肿瘤细胞血管内皮细胞

上皮性肿瘤（1)良性上皮性肿瘤1）乳头状瘤：肿瘤向表面外生性生长形成乳头状突起，并可呈菜花状或绒毛状外观，由覆盖上皮发生。

肿瘤的根部较狭窄形成蒂与正常组织相连。

镜下每一乳头都由具有血管的分支状间质组成轴心，其表面覆盖的增生上皮因其起源部位不同，可为鳞状上皮、柱状上皮或移行上皮。

在外耳道、阴茎及膀胱和结肠的乳头状瘤较易转变为乳头状癌。

2）腺瘤：由腺上皮发生的良性肿瘤，粘膜腺的腺瘤多呈息肉状，腺器官内腺瘤呈结节状，且常有包膜，与周围正常组织分界清晰，结构与起始腺体十分相似，常具有一定的分泌功能，能分泌浆液和粘液，常见于甲状腺、涎腺、卵巢、乳腺等处。

根据腺瘤的组成成分或形态特点，可将腺瘤分为囊腺瘤、纤维腺瘤、多形性腺瘤和息肉状腺瘤等类型。

①囊腺瘤是由于腺瘤组织中的腺体分泌物淤积，腺腔逐渐扩张并互相融合成大小不等的囊腔，因而得名。

主要见于卵巢，偶见于甲状腺及胰腺，卵巢囊腺瘤有两种类型：一种是粘液性囊腺瘤，常为多房性，囊壁光滑，少有乳头状增生。

另一种是浆液性乳头状囊腺瘤，腺上皮向囊腔内呈乳头状增生，并分泌浆液，所以称为浆液性乳头状囊腺瘤。

②纤维腺瘤是女性乳腺最常见的良性肿瘤，除腺上皮细胞增生外，同时还伴有纤维结缔组织增生。

这种肿瘤是女性常见的良性肿瘤。

③多形性腺瘤好发于涎腺，特别是腮腺，过去常称为混合瘤。

由腺组织、粘液样及软骨样组织等多种成分混合而成。

本瘤生长缓慢，但切除后常易复发。

④息肉状腺瘤发生于粘膜，呈息肉状，有蒂与粘膜相连，多见于直肠。

其中表面呈乳头状或绒毛状的恶变率较高。

结肠多发性腺癌性息肉病常有家族遗传性，不但癌变率较高，并易早期发生癌变。

（2）恶性上皮组织肿瘤恶性上皮组织肿瘤统称为癌，多见于40岁以上的人群，常以浸润性生长为主，与周围组织分界不清。

发生于皮肤、粘膜表面者呈息肉状、或菜花状，表面常有坏死及溃疡形成，发生在器官内者为不规则的结节状。

癌早期一般经淋巴道转移，到晚期才发生血道转移。

这与间叶组织恶性肿瘤有区别，恶性间叶组织肿瘤主要先经血道转移。

China Healthcare Frontiers Vol ，4No.4第4卷第4期作者简介：许成云，中国药科大学药学院。

肿瘤内部血管的形成对肿瘤的生长具有重要作用。

肿瘤血管为肿瘤组织提供新陈代谢所必需的氧气和营养，从而使肿瘤得以迅速的生长并同时为肿瘤的远端转移提供转运。

长期研究发现，肿瘤血管形成是一个极其复杂的过程，受多种因子的共同调节［１］。

肿瘤微环境主要指由肿瘤细胞，内皮细胞，成纤维细胞，免疫细胞和细胞外基质共同构成的肿瘤发生，发展和转移局部稳态环境。

研究发现，肿瘤微环境中的各成份对肿瘤的血管形成都有重要关系，可通过各种途径调节肿瘤血管形成［２］。

本文就肿瘤微环境对肿瘤血管形成作用作一篇综述。

1肿瘤微环境微环境主要指邻近的组织细胞及其分泌的各种生长因子。

微环境的稳定是保持细胞正常增殖，分化，代谢和功能活动的重要条件。

早期的肿瘤研究大都将研究重点放在肿瘤细胞上，关注肿瘤细胞的基因突变，增殖凋亡，信号通路的改变等发面。

但随着研究的深入发现，肿瘤组织中的其他非肿瘤细胞或基质也对肿瘤的发生，发展有着很重要作用。

肿瘤微环境作为保护和支持肿瘤发生发展及转移复发的必要机构功能单元的理论已为越来越多的学者所接受。

所谓的肿瘤微环境就是指在肿瘤在生长过程中，由肿瘤细胞，内皮细胞，细胞外基质，免疫细胞，成纤维细胞相互作用形成的肿瘤细胞生长的特殊环境，这一环境具有肿瘤组织雪供不足，间质压力高，营养相对缺乏等特点［１］。

2肿瘤血管形成肿瘤血管是肿瘤赖以生长和转移的基础，肿瘤在没有血管提供氧气和营养的情况下生长不会超过２ｍｍ３。

肿瘤血管形成过程主要包括：内皮细胞激活，基底膜与细胞外基质降解，内皮细胞迁移和增殖，血管形成并使血管延伸至实体瘤内部。

除了这种典型的出芽方式外，几种其他的血管形成方式也得到的了证实，包括内皮祖细胞的募集，细胞增大样血管形成，血管拟态和淋巴管形成。

肿瘤血管形成是受多种因子调节的复杂过程，最终能否形成血管主要依赖于血管生成促进因子和抑制因子间的平衡。

２００９年第３６卷第６期中国肿瘤临床・３５３・・综述。

肿瘤相关循环内皮细胞的分类标志物及其功能研究进展：ｌ：摘要经典肿瘤新生血管的形成主要包括血管生成（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）和血管发生（ｖａｓｅｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ）、均依赖循环内皮细胞（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ，ＣＥＣｓ）的增殖、迁移、黏附而形成管腔。

ＣＥＣｓ不仅与血管新生和肿瘤生长、播散有关，还可能作为抗血管生成药物的靶点和反映疗效的标志物。

循环内皮细胞膜上可表达多种表面分子，在从幼稚到成熟及活化过程要经历不同的阶段，而不同阶段细胞表达的表面分子有所不同。

各表面分子在肿瘤血管新生过程中发挥重要作用。

监测可靠的分子标志物量化ＣＥＣｓ尤其是活化血管内皮细胞（ａｃｔｉｖａｔｅｄｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ。

ａＣＥＣｓ），来判定肿瘤新生血管和血管靶向治疗的疗效具有重要意义且已成为临床上的迫切需要。

本文就肿瘤相关循环内皮细胞的分类、标志物及其功能做一综述。

关键词血管生成血管发生循环内皮细胞内皮祖细胞ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－８１７９．２００９．０６．０１４ＲｅｃｅｎｔＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ．ＭａｒｋｅｒｓａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＴｕｍｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄＣｉｒｃｕｌａｔｉｎｇＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓＸＵＷｅｎｊｉｎｇ，ＬＩＫａｉＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＩＫａｉ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｋａｉ５＠ｍｅｄｍａｉｌ．ｃｏｍ．ｃｎＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｈｏｒａｃｉｃＯｎｃｏｌｏｇｙ，ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅａｎｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｉａｎｊｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３０００６０，ＣｈｉｎａＧｒａｎｔｓｕｐｐｏｒｔ：ＷＵＪｉｅｐｉｎｇ’ｓＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＳｐｅｃｉａｌｆｏｒＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ（Ｎｏ．０４１０１００２）ＡｂｓｔｒａｃｔＴｗｏｍａｊｏｒｐｒｏｃｅｓｓｅｓｂｙｗｈｉｃｈｔｕｍｏｒｂｌｏｏｄｖｅｓｓｅｌｓａｒｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｎｄｒｅｍｏｄｅｌｅｄａｒｅｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ａｎｄａｄｈｅｓｉｏｎｏｆｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃａｌｌｓ（ＣＥＣｓ）．ＣＥＣｓｔｈｅｒｅｆｏｒｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｕｍｏｒｎｅｏｖａｓｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｙｔｏｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｓ．ＣＥＣｓａｒｅｐｏｓｓｉｂｌｅｔａｒ－ｇｅｔｓｆｏｒａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｔｈｅｒａｐｙａｎｄｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓｏｆｔｒｅａｔｍｅｎｔｅｆｆｉｃａｃｙ．Ｉｎｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗ。

血管内皮细胞培养方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：血管内皮细胞（vascular endothelial cell，VEC）是血管内膜上的一种细胞，它们起着维持血管结构和功能的重要作用。

近年来，血管内皮细胞的培养方法逐渐成为生物医学领域的研究热点之一。

良好的血管内皮细胞培养方法不仅有助于研究心血管疾病的发生机制，还可以为新药的研发提供重要参考依据。

本文将详细介绍血管内皮细胞培养的方法和技巧，希望对相关研究人员和医学工作者有所帮助。

一、血管内皮细胞来源血管内皮细胞可以从多种来源获得，包括人类或动物的血管组织。

通常情况下，从人体的脐带血、外周血或组织中分离得到的血管内皮细胞具有较高的纯度和活性，适合于体外培养。

一些商业生物技术公司也提供血管内皮细胞的原代细胞培养服务，可以方便地购买到高质量的细胞用于研究。

二、血管内皮细胞培养基的选择血管内皮细胞培养基是培养血管内皮细胞的基本营养液，不同类型的细胞需要不同种类的培养基。

一般来说，常用的血管内皮细胞培养基包括Eagle's minimum essential medium（EMEM）、Dulbecco's modified Eagle's medium（DMEM）和Medium 199等。

这些培养基通常含有必需氨基酸、维生素、矿物质、生长因子、胎牛血清等营养成分，可以提供适宜的环境促进细胞生长。

1、原代细胞的分离和培养将采集到的组织样本进行酶消化处理，分离出血管内皮细胞，并通过贴壁法或悬浮培养法将其传代培养。

在传代培养的过程中，需要定期更换培养基、观察细胞的形态和数量变化，以确保细胞的健康生长。

2、细胞的传代和冻存随着细胞的传代次数增加，细胞的增殖能力和活性逐渐下降，需要进行细胞的传代和冻存。

传代前需要对细胞进行细胞数计数和活力检测，传代后要及时观察细胞的形态和生长情况，确保细胞的健康状态。

3、细胞的实验处理在进行实验前，需要对培养的细胞进行处理，如细胞分裂抑制（如丙酮酸、羟基脲等）、细胞增殖刺激（如VEGF、EGF等）等。

靛玉红对肿瘤血管内皮细胞增殖迁移及血管形成的影响李卓虹;祝朝富;安佰平;蓝兰;李世杰【摘要】目的探讨靛玉红(Indirubin)对肿瘤血管内皮细胞增殖、迁移、血管形成影响.方法采用肝癌HepG2细胞上清诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)成为肿瘤血管内皮细胞(tumor-derived endothelial cells,Td-EC),通过MTT法、细胞迁徙试验、血管形成实验检测靛王红对HUVEC与Td-EC增殖、迁移、血管形成的影响.结果靛玉红在体外对Td-EC 有显著的生长抑制作用,并具有时间和浓度依赖性;一定浓度的靛玉红能显著降低Td-EC细胞迁徙活性和抑制血管的形成,而同样条件下,靛玉红对HUVEC的抑制作用弱于Td-EC.结论靛玉红在体外可特异地抑制Td-EC增殖、迁移、血管形成.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2017(038)002【总页数】4页(P72-75)【关键词】靛玉红;肿瘤血管内皮细胞;增殖;迁移;血管形成【作者】李卓虹;祝朝富;安佰平;蓝兰;李世杰【作者单位】成都中医药大学附属医院,四川成都610072;成都中医药大学附属医院,四川成都610072;成都中医药大学附属医院,四川成都610072;成都中医药大学附属医院,四川成都610072;成都中医药大学附属医院,四川成都610072【正文语种】中文【中图分类】R285.5·实验研究·肿瘤的生长、转移依赖于血管生成，血管生成可为肿瘤组织提供充足的营养和氧气，并带走其代谢产物，因而抗肿瘤血管生成成为目前理想的抗癌治疗策略[1]。

靛玉红是从我国传统中药青黛、板蓝根、大青叶中提炼而成，已经有大量研究表明靛玉红具有抑制细胞周期[2]、杀伤肿瘤细胞以及抗炎[3]等多种功效。

但对靛玉红抑制肿瘤血管内皮细胞生成的机制尚不清楚，本研究中，我们将探讨靛玉红对肿瘤血管内皮细胞增殖、迁移、血管形成影响，以期揭示其对肿瘤血管内皮细胞生长及相关功能的影响。

药(质子泵抑制剂或H 2受体拮抗剂)加2种抗生素(新大环内酯类、羟氨苄青霉素、硝基咪唑类、呋喃唑酮)。

适应症为消化性溃疡、慢性活动性胃炎、M AL T 淋巴瘤、胃癌高发区慢性萎缩性胃炎、儿童HP 感染者。

停药1个月以上复查阴性者为根除。

6　HP 疫苗的研制我国学者最先证明HP 可通过免疫预防,其免疫保护作用主要来自粘膜免疫系统。

当前疫苗研制工作正在世界范围进行,最近法国和美国联合研制了一种安全、有免疫性的HP 疫苗,国内亦有多家单位正在研制,但均处于动物试验阶段〔9〕。

综上所述,自发现HP 15年来,对其研究工作取得了可喜的成果。

今天的研究方向是,HP 菌株的生物分型与毒力鉴定、HP 致病和致癌机制的基础研究、准确性高和创伤性小的诊断方法、价廉高效的根除方案以及HP 疫苗的研制与应用等。

7　参考文献11汪志鸿1幽门螺杆菌相关疾病的研究进展1中华医院管理杂志　1997;13(12):760121D ixon M F ,et al .Classif ication and gradi ng of gastr itis :The updated Sydney Syste m .Am J Sury Pathol 1996;20:1161131M adara ,JL .M igration of neutrophil through epitheli almonoayers.Trends Cell Biol 1994;4:7141Lanas A I ,et al .R isk factors assoc i ated with refactory pep -tic ulcers.Gastroen terol 1995;109:1124151黄自平,等1幽门螺杆菌感染与胃粘膜淋巴组织增生1中华内科杂志　1996;9:609161王承党,等1幽门螺杆菌感染对功能性消化不良患者胃排空功能的影响1胃肠病学　1997;2(1):16171侯安存,等1小儿幽门螺杆菌感染调查1中华流行病学杂志　1995;16(4):237181周殿元,等1关于幽门螺杆菌若干问题的意见1中华消化杂志　1997:17(5):287191刘岱青,等1幽门螺杆菌与疫菌研究现状及前景　中华医学信息导报　1998:13(5):21(1998-03-26收稿)血管内皮生长因子与肿瘤山东省立医院(250021)　吴泰璜　苏忠学 目前,已分离纯化出20多种血管生成因子及相关因子,包括酸性成纤维细胞生长因子(aFGF )、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF )、转化生长因子Α Β(TGF Α Β)、肿瘤坏死因子Α(TNF Α)、血小板来源的内皮细胞生长因子(PD GF )、血管内皮生长因子(VEGF )等。

㊃综述㊃D O I :10.3760/c m a .j .i s s n .1673-436X.2012.022.014作者单位:410008长沙,中南大学湘雅医院呼吸内科(呼吸与危重症医学科)通信作者:胡成平,E m a i l :h u c h e n g p28@y a h o o .c o m.c n 血管内皮细胞迁移与肿瘤血管生成胡赞 胡成平 李敏ʌ摘要ɔ 肿瘤生长和转移均依赖于肿瘤的血管生成,而血管内皮细胞迁移是肿瘤血管生成过程的一个重要环节,有着重要的研究意义㊂现从肿瘤血管生成过程中促血管生成因子㊁骨架蛋白解聚㊁细胞外基质的降解三个方面对血管内皮细胞迁移的影响进行综述㊂ʌ关键词ɔ 血管内皮细胞迁移;肿瘤血管生成;促血管生成因子;骨架蛋白;细胞外基质V a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l m i g r a t i o n a n d t u m o r a n g i o ge n e s i s HU Z a n ,HU C h e n g -p i n g ,L I M i n .D e p a r t m e n t of R e s p i r a t o r y M e d i c i n e (R e s p i r a t o r y a n d C r i t i c a lC a r e M e d i c i n e ),X i a ng y a H o s pi t a l ,C e n t r a l S o u t hU n i v e r s i t y ,C h a n gs h a 410008,C h i n a C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :HUC h e n g -p i n g ,E m i a l :h u c h e n g p28@y a h o o .c o m .c n ʌA b s t r a c t ɔ T u m o r g r o w t ha n d m e t a s t a s i sd e p e n do nt u m o ra n g i o ge n e s i s .V a s c u l a re n d o t h e l i a l c e l l m i g r a t i o n i s a n i m p o r t a n t p a r t of t h e t u m o r a ng i o g e n e s i s p r o c e s s ,h a s a ni m p o r t a n t s i gn i f i c a n c e .N o wt h e t h r e e a s p e c t so ft h ev a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l m i g r a t i o ni nt u m o ra n g i o g e n e s i s :p r o -a n g i o g e n i cf a c t o r s ,c y t o s k e l e t a l p r o t e i n s d e p o l y m e r i z a t i o n ,e x t r a c e l l u l a rm a t r i xd e gr a d a t i o na r e r e v i e w e d .ʌK e y w o r d s ɔ V a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l m i g r a t i o n ;T u m o ra n g i o g e n e s i s ;P r o -a n g i o g e n i cf a c t o r s ;C y t o s k e l e t a l p r o t e i n s ;E x t r a c e l l u l a rm a t r i xd e gr a d a t i o n 恶性肿瘤血管生成不仅与血管内皮细胞分裂增殖有关,也与血管内皮细胞向肿瘤组织内部迁移密切相关㊂血管内皮细胞的迁移主要是通过调节细胞内骨架蛋白的动态重组形成极状伪足来实现的[1],此外血管内皮细胞的迁移受许多因素的影响和调控,例如促血管生成因子㊁细胞外基质的降解等㊂对血管内皮细胞迁移进行深入研究将有助于增加对肿瘤血管生成方面的认识,有助于寻找有效的靶点来抑制肿瘤的血管生成,从而达到抑制或治疗肿瘤进展的目的㊂1 促血管生成因子与血管内皮细胞迁移肿瘤血管生成是指从肿瘤或其周围芽生出新的以毛细血管为主的血管系统的过程㊂一般来说,包括以下几个过程:①血管内皮细胞增殖;②细胞外基质的降解;③内皮细胞迁移及细胞索的形成㊂恶性肿瘤细胞生长迅速,为了不断满足自身血供的需要,肿瘤内部的肿瘤细胞㊁巨噬细胞㊁血管内皮细胞会分泌多种促血管生长因子,血管内皮细胞能感应这些促血管生长因子浓度的变化,有向高浓度方向运动的趋势,并介导细胞内多个信号机制,多途径促进内皮细胞迁移,促进肿瘤血管生成㊂目前已经分离了20余种促血管生长因子,其中血管内皮生长因子(V E G F )㊁血管生成素㊁A n g i o m o t i n 在促进血管内皮细胞迁移方面的研究较多㊂1.1 V E G F V E G F 作为一种主要的促血管生成因子在肿瘤的血管生成过程中起到了重要作用,有关人类的多种肿瘤的研究早已经发现,肺癌㊁直肠癌㊁肝癌等多种实体瘤中均高表达,且与肿瘤组织中微血管密度成正比[2],它们通过自分泌或旁分泌途径作用于血管内皮细胞,诱导血管内皮细胞向肿瘤组织方向迁移㊁促进血管内皮细胞增殖以及降解细胞外基质三个方面,来促进肿瘤血管的生成㊂随着研究的深入发现,在V E G F 家族的多个成员中,对血管内皮细胞迁移起正向作用的主要是V E G F -A ,而V E G F -C 却与淋巴内皮细胞的迁移有关[3]㊂有关肿瘤血管生成方面的研究发现,V E G F 通过与V E G F R -2结合,活化赖酪氨酸激酶引起受体自身磷酸化,而后通过多种复杂的细胞内信号途径来介导内皮细胞迁移㊂目前研究得比较多的信号通路蛋白是R h o G T P 酶家族,它主要与细胞骨架蛋白㊃1571㊃国际呼吸杂志2012年11月第32卷第22期 I n t JR e s pi r ,N o v e m b e r 2012,V o l .32,N o .22的调节有关㊂此外,值得一提的是,Y o s h i z u k a等[4]在鼠的皮肤癌研究中发现,V E G F不但能够通过V E G F R-2/p38MA P K/P A R K信号途径,调节血管内皮细胞骨架蛋白的重组和促进黏着斑激酶的激活两个方面介导血管内皮细胞的迁移,而且还能从基因水平抑制皮肤癌的血管形成,而且这种短暂的促进或抑制作用的发挥与肿瘤进展阶段㊁组织类型㊁刺激因子有关㊂另外,V E G F还可通过降解细胞外基质来促进血管内皮细胞的迁移㊂正常情况下,细胞外基质结构不利于细胞的迁移,而在肿瘤细胞的生长㊁发展过程中能分泌大量的特定物质[如尿激酶型纤溶酶原激活物(u P A)㊁基质金属蛋白酶(MM P s)],通过降解细胞外基质成分,以达到有利于肿瘤细胞自身及血管内皮细胞迁移的目的㊂研究发现,V E G F能诱导u P A的激活[5],使血管内皮细胞表达蛋白水解酶㊁MM P s等,来降解细胞外基质成分,促进其迁移㊂此外,V E G F是一种强有力的血管通透剂,不但有利于血管内皮细胞从血管移入组织间隙中,还可使血管周围的基质成分发生改变,为内皮细胞和肿瘤细胞的迁移提供条件㊂1.2血管紧张素(A n g)家族 A n g家族具有促进血管内皮细胞迁移㊁增殖㊁血管形成的作用,多种实体肿瘤中A n g均呈高表达㊂赵宝生等[6]对食管鳞癌组织检测发现,癌组织中A n g-2m R N A的表达明显高于癌旁正常组织,并且其表达水平的高低还与微血管密度呈正相关㊂李白翎等[7]利用R N A干扰技术,干扰人肺腺癌A549细胞表达A n g-2后发现,荷瘤裸鼠的瘤组织中微血管密度较对照组明显减低㊂随着研究深入发现,A n g-2的作用依赖于V E G F,当有V E G F存在时,A n g-2可以促进内皮细胞的增殖㊁迁移及血管形成;相反,当无V E G F存在时,A n g-2并不能促进内皮细胞的迁移㊁增殖等,而是促进内皮细胞的凋亡和血管衰退[1]㊂C a i等[8]采用噬菌体展示技术发现,具有拮抗A n g-2作用的s c F v-A n g2可以明显抑制依赖V E G F的血管内皮细胞的迁移㊂此外,C a s c o n e等[9]指出,A n g-1可通过诱导血管内皮细胞的板状伪足形成来促进迁移,其途径可能与激活R h o A和R a c1有关㊂而最近研究发现,A n g-2具有兴奋或抑制T i e-2受体信号通路的双重作用,当A n g-1与A n g-2同时存在时, A n g-2浓度依赖性地拮抗A n g-1介导的T i e-2受体磷酸化及A k t的激活,从而诱导内皮细胞凋亡;而当A n g-2单独存在时,其可通过与T i e-2受体结合促使后者磷酸化,激活磷酸肌醇-3-激酶和A k t,进而促进血管内皮细胞迁移[10]㊂并指出血管内皮细胞只分泌A n g-2而不分泌A n g-1[1]㊂1.3 A n g i o m o t i n A n g i o m o t i n为一种血管生成抑制素结合蛋白,能与血管生成抑制素结合,通过调节血管内皮细胞迁移㊁管状结构形成㊁细胞极性等方面来促进肿瘤血管的生成㊂J i a n g等[11]对人乳腺癌组织的研究中发现,乳腺癌组织中A n g i o m o t i n的表达明显高于正常乳腺组织,发生转移的女性患者A n g i o m o t i n的表达明显高于未转移者,且A n g i o m o t i n水平与反映乳腺肿瘤血管生成程度的血清学指标(如V E-钙黏着蛋白㊁P E C AM-1㊁v W F)呈正相关㊂T r o y a n o v s k y等[12]用人脐静脉内皮细胞来研究A n g i o m o t i n作用时,采用免疫荧光技术发现A n g i o m o t i n位于血管内皮细胞的极状伪足部位,高表达A n g i o m o t i n的血管内皮细胞的迁移能力明显大于对照组㊂A n g i o m o t i n是活体内血管生成抑制素的抑制剂,目前针对A n g i o m o t i n抗体的研究较多,H o l m g r e n等指出[13],将A n g i o m o t i n疫苗与血管内皮细胞表面的受体结合后,能抑制V E G F和成纤维细胞生长因子介导的血管内皮细胞迁移,以及减少后者的伪足形成数量,并抑制宫颈癌的血管生成㊂鉴于大量的基础及临床试验研究,已有学者提出了将A n g i o m o t i n的疫苗及抗体作为抗肿瘤血管生成的新靶点㊂2骨架蛋白与血管内皮细胞迁移血管内皮细胞迁移是一个复杂过程,单次迁移运动可分解为以下几个步骤:①受外部信号刺激(如V E G F浓度变化)后,引起血管内皮细胞内部骨架蛋白重排,沿移动方向形成极状伪足;②极状伪足与细胞外基质形成黏附(即黏着斑形成);③以黏着斑作为支点,细胞收缩推动细胞整体向前移动;④细胞尾部与细胞外基质的黏附解离㊂如此循环,实现血管内皮细胞的迁移[1]㊂血管内皮细胞骨架为蛋白纤维网状结构,由微丝㊁微管㊁中间丝组成,参与维持细胞形态㊁运动㊁物质交换等多种生命活动㊂肌动蛋白是微丝的结构成分,与血管内皮细胞的运动有关㊂肌动蛋白单体为球形时,其表面上有一个A T P结合位点,当单体上结合的是A T P时,肌动蛋白单体一个接一个连成一串肌动蛋白链,两串这样的肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝㊂微丝能形成极状伪足及黏着斑等结构,参与内皮细胞运动及迁移㊂因此,一切影响肌钙蛋白解聚的因素都能影响内皮细胞的迁移㊂目前研究较多的就是R h oG T P酶家族㊂此外,最近研究发现一些肌动蛋白结合蛋白也能促进内皮细胞的㊃2571㊃国际呼吸杂志2012年11月第32卷第22期I n t JR e s p i r,N o v e m b e r2012,V o l.32,N o.22迁移㊂2.1 R h oG T P酶家族 R h oG T P酶属于小分子G蛋白超家族,主要包括R h o㊁R a c㊁C d c42这3个成员,R h o亚家族又包括R h o A㊁R h o B㊁R h o C,均具有G T P酶的活性,可在活性型/G T P和失活型/G D P 两种构象之间发生转换㊂大量文献报道,R h oG T P酶家族在肿瘤细胞及血管内皮细胞内均有表达㊂安萍等[14]通过蛋白质组研究技术发现,C d c42蛋白在肝转移灶中特异表达,提示其可能为大肠癌肝转移相关蛋白㊂Y a o 等[15]通过基因检测发现,与正常鼠肺组织比较,鼠肺腺癌的C d c42基因表达上调㊂K l e e r等[16]指出, R h o C在乳腺癌组织内血管内皮细胞的表达明显高于癌旁组织内的血管内皮细胞㊂V a d e r等[17]用R N A干扰技术沉默血管内皮细胞的R a c1表达后,在体外明显抑制了血管内皮细胞的迁移,体外直接注射表达R a c1阴性的血管内皮细胞,明显抑制了神经母细胞瘤的血管形成㊂因此认为R h oG T P酶家族在肿瘤细胞侵袭转移和肿瘤血管生成方面有着促进作用㊂R h oG T P酶家族介导的血管内皮细胞迁移主要是通过调节肌钙蛋白来实现的,且各成员在这一过程中发挥了不同作用㊂C d c42的活化与细胞丝状伪足形成有关,R h o蛋白的活化与引发收缩性肌动蛋白应力纤维和相关的黏附斑的形成有关,而R a c1却与运动细胞前端中板状伪足有关[1]㊂然而,最新研究发现,R h o B却是一个负向调节因子,H o w e 等[18]等指出,R h o B通过抑制R h o A活性及R h o A/ R O C K信号通路,负向调节血管内皮细胞的迁移及血管形成㊂由上可知,R h oG T P酶家族通过调节肌动蛋白在肿瘤细胞侵袭转移和肿瘤血管生成方面发挥了重要作用,成为近年来研究的热点,有望成为肿瘤治疗的方向㊂P i l lé等[19]对此进行了大胆的尝试,将a n t i-R h o As i R N A制成纳米颗粒,以1500m g/k g 浓度静脉注射到鼠移植瘤中,每3天注射1次,实验结果发现,与对照组比较,实验组明显抑制移植瘤生长(达90%),且移植瘤内可见明显坏死区,并指出静脉注射未见到明显的不良反应㊂2.2 G i r d i n G i r d i n是近年来日本学者发现的一种肌动蛋白结合蛋白,广泛地表达于各种肿瘤细胞及不成熟的血管内皮细胞中,如结直肠癌㊁肺癌㊁食管癌㊁乳腺癌等,具有促进肿瘤细胞及血管内皮细胞迁移的作用[20]㊂J i a n g等[21]对乳腺癌组织的检测中发现,与正常乳腺组织比较,癌组织中G i r d i n蛋白的表达高达10%~35%㊂K i t a m u r a等[22]进一步研究发现,A k t介导的下游底物G i r d i n的磷酸化,可以促进V E G F介导的血管内皮细胞的迁移及血管形成,其迁移主要是通过调节血管内皮细胞内的骨架蛋白的重排来实现的㊂目前关于G i r d i n是通过A k t/G i r d i n途径促进肿瘤血管生成尤其是血管内皮细胞迁移环节的研究还属于初步阶段,随着研究的进一步深入,也许将来可能成为抗肿瘤血管生成的另一个靶点㊂3细胞外基质的降解与血管内皮细胞的迁移血管内皮细胞向肿瘤内部迁移必须降解细胞外基质才能实现,而有关的基质降解酶主要包括MM P s及u P A㊂MM P s是一种锌离子依赖的肽链内切酶,主要由巨噬细胞㊁中性粒细胞㊁血管内皮细胞等分泌,在肿瘤血管生成过程中MM P s不但可以直接降解细胞外基质,为血管内皮细胞迁移扫除障碍,并为新生血管的生长提供空间,而且还可以把贮存在细胞外基质中的促血管生成因子释放出来,进一步促进血管内皮细胞的迁移和肿瘤血管的形成㊂然而,有研究发现MM P s降解细胞外基质所产生的降解产物及小分子物质却有抑制血管生成的作用[23]㊂目前针对MM P s的广谱抑制剂如马立马司已投入临床研究,临床试验结果不甚理想,且有一定不良反应㊂MM P s的作用远比我们想象的复杂,MM P s还可以通过调节细胞因子㊁抑制凋亡㊁逃避免疫系统监视等来促进肿瘤发展,关于MM P s的研究还有待进一步深入,期望研制出针对每种特定的MM P s或作用位点的靶向药物㊂u P A是一种可由肿瘤细胞㊁单核细胞㊁中性粒细胞等细胞分泌的高度特异的丝氨酸蛋白酶[24],有学者证明u P A蛋白表达水平与肿瘤的血管生成显著相关,并且肿瘤组织内分泌的多种生长因子如V E G F㊁成纤维细胞生长因子β1㊁转化生长因子β均能促进u P A的上调㊂u P A与u P A受体结合后不但能于局部不断激活纤溶酶导致细胞外基质的降解,而且还能降解血管基底膜,在肿瘤血管生成的早期就能促进血管内皮细胞的迁移[24-25]㊂此外,u P A还能通过激活MM P s系统㊁降解胶原和弹性蛋白等途径来促进血管内皮细胞的迁移㊂目前针对u P A的抑制剂也正在研究之中㊂整合素是介导细胞与细胞或细胞与细胞外基质黏附的一类分子家族,是细胞迁移必不可少的跨膜受体,广泛表达于脊椎动物细胞膜表面,整合素的胞外部分与细胞外基质上配体结合(即形成黏着斑),㊃3571㊃国际呼吸杂志2012年11月第32卷第22期I n t JR e s p i r,N o v e m b e r2012,V o l.32,N o.22作为血管内皮细胞运动收缩的支点,而胞内部分间接与细胞骨架相连,通过调节骨架蛋白解聚来影响细胞的迁移㊂此外,整合素还有上调MM P-2㊁MM P-9表达的作用,通过直接促进细胞外基质的降解,来促进血管内皮细胞的迁移㊂L o w e l l等[26]报道,不同的组织表达不同类型的整合素,血管内皮细胞以表达αvβ3㊁αvβ8为主㊂在针对肿瘤血管生成的研究中发现,肿瘤组织中αvβ3表达明显上调,而αvβ3拮抗剂却能抑制肿瘤血管的生成[27]㊂近年来针对αvβ3㊁αvβ5的靶向药物西仑吉肽已经用于恶性胶质瘤的Ⅲ期临床试验[28],取得了一定效果,但在肺癌临床前研究显示,西仑吉肽对肺癌移植瘤的血管生成具有抑制和促进的双重作用㊂R o b i n s o n 等[29]指出这种抑制或促进作用可能与靶向药物的剂量㊁细胞类型㊁细胞基质的相互作用㊁其他分子间的相互作用等有关㊂因此,针对整合素家族抗肿瘤血管生成还有待我们进一步研究㊂4展望血管内皮细胞迁移在肿瘤血管生成过程中占有非常重要的作用,影响血管内皮细胞迁移的因素较多,包括促血管生成因子调节㊁骨架蛋白解聚㊁细胞外基质的降解等,是一个复杂的过程㊂而针对血管内皮细胞的迁移目前研究得较多,但具体的机制还不是非常清楚,随着研究的进一步深入,对血管内皮细胞迁移的了解更加透彻,相信能够研制出特定针对血管内皮细胞迁移的某个靶点的靶向药物,而 失去双足 的血管内皮细胞是无法形成血管结构的,从而可以达到抑制肿瘤生长的目的㊂参考文献[1] L a m a l i c eL,L eB o e u fF,H u o t J.E n d o t h e l i a l c e l lm i g r a t i o nd u r i n g a n g i o ge n e s i s.C i r cR e s,2007,100:782-794.[2]王靖雯,刘涛,王伟,等.u P A㊁V E G F和微血管密度在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中表达及其临床意义研究.中华实用诊断与治疗杂志,2011,25:548-551.[3] O c h iN,M a t s u o Y,S a w a i H,e ta l.V a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t h f a c t o r-C s e c r e t e d b y p a n c r e a t i c c a n c e r c e l l l i n ep r o m o t e s l y m p h a t i ce n d o t h e l i a l c e l lm i g r a t i o ni na ni nv i t r om o d e l o f t u m o r l y m p h a n g i o g e n e s i s.P a n c r e a s,2007,34:444-451.[4] Y o s h i z u k aN,C h e nR M,X uZ,e t a l.An o v e l f u n c t i o n o f p38-r e g u l a t e d/a c t i v a t e dk i n a s ei ne n d o t h e l i a lc e l l m i g r a t i o na n dt u m o r a n g i o g e n e s i s.M o l C e l l B i o l,2012,32:606-618. [5] P r a g e rGW,B r e u s s J M,S t e u r e r S,e t a l.V a s c u l a r e n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r(V E G F)i n d u c e sr a p i d p r o u r o k i n a s e(p r o-u P A)a c t i v a t i o no nt h es u r f a c eo fe n d o t h e l i a lc e l l s.B l o o d, 2004,103:955-962.[6]赵宝生,李汉臣,刘尚国,等.A n g-2在食管鳞癌中表达及与血管生成的研究.中华全科医学,2010,8:140-142. [7]李白翎,张冠鑫,侯霄雷,等.沉默血管内皮生长因子及促血管生成素-2基因抑制裸鼠人肺腺癌移植瘤生长的实验研究.中华临床医师杂志(电子版),2011,5:3756-3762.[8] C a iM,Z h a n g H,H u iR.S i n g l ec h a i nF va n t i b o d y a g a i n s ta n g i o p o i e t i n-2i n h ib i t s V E G F-i n d uc ede n d o t h e l i a l c e l lp r o l i f e r a t i o na n d m i g r a t i o ni n v i t r o.B i o c h e m B i o p h y s R e sC o mm u n,2003,309:946-951.[9] C a s c o n eI,A u d e r o E,G i r a u d o E,e ta l.T i e-2-d e p e n d e n ta c t i v a t i o no fR h o A a n d R a c1p a r t i c i p a t e s i ne n d o t h e l i a l c e l lm o t i l i t y t r i g g e r e db y a n g i o p o i e t i n-1.B l o o d,2003,102:2482-2490.[10] Y u a nH T,K h a n k i nE V,K a r u m a n c h i S A,e t a l.A n g i o p o i e t i n2i sa p a r t i a la g o n i s t/a n t a g o n i s to f T i e2s i g n a l i n g i n t h ee n d o t h e l i u m.M o l C e l l B i o l,2009,29:2011-2022.[11]J i a n g WG,W a t k i n sG,D o u g l a s-J o n e sA,e ta l.A n g i o m o t i na n d a n g i o m o t i n l i k e p r o t e i n s,t h e i r e x p r e s s i o n a n d c o r r e l a t i o nw i t h a n g i o g e n e s i s a n d c l i n i c a l o u t c o m e i n h u m a n b r e a s tc a n c e r.B M CC a n c e r,2006,6:16.[12] T r o y a n o v s k y B,L e v c h e n k o T,Mån s s o n G,e t a l.A n g i o m o t i n:a n a n g i o s t a t i n b i n d i n g p r o t e i n t h a tr e g u l a t e se n d o t h e l i a l c e l l m i g r a t i o na n dt u b ef o r m a t i o n.J C e l lB i o l,2001,152:1247-1254.[13] H o l m g r e n L,A m b r o s i n o E,B i r o t O,e ta l.A D N A v a c c i n et a r g e t i n g a n g i o m o t i n i n h i b i t s a n g i o g e n e s i s a n d s u p p r e s s e st u m o r g r o w t h.P N A S,2006,103:9208-9213. [14]安萍,于波,李世拥等.大肠癌发生和肝转移的蛋白质组学研究.中华外科杂志,2004,42:668-671.[15] Y a oR,W a n g Y,L u b e tR A,e ta l.D i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e dg e n e s a s s o c i a t e d w i t h m o u s e l u n g t u m o r p r o g r e s s i o n.O n c o g e n e,2002,21:5814-5821.[16] K l e e rC G,v a nG o l e nK L,Z h a n g Y,e t a l.C h a r a c t e r i z a t i o no fR h o Ce x p r e s s i o ni nb e n i g na n d m a l i g n a n tb r e a s td i s e a s e:ap o t e n t i a l n e w m a r k e r f o r s m a l l b r e a s t c a r c i n o m a s w i t hm e t a s t a t i c a b i l i t y.A mJP a t h o l,2002,160:579-584. [17] V a d e rP,v a nd e rM e e lR,S y m o n sMH,e t a l.E x a m i n i n g t h er o l eo fR a c1i nt u m o ra n g i o g e n e s i sa n d g r o w t h:ac l i n i c a l l yr e l e v a n tR N A i-m e d i a t e da p p r o a c h.A n g i o g e n e s i s,2011,14: 457-466.[18] H o w e G A,A d d i s o n C L.R h o B c o n t r o l s e n d o t h e l i a l c e l l㊃4571㊃国际呼吸杂志2012年11月第32卷第22期I n t JR e s p i r,N o v e m b e r2012,V o l.32,N o.22m o r p h o g e n e s i s i n p a r t v i an e g a t i v e r e gu l a t i o no fR h o A.V a s c C e l l ,2012,4:1.[19] P i l l éJ Y ,L iH ,B l o tE ,e ta l .I n t r a v e n o u sd e l i v e r y o fa n t i -R h o A s m a l li n t e r f e r i n g R N A l o a d e d i n n a n o pa r t i c l e s o f c h i t o s a n i nm i c e :s a f e t y a n d e f f i c a c y i nx e n o g r a f t e d a g g r e s s i v eb r e a s tc a n c e r .H u m G e n eT h e r ,2006,17:1019-1026.[20] W e n g L ,E n o m o t oA ,I s h i d a -T a k a g i s h iM ,e t a l .G i r d i n g f o r m i g r a t o r y cu e s :r o l e so ft h e A k ts u b s t r a t e G i r d i ni nc a n c e r p r o g r e s s i o na n d a n g i o g e n e s i s .C a n c e r S c i ,2010,101:836-842.[21] J i a n g P ,E n o m o t oA ,J i j i w aM ,e t a l .A n a c t i n -b i n d i n g p r o t e i n G i r d i nr e g u l a t e st h e m o t i l i t y o fb r e a s tc a n c e rc e l l s .C a n c e r R e s ,2008,68:1310-1318.[22] K i t a m u r aT ,A s a i N ,E n o m o t oA ,e t a l .R e gu l a t i o n o fV E G F -m e d i a t e d a n g i o g e n e s i s b y t h eA k t /P K Bs u b s t r a t eG i r d i n .N a t C e l l B i o l ,2008,10:329-337.[23] R i b a t t iD .E n d o g e n o u s i n h i b i t o r so f a n g i o g e n e s i s :ah i s t o r i c a l r e v i e w.L e u kR e s ,2009,33:638-644.[24] V i n c e n z aC a r r i e r o M ,F r a n c oP ,V o c c aI ,e ta l .S t r u c t u r e,f u n c t i o n a n d a n t a g o n i s t s o f u r o k i n a s e -t y p e p l a s m i n o g e n a c t i v a t o r .F r o n tB i o s c i ,2009,14:3782-3794.[25] K a n e k o T ,K o n n o H ,B a b a M ,e t a l .U r o k i n a s e -t y p e p l a s m i n o g e n a c t i v a t o r e x pr e s s i o n c o r r e l a t e s w i t h t u m o r a n g i o ge n e s i s a n d p o o r o u t c o m e i n g a s t r i c c a n c e r .C a n c e rS c i ,2003,94:43-49.[26] L o w e l lC A ,M a y a d a s T N.O v e r v i e w :s t u d y i n g i n t e g r i n si n v i v o .M e t h o d sM o l B i o l ,2012,757:369-397.[27] B r o o k sP C ,M o n t g o m e r y AM ,R o s e n f e l d M ,e ta l .I n t e gr i n a l p h av b e t a 3a n t a g o n i s t s p r o m o t et u m o rr e g r e s s i o n b yi n d u c i n g a p o p t o s i s o f a n g i o g e n i c b l o o d v e s s e l s .C e l l ,1994,79:1157-1164.[28] R e a r d o nD A ,N e y n sB ,W e l l e rM ,e t a l .C i l e n gi t i d e :a nR G D p e n t a p e p t i d e ανβ3a n dανβ5i n t e g r i ni n h i b i t o r i nd e v e l o p m e n t f o r g l i o b l a s t o m a a n do t h e rm a l i gn a n c i e s .F u t u r eO n c o l ,2011,7:339-354.[29] R o b i n s o nS D ,H o d i v a l a -D i l k eKM.T h e r o l e o f β3-i n t e g r i n s i n t u m o ra n g i o g e n e s i s :c o n t e x ti se v e r y t h i n g .C u r r O pi n C e l l B i o l ,2011,23:630-637.(收稿日期:2012-03-19﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏﹏)㊃简讯㊃‘哮喘药物治疗学“(中文翻译版)由美国M a y o 临床医学院J a m e s T.L i 教授编著的‘哮喘药物治疗学“重点讲述了哮喘的药物治疗㊂该书在对哮喘全方位药物治疗原则进行回顾的同时,还对哮喘药物的药理学和临床应用进行了系统阐述,提供了主要针对门诊患者的最佳哮喘药物治疗的可行性方案;对比了哮喘药物的几个国际化方案;通过对文献的回顾,分析了一些已得到确认的免疫抑制剂和免疫调节剂;探讨了急诊㊁住院和I C U 中哮喘的药物治疗;为本书撰文的国际知名学者还就已发表的实践指南㊁治疗计划㊁药理药效学及临床进行阐述㊂以期为哮喘的治疗和预防提供最为权威也是最新的参考资料㊂定价198.00元㊂邮购联系人:温晓萍 电话:010-******** 传真:010-64019761 E -m a i l :m e d -p r o f @m a i l .s c i e n c e p .c o m 地址:100717北京市东黄城根北街16号科学出版社医学中心温晓萍(请在汇款附言注明您购书的书名㊁册数㊁联系电话㊁是否要发票等)㊃5571㊃国际呼吸杂志2012年11月第32卷第22期 I n t JR e s pi r ,N o v e m b e r 2012,V o l .32,N o .22。

肿瘤血管内皮细胞瘤（Tumor Vascular Endothelial Cell Tumors）并不涉及具体的分型概念，但提到的“中间型”和“血管肉瘤”实际上是根据恶性程度和细胞分化程度对源自血管内皮细胞的不同恶性肿瘤进行的分类。

1.中间型血管内皮细胞瘤（Intermediate Grade Vascular Endothelial Cell
Tumor）：
o这类肿瘤的恶性程度较低，细胞分化程度相对较好，通常没有或者很少发生转移。

o组织学上，内皮细胞形态较为正常或接近正常，核大略深染，无或仅有轻微的异型性，分裂像不多见。

2.血管肉瘤（Angiosarcoma）：
o高度恶性肿瘤，细胞分化极差，恶性程度极高，转移率高，死亡率也相应较高。

o在显微镜下，血管肉瘤表现出大量新生且异常的毛细血管结构，内皮细胞排列混乱，呈现多层、成堆现象，细胞核大、深染、分裂象频
繁，胞浆特性多样，向周围间质广泛浸润。

此外，在特定器官如肝脏的血管内皮细胞瘤，还可以根据生长方式和组织学特征进一步细分，例如肝上皮样血管内皮细胞瘤被分为局限型、弥漫型和混合型三种类型。

总之，针对血管内皮细胞起源的肿瘤，区分的关键在于其恶性潜能、细胞分化程度以及生物学行为，而非按照内皮细胞本身的特定分型。

生长速度生长速度取决于肿瘤细胞群体内处于分裂繁殖周期和处于休止周期细胞的比例以及瘤细胞分裂周期时间的长短。

一般来讲，成熟程度高、分化好的良性肿瘤中大多数肿瘤瘤细胞处于休止期，因而生长缓慢。

恶性肿瘤细胞分化差，成熟程度低，大多数肿瘤细胞处于增殖分裂周期中，短期内可形成明显的肿块，由于血液供应不足，可发生坏死，出血等继发性改变，如果一个长期存在，生长缓慢的良性肿瘤生长速度突然加快，应警惕良性肿瘤的恶性变。

与生长速度有关的因素1.肿瘤生长的动力学：（1）肿瘤细胞倍增时间：恶性转化细胞的生长周期与正常细胞一样，分为G0、G1、S、G2和M期。

多数恶性肿瘤细胞的培增时间并不是想象的那样比正常细胞更快，而是与正常细胞相似或者长于正常细胞。

医学教育网（2）生长分数（growth fraction）：生长分数指肿瘤细胞群体中处于复制阶段（S＋G2期）的细胞的比例。

在细胞恶性转化的初期，绝大多数的细胞处于复制期，所以生长分数很高资料来源:医学教育网。

但是随着肿瘤的持续生长，不断有瘤细胞发生分化，离开复制阶段的细胞越来越多，使得大多数肿瘤细胞处于G0期。

即使是生长迅速的肿瘤其生长分数也只在20％左右。

（3）瘤细胞的生成与丢失：肿瘤的进行性生长及其生长速度决定于其细胞的生成大于丢失的程度。

由于营养供应不足，坏死脱落以及机体抗肿瘤反应等因素的影响，在肿瘤生长过程中，有相当一部分瘤细胞失去生命力。

肿瘤细胞的生成与丢失的程度共同影响着肿瘤的生长。

在生长分数相对较高的肿瘤，瘤细胞的生成远大于丢失，因此其生长速度比那些细胞生成稍超过丢失的肿瘤要快得多。

肿瘤的细胞动力学概念在肿瘤的化学治疗上有重要的意义。

目前几乎所有的化学抗癌药物均针对处于复制期的细胞。

因此高生长分数的肿瘤（如高恶性的淋巴瘤）对于化疗特别敏感；常见的实体瘤（如结肠癌）生长分数低，故对治疗出现相对耐药性。

临床治疗这些肿瘤的战略是先用放射或手术治疗将肿瘤缩小，使残存的瘤细胞从G0期进入复制期后再用化疗。

血管内皮生长因子与肿瘤血管生成标签：血管内皮生长因子;肿瘤血管;血管生成前言早在几个世纪前,就有学者提出肿瘤可能是一个与脉管系统有密切关系的疾病。

1787年,Johon Hunter就用血管生成一词描述血管新生过程[1]。

1863年,Virchow注意到恶性肿瘤组织中血管绝对数急剧增多[2]。

20世纪初,Goldman 就观察到血管围绕肿瘤生成现象[3]。

1939年,Ide等发现肿瘤细胞分泌促血管新生因子[4]。

1945年,Algire等观察到肿瘤血管与正常血管的差异[5]。

1968年,Greenblatt和Shubik提出了肿瘤可产生弥漫性血管生成物质的假设[3]。

然而,直到1971年Folkman提出“肿瘤生长依赖于血管生成”的观点之后[6],血管生成研究才真正启动并逐渐成为一个引人关注的研究热点。

1肿瘤血管生成肿瘤血管生成是指肿瘤细胞诱导的微血管生长及肿瘤中血液循环建立的过程。

是一个动态的连续过程,但可分为肿瘤组织释放血管生成因子、血管内皮细胞(EC)在生成因子作用下出现形态学改变、EC和肿瘤细胞释放蛋白酶降解毛细血管基底膜和周围细胞外基质、EC从毛细血管后微静脉迁徙形成血管新芽、EC 增殖和肿瘤微血管分化成型6个相对独立的步骤[7]。

2肿瘤血管生成与血管内皮生长因子(VEGF)的关系近年来陆续发现了许多血管生成因子和生成抑制因子。

1996年Hanahan等人提出了“血管生成的开关平衡”假说,即血管生成因子和抑制因子共同调控血管形成,两者的平衡维持血管的稳定状态。

当血管生成因子增加或抑制因子减少,则平衡被打破,导致肿瘤血管生成[8]。

目前发现的血管形成正负调节因子有40～50种,研究最为广泛和深入的是VEGF,它在多种人类肿瘤中均过度表达,是肿瘤血管生成的主要调控者[9]。

3VEGF的结构及特点VEGF属血小板衍生生长因子(PDGF)家族,其结构与PDGF的а、β链氨基酸序列具有同源性,有8个相同半胱氨酸残基,此为PDGF家族的标志。

第59卷第2期Vol.59 No.2山东大学学报（医学版）JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY( HEALTH SCIENCES)2021年2月Feb. 2021文章编号：167 丨-7554 (2021)02-0001-06 DOI ： 10.6040/j.issn. 1671 -7554.0.2020.0934 .基础医学.胶质瘤细胞与血管内皮细胞的信号Crosstalk对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响顾金海1，路宁2，顾珈榕3，文玉军1，强媛媛1，和祯泉1，杨勇、王峰’，孙涛'，牛建国1(1.宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室，宁夏银川750004; 2.银川市第一人民医院神经外科，宁夏银川750001;3.宁波大学医学院预防医学学科系，浙江宁波315211)摘要：日的探讨胶质瘤细抱与血管内皮细胞之间的信号Crosstalk及其对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响方法将人脑微血管内皮细胞（HBMEC)分4组培养：对照组为HBMEC常规培养，血管内皮生长因子（VEGF)组 为HBMEC在含VEGFIM(50ng/mL)的内皮细胞培养基（ECM)中培养，U87MG共培养组为HBMEC与肢质瘤细胞U87MG共培养，U251共培养组为HBMEC与胶质瘤细胞U251共培养，然后采用ELISA检测胶质瘤细胞及组织因予VEGF对血管内皮细胞分泌CXCL8的影响将人脑胶质瘤细胞U87MG或U251分4组培养：对照组为 U87MG或U25丨常规培养，U87MG/U25丨+HBMEC组为U87MG或U251与HBMEC共培养，U87MG/U25I + HBMEC+rhCXCL8 组为U87MG 或 U251 与HBMEC 在含 Akt 通路的激动剂rhCXCL8(50 ng/mL)的DMEM 中共 培养，U87MG/U25I+HBMEC+ LY294002 组为U87MG 或U251 与HBMEC 在含Akt 通路的抑制剂LY294002(I jxmol/L)的DMEM中共培养，分别采用Western blotting、CCK-8、Transwe丨丨侵袭实验检测血管内皮细胞及其分泌CXCL8对胶质瘤细胞的增殖、侵袭以及Akt蛋白表达的影响.结果与对照组比较，VEGF组、U87MG共培养 组、U251共培养组中HBMEC培养体系的CXCL8分泌量升高（尸<0.05)，肢质瘤细胞及其分泌VEGF可促进血管内皮细胞分泌CXCL8 与对照组比较，U87MG/U251 +HBMEC组细胞P-Akt蛋白表达增高（P<0.05)，增殖及侵袭能力增高（/^O.OS);给予CXCL8激活使P-Akt蛋白表达、增殖及侵袭进一步升高（P<0.01 );给予LY294002抑 制则P-Akt的表达降低（P<0.0l),血管内皮细胞可通过分泌CXCL8激活股质瘤细胞Akt信号通路，并促进其增殖和侵袭结■i t e■胶质瘤细胞与血管内皮细胞之间存在VEGF-CXCL8-Akt信号Crosstalk机制，在胶质瘤增殖和侵袭中发挥重要作用.关键词：肢质瘤；血管内皮细胞;Crosstalk;血管内皮生长因子；CXCL8; Akt中图分类号：R730.264 文献标志码:AmEffects of signal Crosstalk between glioma cells and vascular endothelial cells on the proliferation and invasion of glioma cells GU Jinhai1, LU Ning2, GU Jiarong3, WEN Yujun1, QIANG Yuanyuan1, HE Zhenquan',YANG Y o n g', WANG Feng1, SUN Tao1, NIU Jianguo'(1. Ningxia Key Laboratory of Cerebrocranial Diseases, Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia, China；2. Department of Neurosurgery, The First People's Hospital of Yinchuan, Yinchuan 750001, Ningxia, China；3. Department of Preventive Medicine, Medical School of Ningbo University, Ningbo 315211. Zhejiang, China)A bstract：Objective To explore the signal Crosstalk between glioma cells and human brain microvascular endothelialcells (HBMECs) and its effects on the proliferation and invasion of glioma cells. Methods HBMECs were divided into four groups：the control group was cultured with conventional endothelial cell medium (ECM) ；the vascular endo-收稿日期:2020-06-10;网络出版时间:2021-01-25 14:19:42网络出版地址：http: //kns. cnki. net/kcms/detai1/37.1390. R•202 丨 0 丨 25 •0940.002 • html基金项目：国家自然科学基金（8丨丨603丨2);宁夏自然科学基金（2020六八0)3152);银川市医疗卫生领域科技项目（2020-5[-012);宁夏重点研发计划（对外科技合作专项，2019BFH0203)通信作者：牛建国：E-mail:***************2山东大学学报（医学版)59卷2期thelial growth factor ( VEGF) group was cultured with ECM treated with VEGF165( 50 ng/m L) ；U87MG co-culture group was co-cultured with U87MG cells；U251 co-culture group was co-cultured with U251 cells. Then E1ISA was per­formed to detect the effects of glioma cells and VEGF on the secretion of CXCL8. The glioma cells (U87MG/U251) were divided into four groups：the control group was cultured with conventional DMEM；U87MG/U251 + HBMEC group was co-cultured with HBMECs, U87MG/U251+HBMEC + rhCXCL8 group was co-cultured with HBMECs in DMEM containing rhCXCL8 (50 ng/m L, Akt pathway agonist), U87MG/U251 + HBMEC + LY29400 group wereco-cultured with HBMECs in DMEM containing LY294002 ( 1p.mol/L, Akt pathway inhibitor). Then Western blot­ting, CCK-8 and Transwell assays were performed to examine the effects of HBMECs and secretion of CXCL8 on the proliferation and invasion of glioma cells and expression of Akt. Results The secretion of CXCL8 in the VEGF group,U87MG co-culture group and U251 co-culture group were significantly increased compared with that in the control group (^<0.05) , which indicated that glioma cells and VEGF could promote the secretion of CXCL8. Compared with the control group, the U87MG/U251+HBMEC group had elevated P-Akt, proliferation and invasion (尸<0.05) ; exposureto CXCL8 further increased P-Akt, proliferation and invasion (尸<0.01), whereas exposure to LY294002 suppressedP-Akt (P<0.01), which indicated that HBMECs could activate Akt signaling pathway by secreting CXCL8, and promote the proliferation and invasion of glioma cells. Conclusion There is a crosstalk of VEGF-CXCL8-Akt signal network be­tween glioma cells and HBMECs, which might play an important role in the proliferation and invasion of glioma cells.Key words：Glioma；Human brain microvascular endothelial cells；Crosstalk；Vascular endothelial growth factor；CXCL8；Akt胶质瘤是中枢神经系统最为常见的原发性肿 瘤，目前治疗效果不佳。