小鼠发情周期观察与最佳超排时期的确定

自然发情和超排小鼠有腔卵泡发育的动态模式比较张利生　牛树理3(南京农业大学动物科技学院,南京210095)摘要:对自然发情和超排处理发情小白鼠的有腔卵泡进行观察,超排鼠于hCG 注射后不同时间取卵巢作切片,结果发现,自然发情和超排小鼠的卵泡进入有腔卵泡阶段(直径≥265μm )是一个连续的过程,但无论是卵泡被招募(recruit 2ment )(卵泡直径≥265μm )还是由小一级有腔卵泡进入大一级有腔卵泡,其转入的速度并不是恒定的;和自然发情相比,超排可促进卵泡的招募,使招募后的卵泡闭锁大大减少,但招募的数量未见增多。

关键词:小鼠;有腔卵泡;发育;动态模式;超数排卵中图分类号:Q49215 文献标识码:A 文章编号:1000Ο2030(2001)03Ο0053Ο04Comparison in dynamic patterns of ovarian antral folliclesbetw een natural and superovulated estrous ratsZhang Lisheng and Niu Shuli 3(C ollege of Animal Science and T echnology ,Nanjing Agric Univ ,Nanjing 210095,China )Abstract :Antral follicles were counted in ovaries from both natural and superovulated estrous y oung adult K M white rats.The ovaries of the superovulated estrous rats were collected after the injection of hCG at different time.The result indicated that the in flow of the follicles of both the natural rats and the superovulated estrous rats were continuous but not constant.As compared with natural estrous ,superovula 2tion could prom ote recruitment and reduce atresia.H owever there is no significant difference in the recruitment number between natural and superovulated estrous rats.K ey w ords :rat ;antral follicle ;development ;dynamic pattern ;superovulation成年哺乳动物的卵巢上有数以万计的卵子,但是这些卵子并未得到充分的利用,原因之一是其随着动物年龄的增长,褪化闭锁了。

小鼠饲养常见问题问答1. 小鼠的特点小鼠性情温顺，胆小易惊，易于捕捉，夜间比较活跃，尤其是傍晚时更为活跃，其进食、交配、分娩多发生在夜间。

喜欢群居于光线较暗的环境，多只一笼饲养时生长发育较单只饲养时快。

对外来刺激敏感，如强光、噪音，不同气味等刺激，可引发“吃仔”现象。

雄性好斗，性成熟的雄鼠放在一起时，易发生互斗并咬伤，但同窝雄性鼠离乳时放在同笼内，可避免互斗。

雄鼠分泌醋酸铵臭气，是引起室内恃异臭气的主要原因。

小鼠是啮齿动物，门齿终生生长，因此小鼠有啃咬习惯，以此来磨损门齿并保持其长短的恒定。

小鼠不耐饥饿，不耐热，对环境适应性差，对疾病抵抗力低。

实验小鼠自发肿瘤多。

白化小鼠怕强光。

2.小鼠的生殖生理小鼠发育速度较快，一般在14-20g之间可供进行动物实验。

但做种子的小鼠必须根据动物的生物学特性及育种要求进行选种。

小鼠性成熟早（雄鼠36日龄时，可在附睾精液中找到运动活泼的精子，雌鼠37日龄即可发情排卵），性成熟一般在36-42日龄，小鼠具有明显的性周期，性周期为 4-5天，雄性小鼠的体成熟为70-80日龄，雌性小鼠为65-75日龄。

因此，小鼠开始繁殖的适宜日龄在 65-90日之间。

小鼠一年四季均有性活动，分娩后24小时内又可受孕。

雌鼠的性活动一般可分为发情前期、发情期、发情后期和发情休息期，性周期各阶段的特征，可用阴道分泌物涂片和组织学检查加以区分。

雌鼠的这些变化，受卵巢机能所控制。

卵巢能分泌两类激素，一类是由卵巢上皮细胞分泌的雌激素；一类是由黄体细胞分泌的孕激素。

雌激素能促进子宫、输卵管的发育，促进副性征的出现和乳腺导管的发育，诱导动情，孕激素是黄体激素，在整个妊娠期中，都需要黄体的存在，其主要功能是保护受精卵的附植及维护妊娠，并促进乳腺的发育，它是子宫维持正常机能的主激素。

3.如何操作小鼠绝大多数品系的小鼠经过长期的驯养和人为的挑选，性格都是很温驯的，除了被受到攻击以外都不会咬人。

小鼠实验的操作过程中，要平稳快速，如果在操作中发现小鼠变的焦躁不安，此时应停止对小鼠的动作而等其平静下来后再重新开始操作小鼠。

不同交配时间对小鼠胚胎收集和发育的影响田静;赵刚;钟刚毅;郭建鑫;谢鑫;崔继红;杨艳红;李立文;陈富林;严兴荣【摘要】【目的】探索不同交配时间对小鼠胚胎收集和胚胎发育的影响,为小鼠的超排研究提供参考。

【方法】对小鼠进行超数排卵,分别于注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）后9,10,11,12,13,14和15h,在输卵管膨大部收集卵母细胞,研究排卵情况;将超排雌鼠与雄鼠合笼,分别于合笼后2,4,6,8,10和12h观察小鼠是否见阴道栓,研究小鼠交配时间;为了控制小鼠的交配时间,将超排雌鼠分别于注射hCG后0,2,4,6,8,10,12,14,16和18h与雄鼠合笼,每个时间点合笼后2h观察交配情况,于注射hCG后98h从子宫角收集囊胚,统计胚胎收集率,观察胚胎发育情况。

【结果】小鼠排卵主要集中于注射hCG后12～14h,交配时间主要在注射hCG后的前6h。

人为控制交配时间发现,注射hCG后4,6,8,10和12h的交配率均较高,较高的胚胎收集率出现在注射hCG后8,10和12h;囊胚发育率在注射hCG后4h（56.0%）和8h（54.5%）较高;扩张囊胚发育率在注射hCG后12h（68.2%）和16h （58.0%）显著高于其他时间点（P〈0.05）。

【结论】交配时间影响小鼠交配成功率、胚胎收集率和胚胎发育;超数排卵后12h交配可提高小鼠的胚胎收集率和胚胎发育率。

%【Objective】 The effect of different mating time on mice embryonic collection and embryonic development by controlling mating time was investigated.【Method】 Ovulation was ensured by observing oocyte in oviduct at 9,10,11,12,13,14,15 h after injecting hCG.To observe the mating time,vaginal plug was recorded at 2,4,6,8,10,12 h after matingof superovulated female with male.To control the mating time,the female was caged with male mice at 0,2,4,6,8,10,12,14,16,18 h after injecting hCG.The mated mice were recorded at 2 h after caging,respectively.Theembryo was collected in uterus at 98 h after injecting hCG.The collecting and development rate of embryo were recorded.【Result】 In nature,the ovulation occurred at 12-14 h after injecting hCG.The mating rate was mainly concentrated at first 6 h after caging.In control of matingtime,mating rate was higher at 4,6,8,10,12 h after injecting hCG.The success of collecting embryo was higher at 8,10,12 h.Formation rate of blastocyst was higher at 4 h（56.0%） and 8 h（54.5%）;Development rate of expanded blastocyst was higher at 12 h（68.2%） and 16 h（58.0%）,respectively,which were significantly more than other points（P 〈0.05）.【Conclusion】 The mating rate,collection and development of embryo was improved by controlling the mating time,and the rates of embryonic collection and development were improved by mating at 12 h after superovulating.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(040)007【总页数】5页(P21-24,31)【关键词】小鼠;超数排卵;交配时间;胚胎收集;胚胎发育【作者】田静;赵刚;钟刚毅;郭建鑫;谢鑫;崔继红;杨艳红;李立文;陈富林;严兴荣【作者单位】西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;第四军医大学唐都医院妇产科,陕西西安710038;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069;西北大学生命科学学院,陕西西安710069【正文语种】中文【中图分类】Q954.4实验动物为人类健康研究贡献了生命，合理而高效地控制与调整实验动物的繁殖周期与交配行为[1-2]，对减少实验动物无序繁殖而实现有计划生产和按时供给具有重要意义。

C57BL／6小鼠繁殖性能的观察与研究C57BL/6小鼠是一种常用的实验动物模型，广泛应用于多个领域的研究。

研究C57BL/6小鼠的繁殖性能对于了解其繁殖特性、优化实验设计以及提高实验数据的可靠性都具有重要意义。

本文将从配种、妊娠和产仔等方面对C57BL/6小鼠的繁殖性能进行观察与研究。

首先，对C57BL/6小鼠的配种性能进行观察和研究。

正常情况下，C57BL/6小鼠雄鼠的性成熟期在6-8周龄，雌鼠的性成熟期在8-10周龄。

在实验过程中，可以通过观察雄鼠的精液排出情况以及雌鼠的阴道闭锁情况来判断其性成熟情况。

通常情况下，C57BL/6小鼠的配种率较高，可以达到90%以上。

但是，也需要注意一些可能影响配种的因素，如异常的生理状态、缺乏足够的性行为活跃性等。

此外，需要避免连续配种造成的疲劳导致的交配率下降。

其次，对C57BL/6小鼠妊娠过程进行观察和研究。

一般来说，C57BL/6小鼠的妊娠期为19-21天，平均妊娠期为20天。

妊娠的早期可以通过观察雌鼠的体重增加和腹围增大来判断。

在妊娠晚期，雌鼠体内的血液中孕激素的水平会升高，可以通过血液或尿液的检测来确定妊娠情况。

同时，需要控制适当的环境温度和湿度，提供足够的饮水和营养物质，以保证雌鼠的健康和胎儿的正常发育。

最后，对C57BL/6小鼠的产仔情况进行观察和研究。

正常情况下，C57BL/6小鼠的雌鼠一胎产仔数一般为6-8只，最多可达12只。

产仔时需要保持较为安静的环境，以免引起雌鼠的紧张和恐惧情绪。

产仔后，需要及时清理产仔箱，为母鼠提供适当的食物和饮水，以提供良好的哺乳条件。

同时，需要对幼仔的存活率进行观察和记录，对于异常或畸形的幼仔及时处理，以保证健康的后代。

综上所述，对C57BL/6小鼠繁殖性能进行观察和研究对于优化实验设计、提高实验数据的可靠性以及了解其繁殖特性具有重要意义。

通过对配种、妊娠和产仔等方面进行观察和研究，可以为进一步深入开展相关研究提供可靠的数据基础。

第２４卷第３期２００７年６月实验动物科学ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹＡＮＩＭＡＬＳＣＩＥＮＣＥＶ０１．２４Ｎｏ．３Ｊｕｎｅ２００７确定小鼠动情周期的三种方法李靖１李炫诚２吴云霞２。

（１．武警湖北总队医院急诊科，武汉４３００６０）（２．华中科技大学同济医学院药学院，武汉４３００３０）摘要：目的为选择确定小鼠动情期的最准确和方便的方法，取成熟雌性昆明小鼠，每日晨取阴道脱落细胞及宫颈黏液做涂片，置显微镜下观察，分别用宫颈黏液结晶法、阴道脱落细胞学检查法、阴道脱落角化细胞计数法三种不同方法来确定小鼠动情期。

结果显示：三种方法均可以确定小鼠动情期，但三种方法比较，宫颈黏液结晶法特异性差；阴道脱落细胞学方法较为准确，但有假阴性现象；角化细胞计数法直观方便，结果最为客观准确。

关键词：动情周期；宫颈黏液；阴道脱落细胞中图分类号：Ｑ９５．３３文献标识码：Ｂ文章编号：１００６—６１７９｛２００７）０３．００６３．０２雌性小鼠性成熟后，生殖器官发生增生、退化的周期性变化为动情周期。

一般分为四期：动情前期、动情期、动情后期和动情间期。

动情期是性欲冲动和接受交配的时间，本期末雌鼠排卵，此期间卵泡迅速生长，雌激素分泌达高峰，阴道涂片表现多数的多角形无核角化上皮细胞，宫颈黏液结晶可见典型羊齿状。

妇科、产科和计划生育等很多医学科学研究中，常需要准确确定实验动物的动情期以决定是否合笼，在动物体外受精中需要准确确定动情期以确保获得成熟卵子以利于受精。

据文献记录，动情期的确定方法有多种，主要有宫颈黏液结晶观察法和阴道脱落细胞学检查方法¨ｑ。

能否准确确定动情期直接影响到实验进程和实验结果的精确度和可靠性。

本文对确定动情周期的三种方法做了比较研究，旨在建立准确、简单而可靠的方法以供推广应用。

消毒棉签、注射器、９５％乙醇、医用生理盐水、苦味酸、苏木素一伊红（Ｈａｅｍａｔｏｘｙｌｉｎｅｏｓｉｎ，ＨＥ）染色试剂购自北京中山公司。

１．３主要仪器显微镜（ＯＬＹＭＰＵＳＣＨＫ，Ｊａｐａｎ），数码相机（ＬＥＩＣＡ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。

⼩⿏发情期卵泡发育动态影响2019-06-10⼩⿏因其繁殖率⾼、繁殖周期短等特点被常⽤于⽣物医学研究,尤其是胚胎⽣物学和胚胎⼯程研究(Brookeetal,2007;Dingetal,2007;Martín-Coelloetal,2008)。

超数排卵技术作为在同⼀时间段获得⾜够数量卵母细胞或胚胎的主要⼿段之⼀,是开展胚胎⽣物学和胚胎⼯程研究的基础(Chenetal,1991;Heetal,1999,2005)。

⼩⿏超排效果除受⼩⿏⽇龄和超排激素剂量影响之外(Cuietal,2012;Yang,2007),主要受超排注射促性腺激素时⼩⿏所处发情周期阶段的影响,但国内外对于⼩⿏超排的适合发情周期阶段所获得的研究结果并不⼀致，如Fuetal(2005)研究表明,发情前期ICR⼩⿏超排后,其见栓率、平均可⽤胚胎数均⾼于其他发情周期阶段的⼩⿏;Guoetal(2006)对昆⽩系⼩⿏的超排后,结论为在⼩⿏发情前期的初期和间情期后期超排效果较好且两者差异不显著;⽽Redianetal(1994)和Tarínetal(2002)在不同品系⼩⿏的超排中则证明,发情期超排⼩⿏效果最好,发情后期和间情期超排效果较差。

由于处于发情周期不同阶段的⼩⿏,其卵泡发育情况及体内激素分泌存在差异(Palermo,2007),根据⼩⿏发情周期的卵泡发育规律和⽣殖内分泌变化,可将⼩⿏发情周期分为发情前期、发情期、发情后期和间情期(Redianetal,1994),其外部表现为阴门状态的周期性变化(Nagyetal,2002)。

在⼩⿏超排研究中⼀般根据⼩⿏阴门状态的周期性变化对发情周期阶段进⾏判断,但由于⼩⿏的品系或个体差异,其发情周期各阶段长短、阴门状态变化存在差别,导致对其阴门状态的观察结果有所差异。

上述研究结果的差别,除了所⽤促性腺激素来源和⼩⿏品系的不同,各研究者所采⽤的判断发情周期阶段的⽅法和标准的不同可能是导致结果差异的主要原因。

小鼠交配繁殖常识及注意事项小鼠是最常见的实验动物，很多实验室买回小鼠后都涉及到繁殖的问题。

下面来给大家介绍一下小鼠后续交配繁殖的常识及注意事项。

•交配小鼠体成熟一般多为60〜90天，是适宜的配种日龄。

一般发情后2〜*i I「飞r-. 3小时即可排卵，排卵期3〜4天，但在排卵期仅数小时内才允许公3 ■ •卜. 'l I ■, I 沽鼠交配。

雌鼠交配后，在阴道口形成一个白色的阴道栓，是公鼠的精L 心歹汽 I 1液、母鼠的阴道分泌物和阴道上皮混合遇空气后变硬的结果，可防止精子倒流，提高受孕率。

阴道栓常视为交配成功的标志。

阴道栓在交配后12〜24小时自动脱落。

I、- 戈.b ^7%雌鼠产后12〜24小时可发情，此时交配可造成产后妊娠(边哺乳边怀孕)。

有时，由于延迟着床，此妊娠期要比一般妊娠期长，可达31〜35天。

此外雌鼠与不育雄鼠交配或用机械方法刺激宫颈可产生假性妊娠(pseudopregnancy )，—般可维持10〜12天，有时长达3周。

•妊娠',1妊娠期19〜21天，妊娠期的长短与小鼠品系及个体、环境因素、排卵数量、受精卵种植率、胎次等有关。

•分娩精心整理小鼠的分娩多在夜间进行。

产前不安，不停地整理产窝，约4分钟产仔一只，1分钟后胎盘产出，母鼠将胎盘嚼食。

整个过程约经1小时。

有时可出现因受精卵种植延迟导致的产后3〜5天又产仔的现象。

小鼠每胎产仔6〜15只，产仔数取决于品系、胎次、饲养条件、营养条件等。

第2〜6胎产仔数较多，一般7胎后产仔数逐渐下降。

•哺乳心一\ \ \\ !| I ; I 7 \哺乳期18〜23天，小鼠带仔数一般为8〜10只，因母鼠营养状况、L 心歹汽 I 1体质状况、生产能力等因素的不同而变化。

母鼠哺乳仔数太多可导致仔鼠发育不均。

如带仔数不足时可将其它多余的同龄仔鼠放入寄奶代乳，但放入前应使其感染新窝的气味，以免被代乳母鼠咬死。

留种仔鼠可适当延长哺乳期到23天。

•繁殖时限小鼠性活动可维持1年左右，作为种鼠使用时间一般为6〜8个月, 之后其繁殖能力下降，仔鼠质量越来越差，因此应予淘汰。

不同时间注射PMSG和HCG对小鼠超排卵效果的影响陈喜英;郭永昌;刘田福【摘要】目的探讨不同时间注射孕马血清激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对小鼠超排卵效果的影响. 方法选用40只6周龄F1昆明小鼠,随机分成4组,分别在同一天的11:00,13:00,15:00,17:00注射PMSG 5 IU,48 h后注射HCG5 IU,然后与公鼠合笼;次日晨检查阴栓,阳性者于当日10:00处死取卵,计数受精卵的数量. 结果 11:00,13:00,15:00和17:00组平均每只获取可用受精卵9.8枚、24.8枚、11.5枚、4.7枚. 结论在13:00注射PMSG,48 h后注射HCG对小鼠超排效果最好.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2014(045)001【总页数】3页(P23-25)【关键词】孕马血清;人绒毛膜促性腺激素;超排卵;注射时间【作者】陈喜英;郭永昌;刘田福【作者单位】山西医科大学实验动物中心,太原 030001;山西医科大学实验动物中心,太原 030001;山西医科大学实验动物中心,太原 030001【正文语种】中文【中图分类】R-33近年来，随着转基因技术的迅速发展和成熟，转基因动物在生物医药、生命科学研究领域得到越来越广泛的应用。

国际上报道了多种得到转基因动物的方法，目前真正成熟并可以稳定得到转基因动物的方法主要有三种，即原核显微注射法、精子介导的基因转移法和核移植。

其中，显微注射法是转基因最简单、最常用的的方法，其操作步骤包括受精卵的采集、显微注射和胚胎移植。

要取得原核显微注射的高成功率首先要得到质量好、数量多的原核期受精卵。

小鼠在生理状态下一次排卵10－15颗，远不能满足实验的需要。

为了增加可获得的卵子数量，用孕马血清(PMSG)模拟促卵泡激素，用人绒毛膜促性腺激素(HCG)模拟黄体生成素(LH)可以诱发交配雌鼠排卵多于正常排卵数即超排卵。

超排反应是一个由一系列极其复杂的生理过程累积而产生的结果，影响因素诸多［1］，包括动物遗传特性、体况、营养状态、年龄、发情周期的阶段、卵巢的功能状态、季节、温度以及激素剂量等。