高效液相色谱法测定复方氨基葡萄糖咀嚼片中氨基葡萄糖的含量

HPLC法测定复方氨基葡萄糖片中盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素含量狄平平,劳苑子,赵立平,万维勤(上海富海科申药业有限公司,上海201203)摘要:目的建立复方氨基葡萄糖片中盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素含量H PLC测定方法。

方法均采用C18色谱柱,盐酸氨基葡萄糖以0168%醋酸缓冲溶液-甲醇(82B18)为流动相,检测波长为340nm,流速为110m L#min-1,进样量为10L L。

硫酸软骨素以01005mol#L-1辛烷磺酸钠水溶液-乙腈(95B5)为流动相,检测波长为195nm;流速为015mL#min-1;进样量为10L L。

结果盐酸氨基葡萄糖浓度在015061 ~41100mg#mL-1范围内与B-异构体峰面积线性关系良好,平均回收率为100159%,RSD=1121%(n= 6)。

硫酸软骨素的进样浓度在17017~100115L g#mL-1范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为99187%,RSD=1105%(n=6)。

结论该方法简便、准确,可用于本品的质量控制。

关键词:H PLC;盐酸氨基葡萄糖;硫酸软骨素;含量测定中图分类号:R92712文献标识码:A文章编号:1002-7777(2010)03-0283-04Determination of Glucosamine Hydrochloride and C hondroitin Sulfate in Tablets by HPLCDi Pingping,Lao Yuanzi,Zhao Liping and Wan Weiqin(Crimso n Pharm aceutical Limited,Shanghai 201203)ABSTRACT:Objective T o establish the determ ination m ethod of g lucosam ine hydr ochlor ide and cho ndroitin sulfate in tablets by H PLC.Methods H PLC w as all adopted w ith C18column.Gluco samine hydrochlo ride:T he mo bile phase consisted of0168%acetic acid buffer-methanol(82B18)w ith the flow rate of110mL#min-1.AUV-detector at340nm w as used.Cho ndroitin sulfate:T he m obile phase consisted of01005mol#L-11-Octanesulfonic acid sodium salt m ono hy drate so lutions-acetonitrile(95B5)w ith the flow r ate o f015mL#min-1.AU V-detector at195nm w as used.Results T he linear rang e of gluco samine hydrochlo ride(B-isomer)w as015061~41100m g#m L-1,and the av erag e r ecovery rate w as100159%,RSD =1121%(n=6).T he linear rang e o f chondroitin sulfate w as17017~100115L g#mL-1,and the av erag e reco very rate w as99187%,RSD=1105%(n=6).C onclusion T he m ethod is simple and accurate.It can be used to contr ol the quality o f this tablets.KEY WORDS:H PLC;gluco samine hydr ochlor ide;cho ndroitin sulfate;determination复方氨基葡萄糖片是由盐酸氨基葡萄糖、硫酸软骨素以及填充剂、崩解剂、润滑剂、着色剂等辅料制成。

高效液相色谱法测量葡萄糖浓度实验报告实验报告-高效液相色谱法测定VE含量实验四高效液相色谱法测定VE含量1 实验目的1.1 了解高效液相色谱仪的基本操作；1.2 了解高效液相色谱仪测定VE的原理。

2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

VE（维生素E）又名生育酚或产妊酚，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。

有抗氧化作用，能增强皮肤毛细血管抵抗力，并维持正常通透性；有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。

VE通过高效液相色谱柱进行分离，PDA检测器检测，外标法定量。

3实验器材3.1 实验样品VE样品溶液3.2 实验试剂浓度为50μg/ml的VE标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱：C18柱；流动相速度：0.3ml/min；进样量：5μl；柱温：30℃。

5 实验结果与讨论5.1 实验结果本次实验采用的是单点法测定。

实验结果见表1。

表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5μl×50μg/mL×17369/（5μl×42217）=20.57μg/mL5.2 实验讨论本次实验中，测定标样溶液VE含量时，在指定的保留时间内并未出峰。

讨论分析原因：样品溶液在上周实验后，一直置于离心管中，未避光低温保存，导致样品中VE氧化，液相测定时没有在相应的时间出峰。

本次实验时间较短，且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作，以及液相色谱仪测定VE的原理，故结合前组同学对VE含量的测定数据进行讨论与分析。

复方氨基葡萄糖片溶出度测定方法的建立张明晶;关士海【摘要】目的:建立复方氨基葡萄糖片溶出度的测定方法.方法:采用高效液相色谱法和紫外分先光度法测定浓度并计算溶出度.采用桨法,以累积溶出度为指标筛选介质(水、pH3.8缓冲液、0.1mol/L盐酸、pH6.8缓冲液、pH7.2缓冲液)和转速(50、75 r·min-1),建立较佳测定条件.结果:所建立的溶出度测定方法简便易行,准确度高,可用于复方氨基葡萄糖片溶出度测定.【期刊名称】《黑龙江医药》【年(卷),期】2013(026)001【总页数】2页(P6-7)【关键词】复方氨基葡萄糖片;溶出度;HPLC;分光光度法【作者】张明晶;关士海【作者单位】哈药集团制药六厂,哈尔滨150056【正文语种】中文【中图分类】R927.2复方氨基葡萄糖片由盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素组成。

盐酸氨基葡萄糖能够促进软骨的修复和形成，硫酸软骨素能够抗炎，提供关节润滑液，进而保持软骨的弹性，目前已有众多的临床试验证明两者联合使用，能够增强疗效，延长疗效维持时间，作为骨关节炎的特效药，其必然具有良好的发展前景。

目前国内尚未见复方氨基葡萄糖片的溶出度分析方法的文献报道。

因此，为评价复方氨基葡萄糖片的质量，本文建立了其溶出度的测定方法，经方法学验证，本方法完全适用于复方氨基葡萄糖片的溶出度测定。

1 仪器与试药RCZ－8B智能溶出试验仪、Waters 515高效液相色谱仪、UV 2487检测器、UV2501PC紫外分光光度计;盐酸氨基葡萄糖对照品由中国药品生物制品检定所提供、硫酸软骨素钠对照品为USP提供;复方氨基葡萄糖片(自制);甲醇为色谱纯，其余试剂试药均为分析纯。

2 方法与结果2.1 测定方法取本品，照溶出度测定法(《中国药典》2010年版二部附录XC第二法)，以水900ml为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，经30分钟时，取溶液10ml，滤过，续滤液备用。

2.1.1 盐酸氨基葡萄糖色谱条件与系统适用性试验 Hypersil C18，4.6×150mm;以醋酸钠(6.8克醋酸钠溶解于700ml水中，用稀醋酸调pH 5.9加水定容至1000ml)－甲醇(80:20)为流动相;检测波长340nm;流速为1.0ml/min。

高效液相色谱法快速检测氨基葡萄糖含量谢志刚;李博;陈书军;彭秀兰;王莹;尹鸿萍;奚涛【摘要】应用高效液相色谱法,建立了硫酸氨基葡萄糖氯化钾胶囊中氨基葡萄糖含量的快速测定方法.采用Hedera NH2色谱柱(250 mm ×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸缓冲液(65∶35),流速为1.0 mL/min,可变波长紫外检测器,检测波长为195 nm.结果表明,在上述色谱条件下,氨基葡萄糖浓度在1.6～2.4 g/L范围内线性关系良好,检出限为7.81 mg/L,精密度(RSD,n=6)为0.53％；平均加标回收率为100％,相对标准偏差为1.1％.该法准确、可靠,无需衍生反应,适用于硫酸氨基葡萄糖氯化钾胶囊中氨基葡萄糖的含量测定.%A high-performance liquid chromatography ( HPLC ) method for the determination of glu-cosaminein glucosamine sulfate potassium chloride capsules was developed. The separation of analyte was performed on a Hedera NH2 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) with acetonitrile and phosphate buffer (65 : 35) as mobile phase, at a flow rate of 1. 0 mL/min. The variable wavelength detector( VWD) was set at 195 nm. In the above chromatographic conditions, the calibration curve was linear over glucosamine concentration in the rangeof 1.6 -2. 4 g/L. The limit of detection ( LOD) of glucosamine was 7. 81mg/L. The RSD(n =6) for the accuracy was 0. 53% and the average recovery was 100% with RSD of 1. 1% . This method is simple, accurate and with no need of derivation, and is suitable for the determination of glucosamine.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2012(031)005【总页数】5页(P575-579)【关键词】硫酸氨基葡萄糖氯化钾;氨基葡萄糖;高效液相色谱法;测定【作者】谢志刚;李博;陈书军;彭秀兰;王莹;尹鸿萍;奚涛【作者单位】中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009;江苏双林海洋生物药业有限公司,江苏南通226246;中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009;中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009【正文语种】中文【中图分类】O657.72;O629.11氨基葡萄糖是一种天然的氨基单糖，是合成氨基聚糖的基本物质，同时也是人体及动物体内关节组织中糖蛋白的天然成分。

HPLC法测定盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量杨华良;雷勇胜【摘要】目的:建立HPLC法测定盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,用Venusil XBP NH2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液(67:33)；流速1.5 ml/min；检测波长195 nm;柱温35℃.结果:在0.015 ～0.093 75 mg的范围内,盐酸氨基葡萄糖的浓度与峰面积呈良好的线性关系(r =0.999 9)；平均回收率为104.55％,RSD为0.61％.结论:本方法准确、简便、专属性强,适用于盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量测定.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2011(023)006【总页数】3页(P17-19)【关键词】HPLC;盐酸氨基葡萄糖颗粒;含量测定【作者】杨华良;雷勇胜【作者单位】天津市中心妇产科医院,天津300052;天津药物研究院,天津300193【正文语种】中文【中图分类】R927.2氨基葡萄糖是一种从天然甲壳质中提取的氨基己糖，是人体及动物体内关节组织中糖蛋白的天然成分。

本品为白色结晶性粉末，分子式为C6H13NO5。

氨基葡萄糖具有修复和维持软骨及关节功能的作用，可延缓骨性关节炎的病理过程和疾病进展。

近年来国内外已成功的将其引入到全身骨关节炎的治疗和预防。

冉兰等[1]采用比色法测定盐酸氨基葡萄糖片中盐酸氨基葡萄糖的含量，显色后在527nm处有最大吸收；庄旭琴[2]采用旋光度法测定盐酸氨基葡萄糖片中盐酸氨基葡萄糖的含量，但该方法专属性差，辅料也有可能产生影响；任连杰等[3]采用积分脉冲安培检测-高效阴离子交换色谱法测定盐酸氨基葡萄糖，优化了淋洗条件和积分脉冲安培检测条件；吴虹等[4]采用HPLC -ELSD测定盐酸氨基葡萄糖的含量；本方法参考最新的美国药典USP32 -NF27版[5]，采用HPLC-UV测定盐酸氨基葡萄糖颗粒的含量。

复方氨基葡萄糖片溶出度测定方法的建立作者：刘蕊来源：《中国科技博览》2015年第10期[摘要]目的：建立复方氨基葡萄糖片溶出度的测定方法。

方法：采用高效液相色谱法和紫外分先光度法测定浓度并计算溶出度。

采用浆法，以累积溶出度为指标筛选介质（水、PH308缓冲液、0.1mol/L盐酸、pH6.8缓冲液、pH7.2缓冲液）和转速（50、75·r·min-1），建立较佳测定条件。

结果：测定结果重现性和稳定性较好。

结论：所建立的溶出度测定方法简便易行，准确度高，可用于复方氨基葡萄糖片溶出度测定。

[关键词]复方氨基葡萄糖片；溶出度；HPLC；分光光度法中图分类号：G113 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）10-0314-01复方氨基酸葡萄糖中的最主要成分就是盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素。

其中盐酸氨基葡萄糖能够促进人体软骨的形成，在软骨的形成过程中，对软骨中可能出现的问题进行有效的修复，而硫酸软骨素能够对炎症进行有效的抵抗，提高关节的润滑度，对关节能够起到调节作用，在软骨的形成过程中，保障软骨的弹性。

在临床治疗中，将这两种成分进行综合运用，得出的结果表明，两种药物的综合作用，可以发挥出加倍的治疗效果，减少治疗的时间，使得治疗后的效果更加明显，在对关节炎的治疗上更具有效果，在临床中值得推广。

但是我国目前还没有针对复方氨基酸葡萄糖片溶出度测定方法的研究报告，在测定方法的探究上还具有很大的发展前景，本文就对复方氨基酸葡萄糖片溶出度测定方法的进行了研究，并建立了合适的测定方法，以此来对复方氨基酸葡萄糖片进行质量的评估，本文的所建立的测定方法经过多方的查证和检验，结果显示，这种方法的建立具有一定的科学依据，而且在复方氨基酸葡萄片的溶出度上具有良好的检测效用，因此具有极大的参考价值。

1、仪器与试药RCZ一8B智能溶出试验仪、Waters515高效液相色谱仪、UV2487检测器、UY2501PC紫外分光光度计；盐酸氨基葡萄糖对照品由中国药品生物制品检定所提供、硫酸软骨素钠对照品为USP提供；复方氨基葡萄糖片（自制）；甲醇为色谱纯，其余试剂试药均为分析纯。

理但施验学分册PTCA(PART B:CHEM.ANAL.)|工作简报1)()1:10.11973/lhjy-hx202010008测定保健負品中氨基葡萄糖和硫酸软骨素的2种高效液相色谱法对比睢超霞，冯硕，王克(河南医学高等专科学校药学系化学教研室，郑州451191)摘要：分别采用紫外检测器和Cw色谱柱，蒸发光散射检测器和氨基色谱柱，建立了2种高效液相色谱法测定保健食品中氨基葡萄糖与硫酸软骨素的含量。

配蒸发光散射检测器的高效液相色谱法测定氨基葡萄糖和硫酸软骨素的分离度大于1.5,检出限分别为5.0,12.0mg•L-*o配紫外检测器的高效液相色谱法保留时间约2min,氨基葡萄糖和硫酸软骨素的分离度小于1.5。

与配紫外检测器的高效液相色谱法相比，采用配蒸发光散射检测器的高效液相色谱法具有更好的分离度和更强的抗干扰能力，适用于基质复杂的保健食品中氨基葡萄糖和硫酸软骨素的同时测定。

关键词：保健食品；氨基葡萄糖；硫酸软骨素；高效液相色谱法中图分类号：0652.63文献标志码：A文章编号：1001-4020(2020)10-1091-05氨基葡萄糖是人体软骨中糖胺聚糖和透明质酸的主要成分，能够促进软骨基质的重建，延缓骨关节炎的发病进程。

硫酸软骨素是关节软骨的基本组成物质.有助于促进骨钙沉积、帮助新骨形成.硫酸软骨素与氨基葡萄糖结合使用能有效地保护及修复关节软骨⑴。

随着人们生活水平的提高，公众的健康意识和健康需求也不断增强，氨基葡萄糖和硫酸软骨素添加类保健食品也越来越受到中老年人的青睐。

氨基葡萄糖和硫酸软骨素预防与修复关节炎的药效与其含量相关，含量不达标时会影响其保健效果⑵。

因此.在氨基葡萄糖和硫酸软骨素添加类保健食品的研制与生产过程中，需严格保证氨基葡萄糖和硫酸软骨素的添加量。

文献［3］采用分光光度法测定了氨基葡萄糖与硫酸软骨素含量。

文献［4］采用分光光度法测定复方硫酸软骨素片中硫酸软骨素含量。

与化学分析法相比，高效液相色谱法更为灵敏、快速、准确。

高效液相色谱法测定复方氨基葡萄糖咀嚼片中氨基葡萄糖的含量[摘要] 目的建立高效液相色谱法,测定氨基葡萄糖咀嚼片中氨基葡萄糖的含量。

方法以Hypersil C18(50mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;以0.05mol·L-1乙酸钠水溶液甲醇(90∶10)为流动相;UV检测波长340nm;流速1.0ml·min-1。

结果氨基葡萄糖在200～1600mg·L-l范围内具有良好线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为100.4%,(RSD)为1.0%(n=9);3批样品的标示含量分别为99.5%、100.1%、99.4%。

结论高效液相色谱法准确、灵敏,重现性好,可用于氨基葡萄糖咀嚼片的含量测定。

[关键词] 氨基葡萄糖;咀嚼片;色谱法,高压液相;含量氨基葡萄糖[1]是蛋白多糖合成的前体物质,可刺激软骨细胞产生有正常多聚体结构的蛋白多糖,提高软骨细胞的修复能力,抑制可损害关节软骨的酶,并可防止损伤细胞的超氧化物自由基的产生,促进软骨基质的修复和重建,从而可缓解骨关节疼痛,改善关节功能,并延缓关节病变的发展;硫酸软骨素在关节中具有润滑和支撑功能,还具有抗动脉粥样硬化与抗粥样斑块作用;两者复方在临床上主要用于骨性关节炎的防治,减慢软骨退化和缓解疼痛。

目前国内仅有氨基葡萄糖常规口服片剂和胶囊的生产与销售,尚无复方氨基葡萄糖制剂(氨基葡萄糖和硫酸软骨素)。

为此我们开发了复方氨基葡萄糖咀嚼片,为控制其质量,建立了测定氨基葡萄糖咀嚼片含量的高效液相色谱法。

1 材料和方法1.1 材料1.1.1 试药与试剂硫酸氨基葡萄糖氯化钠复盐(浙江海正药业股份有限公司);氨基葡萄糖对照品(中国药品生物制品鉴定所;批号:649200001);复方氨基葡萄糖咀嚼片(规格:氨基葡萄糖∶硫酸软骨素=250mg∶200mg),甲醇色谱纯,乙酸钠、醋酸及邻苯二甲醛等为分析纯。

1.1.2仪器高效液相色谱仪(Waters 600E泵控系统),WatersTM 486紫外检测器,Rheodge 7125进样器,HW色谱工作站。

反相高效液相色谱法测定复方硫酸氨基葡萄糖分散片的含量初立梅;徐健峰;石涛;徐康康【摘要】目的建立硫酸氨基葡萄糖含量测定的高效液相色谱(HPLC)法.方法样品柱前衍生化后采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法进行测定,色谱柱为Hypersil ODS柱(50 mm×4.6 mm,5μm),流动相为三水合乙酸钠水溶液-甲醇(90:10),用紫外检测器检测.结果方法的进样量线性范围为300～1 500 μg/Ml,r=0.999 7(n=5),平均回收率为102.68%,RSD=1.08%(n=9).结论此法简便、快速、准确,是测定硫酸氨基葡萄糖含量的有效方法.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2010(019)005【总页数】2页(P20-21)【关键词】衍生化;反相高效液相色谱法;硫酸氨基葡萄糖;含量【作者】初立梅;徐健峰;石涛;徐康康【作者单位】南京医科大学附属南京儿童医院,江苏,南京,210008;南京威尔曼药物研究所,江苏,南京,210009;东南大学医学院附属中大医院,江苏,南京,210009;南京医科大学附属南京儿童医院,江苏,南京,210008【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R977.6氨基葡萄糖被广泛地用于缓解骨关节病的症状，目前已上市的氨基葡萄糖类药品包括盐酸氨基葡萄糖、硫酸氨基葡萄糖氯化钾(钠)复盐和硫酸氨基葡萄糖。

Elson-Morgan法是这类物质含量的经典检测法[1]，虽经数十年的改进[2-3]，但操作仍显烦琐。

高效液相色谱（HPLC）法是近年来的研究热点。

美国药典（USP30）采用示差检测法进行氨基葡萄糖的分析检测，但此方法对环境温度要求较严苛，操作具有一定的局限性。

本研究采用柱前衍生化后，用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定硫酸氨基葡萄糖分散片的含量，旨在为氨基葡萄糖的含量测定提供更好的检测方法。

1 仪器与试药岛津高效液相色谱仪，包括LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外检测器，7725i进样阀，HW色谱工作站；BP 211Dsartorius分析天平。