实验二葡萄糖注射液的含量测定

葡萄糖注射液含量的测定一．实验目的：1.利用旋光法、折光法、快速分析法考查一批葡萄糖注射液的质量。

2.掌握旋光法、折光法、快速分析法测定葡萄糖注射液的基本原理和操作方法。

二、实验原理：1.旋光法：旋光度：平面偏振光通过含有某些化学活性的化合物或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称为旋光度。

使偏振光向右旋转以“+”号表示；使偏振光向左旋转以“–”号表示。

比旋度：当偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长和温度下测得的旋光度称为比旋度。

比旋度（或旋光度）可以用于区别或检查某些手性药物的纯杂程度，也可以用于测定其含量。

2.折光法：光线自一种透明介质进入另一透明介质时，由于两种介质的密度不同，光的进行速度发生变化，即发生折射现象。

折光率n=sini/sinr,其中i为入射角；r为折射角n的影响因素：温度和光线波长,T越高，n越小;λ越小，n越大测定折光率可以区别不同的油类或检查某些药品的纯杂程度3.快速分析法：葡萄糖为多羟基醛，具有还原性。

在酸性介质中，过量的标准碘溶液将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，剩余的碘在酸性介质中用硫代硫酸钠返滴定。

三、实验步骤：1.旋光法：测定管（葡萄糖注射液冲洗数次）中缓缓注入供试品没过测定管内径，无气泡生成，放入旋光以内，测旋光度，三次取平均值，蒸馏水为空白校正。

其中L 为测定管长度（单位为分米）。

2.折光法：调节零点：将折光计棱镜面用擦镜纸擦净，棱镜中央滴蒸馏水1-2滴，合闭棱镜，旋转分界调节旋钮，使标尺读数为1.3330（20℃时蒸馏水的折光率），调节补偿棱镜螺旋，使明暗分界线清晰（用小钥匙插入观察镜的筒旁小孔内的螺钉上，轻轻转动），直到明暗线恰好移到十字交叉的交叉点上，零点校正结束。

测折光率：分开两面棱镜，用擦镜纸擦净折光计棱镜面，棱镜中央滴葡萄糖注射液1-2滴，合闭棱镜，调节补偿棱镜螺旋，使明暗分界线清晰，旋转分界调节旋钮，使明暗线对准在十字交叉的交叉点上，读数到小数点后四位。

实验一：葡萄糖的性状、鉴别和检查一、实验目的：1、了解药品鉴别、检查的目的和意义；2、掌握药品性状测定方法和性状的正确描述；3、掌握药物的常用鉴别方法和原理；4、掌握药品中一般杂质检查的方法原理和限量计算方法。

二、实验原理和内容药用葡萄糖或无水葡萄糖为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜。

在水中易溶、在乙醇中微溶，利用葡萄糖具有的还原性或其它特性以及存在杂质的特性可对葡萄糖进行鉴别和杂质检查。

三、实验材料、药品和仪器清单红外光谱仪；纳氏比色管；小烧杯；电子天平；台秤。

碱性酒石酸铜试液；酚酞指示液；氢氧化钠滴定液(0.02mol/L，学生用备好的0.1 mol/L稀释即得)；95％乙醇；标准氯化钠溶液(0.01％)；稀硝酸；硝酸银试液；标准硫酸铁铵溶液()标准硫酸钾溶液(0.01％)；碘试液；磺基水杨酸溶液；硫氰酸铵溶液；标准铁溶液(0.001％)；25%氯化钡溶液；葡萄糖-水合物。

四、实验内容（或实验步骤）1、鉴别：(1) 取本品约0.2g于小试管中，加水5m1溶解后，缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀（稍微加热后可加速沉淀的生成）。

(2) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集464图)一致。

2、检查：酸度取本品 2.0g于小烧杯中，加水20m1溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20m1（约1D），应显粉红色。

溶液的澄清度与颜色取本品5.0g于小烧杯中，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10m1，溶液应澄清无色。

乙醇溶液的澄清度取本品1.0g于小烧杯中，加95％乙醇30m1溶解，溶液应澄清。

氯化物取本品0.6g于50mL纳氏比色管中，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸(10.5→100学生自配）10ml；溶液如不澄清，应滤过,加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。

另取该品种项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。

一、葡萄糖注射液的含量测定1.实验目的（1）了解旋光度的测定原理。

（2）掌握旋光仪的使用方法和含量的计算。

（3）学会正确记录及判定。

2.仪器药品WZZ-2型自动旋光仪、100ml 量瓶、移液管、氨试液、葡萄糖注射液。

3.葡萄糖注射液含量测定方法 精密量取本品适量（约相当于葡萄糖10g ），置100ml 量瓶中，加氨试液0.2ml （10%或10%以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟后，在25℃时，依法测定旋光度（附录Ⅵ E ），与2.0852相乘，即得供试量中含有C 6H 12O 6·H 2O 的重量（g ）。

4.记录计算（1）计算公式 []100tD c lαα=⨯含水葡萄糖分子量葡萄糖的浓度无水葡萄糖分子量100198.1752.751180.16c α=⨯⨯葡萄糖的浓度即 .0c α=⨯2852葡萄糖的浓度（2）数据记录123蒸馏水零点蒸馏水零点平均值 供试品读数供试品读数平均值 供试品旋光度 供试品浓度结论（本品含C 6H 12O 6·H 2O 应为标示量的95.0 %~105.0%）供试品旋光度=供试品读数平均值－蒸馏水零点平均值附：1. WZZ-2型自动旋光仪的操作（1）操作前准备 在测定前应将仪器和供试液置规定温度的恒温室里至少1h ，使温度恒定。

（2）接通电源将仪器电源插头插入220V交流电源插座上，并保证接地脚可靠接地。

（3）开启电源开关开启开关后，钠光灯点燃。

20min后钠光灯稳定，将钠光灯开关扳向直流。

（4）调零调零使显示屏上显示0.0000。

按下复测按钮，使指示值偏离零点，放开复测按钮，显示屏应能重新显示0.0000。

反复以上操作3次，记录3次平均值，即为仪器的零点。

将装有蒸馏水的试管放入样品室，盖上箱盖，待数值稳定后，按前面所述方式测得读数，并记录。

注意：试管中若有气泡，应先让气泡浮在凸颈处；通光面两端应先擦干；试管螺帽不宜旋得过紧。

葡萄糖注射液含量的测定一．实验目的：1.利用旋光法、折光法、快速分析法考查一批葡萄糖注射液的质量。

2.掌握旋光法、折光法、快速分析法测定葡萄糖注射液的基本原理和操作方法。

二、实验原理：1.旋光法：旋光度：平面偏振光通过含有某些化学活性的化合物或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称为旋光度。

使偏振光向右旋转以“+”号表示；使偏振光向左旋转以“–”号表示。

比旋度：当偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长和温度下测得的旋光度称为比旋度。

比旋度（或旋光度）可以用于区别或检查某些手性药物的纯杂程度，也可以用于测定其含量。

2.折光法：光线自一种透明介质进入另一透明介质时，由于两种介质的密度不同，光的进行速度发生变化，即发生折射现象。

折光率n=sini/sinr,其中i为入射角；r为折射角n的影响因素：温度和光线波长,T越高，n越小;λ越小，n越大测定折光率可以区别不同的油类或检查某些药品的纯杂程度3.快速分析法：葡萄糖为多羟基醛，具有还原性。

在酸性介质中，过量的标准碘溶液将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，剩余的碘在酸性介质中用硫代硫酸钠返滴定。

三、实验步骤：1.旋光法：测定管（葡萄糖注射液冲洗数次）中缓缓注入供试品没过测定管内径，无气泡生成，放入旋光以内，测旋光度，三次取平均值，蒸馏水为空白校正。

其中L 为测定管长度（单位为分米）。

2.折光法：调节零点：将折光计棱镜面用擦镜纸擦净，棱镜中央滴蒸馏水1-2滴，合闭棱镜，旋转分界调节旋钮，使标尺读数为1.3330（20℃时蒸馏水的折光率），调节补偿棱镜螺旋，使明暗分界线清晰（用小钥匙插入观察镜的筒旁小孔内的螺钉上，轻轻转动），直到明暗线恰好移到十字交叉的交叉点上，零点校正结束。

测折光率：分开两面棱镜，用擦镜纸擦净折光计棱镜面，棱镜中央滴葡萄糖注射液1-2滴，合闭棱镜，调节补偿棱镜螺旋，使明暗分界线清晰，旋转分界调节旋钮，使明暗线对准在十字交叉的交叉点上，读数到小数点后四位。

葡萄糖注射液的测定方法
一、试剂：
1.碘酒石：用于检测糖的溶解度；
2.碳酸钠：用于酸度的测定；
3.抗坏血酸：用于检测糖的稳定性；
4.硫酸铜：用于测定糖的纯度；
5.硫酸钠：用于检测糖的活力。

二、实验步骤：
1.取适量碘酒石，将其加入待测样品中，搅拌均匀；
2.用碳酸钠检测样品的酸度，调节样品的酸度至pH 6.5；
3.加入抗坏血酸，检测糖的稳定性；
4.加入硫酸铜，测定糖的纯度；
5.加入硫酸钠，检测糖的活力。

三、结果分析：
1.检测糖的溶解度：碘酒石可以检测出样品中糖的溶解度，当溶解度达到一定程度时，碘酒石会变色；
2.检测糖的酸度：碳酸钠可以检测出样品中糖的酸度，当样品的pH值达到6.5时，表明样品的酸度已经调节好；
3.检测糖的稳定性：抗坏血酸可以检测出样品中糖的稳定性，当抗坏血酸完全溶解时，表明样品中糖的稳定性已经达到一定程度；
4.检测糖的纯度：硫酸铜可以检测出样品中糖的纯度，当硫酸铜完全溶解时，表明样品中糖的纯度已经达到一定程度；
5.检测糖的活力：硫酸钠可以检测出样品中糖的活力，当硫酸钠完全溶解时，表明样品中糖的活力已经达到一定程度。

实验二葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定一、实验目的1.掌握分光光度法测定葡萄糖的基本原理和操作技能；2.了解葡萄糖在生物体内的代谢和应用。

二、实验原理1.葡萄糖代谢葡萄糖是一种重要的生物物质，是获得能量的主要物质，也是生物体合成有机物质的原料。

葡萄糖经过胰岛素调节，通过细胞膜上的载体转运到细胞内，进入糖酵解途径中进行氧化解糖，产生ATP。

当血糖过高时，胰岛素会促使肝细胞和骨骼肌细胞内的糖原合成，把多余的葡萄糖转化成糖原储存起来；当血糖过低时，胰岛素促使肝细胞和骨骼肌细胞内的糖原分解并释放葡萄糖。

2.分光光度法测定葡萄糖利用葡萄糖的还原性，可以将氧化态铁离子Fe3+还原为二价离子Fe2+，从而形成一种发生显色反应的络合物Fe2+ -phenanthroline。

络合物的最大吸收波长为510nm，其吸收度与葡萄糖浓度成正比关系。

因此，可以用此方法测定葡萄糖的含量。

三、实验仪器和试剂1.分光光度计2.比色皿3.移液管、分液漏斗4.葡萄糖注射液5.0.1mol/L FeCl3·6H2O溶液6.0.1mol/L phenanthroline乙醇溶液7.生理盐水8.蒸馏水四、实验步骤1.将大约10mL葡萄糖注射液移到50mL容量瓶中，加入约10mL生理盐水，用蒸馏水稀释至刻度线。

制成10mg/mL的葡萄糖溶液。

2.在比色皿中取出一定量的葡萄糖溶液，加入相应体积的FeCl3溶液和phenanthroline乙醇溶液，混匀后，放置5min。

3.将试液的吸光度A值测定于510nm波长处。

同时用蒸馏水和相同条件下的试剂组成空白，测空白的吸光度A0值。

4.计算样品中葡萄糖的浓度C。

由于在实验中加入了生理盐水稀释葡萄糖溶液，因此需乘上一个稀释系数。

葡萄糖浓度C (mg/mL)=[(A-A0)×V0×1000]/(ε×V×d)其中，A为样品吸光度值，A0为空白吸光度值；V0为样品体积，mL；V为稀释系数，即稀释前体积与稀释后体积的比值；d为比色皿的单位长度，一般为1cm；ε为吸光度折射率，单位为L/(mol·cm)。