入机体的途径和方式有关。
抗原通常为非己物质,抗原与抗体之间的亲缘关系越远,免疫原性越强。
天然抗原多为大分子有机物,蛋白质免疫原性较强;抗原分子量越大,则免疫原性越强;多支链或含环状结构基团的抗原较直链抗原免疫原性强;聚合状态蛋白较单体的免疫原性强;颗粒性抗原较可溶性抗原的免疫原性强。
此外,机体对抗原的免疫应答受多种遗传基因特别是主要组织相容性复合体基因的控制,还受年龄、性别与健康状态的影响。
在应用抗原免疫动物制备抗体时,选择合适的动物种类非常重要,应该选用发育成熟且健康的动物。
免疫学检验考试重点免疫学检验老师给的重点,自己总结的,当复习资料看看吧。
第一章绪论1、临床免疫学检验是研究免疫学检验的理论、技术、应用,以及临床免疫学性疾病发病机制、免疫诊断与防治的一门医学应用性学科。
2、临床免疫学(clinical immunology)是利用免疫学的基础理论和技术来研究临床疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、治疗效果和预后判断以及疾病预防等多个分支学科的总称。
3、免疫学检验建立的基础第二章抗原抗体反应1、抗原抗体反应(antigen-antibody)是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
可发生于体内,也可发生于体外。
2、抗原抗体防御的原理是什么?具有哪些特点?原理:基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,抗原与抗体间的结合是非共价键结合,通过静电场力、范德华引力(作用最小)、氢键结合力(最具特异性)、疏水作用力(作用最大)等分子间的引力结合在一起,在特异性的基础上形成非共价键由亲水胶体转化为疏水胶体。
特点:特异性、比例性、可逆性。
3、影响抗原抗体反应的因素有哪些?①反应物自身因素抗原(理化性状、分子量、表位的种类和数目)、抗体(来源、浓度、特异性与亲和力)。
②环境因素电解质、酸碱度(一般在6-8之间为宜)、温度(一般为15-40,常用抗原抗体反应为37)。
③对照的设置阴性对照、阳性对照、空白对照、标准品对照4、亲合力(avidity):抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度,与抗体结合价直接相关即所谓多价优势。
5、亲和力(affinity):是指抗体分子单一抗原结合部位与抗原分子表面一个相应抗原决定簇(表位)之间的结合强度,它是抗原抗体之间固有的结合力。
第三章免疫原和抗体的制备1、抗体制备类型:单克隆抗体、多克隆抗体、基因工程技术。
2、各类抗体的制备原理和应用?单克隆抗体,原理:将抗原免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞通过融合剂(聚乙二醇,PEG)融为一体,在HAT选择性培养基的作用下,只让融合成功的杂交瘤细胞生长,经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养(克隆化),最终获得既能产生所需单克隆抗体,又能体外长期繁殖的杂交瘤细胞系,将这种杂交瘤细胞扩大培养,接种于小鼠腹腔,从小鼠腹腔积液中获取高效价的单克隆抗体。
【名词解释】1.抗原抗体反应:抗原抗体反应是指抗原与相应抗体在体内和体外发生的特异性结合反应2.亲和性;抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度,3.亲和力;一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度4.带现象;由于抗原或抗体过量,形成免疫复合物少,沉淀物少,上清液中可测出游离的抗原或抗体6.抗血清:将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物,一定时间后,采集动物血液,分离得到含有抗体的血清。
7凝集反应;细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,它们与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象8.直接凝集反应:颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象(这个名解删除)9.间接凝集反应:将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面(加到了反应面积),然后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象这个名解删除)10.沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。
11.比放射活性:单位质量标记物中所含的放射性强度(每分子被标记物平均所结合放射性原子的数目)单位: Ci/g12.发射光谱:指固定激发波长,在不同波长下记录的样品发射荧光的强度。
13.激发光谱:指固定检测波长,用不同波长的激发光激发样品,记录相应的荧光发射强度。
14.荧光效率:荧光物质将光能转变成荧光的百分率,一定范围内与激发光强度呈正相关。
15.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。
16.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发射荧光减弱甚至消退,称为荧光淬灭。
17.包被;将抗原或抗体结合于固相载体的过程18.封闭:抗原或抗体包被后,为防止固相载体没有完全包被,可能在后续实验中非特异性吸附蛋白,因此用1%~5%的牛血清白蛋白重新包被,覆盖所有蛋白结合位点,消除非特异性吸附19.固相膜免疫分析技术:以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性,以酶标记或各种有色粒子(胶体金,胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应或抗体检测的快速检验方法20.免疫金;指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合,习惯称金探针21.免疫组织化学技术:又称免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。
22.抗原修复:免疫组化在制片的过程中由于广泛的蛋白交联而使其组织的某些抗原决定簇发生遮蔽、致使免疫细胞化学的信号减弱或消失等不良效应。
所以,使遮蔽的组织抗原决定簇重新暴露的方法,即抗原修复。
23.CH50;补体总活性测定方法是以红细胞的溶解为指示,以50%溶血为判断终点24.不完全抗体。
1.超敏反应(hypersensitivity)又称变态反应,是指机体再次接受相同抗原刺激后,发生的以组织细胞损伤或生理功能紊乱为主的特异性免疫应答2.变应原(allergen):引起超敏反应的抗原称之为变应原。
3.自身免疫耐受(autoimmune-tolerance):正常情况下,机体免疫系统能识别“自我”,对自身组织成分不发生免疫应答反应,或仅产生微弱的免疫应答,此为自身免疫耐受。
4.自身免疫(autoimmunity):是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应,出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。
5.自身免疫病(autoimmune disease,AID):因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。
6.混合性结缔组织病(MCTD:自身免疫病通常由Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ超敏反应所引发,常有两种或两种以上的自身免疫病混合出现的临床表现7.自身抗体(autoantibody)(掌握),是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白,是自身免疫和自身免疫病重要特征之一,某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱)。
8.抗核抗体(ANA)(掌握):是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。
ANA 的性质主要是IgG,也有IgM、IgA 和IgD。
9.免疫增殖性疾病(immunoproliferative disease)是指由于淋巴细胞异常增殖所引起的疾病,多属于血液疾病范畴10.多发性骨髓瘤(multiple myeloma)是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,也称浆细胞瘤(plasnocytoma),因其引起骨破坏而得名。
患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍11.巨球蛋白血症(macroglobulinemia)是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。
好发于老年男性。
12.M蛋白(掌握):。
当某一类Ig显著增加,含量≥30g/L,理化性质一致时,称为单克隆蛋白,即M蛋白。
M蛋白见于免疫增殖病,如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、轻链病和恶性淋巴瘤等13.免疫缺陷病(ID).由遗传因素或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全称为免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各种临床综合征称为免疫缺陷病14.肿瘤抗原(tumor antigen):是指在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。
15.肿瘤特异性抗原(TSA)。
为肿瘤细胞所特有,只表达于肿瘤细胞,而不存在于任何处于不同发育阶段的正常细胞16.肿瘤相关抗原(TAA。
指非肿瘤细胞所特有的抗原成分,也少量存在于正常细胞,但在肿瘤发生的机体可异常表达,可分为胚胎性抗原和分化抗原两种类型。
17.质量保证(QA)。
质量保证是临床实验室为了证明给患者做提供实验数据的有效性,而采取的一系列措施,涵盖实验室进行检测前后的所用活动。
18.准确度(accuracy)待测物的测定值与其真值的一致性程度19.精密度(precision)在一定条件下进行多次测定,所得结果之间的符合程度20.标准品(standard)。
指性质纯的处于一定基质中已知含量或成分且特性明确的物质,通常用于比较检测未知的物质或成分21.正确诊断指数(Youden’s index)又称约登指数,指将灵敏度和特异度结合的评价某种免疫学实验的综合指标。
其值是灵敏度与特异度之和减去1,大小范围从0到1 。
22.选择性蛋白尿指数(掌握),SPI= (尿Ig/血清Ig)/(尿TRF/血清TRF)23.冷球蛋白:在低温下发生沉淀,加温后又复溶的免疫球蛋白。
0~4℃沉淀,37 ℃恢复溶解24.SD抗原。
由血清学分型法检测的抗原称为SD抗原,包括,HLA-A,HLA-C,HLA-DR,HLA-DQ25.LD抗原.由细胞学分型法检测的抗原称为LD 抗原包括HLA-D,HLA-DP26.混合淋巴细胞反应:又称混合淋巴细胞培养,是指两个无关个体、功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时,由于HLA II类抗原中D和DP抗原不同,可相互猜忌对方的T细胞发生增值。
【大题以及知识点】一、.抗原抗体结合力有哪些(掌握)静电引力,范德华力(最弱),氢键(特异性),疏水作用力(最强)二、抗原抗体反应的特点(掌握)特异性,比例性,可逆性,阶段性注意:抗体过量称为前带,抗原过量称为后带三、抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例。
(掌握)抗原抗体分子比例适合的范围称为抗原抗体等价带,在此范围内,抗原抗体结合充分,沉淀物形成快而多。
在等价带前后,由于抗体和抗原过量,形成沉淀物少,上清液中可测出游离的抗体或抗原,这种现象称为带现象,由于带现象的干扰,可导致假阴性结果,因此需要确定合适比例四、什么是免疫佐剂,免疫佐剂的种类(熟悉)预先或与抗原同时注入体内,可增加机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质,简称佐剂。
分为福氏完全佐剂,福氏不完全佐剂,两者的区别在于前者含有卡介苗。
五、什么是直接Coombs实验,直接和间接coombs实验有何区别?(掌握)抗球蛋白试验是抗球蛋白参与的间接血凝试验,用于检测抗红细胞不完全抗体。
直接coombs试验用于检测吸附于红细胞表面的不完全抗体,间接coombs 试验用于检测血清中游离的不完全抗体。
六、免疫浊度法的原理?和影响因素?(掌握)原理:可溶性抗原与相应的抗体特异性结合,两者在合适比例和增浊剂作用下,可以快速形成一一定大小的免疫复合物,使其反应液出现浊度。
它的最大优点就是稳定性好,敏感度高,精确度高。
简便快速,易于自动化,无放射性核素污染。
因素:抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的环境、增浊剂。
七、碘125的优势有哪些?(掌握)1.化学性质活泼,标记方法简单,核素丰度高2.产生的γ射线,便于测量且测量的效率高3.半衰期60天,易于废料处理。
九、常用荧光物质种类和用途(掌握)1.异硫氰酸荧光素(FITC)最大吸收波长490—495nm,最大发射波长520-530n m呈现黄绿色荧光,常用于双标记免疫荧光染色2.四乙基罗丹明(RB200),棕红色常用与双重标记或对比染色3.藻红蛋白(PE)最大吸收波长565nm,常用于双标记免疫荧光染色4.镧系螯合物如铕Eu3+,常用于时间分辨荧光免疫侧定5.酶作用后产生的荧光物质,常用于荧光酶免疫分析十、时间分辨荧光免疫测定的原理(掌握)通常各组织、蛋白或者其他化合物,在激发光的照射下都能发出一定波长的自发荧光,但他们的荧光寿命通常较短,最长不超过20秒钟。
而镧系元素螯合物的荧光寿命较长,因此在检测时可在短寿命本底自发荧光完全衰变后,再测定镧系元素螯合物的特异性荧光信号,可有效的降低本底荧光的干扰,故称为。
十二、荧光偏振免疫测定原理(掌握)在反应液中,荧光素标记的小分子抗原转动速度快,失去方向性;但与抗体结合后,荧光素标记抗原分子增大,转动速度变慢,受偏振光激发后发射出的偏振荧光明显增强。
当待检抗原过多时,由于竞争性结合,形成小分子抗原抗体复合物少,游离的小分子抗原就多,受偏振光激发后,发射的偏振荧光就越弱,即待检抗原含量与偏振荧光强度呈反比。
十三、酶免疫技术中,常用的固相载体有哪些(掌握)1.塑料制品:聚苯乙烯,聚氯乙烯2.微粒。
3.膜载体;NC,PVDF十四、ELISA的原理和方法类型?(必须掌握)原理:把抗原或者抗体结合到某种固相载体表面,将抗原或抗体与酶连接成酶标抗原或抗体,将受检样品和酶标抗原或抗体按照不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体反应,洗涤复合物与其他物质分开,加入底物,底物被固相载体上的酶催化成有色物,通过定性或定量测有色物即可。
方法类型:1检测抗原的方法:双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法2.检测抗体的方法:间接法、双抗原夹心法、竞争法、捕获法。