色谱概论13章
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色谱分析丁黎中国药科大学药物分析教研室第一章 概论一.定义色谱分析法(chromatography )简称色谱法或层析法,该法是一种物理或物理化学的分离分析方法,主要用于分析多组分样品。
该法利用某一特定的色谱系统(如TLC ,HPLC 或GC 系统等),该系统一般包含二相(一为固定相,一为流动相)。
利用多组分样品中各组分在不同的两相之间具有不同的分配系数,当两相相对运动时,这些组分在两相的分配反复多次进行,使分配系数有微小差别图 1-2 色谱系统示意图 的组分得到分离。
分配系数大的组分保留时间长,较慢地被从色谱柱中被洗脱出来。
分配系数小的组分保留时间短,较快地被从色谱柱中被洗脱出来。
图 1-2 色谱分离示意图色谱分析法与光谱法、化学分析法的主要不同在于色谱法具有分离及分析两种功能,而光谱法及化学分析法不具备分离功能。
色谱法是先将混合物中各组分分离,而后逐个分析,因此它是分析混合物最有效的方法。
试样固定相 流动相色谱分析法与其它分析法的比较:化学法:判断标准简单、直观、快速、易得、价廉,但需纯物质(定量时)。
无分离能力,易受干扰,选择性差,无法区分结构相似的药物,适用范围不够广,一般用于原料药,非水滴定测含量,灵敏度一般为mg级。
光谱法:主要用于定性及结构鉴定,准确度高,但需纯物质,成本较高。
无分离能力,选择性差。
灵敏度较高,一般为ppm级,即微克级。
适用范围不够广,一般用于原料药的定性与定量。
色谱法:分离分析,最适宜分析多组分样品。
高分离效能。
高选择性:可检测差别很小的物质。
高灵敏度:ppm(10-6)~ ppt(10-12),µg级~ pg级。
适用范围:几乎所有的药物(95%)可进行HPLC分析,30%的药物可进行GC分析。
二.色谱法的历史与发展古罗马时期,人们发现:色素滴在白布上会扩散成不同颜色的同心圆环。
1834年Runge根据此现象来以布分析染料的组成,此为色谱的萌芽阶段。
图1-3 色素滴在白布上会扩散成不同颜色的同心圆环。
色谱概论及薄层色谱法色谱是一种重要的化学分离技术,在化学分析、生物医药、环境监测等领域有广泛应用。
色谱可以将混合物的组分根据各自的性质,在固定相(静相)和移动相(流动相)之间进行分离,其中薄层色谱法是常用的色谱技术之一色谱的原理是基于不同组分在静相和流动相中的相互作用不同而产生分离的原理。
静相一般是固体或液体,而流动相是液体或气体。
在色谱过程中,样品溶液被施加于静相,流动相通过其中一种方式运动过静相,进而分离样品中的组分。
流动相运动速度快,组分溶质相互之间的作用力弱,溶质相对向前运移;而静相上的吸附力或分配力决定了各组分的保留时间,从而实现分离。
薄层色谱法是一种常用的色谱技术,其基本原理与其他色谱技术类似,只是在操作上有所不同。
薄层色谱是将静相涂布在一张玻璃、铝箔或塑料片上形成薄层,称为薄层板。
将待测样品与流动相共同作用于薄层板上,通过静相的吸附或分配作用实现组分之间的分离。
薄层色谱法的特点是操作简单、分析速度快、分离效果良好,成本低廉。
它广泛应用于药学、化学、生物学等领域,特别是在有机合成反应的监控和质量控制、天然产物的分离和鉴定、毒理学研究和食品安全领域中得到广泛应用。
薄层色谱法的操作步骤如下:首先,准备好薄层色谱板,并涂布需要的静相。
然后,在薄层板上绘制样品点,并选择合适的流动相。
接下来,将薄层板放入预先准备好的色谱槽中,让流动相上升或下降至一定高度,静止一段时间使样品分离。
最后,将薄层板取出,干燥后可通过显色、紫外光照射等方法进行检测和分析。
除了薄层色谱外,还有气相色谱(GC)和液相色谱(HPLC、GC-MS等)等其他类型的色谱技术。
每一种色谱技术在不同领域都有其特殊的应用和优势,选择合适的色谱技术取决于待测物性质和分离要求。
总结起来,色谱是一种重要的化学分离技术,而薄层色谱法是其中的一种常用技术。
薄层色谱法具有操作简单、分析速度快、分离效果良好等特点,广泛应用于药学、化学和生物学等领域。
色谱概论及薄层色谱法
一、引言
色谱是一种分离技术,可以分离、鉴别及测定任何化合物,是一种常
用的理论和技术工具,用于研究具有多种绣属性的有机化合物和离子的组成、结构、组成、结合力和动力学特性。
色谱在现代科学研究领域发挥着
重要作用,在分析化学,有机化学和定量生物学等领域得到广泛应用。
色谱分类方法比较多,如层析色谱、衍生色谱、色谱分析色谱、色计
数色谱、色谱结构色谱等,薄层色谱法是其中不可或缺的一部分。
二、薄层色谱
薄层色谱是指将样品溶解于适当的溶剂或添加特定的添加剂,滴落在
薄层片上,经过移动相分离,而沿着薄膜表面形成不同的印记的方法。
它
是一种迅速、简便的分离方法,广泛地用于有机化合物及其衍生物的快速
分离、鉴别和定量。
薄层色谱法常用的溶剂有甲苯,乙腈,甲醇,乙醇,氯仿和硝酸酐等,其中最常用的是甲苯、乙腈和氯仿。
薄层色谱片的纸张是指不同的膜纸,
如滤纸,热解纸,磷酸纸和各种色谱纸等。