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高效液相色谱法习题一、思考题1．从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2．液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处? 3．在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?4．液相色谱有几种类型? 5．液-液分配色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？6．液-固分配色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？7．化学键合色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？8．离子交换色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？9．离子对色谱的保留机理是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么?10．空间排阻色谱的保留机理是什么？这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么？11．在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱？12．何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？13．何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱？试述它们的基本原理14．何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处？16．以液相色谱进行制备有什么优点？17．在毛细管中实现电泳分离有什么优点？18．试述CZE的基本原理19．试述CGE的基本原理20．试述MECC的基本原理二、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3．组分在固定相中的质量为MA(g)，在流动相中的质量为MB（g），而该组分在固定相中的浓度为CA（g·mL －1），在流动相中浓度为CB（g·mL－1），则此组分的分配系数是( )。
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？A、0.5μmB、0.45mC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为（）A、甲醇/水（83/17）B、甲醇/水（57/43）C、正庚烷/异丙醇（93/7）D、乙腈/水（1.5/98.5）6. 下列用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（）范围内。
A 、10～30cmB、20～50mC 、1～2mD、2～5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力（）A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行（）的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是（）A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中，常常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱分析，应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（）A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（）A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是（）A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（）A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用（）水A．国标规定的一级、二级去离子水B．国标规定的三级水C．不含有机物的蒸馏水D．无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外－可见分光光度计完全不同的部件是（）A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1. 液相色谱分析时，增大流动相流速有利于提高柱效能。
高效液相色谱试题高效液相色谱试题部门姓名得分一、选择题1.在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）A.分配色谱法B排阻色谱法C.离子交换色谱法D.吸附色谱法答案：D.吸附色谱法2.在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A.检测器B.记录器C.色谱柱D.进样器答案：C.色谱柱3.液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？（）A.0.5μmB.0.45μm。
C.0.6μmD.0.55μm答案：B.0.45μm4.在高固定液含量色谱柱的情况下，为了使柱效能提高，可选用()A.适当提高柱温B.增加固定液含量C.增大载体颗粒直径D.增加柱答案：C.增大载体颗粒直径5.在液相色谱中,为了提高分离效率,缩短分析时间,应采用的装置是()A.高压泵B.梯度淋洗C.贮液器D.加温答案：B.梯度淋洗6.下列用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A.紫外检测器B.荧光检测器C.蒸发光散射检测器D.示差折光检测器答案：C.蒸发光散射检测器7.在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在( )范围内。
A.10-30cmB.20-50cmC.1-2cmD.2-5cm答案：B.20-50cm8.在液相色谱中,为了获得较高柱效能,常用的色谱柱是()A.直形填充柱B.毛细管柱C.Ｕ形柱D.螺旋形柱答案：A.直形填充柱9.纸色谱的分离原理,与下列哪种方法相似？()A.毛细管扩散作用B.萃取分离C.液-液离子交换D.液-固吸附答案：D.液-固吸附10.高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A.恒温箱B.进样装置C.程序升温D.梯度淋洗装置答案：B.进样装置二、填空题1.高效液相色谱仪一般由泵、进样器、色谱柱、检测器、记录器五部分组成。
2.流动相使用前必须先过滤。
3.系统适用性试验包括灵敏度、分离度、线性范围、重复性四个指标。
4.梯度洗脱有两种实现方式：程序梯度洗脱和混合梯度洗脱。
三、名词解释1.分离度：分离度是指在色谱柱中两个相邻峰之间的距离，即在色谱柱中分离两个化合物的能力。
高效液相色谱习题一、填空题1.高效液相色谱分析是将流动相用高压泵输送，使压力高达 5 MPa以上，并采用新型的化学键合固定相，是分离效率很高的液相色谱法。
2.高效液相色谱法的特点是分离性能高、分析速度快、检测器灵敏度高、应用范围广。
3.高效液相色谱法和气相色谱法的共同之处是分离功能、分析功能、在线分析。
4.高效液相色谱分析根据分离机理不同可分为四种类型，即液固色谱、液液色谱、键合相色谱、凝胶色谱。
5.高效液相色谱中的液一液分配色谱采用的新型固定相叫化学键合相，它是利用化学方法将固定液官能团键合在载体表面上的。
6.通常把固定相极性大于流动相极性的一类色谱称为正相色谱。
反之称为反相色谱。
7.高效液相色谱仪通常由储液器、输液泵、梯度淋洗器、进样器、色谱柱、检测器、色谱工作站七部分组成。
8.高效液相色谱仪中使用最广泛的检测器为紫外检测器，另外还有折光检测器、荧光检测器等等。
9.高效液相色谱主要用于分析沸点高的、分子量大的、受热易分解的以及具有生理活性物质的分析。
二、判断题√、√、⨯、⨯、√、√、⨯、√、⨯、√、⨯、√、√、⨯、√、⨯、⨯、√、⨯、√、√、⨯、⨯、⨯、⨯、⨯、⨯、⨯、√、⨯1．液一液色谱流动相与被分离物质相互作用，流动相极性的微小变化，都会使组分的保留值出现较大的改变。
（√）2．利用离子交换剂作固定相的色谱法称为离子交换色谱法。
（√）3．紫外吸收检测器是离子交换色谱法通用型检测器。
（×）4．检测器性能好坏将对组分分离产生直接影响。
（×）5．高效液相色谱适用于大分子，热不稳定及生物试样的分析。
（√）6．高效液相色谱中通常采用调节分离温度和流动相流速来改善分离效果。
（×）7．键合固定相具有机械性能稳定，可使用小粒度固定相和高柱压来实现快速分离。
（√）8．在液相色谱中为避免固定相的流失，流动相与固定相的极性差别越大越好。
（×）9．正相分配色谱的流动相极性大于固定相极性。
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1、在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2、在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3、液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径得过滤膜？A、0、5 PmB、0、45 AmC、0、6 p mD、0、55 p ra4、在液相色谱中，为了改变色谱柱得选择性，可以进行如下哪些操作？A、改变流动相得种类或柱子B、改变固定相得种类或柱长C、改变固楚相得种类与流动相得种类D、改变填料得粒度与柱长5、一般评价烷基键合相色谱柱时所用得流动相为（）A、甲醇/水（83/17）B、甲醇/水（57/43）C、正庚烷/异丙醇（93/7）D、乙睛/水（1、5/98、5）6、下列用于高效液相色谱得检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7、在高效液相色谱中，色谱柱得长度一般在（）范用内。
A、10"*30cmB、20〜50inC、l~2niD、2〜5m8、在液相色谱中，某组分得保留值大小实际反映了哪些部分得分子间作用力（）A、组分与流动相B、组分与固能相C、组分与流动相打固楚相D、组分与组分9、在液相色谱中，为了改变柱子得选择性，可以进行（）得操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相得流速10、液相色谱中通用型检测器就是（）A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11、在环保分析中，常常要监测水中多环芳婭，如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、吸收检测器12、在液相色谱法中，提高柱效最有效得途径就是（）A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13、在液相色谱中，不会显著影响分离效果得就是（）A、改变固楚相种类B、改变流动相流速17、C 、改变流动相配比D 、改变流动相种类 14、 不就是高液相色谱仪中得检测器就是（）A 、紫外吸收检测器B 、红外检测器C 、差示折光检测D 、电导检测器 15、 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A 、恒温箱B 、进样装置C 、程序升温D 、梯度淋洗装置 16、 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳楚得速度流过色谱柱得部件就是（）A 、贮液器B 、输液泵C 、检测器D 、温控装置17、 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液得配制一般使用（）水 A.国标规立得一级、二级去离子水B.国标规宦得三级水C.不含有机物得蒸水D.无铅（无重金属）水高效液相色谱仪与普通紫外一可见分光光度计完全不同得部件就是（）判断题：液相色谱分析时，增大流动相流速有利于提高柱效能。
高效液相色谱习题一：选择题1.在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（D ）A.提高柱温B.降低板高C.降低流动相流速D.减小填料粒度2.在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进下列那种操作（C ）A. 改变固定液的种类B.改变栽气和固定液的种类C. 改变色谱柱温D.改变固定液的种类和色谱柱温3.在液相色谱中，范第姆特方程中的哪一项对柱效的影响可以忽略（ B ）A.涡流扩散项B.分子扩散项C.流动区域的流动相传质阻力D.停滞区域的流动相传质阻力4. 在高固定液含量色谱柱的情况下，为了使柱效能提高，可选用 (A )A.适当提高柱温B.增加固定液含量C.增大载体颗粒直径D.增加柱长5. 在液相色谱中, 为了提高分离效率, 缩短分析时间, 应采用的装置是 ( B )A. 高压泵B. 梯度淋洗C. 贮液器D. 加温7. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力？（ C ）A. 组分与流动相B. 组分与固定相C. 组分与流动相和固定相D. 组分与组分8. 在液相色谱中, 通用型检测器是 (A )A.示差折光检测器B.极谱检测器C.荧光检测器D.电化学检测器9. 在液相色谱中, 为了获得较高柱效能, 常用的色谱柱是 (A )A.直形填充柱B.毛细管柱C.Ｕ形柱D.螺旋形柱10. 纸色谱的分离原理, 与下列哪种方法相似？ ( B)A.毛细管扩散作用B.萃取分离C.液-液离子交换D.液-固吸附二：简答题1. 在液相色谱中，色谱柱能在室温下工作，不需恒温的原因是什么？答：由于组分在液-液两相的分配系数随温度的变化较小，因此液相色谱柱不需恒温三：计算题1. 一液体混合物中，含有苯、甲苯、邻二甲苯、对二甲苯。
用气相色谱法，以热导池为检测器进行定量，苯的峰面积为1.26 cm2。
甲苯为0.95 cm2，邻二甲苯为2.55 cm2，对二甲苯为1.04 cm2。
求各组分的百分含量？（重量校正因子：苯0.780，甲苯0.794，邻二甲苯0.840．对二甲苯0.812）。
高效液相色谱法习题一、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是 ;A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要是因为 ;A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相粘度较大D 柱温低3．分离糖类化合物,选以下的柱子最合适;A ODS柱B 硅胶柱C 氨基键合相柱D 氰基键合相柱4．在液相色谱中,梯度洗脱适用于分离 ;A 异构体B 沸点相近,官能团相同的化合物C 沸点相差大的试样D 极性变化范围宽的试样5．在液相色谱中,提高色谱柱柱效的最有效途径是 ;A 减小填料粒度B 适当升高柱温C 降低流动相的流速D 增大流动相的流速6．如果样品比较复杂,相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳定,要准确测量保留值有一定困难时,可选择以下方法定性;A 利用相对保留值定性B 加人已知物增加峰高的办法定性C 利用文献保留值数据定性D 与化学方法配合进行定性7．液相色谱中通用型检测器是 ;A 紫外吸收检测器B 示差折光检测器C 热导池检测器D 荧光检测器8．离子色谱的主要特点是 ;A 高压、高效、高速、高分辨率、高灵敏度B 采用柱后抑制技术和电导检测,特别适合离子分析C 采用了阴离子专用检测器,对阴离子分析有高灵敏度D 采用紫外检测器合柱压衍生装置,对离子分析有高效9．高压、高效、高速是现代液相色谱的特点,采用高压主要是由于 ;A 可加快流速,缩短分析时间B 高压可使分离效率显着提高C 采用了细粒度固定相所致D 采用了填充毛细管柱10.与气相色谱相比,在液相色谱中 ;A 分子扩散项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成B 涡流扩散项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成C 传质阻力项很小,可忽略不计,速率方程式由两项构成D 速率方程式同样由三项构成,两者相同11．在液相色谱中,下列检测器可在获得色谱流出曲线的基础上,同时获得被分离组分的三维彩色图形的是 ;A 光电二极管阵列检测器B 示差折光检测器C 荧光检测器D 电化学检测器12．不同类型的有机物,在极性吸附剂上的保留顺序是 ;A 饱和烃、烯烃、芳烃、醚B 醚、烯烃、芳烃、饱和烃C 烯烃、醚、饱和烃、芳烃D 醚、芳烃、烯烃、饱和烃13．液相色谱中不影响色谱峰扩展的因素是 ;A 涡流扩散项B 分子扩散项C 传质扩散项D 柱压效应14．在液相色谱中,常用作固定相又可用作键合相基体的物质是 ;A 分子筛B 硅胶C 氧化铝D 活性炭15．在以硅胶为固定相的吸附柱色谱中,错误的说法是 ;A 组分的极性越强,被固定相吸附的作用越强B 物质的相对分子质量越大,越有利于吸附C 流动相的极性越强,组分越容易被固定相所吸附D 吸附剂的活度系数越小,对组分的吸附力越大二、问答题1．什么叫正相色谱什么叫反相色谱各适用于分离哪些化合物2. 简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点;高效液项色谱法习题解答一、选择题1 B2 C3 C4 D5 A6 B7 B8 B9 C 10 A 11 A 12 A 13 B 14 B 15 D二、问答题1.答：正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的色谱法;用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质,用于含有不同官能团物质的分离;反相色谱法：流动相极性大于固定相极性的色谱法;用于分离非极性至中等极性的分子型化合物;2.答：相同点：均为高效、高速、高选择性的色谱方法,兼具分离和分析功能,均可以在线检测;不同点：。
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中，按别离原理分类，液固色谱法属于〔〕。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在〔〕中被别离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？A、B、C、D、4. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为〔〕A、甲醇/水〔83/17〕B、甲醇/水〔57/43〕C、正庚烷/异丙醇〔93/7〕D、乙腈/水〔〕6. 以下用于高效液相色谱的检测器，〔〕检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在〔〕范围内。
A 、10～30cmB、20～50mC 、1～2mD、2～5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力〔〕A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行〔〕的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是〔〕A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中，常常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱分析，应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是〔〕A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中，不会显著影响别离效果的是〔〕A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是〔〕A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了〔〕A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是〔〕A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用〔〕水A．国标规定的一级、二级去离子水B．国标规定的三级水C．不含有机物的蒸馏水D．无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外－可见分光光度计完全不同的部件是〔〕A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 以下哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1. 液相色谱分析时，增大流动相流速有利于提高柱效能。
高效液相色谱仪试卷满分100分一、填空题共52分,每空2分1、高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成.2、拖尾因子T用于评价色谱峰的对称性,除另有规定外,T应在0.95-1.05之间.3、梯度洗脱装置分为两类：一类是外梯度装置又称低压梯度流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可.安捷伦液相,另一类是内梯度装置高压梯度.将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度岛津液相.4、如色谱柱需长期保存,反相柱可以贮存于甲醇或乙腈中,正相柱可以贮存于经脱水处理后的正己烷中.保存时要旋紧柱堵头防止有机溶剂挥发导致色谱柱填料干裂、脱落.5、气泡空气会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡.6、高效液相色谱进样针：应选用液相专用的平头针.流动相pH值应控制在2-8之间.7、将吸滤头分别放入脱气后的流动相中,旋转排液阀,排液5min；排液结束后应先更改低流速再旋紧排液阀,避免压力过大冲坏色谱柱.8、以硅胶为载体的键合固定相的使用温度通常不超过40°C,为改善分离效果可适当提高色谱柱的使用温度,但不宜超过60°C.9、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱.若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱.组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反.10、高效液相色谱法常用的检测器类型有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、光电二极管阵列检测器等.任意写4种二、名词解析共16分,每空4分1、基线：是在操作条件下,没有组分流出时的流出曲线.2、保留时间：是从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔.3、色谱流出曲线：是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线,又称为色谱图4、梯度洗脱：就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的.三、选择题共16分,每空2分1、当流动相使用含有缓冲盐时,关机之前应对流路如何进行的清洗BA、不需要清洗,直接关机B、先用10%甲醇水冲60min,再用100%甲醇冲洗30min以上,最后进行关机C、先用100%甲醇冲洗60min以上,再用10%甲醇水冲30min后关机D、使用90%甲醇冲洗60min后关机2、在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是DA、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度3、在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是BA、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置4、在液相色谱中,某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力CA、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分5、下列用于高效液相色谱的检测器,D检测器不能使用梯度洗脱.A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器6、液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜BA、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm7、在液相色谱中,不会显着影响分离效果的是BA、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类8、在高效液相色谱流程中,试样混合物在C中被分离.A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器四、简答题共16分,每空8分1、反相色谱柱的冲洗方法.对于反相色谱柱,如使用缓冲液或含盐溶液作为流动性,在试验结束后,应用10倍柱体积如150mm柱长,约15ml的低浓度甲醇/乙腈-水溶液10%-20%冲洗,使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出,再用较高浓度的甲醇/乙腈-水溶液50%冲洗,最后用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液80%-100%冲洗,使色谱柱中的强吸附物质冲洗出来.如流动相中没有盐溶液,只是甲醇/乙腈-水溶液小于80%,可直接用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液80%-100%冲洗.2、为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气若流动相中所含有的空气不除去,则流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩,流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来,造成检测器噪声增大,使基线不稳,仪器不能正常工作,这在梯度洗脱时尤其突出.。
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？A、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm4. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为（）A、甲醇/水（83/17）B、甲醇/水（57/43）C、正庚烷/异丙醇（93/7）D、乙腈/水（1.5/98.5）6. 下列用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（）范围内。
A 、10～30cm B、20～50m C 、1～2m D、2～5m8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力（）A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行（）的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是（）A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11. 在环保分析中，常常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱分析，应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（）A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（）A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是（）A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（）A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用（）水A．国标规定的一级、二级去离子水B．国标规定的三级水C．不含有机物的蒸馏水D．无铅(无重金属)水18. 高效液相色谱仪与普通紫外－可见分光光度计完全不同的部件是（）A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19. 下列哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20. 高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1. 液相色谱分析时，增大流动相流速有利于提高柱效能。
高效液相色谱法习题一、思考题1．从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2．液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处 3．在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些其中最有效的途径是什么4．液相色谱有几种类型 5．液-液分配色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么6．液-固分配色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么7．化学键合色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么8．离子交换色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么9．离子对色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质是什么10．空间排阻色谱的保留机理是什么这种类型的色谱在分析应用中，最适宜分离的物质是什么11．在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱12．何谓化学键合固定相它有什么突出的优点13．何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱试述它们的基本原理14．何谓梯度洗提它与气相色谱中的程序升温有何异同之处15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处16．以液相色谱进行制备有什么优点17．在毛细管中实现电泳分离有什么优点18．试述CZE的基本原理19．试述CGE的基本原理20．试述MECC的基本原理二、选择题1．液相色谱适宜的分析对象是（）。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（）。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3．组分在固定相中的质量为MA(g)，在流动相中的质量为MB（g），而该组分在固定相中的浓度为CA（g·mL －1），在流动相中浓度为CB（g·mL－1），则此组分的分配系数是( )。
第二十章高效液相色谱法思考题和习题1．简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。
相同点：均为高效、高速、高选择性的色谱方法，兼具分离和分析功能，均可以在线检测不同点：分析对象及范围流动相的选择操作条件GC能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，占有机物的20%流动相为有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小加温常压操作HPLC溶解后能制成溶液的样品，高沸点、高分子量、难气化、离子型的稳定或不稳定化合物，占有机物的80%流动相为液体或各种液体的混合。
它除了起运载作用外，还可通过溶剂来控制和改进分离。
室温、高压下进行2．何谓化学键合相？常用的化学键合相有哪几种类型？分别用于哪些液相色谱法中？采用化学反应的方法将固定液键合在载体表面上，所形成的填料称为化学键合相。
优点是使用过程不流失，化学性能稳定，热稳定性好，适于作梯度淋洗。
目前常用的Si-O-Si-C型键合相，按极性分为非极性，中等极性与极性三类。
①非极性键合相：常见如ODS键合相，既有分配又有吸附作用，用途非常广泛，用于分析非极性或弱极性化合物；②中等圾性键合相：常见的有醚基键合相，这种键合相可作正相或反相色谱的固定相，视流动相的极性而定：③极性键合相：常用氨基、氰基键合相，用作正相色谱的固定相，氨基键合相还是分离糖类最常用的固定相。
3．什么叫正相色谱？什么叫反相色谱？各适用于分离哪些化合物？正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的色谱法。
用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质，用于含有不同官能团物质的分离。
反相色谱法：流动相极性大于固定相极性的色谱法。
用于分离非极性至中等极性的分子型化合物。
4．简述反相键合相色谱法的分离机制。
典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。
固定相，常用十八烷基（ODS或C18）键合相；流动相常用甲醇-水或乙腈-水。
非典型反相色谱系统，用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。
高效液相色谱习题及参考答案一、单项选择题1、在液相色谱法中，按分离原理分类,液固色谱法属于（）。
A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2、在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3、液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径得过滤膜？A、0、5μmB、OX 45mC、0、6μmD、0、55μm4、在液相色谱中，为了改变色谱柱得选择性,可以进行如下哪些操作?A、改变流动相得种类或柱子B、改变固定相得种类或柱长C、改变固定相得种类与流动相得种类D、改变填料得粒度与柱长5、一般评价烷基键合相色谱柱时所用得流动相为（）B、甲醇冰（57/43）C、正庚烷/异丙醇（93/7）D、乙月青冰（1、5/98、5）6、下列用于高效液相色谱得检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7、在高效液相色谱中，色谱柱得长度一般在（）范Ii内。
A、10~30cmB、20 〜50mC、 1 〜2mD、2〜5m8、在液相色谱中，某组分得保留值大小实际反映了哪些部分得分子间作用力（）A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相与固定相D、组分与组分9、在液相色谱中，为了改变柱子得选择性,可以进行（）得操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相得流速10、液相色谱中通用型检测器就是（）A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11、在环保分析中，常常要监测水中多环芳桂，如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外吸收检测器12、在液相色谱法中,提高柱效最有效得途径就是（）A、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13、在液相色谱中，不会显著影响分离效果得就是（）A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14、不就是高液相色谱仪中得检测器就是（）A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15、高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（）A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16、在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定得速度流过色谱柱得部件就是（）A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17、高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液得配制一般使用（）水B. 国标规定得三级水C. 不含有机物得蒸镭水D. 无铅（无重金属）水18、高效液相色谱仪与普通紫外一可见分光光度计完全不同得部件就是（）A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19、下列哪种就是高效液相色谱仪得通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20、高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1、液相色谱分析时,增大流动相流速有利于提高柱效能。
高效液相色谱习题及参照答案一、单项选择题1. 在液相色谱法中，按分别原理分类，液固色谱法属于（）。
A、分派色谱法B、排阻色谱法C、离子互换色谱法D、吸附色谱法 2. 在高效液相色谱流程中，试样混淆物在（）中被分别。
A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3.液相色谱流动相过滤一定使用何种粒径的过滤膜？A、μ mB、μ mC、μ mD、μ m4.在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，能够进行以下哪些操作？A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类D、改变填料的粒度和柱长5. 一般评论烷基键合相色谱柱时所用的流动相为（）A、甲醇 / 水（ 83/17 ）B、甲醇 / 水（ 57/43 ）C、正庚烷 / 异丙醇（ 93/7 ）D、乙腈 / 水（）6. 以下用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不可以使用梯度洗脱。
A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（）范围内。
A 、10～ 30cm B、 20～ 50m C 、 1～2m D、 2～ 5m8. 在液相色谱中 , 某组分的保存值大小实质反应了哪些部分的分子间作使劲（）A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，能够进行（）的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D、改变流动相的流速10. 液相色谱中通用型检测器是（）A、紫外汲取检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11.在环保剖析中，经常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱剖析，应采用下述哪一种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、紫外汲取检测器12. 在液相色谱法中，提升柱效最有效的门路是（）A、提升柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度13. 在液相色谱中，不会明显影响分别成效的是（）A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相当比D、改变流动相种类14. 不是高液相色谱仪中的检测器是（）A、紫外汲取检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15. 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增添了（）A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳固的速度流过色谱柱的零件是（）A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17. 高效液相色谱、原子汲取剖析用标准溶液的配制一般使用（）水A．国标规定的一级、二级去离子水B．国标规定的三级水C．不含有机物的蒸馏水D．无铅 (无重金属 )水18. 高效液相色谱仪与一般紫外－可见分光光度计完整不一样的零件是（）A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19.以下哪一种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20.高效液相色谱仪中高压输液系统不包含A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1.液相色谱剖析时，增大流动相流速有益于提升柱效能。
高效液相色谱基础知识测试一、填空题1、我们公司所用的高效液相色谱仪的品牌是：安捷伦1260 。
高效气相色谱仪的型号是安捷伦7890 。
2、高效液相色谱系统由恒温器、四元泵、进样器、色谱柱、检测器和分析系统组成。
3、本公司所用的高效液相，为防止压力过大导致柱内填料空间发生变化，影响分离效果。
一般采用C18（十八烷基硅烷键合硅胶）填料的色谱柱，最高工作压力为400 bar。
4、高效液相根据流动相与固定相极性分为：正相高效液相色谱和反相高效液相色谱。
5、开机步骤：接通电源，依次开启不间断电源、真空脱气机、四元泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。
6、高效液相的维护：最后一次进样完成后，应用流动相冲洗20分钟，以保证洗脱完全，若流动相中含有无机盐类，应用高纯水冲洗30分钟，。
7、进样器的保养：每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。
8、气相色谱仪常用的检测器有热导检测器，氢火焰检测器，电子捕获检测器和火焰光度检测器。
二、选择题1.在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（D ）A.提高柱温B.降低板高C.降低流动相流速D.减小填料粒度2. 在高固定液含量色谱柱的情况下，为了使柱效能提高，可选用( A )A.适当提高柱温B.增加固定液含量C.增大载体颗粒直径D.增加柱长3. 在液相色谱中, 为了提高分离效率, 缩短分析时间, 应采用的装置是( B )A. 高压泵B. 梯度淋洗C. 贮液器D. 加温4. 在液相色谱中, 最通用型检测器是( A )A.示差折光检测器B.极谱检测器C.荧光检测器D.电化学检测器5. 在液相色谱中, 为了获得较高柱效能, 常用的色谱柱是( A )A.直形填充柱B.毛细管柱C.Ｕ形柱D.螺旋形柱6. 实验室常用气相色谱仪的基本组成是（B ）。
(1)光源；(2)气路系统；(3)单色器系统；(4)进样系统；(5)分离系统；(6)吸收系统；(7)电导池；(8)检测系统；(9)记录系统。
高效液相色谱法习题一、思考题1.从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
2.液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处?3.在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径就是什么?4.液相色谱有几种类型?5.液-液分配色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？6.液-固分配色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？7.化学键合色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？8.离子交换色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？9.离子对色谱的保留机理就是什么?这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么?10.空间排阻色谱的保留机理就是什么？这种类型的色谱在分析应用中,最适宜分离的物质就是什么？11.在液-液分配色谱中,为什么可分为正相色谱及反相色谱？12.何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？13.何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱？试述它们的基本原理14.何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？15.高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有与不同之处？16.以液相色谱进行制备有什么优点？17.在毛细管中实现电泳分离有什么优点？18.试述CZE的基本原理19.试述CGE的基本原理20.试述MECC的基本原理二、选择题1.液相色谱适宜的分析对象就是( )。
A 低沸点小分子有机化合物B 高沸点大分子有机化合物C 所有有机化合物D 所有化合物2.HPLC与GC的比较,可忽略纵向扩散项,这主要就是因为( )。
A 柱前压力高B 流速比GC的快C 流动相钻度较小D 柱温低3.组分在固定相中的质量为MA(g),在流动相中的质量为MB(g),而该组分在固定相中的浓度为CA(g·mL－1),在流动相中浓度为CB(g·mL－1),则此组分的分配系数就是( )。
第二十章高效液相色谱法思考题和习题1．简述高效液相色谱法和气相色谱法的主要异同点。
相同点：均为高效、高速、高选择性的色谱方法，兼具分离和分析功能，均可以在线检测不同点：2．何谓化学键合相？常用的化学键合相有哪几种类型？分别用于哪些液相色谱法中？采用化学反应的方法将固定液键合在载体表面上，所形成的填料称为化学键合相。
优点是使用过程不流失，化学性能稳定，热稳定性好，适于作梯度淋洗。
目前常用的Si-O-Si-C型键合相，按极性分为非极性，中等极性与极性三类。
①非极性键合相：常见如ODS键合相，既有分配又有吸附作用，用途非常广泛，用于分析非极性或弱极性化合物；②中等圾性键合相：常见的有醚基键合相，这种键合相可作正相或反相色谱的固定相，视流动相的极性而定：③极性键合相：常用氨基、氰基键合相，用作正相色谱的固定相，氨基键合相还是分离糖类最常用的固定相。
3．什么叫正相色谱？什么叫反相色谱？各适用于分离哪些化合物？正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的色谱法。
用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质，用于含有不同官能团物质的分离。
反相色谱法：流动相极性大于固定相极性的色谱法。
用于分离非极性至中等极性的分子型化合物。
4．简述反相键合相色谱法的分离机制。
典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。
固定相，常用十八烷基（ODS或C18）键合相；流动相常用甲醇-水或乙腈-水。
非典型反相色谱系统，用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。
反相键合相表面具有非极性烷基官能团，及未被取代的硅醇基。
硅醇基具有吸附性能，剩余硅醇基的多寡，视覆盖率而定。
对于反相色谱的分离机制目前，保留机制还没有一致的看法，大致有两种观点，一种认为属于分配色谱，另一种认为属于吸附色谱。
分配色谱的作用机制是假设混合溶剂（水十有机溶剂）中极性弱的有机溶剂吸附于非极性烷基配合基表面，组分分子在流动相中与被非极性烷基配合基所吸附的液相中进行分配。
