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超高效液相色谱_串联质谱法快速测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留

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超高效液相色谱-串联质谱法快速测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留孙涛X,刘河疆,胡开峰,乔昆云,周俊(新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐830091)摘要:采用超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS P MS)技术建立了同时检测蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药多残留量的快速检测方法。

样品经乙腈提取,氨基固相萃取柱净化,Waters C18超高效液相色谱柱分离,进入电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测(MRM)分析,对液质分离条件和样品前处理条件进行了优化。

结果表明7种氨基甲酸酯类农药在2~500L g P L范围内线性良好(r\019986)。

在01005~0101mg P kg范围内,平均加标回收率在7214%~ 11211%之间;相对标准偏差小于13%。

该方法检出限范围为1131~3172L g P L,测定结果满足多残留农残的检测要求。

关键词:多残留量检测;氨基甲酸酯类;固相萃取;蔬菜;超高效液相色谱-串联质谱中图分类号:O657.63文献标识码:A文章编号:1000-0720(2010)04-087-05氨基甲酸酯类农药是一类广谱杀虫剂,其在蔬菜中的残留以及对人类健康和环境造成的毒害也越来越为人们所关注[1]。

目前报道的检测氨基甲酸酯类农药的方法主要有酶联免疫法和快速酶法[2],气相色谱法(GC)[3,4],气相色谱-质谱法(GC-MS)[5],液相色谱法(HPLC)[6,7],液相色谱-质谱法(HPLC-MS)[1,9~14]等法。

超高效液相色谱-串联质谱法由于使用了电喷雾离子源和超惯压液相色谱柱Acquity BE H C18,不仅大大提高了检测灵敏度,同时缩短了样品分析时间。

本实验研究了蔬菜中克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等7种氨基甲酸酯类农药残留分析的样品前处理方法和UPLC-MS P MS 检测条件,715min完成一次分析。

结果表明,本方法简便、灵敏度高,大大提高了蔬菜中多种氨基甲酸酯类农药残留检测工作效率。

1实验部分1.1仪器与试剂AC QUI TY UPLC超高效液相色谱仪、Micromass Quattro Premier XE三重四极杆串联质谱仪(美国Waters公司),配有电喷雾离子源(ESI)。

高速组织捣碎机(德国IKA公司);旋转浓缩仪(日本EYELA 公司);Mill-i Q超纯水设备(美国Millipore公司);漩涡混合器;固相萃取装置(美国Supelco公司); Waters NH2固相萃取柱(60mg P3mL)。

NaCl(AR,用前120e烘4h);乙酸铵、乙腈、C H2Cl2、甲醇等均为色谱纯;其他试剂均为分析纯,水为超纯水。

1.2标准工作液的配制将克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等标准品(1000mg P L,农业部农业环境监测总站)用甲醇配制成质量浓度为20mg P L的标准储备液,依据需要稀释成适当质量浓度的标准工作液,于4e下保存。

1.3色谱条件色谱柱:Acquity BE H C18(211mm@50mm, 117L m)。

柱温:40e,样品室温度:10e;进样)87)X收稿日期:2009-06-17;修订日期:2009-08-20作者简介:孙涛(1978-),男,实验师;E-mail:suntaotxy@量:10L L流动相:溶剂A为甲醇,溶剂B为5mmol P L乙酸胺溶液。

梯度洗脱程序如表1。

表1流动相梯度洗脱程序Tab.1Gradient elution program时间t P min流速P(mL P min)甲醇U P%乙酸铵(5mmol P L)<P%梯度变化曲线ini tial0.2020806 2.000.2020806 2.010.2020806 6.500.20604066.510.20208077.500.20208061.4质谱条件离子源:电喷雾离子源(ESI);毛细管电压: 3.00kV;离子源温度:110e;锥孔反吹气流量: 50L P h;脱溶剂气温度:350e;脱溶剂气流量: 650L P h。

碰撞气:氩气,流量:0.22mL P min,驻留时间50ms,多反应监测扫描模式(MRM)。

溶剂延迟时间(0~ 1.00min, 6.80~7.50min)其他质谱参数见表2。

1.5样品采集由蔬菜批发市场购买茄子、黄瓜、油白菜、芹菜、辣椒、豇豆、甘蓝、大白菜等各2kg,采用四分法均匀取样,匀浆处理。

做添加回收试验时,样品需用水清洗后再处理,做实际样品测定时,样品不经水洗,直接处理。

表2多反应监测扫描模式(MRM)的部分质谱参数Tab.2MRM conditions for the determ ination of seven carbamate pesticides农药分子量定性离子对m P z定量离子对m P z锥孔电压ECPP V碰撞气能量ECEP V保留时间tRTP min涕灭威亚砜206.27207.0>88.7207.0>131.7207.0>88.7171716181.22涕灭威砜222.26240.1>85.7240.1>147.8240.1>85.7141420141.42灭多威162.21162.9>105.7162.9>87.7162.9>87.7121210104.24三羟基克百威237.26220.0>134.8220.0>162.9220.0>162.9282813104.25涕灭威190.27208.0>88.8208.0>88.8920 5.25克百威221.26222.1>164.9222.1>122.7222.1>164.922229226.15甲萘威201.23202.0>144.8202.0>126.8202.0>144.8191913286.431.6样品处理提取:称取25g(精确到0.01g)匀浆后的样品,置于100mL烧杯中,加50mL乙腈,高速组织捣碎机中高速捣碎1min。

将捣碎后的样品过滤到100mL具塞量筒(量筒内已放入5g NaCl)内,收集滤液后具塞,剧烈振摇2min,静置30min(若大白菜、甘蓝等含水量少的样品出现乳化现象,两相分层不明显,可加入适量水,轻轻转摇量筒即可),待乙腈相与水相分层完全。

浓缩:准确吸取10mL上层乙腈相溶液于150mL平底浓缩瓶中,于40e水浴缓慢浓缩蒸发至近干。

净化:用2mL V(甲醇)B V(CH2Cl2)=5B95溶解样品,将其加到固相萃取柱(使用前先用4mL 上述甲醇:C H2Cl2液平衡该固相萃取柱)中。

用100mL浓缩瓶收集洗脱液,用5mL V(甲醇)B)88 )V(C H2Cl2)=5B95洗涤浓缩瓶,并将其注入固相萃取柱(重复2次),合并洗脱液,旋转浓缩仪40e 蒸发至近干,用V(甲醇)B V(水)=20B80准确定容至215mL,过0122L m滤膜,待测。

2结果与讨论2.1UPLC-MS P MS分离条件氨基甲酸酯类农药的分离多采用常规10~ 25cm C18或C8液相色谱柱,本实验采用Waters公司的超高压液相色谱柱Acquity B EH C18(2.1mm@ 50mm,1.7L m)。

试验了不同的梯度程序,灭多威和三羟基克百威(分别为4.24和4.25min出峰)未能得到有效分离,但由于采用了多反应监测(MRM)模式,避免了灭多威和三羟基克百威相互干扰。

对各项质谱条件进行了优化(见表2),使各被测物的响应值达到最佳。

2.2样品前处理条件蔬菜样本中含有叶绿素、叶黄素、花青素等植物色素,样本经乙腈提取后,提取液颜色较深,尤其是油白菜等叶菜类更加明显。

目测发现,采取弗罗里硅土小柱、C18固相萃取小柱和加入PSA 的方法都不能有效祛除提取液中色素。

本方法使用Waters NH2固相萃取柱,通过目测对比,祛除提取液色素效果较以上几种方法好;结合Waters UPLC-MS P MS仪器阀切换功能,使样品提取液在1min之前和6.8min之后切入废液池,能尽量减少色素等内源性杂质进入质谱系统造成的污染。

2.3线性关系、回收率、检出限2.3.1线性关系选取空白样本提取液配制系列基质标准工作溶液,绘制标准曲线进行定量,线性关系和相关系数见表3。

结果表明,7种氨基甲酸酯类农药在浓度范围2~500L g P L线性良好。

表3线性关系、相关系数Tab.3Linear equations,correlation coefficients农药线性范围Q P(L g P L)线性方程相关系数涕灭威亚砜2~500y=1.32@107Q+2.30@1040.9994涕灭威砜2~500y=1.38@107Q-9.38@1030.9996灭多威2~500y=1.45@107Q-9.65@1040.9991三羟基克百威2~500y=7.18@106Q-1.97@1030.9986涕灭威2~500y=8.77@106Q+4.56@1030.9992克百威2~500y=5.09@106Q+4.95@1030.9987甲萘威2~500y=7.71@106Q-5.29@1020.99912.3.2回收率对7种氨基甲酸酯杀虫剂分别用黄瓜、芹菜、豇豆、甘蓝等4种蔬菜按01005、0101mg P kg添加水平进行了加标回收试验,黄瓜、芹菜、豇豆、甘蓝的回收率及其相对标准偏差(RSD)见表4。

由表4可以看出:在两个添加水平上,7种氨基甲酸酯杀虫剂的平均回收率在7214%~11211%之间,RSD[13%,符合农药多残留检测的要求。

表4氨基甲酸酯杀虫剂及其代谢物添加回收率Tab.4The spiked recoveries of carbamate pesticides and metabolites(n=3)农药添加水平w P(mg P kg)黄瓜回收率P%RSD P%芹菜回收率P%RSD P%豇豆回收率P%RSD P%甘蓝回收率P%RSD P%涕灭威亚砜0.0050.1073.495.05.33.682.094.6133.289.092.32.53.589.493.44.85.5涕灭威砜0.0050.1096.695.31.22.490.192.50.91.597.898.15.84.195.085.47.81.7)89)续表4(Conti nued Tab.4)农药添加水平w P(mg P kg)黄瓜回收率P%RSD P%芹菜回收率P%RSD P%豇豆回收率P%RSD P%甘蓝回收率P%RSD P%灭多威0.0050.1098.690.66.84.296.195.93.52.172.482.1123.794.896.23.31.3三羟基克百威0.0050.10101.2102.18.33.286.790.90.60.383.595.16.13.086.694.34.05.0涕灭威0.0050.1092.8109.99.76.594.995.12.98.187.190.28.60.989.891.61.33.5克百威0.0050.10112.1110.46.69.8101.986.53.80.898.281.44.72.978.290.85.79.8甲萘威0.0050.1097.198.57.23.194.389.02.26.796.8104.36.81.985.790.84.88.72.3.3检出限按S P N=3计算,7种氨基甲酸酯杀虫剂的最低检出限分别为涕灭威亚砜1143L g P L,涕灭威砜1138L g P L,灭多威1131L g P L,3-羟基克百威2164L g P L,涕灭威2116L g P L,克百威3172L g P L,甲萘威2146L g P L。

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高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药

高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药

高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药作者：卫昊来源：《现代食品》 2018年第12期摘要：目的：采用HPLC 法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药。

方法：选取乙腈溶剂对样品内氨基甲酸酯类农药超生提取，借助HPLC 法对其进行定量分析。

结果：一定浓度范围内，质量浓度与峰面积有良好线性关系，相关系数0.992 ～ 0.992，加标回收率79% ～ 91%，RSD 为0.8% ～ 4.9%，方法检出限0.002 ～ 0.005 mg/kg。

结论：高效液相色谱法在蔬菜氨基甲酸酯类农药的测定十分适用，具有灵敏度高、准确性好的显著特点。

关键词：高效液相色谱法；氨基甲酸酯类农药；含量测定Abstract： Objective: To determine carbamic acid esters in vegetables by HPLC. Methods: Acetonitrilesolvent was used for quantitative analysis by HPLC. Results: Within a certain concentration range， there wasa good linear relationship between mass concentration and peak area， with correlation coefficient between0.992 ～0.992， marking recovery rate between 79% and 91%， RSD 0.8% ～ 4.9%， anddetection limitbetween 0.002mg/kg and 0.005mg/kg. Conclusion the method is sensitive， accurate and suitable for thedetermination of vegetable carbamate pesticides.Key words：HPLC; Carbamate pesticides; Content determination中图分类号：TS255.7HPLC 法具有较高灵敏度和较好重现性，广泛应用于氨基甲酸酯类农药检测中[1]。

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法1. 介绍随着人们对食品安全的重视，对农药残留的检测也愈发关注。

其中，果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法备受关注。

本文将详细探讨果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法，包括常用的仪器设备、样品提取和分析方法等。

2. 仪器设备果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测通常涉及到一些常见的仪器设备，包括质谱仪、气相色谱仪和液相色谱仪等。

2.1 质谱仪质谱仪是一种常用的仪器设备，用于检测物质的质量和分子结构。

在果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测中，质谱仪可用于定性和定量分析。

常见的质谱仪包括气质联用质谱仪（GC-MS）和液质联用质谱仪（LC-MS）。

2.2 气相色谱仪气相色谱仪是一种常见的分析仪器，用于分离和检测挥发性物质。

在果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测中，气相色谱仪常与质谱仪联用，用于分离和定量目标农药的残留量。

2.3 液相色谱仪液相色谱仪是一种通过样品的溶液进行分析的仪器。

在果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测中，液相色谱仪可用于对非挥发性农药的分离和定量。

3. 样品提取方法样品提取是果蔬中氨基甲酸酯类农药残留检测的关键步骤之一。

常用的样品提取方法有溶剂萃取、固相萃取和超声萃取等。

3.1 溶剂萃取溶剂萃取是一种简单而有效的样品提取方法。

该方法通过将样品与合适的溶剂混合，使目标农药从样品中萃取出来。

常用的溶剂包括乙醇、乙酸乙酯和甲醇等。

3.2 固相萃取固相萃取是一种常用的样品提取方法，它利用了固相萃取柱上的固定相材料对目标农药进行吸附。

通过调节沿固定相材料上物质的移动速度，可以将目标物质从样品中分离出来。

3.3 超声萃取超声萃取是一种高效的样品提取方法。

该方法利用超声波的机械作用和热量效应，加速目标农药从固体样品或液体样品中释放出来。

超声萃取具有提取效率高、操作简单等优点。

4. 分析方法果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的分析方法通常采用质谱联用技术，结合气相色谱或液相色谱进行分析。

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法

果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法果蔬中氨基甲酸酯类农药残留的检测方法导言：近年来，随着人们对食品安全的关注度不断提高，农药残留成为引起公众担忧的一个重要问题。

特别是在果蔬生产和消费中，对农药残留的控制变得尤为重要。

氨基甲酸酯类农药是一类常见的农业药剂，其中包含许多广泛应用于果蔬种植的农药。

及时有效地检测果蔬中的氨基甲酸酯类农药残留成为了确保食品安全的重要环节。

本文将介绍几种常见的氨基甲酸酯类农药残留检测方法，包括色谱法、质谱法以及免疫分析法。

一、色谱法色谱法是一种常用的氨基甲酸酯类农药残留检测方法。

它基于分子在不同条件下吸附和解吸的特性，通过分离和定量目标农药。

常见的色谱法包括气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。

气相色谱法适用于气态或易挥发的样品，而液相色谱法适用于液体或固体样品。

气相色谱法的原理是通过将样品蒸发在固态柱上，通过升温程序使农药挥发到气相，并经过柱的分离与检测，从而实现目标农药残留的定量测定。

液相色谱法则是将样品溶解在合适的溶剂中，经过柱的分离与检测，即可得到农药残留的浓度值。

二、质谱法质谱法是一种高灵敏度、高选择性的农药残留检测方法。

常见的质谱法包括质谱-质谱联用技术（MS/MS）和高分辨质谱（HR-MS）。

这些方法结合了质量分析的高分辨率和质谱的高灵敏度，可用于低浓度农药残留的定量与鉴定。

质谱-质谱联用技术通过两次质谱扫描，即前体离子扫描和产品离子扫描，可提高农药残留分析的选择性和灵敏度。

高分辨质谱依赖于高能量碰撞诱导解离（HCD）的离子源，能够提供更准确的质谱数据，并用于农药残留分析中。

三、免疫分析法免疫分析法是一种快速、灵敏度高的农药残留检测方法。

它基于抗原和抗体之间的特异性结合反应，通过荧光、酶标记等检测方法来定量分析农药残留。

免疫分析法的优势在于快速高效，样品处理简便，不需要复杂的仪器设备，且具有较低的检测限。

然而，与色谱法和质谱法相比，免疫分析法对样品基质的影响较为敏感，有时可能会导致误检或漏检。

高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的方法与应用

高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的方法与应用

农业资讯NONGYEZIXUN　农业信息高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的　方法与应用张亚萍（玉溪市江川区农产品质量安全检测站，云南玉溪 652600）摘 要 为探讨如何利用高效液相色谱法来测定氨基甲酸酯类农药的残留，对市场上的蔬菜进行随机抽样，使用配荧光检测器及柱后衍生系统的高效液相色谱法来测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药的残留，并对每一种农药进行3种不同浓度的回收率试验。

结果表明：蔬菜中农药残留回收率在74.6%～107.6%，其精密度控制在10%以内，可使用高效液相色谱法来测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留，这种方法适用于大白菜、黄瓜、辣椒、芹菜等氨基甲酸酯类农药残留分析。

关键词 氨基甲酸酯；农药残留；高效液相色谱氨基甲酸酯类农药是一种良好的杀虫农药，这种农药在使用过程中，有高效、低毒、低残留的效果，经常被用在果蔬杀虫上，现已成为果蔬及粮食主要的杀虫剂。

但由于农户环保意识以及相关部门的管理意识不够，这类农药仍存在一些不合理使用情况，且这些不合理的使用也给当地的生态跟食品安全造成了一定影响，因此对蔬菜中的氨基甲酸酯类农药进行检测十分必要。

现如今可以完成氨基甲酸酯类农药残留检测的方法主要包括高效液相色谱法、质谱法以及液相柱后衍生法等，其中酶抑制法存在着局限性，但可以将其作为仪器分析法进行补充[1]。

高效液相色谱法在检测过程中，比较常用的检测器是紫外检测器，该检测器的灵敏度不够高，而荧光检测器的灵敏度较高，操作起来也较为简便，在众多分析方法中比较突出。

基于此，主要以我国农业行业标准——蔬菜和水果中有机磷、有机氮、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定作为参考，使用配荧光检测器以及柱后衍生系统的高效液相色谱仪测定随机抽取的蔬菜中的7种氨基甲酸酯类农药残留量，对蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留测定技术进行探讨。

１　材料与方法１．１　材料与试剂　主要的材料为市面上销售的白菜、黄瓜以及芹菜；主要的试剂包括甲酯、色谱纯、二氯甲烷、醋酸氨、氨基甲酸酯类标准储备液。