猪支原体肺炎活疫苗(168株)的安全性研究
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猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine ,MPS )是由猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae ,Mhp )引起的一种慢性、接触性呼吸道传染病,临床上有独特的咳嗽和喘气症状,又称猪喘气病或猪气喘病[1]。
该病可通过空气传播,不同日龄的猪均易感,但仔猪超过6周龄时才表现明显症状。
感染后导致日增重降低,死亡率的增加、饲养利用率的下降及给药治疗导致的成本增加等,当与引起呼吸道疾病综合征(Porcine Respiratory Disease Complex ,PRDC )的部分病毒性病原体结合时,猪肺炎支原体也能够导致由特定病毒性病原包括猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV )和猪2型圆环病毒(PCV2)感染引起疾病的发生[2]。
疫苗免疫是猪支原体肺炎的主要防制措施,目前商品化疫苗应用广泛,对防控MPS 起到了积极的作用。
本文将对国内外近年来研发及使用的猪支原体肺炎疫苗进行概述,为将来MPS 疫苗的研究开发提供参考。
1常规疫苗目前使用非常广泛的疫苗主要是灭活疫苗和减毒活疫苗,详见表1。
国内上市的进口猪支原体肺炎灭活苗菌株主要是J 株、P 株、BQ14株、P⁃5722⁃3Ⅰ株和P⁃5722⁃3Ⅱ株。
近年来,国产猪支原体肺炎灭活疫苗的开发迅速,新增了5个不同菌株的灭活疫苗,该类疫苗在我国市场占有率较高,生产企业也较多,主要是DJ⁃166株、HN0613株、NJ 株、CJ 株和SY 株。
除上述猪支原体肺炎灭活疫苗外,目前仍有4个菌株的灭活疫苗处在新兽药注册阶段,分别是广东大华农动物保健品股份有限公司的M1203株,北京中海生物科技有限公司的S 株,广东永顺生物制药股份有限公司的GD0503株和辽宁益康生物股份有限公司的ZY 株。
猪支原体肺炎活疫苗国外无商品化猪支原体肺炎疫苗研究进展穆光慧,刘欢欢,胡美容*(广东永顺生物制药股份有限公司,广东广州511356)摘要:猪肺炎支原体是引起猪支原体肺炎的病原,该病呈世界性流行,死亡率虽然不高,但由于长期性和消耗性的流行,使饲料转化率降低,并引起猪的多种并发病,是造成养猪业经济损失最重要的疾病之一。
猪支原体肺炎及疫苗研究进展朱燕锋;罗意;许俊才;卢业云;杨德明;冯志新;王胜东【摘要】文章对猪支原体肺炎的危害、致病机理、诊断和防控技术进行了综述,并对猪支原体肺炎疫苗进行了分类及分析,为该病的防控及疫苗的研究开发提供参考.【期刊名称】《贵州畜牧兽医》【年(卷),期】2017(041)001【总页数】5页(P17-21)【关键词】猪支原体肺炎;活疫苗;研制;免疫机理;应用【作者】朱燕锋;罗意;许俊才;卢业云;杨德明;冯志新;王胜东【作者单位】南京大爻网络科技有限公司,江苏南京210012;贵州福斯特生物科技有限公司,贵州贵阳550014;贵州福斯特生物科技有限公司,贵州贵阳550014;南京大爻网络科技有限公司,江苏南京210012;南京大爻网络科技有限公司,江苏南京210012;江苏省农科院兽医研究所,江苏南京210014;寿光华银食品有限公司,山东潍坊262700【正文语种】中文【中图分类】S858.28猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(MPS,又称“喘气病”)的病原体。
MPS以接触性、高度传染性、慢性、高发病率和低死亡率为特点,主要表现为咳嗽、呼吸困难,解剖可见肺组织肉样或胰样病变。
其主要危害是引起猪的生长受阻和饲料转化率大幅下降,同时造成免疫缺陷并诱导其它疾病多发,严重影响养猪业的经济效益。
猪支原体肺炎流行于世界各地,在畜牧业发达的美国、澳大利亚等国普遍存在,也是对我国养猪业造成严重经济损失的主要疾病之一[1]。
猪肺炎支原体导致的疾病在猪场比较普遍,一般不会引起猪的死亡,因而其危害容易被人们所忽视。
猪支原体肺炎造成的经济损失主要有:日增重降低、死亡率增加、饲养效率低及医药费用增加。
Wallgren.P等[2]在对一个屠宰场的调查中发现,在被检4 508头猪中有4210头有肺损伤,对其中3 841头猪的肺脏进行检验发现有3 769头为猪肺炎支原体阳性,感染率高达91.6%。
110猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2017年34卷第07期猪群保健H E A L T H广东腾骏动物药业股份有限公司协办栏目协办国家高新技术企业猪支原体肺炎疫苗应用现状与研究进展魏 凤1,张文通2,李 峰1,沈志强*,1,2(1.山东省滨州畜牧兽医研究院,山东 滨州 256600;2.山东绿都生物科技有限公司,山东 滨州 256600)基金项目:山东省现代农业产业技术体系生猪创新团队项目 SDAIT-08-17 作者简介:魏凤,女(1979-),河南遂平人,硕士,助理研究员,主要从事兽用生物制品研究,E-mail :hzndzwt1@猪肺炎支原体(Mhp)是引起猪肺炎的一种接触性呼吸系统传染病。
它主要通过感染破坏猪的上呼吸道纤毛、导致纤毛的脱落,进而使得其他病原有机会侵袭肺脏而引发肺炎,从而导致猪体的体液免疫和细胞免疫功能的降低,产生免疫抑制,使其他细菌或病毒性疾病易感。
该病的特点是可感染各年龄阶段的猪群,当猪肺炎支原体伴有其他病原混合感染或继发感染(如猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等)时,表现为呼吸困难、发热、死亡;反之,未伴有其他病原体时,表现为干咳、生长减慢。
该病全世界普遍存在,能够降低猪只平均日增重、降低饲料转化率、增加防治药费、增加淘汰猪和低体重猪数量等,给养猪业带来了巨大经济损失[1-4]。
防治该病最关键措施是疫苗接种。
目前国内外用于预防猪肺炎支原体感染的商品疫苗有灭活苗、减毒活苗,这些疫苗己得到广泛应用。
而一些新型疫苗的研究如活载体苗、以及亚单位苗和DNA 苗均处于实验室研究阶段。
本文对该疫苗在国内外主要研究进展展开综述。
1 灭活疫苗目前国内市场上出售的猪支原体肺炎灭活苗进口的有:梅里亚有限责任公司的BQ14株,西班牙海博莱的J 株,硕腾公司美国查理斯堡的P-5722-3株,美国普泰克的P 株,勃林格殷格翰的J 株,英特威美国分公司的J 株。
市场上出售的猪支原体肺炎灭活苗国产的有:哈药集团的P-5722-3株,中牧的DJ-166株。
猪支原体肺炎弱毒疫苗——“支必宁”临床应用报告作者:周先建,周勇岐,何东旭等来源:《兽医导刊》 2018年第1期一、试验单位山东某种猪场(国家核心育种场)二、试验目的探究南京天邦猪支原体肺炎弱毒活疫苗(168株)——“支必宁”与某进口厂家支原体肺炎灭活疫苗在预防猪支原体肺炎的效果及免疫后对猪生长性能等经济指标影响之间的差异。
三、试验材料与方法试验选择同一产房21 头母猪所产仔猪进行试验,试验猪群随机分成两组:支必宁组和灭活苗组。
灭活苗组于7 日龄和28 日龄两次免疫某进口厂家支原体肺炎灭活疫苗(2ml/ 头),支必宁组于7 日龄免疫支必宁(1 头份/ 头),试验全程两组试验猪群都于相同环境下饲养。
四、试验结果试验数据见表1,表2。
数据显示:支必宁组下保育时均重、日增重、料肉比等指标均优于灭活苗组。
肺部解剖结果显示:支必宁组肺脏肉变比例(33.33%)远小于灭活苗组(75%),说明支必宁与某厂家灭活疫苗相比,对防止肺脏发生肺炎支原体造成的样肉变及改善均重、日增重、料肉比等各项经济指标具有明显优势。
五、结果分析从表1 试验结果可以看出:两组在饲喂试验中,就料肉比而言,两组相差:1.69-1.63=0.06,即灭活苗组每头猪每长1kg 肉就多耗料0.06 kg ;而支原体肺炎发病日龄多在保育后期及育肥期,随着日龄的增加发病率及肺部病变将进一步增大,若试验继续至育肥出栏,则料肉比的差值将极有可能进一步扩大。
设想即使到出栏时料肉比的差值仍为0.06,按出栏重为100 kg,则支必宁组较灭活苗组将少耗费饲料:0.06×100=6 kg/ 头;按每公斤饲料3.2 元计算,则支必宁组每头猪增加收益:3.2×6=19.2 元/ 头,一个年出栏1 万头肥猪的猪场则可增加收益19.2 万元。
此外,如果进一步计算支必宁的使用对呼吸道疾病发病率的降低,治疗、保健用药的减少,则支必宁与灭活苗相比对于猪场效益的增加将远远大于19.2 万元。
江西农业学报2012,24(11):125 128Acta Agriculturae Jiangxi猪肺炎支原体168株特异性单抗的制备及鉴定王海燕,缪芬芳,冯志新,刘茂军,邵国青*收稿日期:2012-08-22基金项目:江苏省农业自主创新资金资助项目[cx (12)5047]。
作者简介:王海燕(1983─),女,江苏大丰人,硕士,助理研究员,主要从事动物疫病研究。
*通讯作者:邵国青。
(江苏省农业科学院兽医研究所、农业部兽用生物制品工程技术重点实验室、国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014)摘要:将猪肺炎支原体168株全菌蛋白免疫小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,3次亚克隆后,获得了4株针对168株全菌蛋白的单抗,分别将其命名为2F5、2G7、4F5、5E9。
Western -blot 检测结果表明,2G7、4F5与猪肺炎支原体具有特异性反应条带,不与猪鼻支原体、大肠杆菌反应。
亚型鉴定结果表明,两株特异性单抗(2G7、4F5)的亚型属IgG1,轻链为κ型,2F5、5E9亚型属IgG2a ,轻链为κ型。
间接免疫荧光结果表明,4株单抗均与猪肺炎支原体168株有特异性荧光反应,特异性单抗的获得为猪肺炎支原体的检测及机理研究奠定基础。
关键词:猪肺炎支原体;单克隆抗体;间接免疫荧光中图分类号:S858.28文献标识码:A文章编号:1001-8581(2012)11-0125-04Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies against Mycoplasma hyopneumoniae Strain 168WANG Hai -yan ,MIAO Fen -fang ,FENG Zhi -xin ,LIU Mao -jun ,SHAO Guo -qing *(Institute of Veterinary Medicine ,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences ;Key Laboratory of Veterinary Biological Engineering and Technology ,Ministry of Agriculture ;National Center for Engineering Research of Veterinary Bio -products ,Nanjing 210014,China )Abstract :Balb /c mice were immunized with Mycoplasma hyopneumoniae (Mhp )strain 168,and the splenocytes of the immu-nized mice were fused with SP2/0cells.After subcloning for 3times ,four hybridoma clones which produced Monoclonal Antibodies (McAbs )steadily were screened by ELISA ,named 2F5,2G7,4F5,and 5E9.The result of Western -blot indicated that 2G7and4F5both strongly specifically reacted with the Mhp strain 168.Both of the McAbs (2G7and 4F5)belonged to IgG1isotype ,and their light chains were κtype.However ,2F5and 5E9belonged to IgG2a isotype ,and their light chains were also κtype.They all reacted strongly with Mhp strain 168in immunofluorescence assay (IFA ).The McAbs could be used for the detection and pathogenic mecha-nism research of Mhp.Key words :Mycoplasma hyopneumoniae ;Monoclonal antibody ;Immunofluorescence assay猪支原体肺炎(Mycoplasma hyopneumoniae ,Mhp ),亦称猪地方流行性肺炎、猪气喘病,是一种接触性、慢性呼吸道传染病。
猪支原体肺炎活疫苗与灭活苗比较分析作者:王留来源:《兽医导刊》 2015年第5期王留/ 河南商丘职业技术学院动物工程系猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性呼吸道传染病, 又称猪气喘病和猪地方流行性肺炎, 广泛流行于世界各养猪国家和地区, 是一种顽固性慢性传染病。
临床表现咳嗽和气喘,患病动物体温、食欲变化不明显,剖检可见肺脏心叶、中间叶和尖叶有融合性支气管炎,呈现肉样或肝样病变。
国内猪支原体肺炎的发病率为30% ~ 50%,而感染率高达85% 以上。
猪支原体肺炎的预防、控制和净化须采取早期诊断、及时隔离、抗生素治疗或淘汰病猪、疫苗接种、全进全出、严格消毒等综合性措施,其中疫苗预防起着关键性作用。
大量研究已经证实了支原体疫苗带来的经济效益,使用肺炎支原体疫苗可以降低肺炎发生率和与肺炎支原体感染有关的经济损失,在感染严重的猪场其效益和成本的比例可以达到5 ∶ 1。
目前国内应用的猪肺炎支原体疫苗包括弱毒活疫苗和灭活苗,活疫苗由于胸腔注射途径难于掌握,副反应较大,因此推广受到限制,而灭活疫苗特别是新型佐剂和双重佐剂的疫苗在田间显示出对猪支原体肺炎较为理想的控制效果。
现仅从以下几个方面对猪肺炎支原体弱毒活疫苗和灭活苗的优缺点进行比较分析,以期为猪肺炎支原体疫苗的临床选用提供参考。
(一)弱毒活疫苗和灭活苗特征1. 弱毒活疫苗。
在国内, 弱毒活疫苗主要有猪肺炎支原体兔化弱毒苗和168 株无细胞培养弱毒苗,它们分别由北京兽药监察所和江苏农科院畜牧兽医研究所研制成功。
猪肺炎支原体弱毒活疫苗采用胸腔和肺部注射的免疫途径不易为一般用户接受, 因而在推广应用上受到一定限制。
猪肺炎支原体兔化弱毒苗于1989 年由北京兽药监察所研制成功,该疫苗采用济南强毒株在乳兔山连续传代致弱后获得兔化弱毒株,经配苗冻干后制成兔化弱毒苗。
经临床试用证明,该毒株制成的疫苗安全有效,能使80% 的免疫猪在强度攻击后肺部组织不出现任何病变,而对照组全部发病。
猪支原体肺炎活疫苗(168株)肺内免疫机制研究冯志新;刘茂军;熊祺琰;华利忠;王海燕;甘源;韦艳娜;苏国东;邵国青【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2012(046)008【摘要】为研究猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫机制,通过肺内接种免疫5 ~10日龄仔猪,并于免疫后不同时间点检测血清中IgG抗体效价、全血中淋巴细胞转化效率、呼吸道局部的IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度,于免疫后28 d剖杀采集呼吸道上皮组织,通过扫描电镜法与原位杂交检测法观察疫苗株在呼吸道的存留以及对纤毛的影响情况.结果发现,免疫后猪血液中淋巴细胞转化增强1.52~2.01倍,支气管表面IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度持续增加,但血清抗体一直未检测到.扫描电镜与原位杂交检测结果发现疫苗株能有效地黏附在支气管纤毛上皮细胞上,但对纤毛的影响较小.由此表明,猪支原体肺炎活疫苗(168株)通过肺内免疫可有效激活全身细胞免疫及呼吸道局部的黏膜免疫与细胞免疫反应,而且还可以通过黏附支气管纤毛上皮细胞产生占位效应而对上皮组织不产生损伤.【总页数】5页(P4-7,19)【作者】冯志新;刘茂军;熊祺琰;华利忠;王海燕;甘源;韦艳娜;苏国东;邵国青【作者单位】江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;南京天邦生物科技有限公司,南京211102;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014【正文语种】中文【中图分类】S859.797【相关文献】1.免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效果评价 [J], 熊祺琰;王占伟;甘源;孔猛;冯志新;刘茂军;邵国青2.猪支原体肺炎活疫苗(RM48株)的最小免疫剂量测定及活菌滴度与免疫保护率平行关系试验 [J], 沈青春;吴思杰;范学政;张广川;高和义;宁宜宝3.猪支原体肺炎弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果评估 [J], 彭涛;马梓承;王宏宇;孟凡亮;刘照虎;肖一红;刘思当4.不同猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效果评价及比较 [J], 肖婷;韦明宇;何颖;陈忠伟;蒋家霞;卢冰霞;覃国喜;韩定角;郭旋;段群棚;赵武5.猪支原体肺炎活疫苗(168株)肺内免疫机制研究 [J],因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
猪支原体肺炎疫苗的研究进展作者:邢育钢刘艳昭来源:《现代畜牧科技》2017年第03期摘要:猪支原体肺炎(MPS)是由猪肺炎支原体(Mhp)引起猪的一种呼吸系统疾病,其主要症状是气喘、咳嗽,该病病程较慢,但传播速度很快。
目前是全世界流行最广,最难净化,被认为是威胁全球养猪业的主要传染病之一。
疫苗免疫是预防该病最主要的手段,弱毒活疫苗弊端过多,灭活疫苗相对稳定,基因工程疫苗成本低则成为未来的趋势。
关键词:弱毒活疫苗;不良反应;生物安全性;基因工程疫苗中图分类号:S852.62 文献标识码:B文章编号:2095-9737(2017)03-0157-011弱毒活疫苗1.1猪肺炎支原体乳兔继代弱毒株活疫苗该疫苗所用毒株为猪肺炎支原体乳兔继代弱毒株(LMP),是由中国兽医药品监察所于1985年培养完成,使用688~843代弱毒进行接种、收获、冻干,制备出了世界第一个能够安全有效预防猪喘气病的弱毒活疫苗,即猪气喘病乳兔继代弱毒株鸡胚冻干苗。
该疫苗免疫效果好,不会引起猪发生融合性肺炎,能使平均70%的免疫猪在强毒攻击后不引起同圈未接种猪的同居感染,肺组织不出现任何病变。
但该疫苗存在一定的缺陷,该种疫苗制造方法属于组织活疫苗制造方法之一,通过接种健康大兔胸腔或鸡胚卵黄囊内,经过培育,4天后采集兔肺或鸡胚卵黄囊,进行加工后,按照一定比例加入冻干保护剂制成冻干活疫苗,该菌株长期在乳兔体内传代,基本失去了在培养基中生长的能力,无法适合工厂化条件的规模化大生产,造成了其产量低,各种成本居高,阻碍该疫苗的发展空间,并且由于其采用胸腔注射的免疫途径,会造成机体反应较大,并且使用者操作难度较大,不易被接受,因此在推广应用上受到限制。
1.2猪支原体肺炎活疫苗(168株)江苏省农科院畜牧兽医研究所于1986年,制备江苏2号培养基,然后接种猪肺炎支原体安宁系168等菌株,经3次克隆化培养,无细胞培养340代次,人工致弱的弱毒菌株,接种于Friis培养基、改良的Switzer培养基(KM2)制作成弱毒疫苗,Mhp168株弱毒疫苗可以升高分泌型免疫球蛋白A与γ干扰素的浓度,减少肺部炎症反应程度,疫苗通过肺内注射免疫后,能够附着在支气管纤毛表面,体现优势占位效应,能防止野毒的感染和排毒,诱导的细胞免疫和黏膜免疫。
·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要:为探寻一种更加合理高效的猪支原体肺炎(MPS )免疫方式,本研究使用MPS 弱毒疫苗进行基础免疫后14 d 再使用灭活疫苗进行加强免疫,通过人工感染猪肺炎支原体来评价其免疫效果。
同时将这种免疫程序在规模化猪场进行应用,通过计算一定时期内的日增重来评价其免疫效果。
结果显示:联合免疫在保证黏膜免疫效果的同时并未降低体液免疫水平;更为重要的是,联合免疫不但具备较高攻毒保护率,而且在攻毒后剖杀时其肺泡灌洗液中抗原含量远低于其他免疫方式。
以上结果表明,联合免疫可以产生较好的免疫协同作用,从而提高了机体的综合免疫保护能力。
田间试验结果发现:联合免疫组猪群从21日龄至80日龄平均增重27.31 kg ,比活疫苗免疫组猪群多增重3.02 kg ,比灭活疫苗免疫组猪群多增重3.73 kg ;其平均日增重可达0.46 kg/d 。
本研究为防治猪支原体肺炎提供了新的思路。
关键词:猪支原体肺炎活疫苗和灭活疫苗;初免-加强免疫策略;攻毒保护;日增重中图分类号:S858.28文献标志码:A文章编号:1674-6422(2023)04-0089-07Evaluation of the Combined Vaccination Strategy of Attenuated and InactivatedVaccines against Mycoplasma hyopneumoniae Infection收稿日期:2021-03-01基金项目:江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(20)1006)作者简介:郝飞,男,博士,助理研究员,主要从事动物支原体感染与黏膜免疫防控技术研究;白昀,男,硕士,副研究员,主要从事动物支原体感染与黏膜免疫防控技术研究通信作者:冯志新,E-mail:***************猪支原体肺炎活疫苗与灭活疫苗联合免疫效果评价郝 飞1,2,白 昀1,2,袁 厅1,2,张 磊1,2,刘蓓蓓1,2,谢 星1,2,韦艳娜1,2,甘 源1,2,熊祺琰1,2,邵国青1,2,冯志新1,2(1. 江苏省农业科学院兽医研究所 农业农村部兽用生物制品工程重点实验室,南京210014;2. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心,泰州 225300)2023,31(4):89-95Abstract: In order to explore a more reasonable and effi cient immunoprotection method for Mycoplasmal pneumonia of swine (MPS), a combined vaccination strategy was developed in the present study. Piglets were primed with the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae (Mhp) vaccine and then boosted with the inactivated vaccine 14 days later. The vaccinated piglets were challenged with the virulent strain to evaluate the effi cacy of this combined vaccination method. At the same time, this immunization procedure was applied on the large-scale pig farms, and the effi cacy was evaluated by comparing the daily weight gain of piglets at different stages. The experiment result shows that the combined vaccination with the attenuated vaccine and inactivated vaccine did not reduce the humoral immunity level while ensuring the mucosal immunity effect. More importantly, the combined vaccination not only provided better protection but also reduced the Mhp antigen level in bronchoalveolar lavage fluid. These results indicated that the combination of Mhp attenuated vaccine with inactivated vaccine had good immune synergism and enhanced host immunoprotection. The fi eld experiment showed that the averageHAO Fei 1,2, BAI Yun 1,2, YUAN Ting 1,2, ZHANG Lei 1,2, LIU Beibei 1,2, XIE Xing 1,2, WEI Yanna 1,2,GAN Yuan 1,2, XIONG Qiyan 1,2, SHAO Guoqing 1,2, FENG Zhixin 1,2(1. Key Laboratory for Veterinary Bio-Product Engineering, Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; 2. GuoTai (Taizhou) Center of Technology Innovation for VeterinaryBiologicals, Taizhou 225300, China)· 90 ·中国动物传染病学报2023年8月猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine, MPS)又称猪气喘病或猪喘气病,是一种由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae, Mhp)感染引起的以咳嗽、气喘、腹式呼吸和生长速度缓慢为主要特征的慢性呼吸道传染病。
摘 要:猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性接触性呼吸道病,传播范围广,对猪的生产影响较大,是需要特别重视的一类疾病。
本文对本病的病原、流行病学进行了分析,探讨了其防治措施,希望能为广大养殖户提供一定的参考。
关键词:猪支原体肺炎;诊断;防治1 病原猪肺炎支原体对外界环境抵抗力不强,在外界环境中存活不超过36h,病肺组织块内的病原体在-15℃可保存45d,在1~4℃可保存7d。
常用的化学消毒药均能将其杀灭。
肺炎支原体对青霉素、磺胺类药不敏感,对壮观霉素、卡那霉素、林可霉素和泰乐菌素敏感。
2 流行病学猪支原体肺炎仅发生于猪,不同品种、年龄、性别的猪均能感染,其中以哺乳猪和幼猪最易感,发病率和死亡率较高。
其次是妊娠后期的母猪和哺乳母猪,育肥猪发病较少。
母猪和成年猪多呈慢性和隐性感染。
病猪和带菌猪是本病的传染源。
病原体存在于病猪及带菌猪的呼吸道及其分泌物中,在猪体内存在的时间很长,病猪在症状消失之后半年至一年多仍可排菌。
猪场发生本病主要是从外面购人隐性感染猪所致,哺乳仔猪常从患病母猪感染。
呼吸道是本病的传染途径。
病原体随病猪咳嗽、气喘和喷嚏的分泌物排到体外,形成飞沫,经呼吸道感染健康猪。
3 主要症状和病理变化潜伏期10~16d。
据病程可分为急性、慢性和隐性感染。
急性型:见于新发猪群,以仔猪、妊娠母猪和哺乳仔猪多发。
病猪剧喘,腹式呼吸或犬坐姿势,时发痉挛性阵咳。
体温一般正常,有继发感染则体温升高。
食欲大减或废绝,日渐消瘦。
病程约1周,病猪常因窒息而死,病死率高。
慢性型:多见于老疫区的架子猪、育肥猪和后备母猪。
长期咳嗽,清晨进食前后及剧烈运动时最明显,严重的可发生痉挛性咳嗽。
症状可因饲养条件和气候的改变而缓和或加重。
病猪体温不高,但消瘦,发育不良,被毛粗乱。
病程长达2~3个月,有的在半年以上,病死率不高。
此类病最易发生继发性感染,是夏季造成猪群急性死亡的主要诱因。
隐性型:不表现任何症状,或偶见个别猪咳嗽,生长发育一般正常,剖检时有肺炎病灶。
猪肺炎支原体弱毒活疫苗对生猪生长性能的影响文│单攀 唐中涛 周先建 孙志阔[兆丰华生物科技(南京)有限公司]猪支原体肺炎又称猪气喘病,其病原是猪肺炎支原体,该病原能引起猪只慢性呼吸道传染病,破坏肺脏纤毛结构,使肺脏容易继发其他病原感染,尤其是细菌性病原。
在临床上,该病主要以药物和疫苗两种方式控制猪支原体肺炎,本实验旨在探究猪支原体肺炎弱毒活疫苗对商品猪的生长性能的影响。
一、试验材料与方法1.疫苗。
猪肺炎支原体弱毒活疫苗168株(使用“支必宁”),该疫苗由兆丰华生物科技(南京)有限公司提供。
2.试验动物。
5~10日龄健康仔猪由江西某农业开发有限公司提供,该场存栏经产母猪800头,猪场设施齐全,生产管理规范;实验猪只健康状况良好,猪群无典型气喘病临床症状,未免疫任何厂家猪支原体肺炎疫苗。
3.分组与免疫。
试验随机选取同期分娩的两栋产房母猪所产仔猪进行试验,试验猪群以产房为单位分成两组:实验组289头7日龄健康仔猪肺内注射免疫“支必宁”,1份/头;对照组304头7日龄健康仔猪不免疫任何厂家猪支原体肺炎疫苗。
试验过程中免疫组与对照组仔猪饲养、保健、管理等条件(除猪肺炎支原体疫苗外)相同;保育阶段分组饲养,饲养条件相同,试验期60天。
4.生产数据采集。
统计对照组和实验组的母猪产仔情况,统计健仔数、免疫猪只数及应激猪只数、断奶仔猪数、断奶仔猪重、保育结束活仔数、保育结束仔猪重等数据。
二、结果与分析由表1可知,实验组在7日龄免疫该疫苗后未出现应激和死亡情况;实验组和对照组的25日龄仔猪断奶成活率分别为95.16%、90.79%,实验组断奶成活率比对照组高4.81%;实验组和对照组仔猪断奶均重分别为7.97千克、8.05千克,实验组断奶均重略低于对照组0.08千克;实验组和对照组猪只保育结束时平均体重分别为10.42千克、10.62千克,保育期成活率分别为98.18%、94.57%,在猪场根据生产安排实验组提前出栏6天的情况下,实验组猪只保育期结束时的平均体重与对照组猪只保育期结束时的平均体重相差不显著,其优势显而易见。
猪支原体肺炎活疫苗(168株)Zhu Zhiyuantifeiyan Huoyimiao (168 Zhu)Swine Enzootic Pneumonia Vaccine,Live(Strain 168)本品系采用猪肺炎支原体(168株)接种于江苏Ⅱ号培养基(KM2)中培养,收获培养物,加适宜稳定剂,经冷冻真空干燥。
用于预防猪支原体肺炎(猪喘气病)。
【性状】白色或淡黄色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解。
【纯粹检验】按现行《中国兽药典》附录3306进行检验,应纯粹。
【鉴别检验】将疫苗用KM2培养基(见附注1)1︰10-4稀释后,与等量抗猪肺炎支原体阳性血清(AGP效价≥1︰8)混合,在37℃水浴中和2小时后,接种KM2培养基,培养、观察15日。
应pH值无变化或pH值变化量低于阴性血清生长对照组并至少保持24小时。
【安全检验】(1)用小鼠检验每批疫苗任取5瓶加灭菌生理盐水稀释混合后,接种18~22 g清洁级小鼠5只,每只皮下接种5头份,观察10日,应全部健活。
如个别死亡,可重检1次,重检应全部健活。
(2)用猪检验用5~15日龄健康易感猪3头,各右侧肺内注射疫苗10头份,观察25日。
记录如下重要症状:咳嗽、呼吸困难、俯卧、呕吐、食欲不振、震颤和死亡,注射后第1~25日的每日上午检测直肠温度。
根据猪安检试验临床症状评判标准(见附注2),猪安检试验应全部累计总分不大于2判为安全,累计总分大于5判为不安全,累计总分2~5,可重检1次。
重检累计总分不大于2判为安全。
【效力检验】CCU含量测定按CCU含量测定方法(见附注3)测定,每头份冻干疫苗菌数应≥106CCU。
【剩余水分测定】按现行《中国兽药典》附录3204进行测定,应符合规定。
【真空度测定】按现行《中国兽药典》附录3103进行测定,应符合规定。
【作用与用途】用于预防猪支原体肺炎(猪气喘病)。
免疫期为6个月。
【用法与用量】猪肺内注射。
按瓶签注明头份,用无菌生理盐水稀释后,由猪右侧肩胛后缘2.0 cm肋间隙进针注射接种,每头接种1头份。
猪支原体肺炎活疫苗(168株)的安全性研究刘茂军;苏国东;周勇岐;冯志新;王海燕;朱晓玮;邵国青【摘要】An experiment of susceptible piglets were used to evaluate the safety of a live vaccine on Mycoplasma hyopneumoniae (Mhp) through contact with vaccinated piglets, and five generations of virulence reversion experiment was also involved. The clinical assessment of the pigs vaccinated with one dose, one dose repetition and the high dose of the live vaccine were carried out, and five batch vaccines were done in the productive swine farm. The results demonstrated that the typical clinical symptoms and pathological changes were not observed in vaccinated piglets and cohabitated pigs with vaccinated pigs. In the test of five generations of virulence reversion experiment, Mhp 168 strain was identified from each generation back to pigs to pigs and there was no the typical clinical symptoms and pathological changes in all the pigs. Moreover, the typical clinical symptoms and pathological changes were vaccine, and five batches has good safety. not observed in the one dose, one dose repetition and the high dose of the live Mhp vaccines clinical experiments. All these results demonstrated that the live Mhp vaccine has good safety.%用健康易感仔猪进行同群感染试验和连续五代返强试验对猪肺炎支原体活疫苗(168株)进行安全性试验,同时也进行了该活疫苗单剂量、单剂量重复和大剂量试验及5批次疫苗免疫商品猪的l临床试验。
结果发现,猪支原体肺炎活疫苗(168株)免疫猪后,免疫猪和同群感染猪均未观察到典型的临床症状和病理变化;连续五代返强试验,试验猪均未观察到典型的临床症状和病理变化,说明该疫苗株未出现返强。
单剂量、单剂量重复和大剂量试验及5批次疫苗的临床试验也未观察到不良反应。
这说明受试批次猪支原体肺炎活疫苗(168株)具有良好的安全性。
【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2012(046)007【总页数】4页(P1-4)【关键词】猪支原体肺炎活疫苗;安全性;毒力返强【作者】刘茂军;苏国东;周勇岐;冯志新;王海燕;朱晓玮;邵国青【作者单位】江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014/南京天邦生物科技有限公司,南京211102;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014/南京天邦生物科技有限公司,南京211102;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014【正文语种】中文【中图分类】S859.797猪支原体肺炎(Mycoplasma Pneumoniae of Swine,MPS)又称猪地方性肺炎,该病是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)引起的一种猪慢性呼吸道传染病,在全世界养猪国家和地区普遍存在,给养殖业造成了严重危害[1-3]。
疫苗预防是控制该病的主要手段[4]。
猪肺炎支原体168株是江苏省农业科学院兽医研究所连续传代培育而成的适应无细胞培养基(KM2)的弱毒株。
我们对该弱毒株的安全性进行了研究,确保该菌株疫苗的临床使用效果。
1 材料1.1 疫苗、培养基和试剂猪肺炎支原体168株(X+1)代(5×107 CCU/mL)和3批次猪支原体肺炎活疫苗(168株)(X+15)代由江苏省农业科学院兽医研究所保存。
5批次猪支原体肺炎活疫苗(168株)(X+15)代由南京天邦生物科技有限公司制造。
猪肺炎支原体P46基因PCR引物由TaKaRa公司合成。
KM2培养基和兔抗猪肺炎支原体J株高免血清由江苏省农业科学院兽医研究所制备。
1.2 试验猪 5~15日龄猪75头,仔猪和哺乳母猪均为猪肺炎支原体IHA抗体阴性,来源于江苏省农科院猪场,饲养于江苏省农科院试验动物房,各组猪隔离饲养,饲喂无抗生素的饲料,饮用自来水。
120头商品猪来源于广东某猪场,一直饲养与该猪场。
2 方法2.1 感染性试验用猪肺炎支原体168株X代肺内注射接种5头5~15 d龄试验猪,每头1 mL,另5头不注射作为岗哨组。
在注射疫苗前、注射后4 h以及注射后第1~4 d每日上午检测直肠温度;并于接种后连续逐日观察临床症状至剖杀前,主要观察观察是否有精神不振、食欲减退、呼吸困难、呕吐、俯卧、震颤等不良症状。
在注射后第25 d剖杀所有猪,采集肺脏,检查是否存在组织病变。
肺病变指数按照28分评分法判定[5]。
2.2 毒力返强试验2.2.1 连续感染试验用2 mL猪支原体肺炎活疫苗(168株)X代右侧肺内接种5头5~15日龄试验猪,隔离单圈饲养25 d后,剖检试验猪,观察肺脏是否有胰样小叶性肺炎病变,并以无菌操作分别从5头猪右侧肺脏剪取注射部位周围肺组织约5~7 g剪成细块,混合研磨成糊状,加入含有1000单位/mL青霉素的Hank’s溶液,配制成5%肺悬液,当日再肺内接种到第二批5~15日龄健康易感猪5头,2 mL/头。
如此反复连续接种5代,观察每代次各接种猪临床症状和肺脏的病理变化。
2.2.2 菌株鉴定每代次剖杀的猪肺用P46 PCR方法进行检测,对猪支原体肺炎活疫苗(168株)菌体和第5次回归猪的PCR扩增产物进行序列分析[6,7]。
2.3 不同免疫剂量安全性试验 3批次猪支原体肺炎活疫苗(168株)肺内接种健康猪进行一次单剂量、单剂量重复和一次大剂量接种各5头,分别注射1次1头份、间隔2周2次各注射1头份和1次10头份,每头份体积均为1 mL;对照组5头猪同时肺内接种1 mL生理盐水。
各组在当日注射疫苗前、注射后4 h以及注射后第1~3 d的每日检测直肠温度,并于接种后连续逐日观察临床症状至剖杀前。
接种后第25 d将试验猪全部剖杀,采集肺脏,对注射部位特别检查。
2.4 临床安全性试验用5批次猪支原体肺炎活疫苗(168株)在猪场进行免疫,每批次免20头,1头份/头,对照20头不免疫。
对免疫组和对照组的各猪只在免疫前、免后6 h和免后24 h抽样检测直肠体温,疫苗免疫后28 d内进行临床观察,观察是否有精神不振、食欲减退、呼吸困难、呕吐、俯卧、震颤等不良症状。
3 结果与分析3.1 感染性试验结果3.1.1 临床症状观察仔猪注射猪支原体肺炎活疫苗(168株)后25 d内,试验组和岗哨组的猪均表现正常,均未观察到精神不振、食欲减退、咳嗽、呼吸困难、俯卧、呕吐、震颤、死亡等不良反应。
提示猪支原体肺炎活疫苗(168株)对猪只的影响轻微,没有可观察到的临床症状发生。
3.1.2 注射后的体温变化在所有测温的时间点,试验组猪的直肠温度平均值与对照组的相差范围在0.5℃以内。
测得的每组平均直肠温度见图1。
3.1.3 大体病理观察在注射后25 d进行剖检,试验组与岗哨组均未观察到猪支原体肺炎病变。
提示该活疫苗免疫接种后未见眼观肺脏病变,也未引起同圈猪发生眼观肺脏病变。
图1 猪注射当日前后各时间的平均直肠温度3.2 毒力返强试验3.2.1 临床症状观察和肺脏剖检结果猪支原体肺炎活疫苗(168株)进行肺内注射猪后,用肺脏悬液连续5次毒力返强接种试验猪的临床观察、肺脏剖检结果见表1。
表1 连续5代毒力返强试验猪肺脏临床症状、肺脏病变结果返强试验代次猪数临床观察肺脏病变第1次返强试验 5表现正常,未见咳嗽、呼吸困难等典型症状。
肺脏正常,均未见有胰样小叶性肺炎第2次返强试验 5表现正常,未见咳嗽、呼吸困难等典型症状。
肺脏正常,均未见有胰样小叶性肺炎第3次返强试验 5表现正常,未见咳嗽、呼吸困难等典型症状。
肺脏正常,均未见有胰样小叶性肺炎第4次返强试验 5表现正常,未见咳嗽、呼吸困难等典型症状。
肺脏正常,均未见有胰样小叶性肺炎第5次返强试验 5表现正常,未见咳嗽、呼吸困难等典型症状。
肺脏正常,均未见有胰样小叶性肺炎猪支原体肺炎发病猪的典型症状表现为咳嗽、呼吸困难、气喘等[6]。
由上表可见,猪支原体肺炎活疫苗(168株)肺内注射易感猪均表现正常,未观察到该病的临床症状。
第2~5代连续返强试验接种时,接种猪也未见明显临床反应,病理剖检均未产生眼观典型的猪支原体肺炎病变。
对每代连续返强试验接种的肺组织均可检出猪肺炎支原体,第5代返强试验猪扑杀的分离物经代谢抑制试验鉴定为猪肺炎支原体。
连续5代返强试验的临床症状和大体剖检结果提示在5代次内该疫苗菌株毒力稳定,逐次传递没有返强迹象。
3.2.2 菌株分离和鉴定用该活疫苗(168株)肺内注射后的肺脏悬液连续5次接种试验猪,逐次剖取各批次猪的肺脏接种于KM2培养基后均分离获得的疑似猪肺炎支原体菌体,经代谢抑制试验鉴定均与猪肺炎支原体J血清型一致,因猪肺炎支原体仅有一个血清型,所以分离到的菌株为猪肺炎支原体。