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有色样品在发光细菌测试研究中的可能和局限性

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卢 布林 大学 （ 兰 ） 波
伊斯 坦布 尔技 术大 学（ 土耳其 ） 鲁 汶大 学（ 比利 时 ）
发光 细 菌 测试 以标 准 化形 式 已被
摘 要 ： 究了废 水净化 和新型 染料 开发 的新方 法。除废 水脱 色和 工业适 用性 外， 研 毒 性 测试也 必不可少 作为筛选 ， 光细 菌测试适 用于迅速评 价有 色样 品的毒 发
可自动进行颜色校正。
１２ 样 品制备 ．
光密 度 （ ９ ｍ） ４０ ｎ 必须 最 大 化至
Ｎ ａｅ 大 学（ ｅｐ ｌ 意大利 ）
Ｃ ｌｂ ｒｓｒ（ 利 时 ） ｅａ ｏ ｃｌ 比
Ｃ ｕ ｇ ａｓ Ｄ ｃｌｓ ｒ ．Ｊｎ ｈｎ ， ．Ｓｈｏｓ ｅ
Ｕ Ｚ莱比锡 （ 国） Ｆ 德
Ｃ ｒｎｙ ．Ｐｕ ｔ
Ｑ ｅｔ 中心 （ 国） ｕｓ ｒ ｏ 英
Ａ ａｏｚ ｌｏ ｚａ Ａ ｌ ｅｓａ ．Ｊｒｓ— ｋｌ ｋ ， ．Ｏｓ ｗｋ Ｗｉ ａ ｚ Ｋ ｅｉｄｌ ．Ｙ ｓａａ ｌ ｉ Ｅ ｎｕ ， ．Ｖ ｎｕｌ ．Ｅ ａｄ Ｓ ａｈｌ ｅ
酸性染浴（ 皮革）
菌株 ｒ ３４和ｉＳ３ ￣４ ｉ ３３ Ｇ
＾
一
直 接染浴
活性染浴
菌株 Ｐ３４和ｉ ３３ 活性污泥 Ｓ４ ｇ ３ ； Ｓ
ｊ 株 Ｐ３４ Ｇ ３ ； 性污泥 菌 Ｓ Ｊ Ｓ３ 活 ４ 和ｉ ３
到试 管 中 （ ａｈＬ ｎｅ公 司 Ｌ Ｐ Ｈ ｃ ａｇ Ｚ １７ 。 ８ ） 再经 １ ｉ 开 始 测量 。每 ５ｍｎ后
纺 梁 织 整
有色 样品在发光细菌测试研 究中的可能和局限性
Ｉ ￣ｅ ， ．Ｈ ￣ｅ ， ．Ｈ ｒｈ ｒ ．ＪｇｒＣ ａ ｒ Ｃ ｅｃ ｅ ｉ Ｈ ｄｏ ｘ 司（ 国） ｙｒｏ 公 ｔ 德
Ｇ ａ ｎａ Ｃ ｅｚｌ ．Ｓ ｎ ｉ， ．Ｐ ｚｅ ａ ｌ
Ｅ．Ｍｏｓ ｉ，Ｍ．Ｃ ｕ ｔ ｌｄｓ
有色样 品必须予 以颜色校正 ，
否 则可能 得到假 阳性 结 果 ， 因为 染
为有 效方法 ， 可 能 的情况 在
下被定向至标准化过程 ；
一
在不同欧洲国家（ 比利时、 如 爱尔
兰、 萄 牙、 国、 兰、 典、 葡 德 荷 瑞 英 国 ， ＳＡ ２０ ） Ｏ Ｐ Ｒ，０７ 的废 水框架 中 ，
一
必须能 够 在 其 实验 室 中 建 立 此 测 试 过程 。 发光 细 菌 测 试 被 选 为 生 态毒
的累积影响可在 没有任何确切 成
分或 个 别 物质 的 生 态毒 性 下 测 量 （ ｃ０ Ｅ ５ —— 浓 度 影 响 或 Ｉ５ —— ｃ０ 抑制 浓 度 ） 测试 基 于 一 个 事 实 ， 。 即毒 素 可 以 减 少 海 洋 细 菌 Ｖｂｉ ｉｒ ｏ ｉ ｅｉ ｆｈｒ的 正 常 发 光 。发 射 光 的 减 ｓ 少 与毒 素的浓 度成 正 比 ， 可 用光 并 度计 测量 。
关键词 ： 光细菌测试 ， 色样 品， 发 有 废水 ， 染料 ， 毒性测试
欧洲
工艺 ” 的框 架有 ３个主要 目标 ：
一
一
当只有 数量有限的样 品材
料可供使用时， 测试过程应几乎无
需材料 ；
生 物 技 术 脱 毒 和 纺 织 品废
一
性研究 的首个筛选测试。此 测试 用于环境样 品毒性研 究的生物测 试 。遵 照 ＩＯ １３— ２０ ） Ｓ １４２（ ０７ ，发
光细 菌 测试 被 标 准 化 地 应 用于 废 水 中 。 测 试 被 普 遍 公 认 ， 被 也 Ｏ Ｐ Ｒ工 作 组 “ 体 污 水 评 估 ” ＳＡ 整 （ Ａ 推荐 作 为废 水 研 究 的细 菌 ＷＥ ） 测试 （ Ｓ Ａ ２０ ，０５ ２ ０ ） Ｏ Ｐ Ｒ，００ ２０ ，０ ７ 。
１ １ 有 色样 品 ．
料的合 成。 为 此 ， 项 目估 量 工 作 包 中 ， 在 对 新开 发 的 废 水 净 化 就 染 料 所 涉 及（ 生态 ） 性 和 工 业质 量 的脱 毒 毒 及脱色 方 面 作 出 了 评 价 。包 括 选 择 合适 的 测试 方 法 测 试 染 料 和 废 水 的毒 性 及 生态 毒 性 。 因此 测 试 方法 必须满 足 以下要求 ：
废水样品
表 １ 废 水 样 品 的 检 测
酸性染浴（ 羊毛）
菌株 ｅ３４ Ｇ ３３Ｐ３２和 Ｐ３４活性污泥 ； 酶 ｓ４ ，Ｓ３ ， ３ ； Ｃ ７ ； ０ 漆
、
自动计算 吸附和发射 。在该项目 的框架中使用了光度计 “ Ｕ Ｉ ｏ Ｌ ＭＳ ｘ ｔ
３ ０ （ ａｈＬ ｎｅ公 司 Ｌ Ｖ ３ １ 。 ０ ” Ｈ ｃ ａ ｇ Ｐ ２ ）
性 ， 成 本 低廉 。 且
使用多年。该测试执行简单 ， 在简 短的指令后 ， 可迅速 、 经济地赋诸
实施 ， 且仅需少量样品（ ０ｍ 或 ≥１ ｌ ５ ｇ 。有色样品可利用颜色校 ０ｒ ＞ ａ
正试 管或 在 更 新 的 仪 器 中 通 过 综 合 自动 测量并 计算 吸附量 。
１ 方 法
发光 细 菌 测 试 为 生 物 测试 过 程 。该测试 过程 中 ， 内有毒 物 质 水
水脱色 ；
一
测试过程必须 适用于深色 染色样品的评价 ；
一
一
传统染料环 境友好型 生物
生 物技 术 的发 展 和 新 型 染
参 与 合 作 的 伙 伴 在 技 术 上
技术开 发 ；
当样品数量很大时 ， 测试过
料分子通过细菌可自身吸收发射 光。可以利 用相对繁琐的颜色校
正试 管手 动进 行颜 色 校 正 或用 仪
国 际纺织导 报 ２ ０ ０ ８年第 １ １期
程应快 速 、 济 ； 经
４ ８
纺 染 织 整
器中的颜色校正集成工具自动进
行颜 色 校 正。 因此 在 细 菌 发 光 被 测 定前 ， 品吸 收首 次在 细 菌发 射 样 光的波长 范围 （９ ｍ） ４０ｎ 内被测 量 ，

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发光细菌的研究和应用

发光细菌的研究和应用

发光细菌的研究和应用①杜宗军②　王祥红　李海峰　池振明(中国海洋大学海洋生命学院　青岛266003)摘　要　发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌,主要分布在海洋环境中。

发光细菌及其发光基因在环境监测等领域中具有广泛的应用价值。

本文综述了发光细菌的分类、发光机理及其应用。

关键词　发光细菌,分类,发光基因,环境监测1　发光细菌的分类发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌,这种可见荧光波长在450～490nm 之间,在黑暗处肉眼可见。

目前,全世界已命名的发光细菌有以下几种[1,2]:①属于异短杆菌属(Xenorhabdus )的有发光异短杆菌(Xenorhabdus l u 2mi nescens );②属于发光杆菌属(Photobacteri um )的有明亮发光杆菌(Photosbacteri um phosphoreum )和鳆发光杆菌(P.leiognathi );③属于希瓦氏菌属(S hew anella )的有羽田希瓦氏菌(S hew anella hanedai ),以前也曾经把它归类为交替单胞菌属(A lteromonas )的海氏交替单胞菌(A lteromonas hanedia );④属于弧菌属(V ibrio )的有哈维氏弧菌(V ibrio harveyi )、美丽弧菌生物型Ⅰ(V .splen 2di dus biotype Ⅰ)、费氏弧菌(V .f ischeri )、火神弧菌(V .logei )和东方弧菌(V .orientalis )。

霍乱弧菌(V .cholerae )和地中海弧菌(V .mediterranei )中的某些菌株有发光现象,曾有报道易北河弧菌(V .albensis )有发光现象,后将其重新分类归入霍乱弧菌(V .cholerae )。

另外,我国学者分离得到一株淡水发光细菌青海弧菌(V .qi ng 2haiensis )[3],目前还没有进入伯杰氏手册。

26443692_发光细菌法在煤化工废污水急性毒性评价中的应用

26443692_发光细菌法在煤化工废污水急性毒性评价中的应用

DOI ：10.19965/ki.iwt.2021-0434第42卷第1期2022年1月Vol.42No.1Jan.，2022工业水处理Industrial Water Treatment发光细菌法在煤化工废污水急性毒性评价中的应用宋张杨，韦昊，魏玥，孙晓懿，孙照东，焦瑞峰（黄河水资源保护科学研究院，河南郑州450004）[摘要]采用发光细菌法对某煤化工企业污水处理厂的进出水进行急性毒性测定。

研究结果表明，该化工企业污水处理厂进水15min 和30min 的急性毒性测试结果趋于一致，进水毒性较高，高毒性污水经污水处理厂的A/O+BAF 工艺处理后，出水的细菌急性毒性有较大程度降低。

分析结果表明，发光细菌抑制率与COD nb /COD 存在一定关系：即废污水中不可降解化合物需氧量（COD nb ）所占废污水总化学需氧量（COD ）的比例高时，细菌毒性实验的发光抑制率也高，即毒性越强。

［关键词］急性毒性；发光细菌法；毒性评价［中图分类号］X832［文献标识码］A［文章编号］1005-829X（2022）01-0158-05Application of bioluminescent bacteria test on evaluating toxicity of coal chemical enterprise wastewaterSONG Zhangyang ，WEI Hao ，WEI Yue ，SUN Xiaoyi ，SUN Zhaodong ，JIAO Ruifeng（Yellow River Water Resources Protection Institution ，Zhengzhou 450004，China ）Abstract ：The bioluminescent bacteria test was used to evaluate the toxicity of the incoming and the treated wastewa⁃ter of chemical enterprise.The results showed that the influent wastewater had high toxicity ，and the 15minutes acute toxicity test were consistent with 30minutes.High toxicity wastewater was largely reduced by A/O （pre⁃denitri⁃fication ）biochemical treatment+BAF process of wastewater treatment plant.The results showed that there was a cer⁃tain relationship between luminescent bacteria inhibition rate and COD nb /COD.It was indicated that the proportion of non ⁃biodegradable chemical oxygen demand （COD nb ）of the total chemical oxygen demand （COD ）was higher ，when the luminescent inhibition rate was higher ，and the water was more toxic.Key words ：acute toxicity ；bioluminescent bacteria test ；toxicity evaluation工业废水污染物种类繁多且成分复杂，不可避免存在无法处理或未降解完全的有毒成分，威胁环境和公共健康以及对污水处理厂的活性污泥体系造成致命冲击〔1-2〕。

生物急性毒性试验题库及答案

生物急性毒性试验题库及答案

急性毒性试验(一)发光细菌法分类号：B4-1主要内容水质急性毒性的测定发光细菌法(GB／T15441-1995)一、填空题1．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441—1995)，若须排除pH影响，应先将水样和氯化钠溶液的pH进行调整，具体为：含铜水样的pH调整为，含其他金属水样的pH调整为5.4，含有机化合物水样的pH调整为。

答案：4.5 7.02．《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T15441-1995)适用于、和实验室条件下可溶性化学物质的水质的急性毒性监测。

答案：工业废水纳污水体3．发光菌急性毒性试验中，样品的急性毒性水平可用相对发光度、或等来表示。

答案：参比毒物氯化汞浓度受测样品的EC50值4．淡水型的发光菌急性毒性试验中，样品的急性毒性水平则用相对发光度、和等来表示。

答案：参比毒物苯酚浓度受测样品的EC50值5．用青海弧菌Q67进行发光菌急性毒性测定时，环境温度在℃之间均可进行，但在测试过程中要求温度波动在±℃内。

答案：18～30 1二、判断题1．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441-1995)，用发光菌测定样品的毒性非常简便，冻干粉经复苏后即可用于进行样品的测定。

( )答案：错误正确答案为：冻干粉经复苏后，需经质量检验后方可用于进行样品的测定。

2．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T15441-1995)，若须测定包括pH影响在内的急性毒性，不应调节水样pH。

( )答案：正确3．在进行发光菌急性毒性试验中，对含有固体悬浮物的样品须离心或过滤去除，以免干扰测定。

( )答案：正确4．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441-1995)，氯化汞母液可在2～5℃冰箱里保存6个月，而氯化汞工作液在2～5℃冰箱里只能保存24h。

( )答案：正确5．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441-1995)，在测定有色样品时，先要进行颜色干扰的校正，计算出因颜色引起的发光量校正值。

《发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用(精)》

《发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用(精)》

《发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用(精)》第一篇：发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用（精）全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用张绮王克波赵人王争南京２１００２９南京医科大学公共卫生学院摘要。

发光细菌毒性试验已广泛应用于水质监测中。

本文主要概述了发光细菌的分类、发光细菌毒性检测原理及其在工业废水、城市污水及河流等水域的水质综合毒性评价的应用。

关键词：发光细菌；水质监测；综述随着工农业的不断发展，当今世界面临日益严重的环境污染问题，水污染尤为突出。

水中污染物种类繁多，性质复杂，且污染物之间可发生协同、相加或拮抗等复杂作用。

传统的水质检测虽能准确定量分析污染物中主要成分及含量，但不能检测水中各种污染物对环境和生物产生的综合毒性。

发光细菌毒性试验因其独特的生理特性，与现代光电检测手段结合具快速、灵敏、简便等特点，检测结果可反映水中污染物的综合毒性，比测定单一组分污染物更具实际意义。

１.发光细菌的分类及其生物毒性检测用商品种类发光细菌属革兰氏阴性、兼性厌氧菌，大小约０.４一１.Ｏ×１.０—２.５ｕｍ。

无孢子、荚膜，有端生鞭毛一根或数根，最适温度２０—３０＂Ｃ，ｐＨ６～９，ＮａＣｌ浓度３％，０.３％的甘油对发光反应有利。

其分类目前普遍采用美国学者ＥＢａｕｍａｎｎ的方法【ｌ’２１，见表１。

表１发光细菌的分类大多用明亮发光杆菌、鲳鱼发光杆菌及费氏弧菌作有毒有害物急性毒性效应的检测。

检测时测试体系中须加入较高浓度的盐以维持其正常生存，大量氯离子的存在会在相当程度上影响样品中一些污染物的生物可利用性和毒性顺序。

由我国学者分离的淡水型发光青海弧菌则具有较广泛的酸碱和温度适应性，可在蒸馏水中正常发光，使测试体系得到简化【引。

发光菌除用于急性毒性效应检测外，其发光菌经过处理以后的暗变异株在接触致突变物后可恢复一定的发光能力，通常可使暗变株的发光强度增加１０００倍左右。